根霉TC1653产纤维素酶提纯及酶学性质研究

对根霉所产纤维素酶酶系进行了分析并研究了部分酶学性质。实验选择超滤和凝胶柱分离相结合的方式提纯纤维素酶,结果显示根霉TC1653纤维素酶系是一个完全酶系,具有一个较为明显的内切葡聚糖酶组分。β-葡萄糖苷酶组分的最适反应温度为70℃,温度高于70℃时,活性迅速下降,但在这种高温下具有最高反应活性的酶很少见,很可能又是一种新的β-葡萄糖苷酶。     

米黑毛霉(M.miehei)天冬氨酸蛋白酶的研究

用硫酸铵分部盐析及离子交换层析技术从米黑毛霉半固体培养物的浸提液中提纯了天冬氨酸蛋白酶,酶活力收率为19.5％,,比活力达3080SU/mg蛋白,提纯8.5倍。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-凝胶电泳、等电聚焦、双向免疫扩散及免疫电泳等方法鉴定该酶均一。本文还报道了关于该酶生化性质、动力学性质及化学修饰的研究结果。该酶以天冬氨酸为其活性的必需基团,系一典型的天冬氨酸蛋白酶。     

微生物木聚糖酶的研究进展及其在食品领域的应用

木聚糖是半纤维素的主要组成成分,也是自然界第二丰富的可再生资源。木聚糖的结构稳定、组成复杂,很难在自然条件下自我降解,只有通过多种酶组成的木聚糖酶系的协同作用才可以更好地水解木聚糖或含有木聚糖的底物。木聚糖酶系主要由微生物产生,不同来源的木聚糖酶的性质存在较大差异。介绍了木聚糖水解酶系的组成和作用机理,木聚糖酶的分类和酶学性质,并对木聚糖酶在食品领域的应用进行了综述。     

外切葡聚糖纤维二糖水解酶的分离纯化和部分性质研究

纤维素酶系包括内切葡聚糖酶,外切葡聚糖纤维二糖水解酶和葡萄糖昔酶三类酶．近年纤维素酶的结构与功能方面的研究有了很大进展[1～3]．目前,已有百余个不同菌种来源的纤维素酶的基因得到了克隆和表达,但主要为Trichodermareesei和Trichndermaviride产生的纤维素酶．TrichodemapseudokiningiiS-38是我们分离得到并易于培养的高产酶菌株[4]．我们采用固态发酵方法培养了该菌株,从发酵液中提纯了两个外切酶（cellobiohydrolase,EC3．21．91,CBH）组分,并测定了它们的部分酶学性质．1材料和方法1．1对硝基酚纤维二糖（P-nitrophenyl…     

人肌型和脑型肌酸激酶的提纯与性质的比较

本文报道人肌型和脑型肌酸激酶的提纯方法和某些性质的比较。两种同工酶的提纯倍数分别达30.7和110倍,活力回收为48.3%和26%,比活力为113.5和90单位/毫克蛋白。提纯酶制剂在醋酸纤维薄膜电泳酶活力鉴定,均可见一条萤光带,在聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白染色时,肌型为一条带,脑型为两条带。肌型和脑型肌酸激酶对底物ADP的k_m分别为0.5和0.25mM,对CrP的K_m分别为9.5和4.2mM。温度对它们影响的差别十分显著,将酶制剂在不同温度处理15分钟,在30～45℃间NMCK酶活力能保持在90%以上,而BBCK活力则呈直线下降。在45℃时BBCK则全部失活。如在37℃保温不同时间,MMCK保温8小时活力仍有80%,而BBCK半小时后活力即迅速下降,4小时后全部丧失。用碘代乙酸和酶作用时,发现两者活力均能显著被抑制。抑制作用在25分钟内均呈一级反应。但MMCK酶活力的半衰期为14分,而BBCK为5分。两种同工酶制剂在相似的蛋白浓度下随IAA浓度的增加MMCK的活力不能完全被抑制,而BBCK则可完全被抑制。ADP具有保护IAA抑制这两种同工酶酶活力的作用,但作用不完全相同。还比较了三种巯基化合物(DTT、巯基乙醇、CyS)对这两种同工酶的激活作用,发现这三种化合物对MMCK激活作用大于BBCK,尤以DTT为最显著。     

人肌型和脑型肌酸激酶的提纯与性质的比较

本文报道人肌型和脑型肌酸激酶的提纯方法和某些性质的比较。两种同工酶的提纯倍数分别达30.7和110倍,活力回收为48.3%和26%,比活力为113.5和90单位/毫克蛋白。提纯酶制剂在醋酸纤维薄膜电泳酶活力鉴定,均可见一条萤光带,在聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白染色时,肌型为一条带,脑型为两条带。肌型和脑型肌酸激酶对底物ADP 的K_m 分别为0.5和0.25mM,对CrP 的K_m 分别为9.5和4.2mM。温度对它们影响的差别十分显著,将酶制剂在不同温度处理15分钟,在30～45℃间MMCK 酶活力能保持在90%以上,而BBCK 活力则呈直线下降。在45℃时BBCK 则全部失活。如在37℃保温不同时间,MMCK 保温8小时活力仍有80℃,而BBCK 半小时后活力即迅速下降,4小时后全部丧失。用碘代乙酸和酶作用时,发现两者活力均能显著被抑制。抑制作用在25分钟内均呈一级反应。但MMCK 酶活力的半衰期为14分,而BBCK 为5分。两种同工酶制剂在相似的蛋白浓度下随IAA 浓度的增加MMCK 的活力不能完全被抑制,而BBCK 则可完全被抑制。ADP具有保护IAA 抑制这两种同工酶酶活力的作用,但作用不完全相同。还比较了三种巯基化合物(DTT、巯基乙醇、CyS)对这两种同工酶的激活作用,发现这三种化合物对MMCK 激活作用大于BBCK,尤以DTT 为最显著。     

卡拉胶酶的研究进展

卡拉胶酶主要有κ－卡拉胶酶,ι－卡拉胶酶,λ－卡拉胶酶,是水解酶的一种。本文从酶的分类和来源,底物专一性和作用方式,酶的性质,产酶菌株及酶系,酶的应用五个方面综述了卡拉胶酶的研究进展。     

《酶检测》

《酶检测》(Enzyme assays)由Robert Eisenthal和Michael J.Danson编著,1992年IRL出版社出版,351页。该书是《实用方法》丛书中的一种。酶检测在生化学上是应用最频繁的程序,日常用在估计细胞或组织中酶的总量、酶的提纯或者确定其系统动力参量。测量酶催化反应速率,其技术范围受到化学变化性质及其研究人员技巧的限制。该书叙述了酶检测设计和执行,包括普     

琼胶酶研究进展*

琼胶酶是一种多糖水解酶,根据降解琼脂糖的作用方式不同,可以分为α-琼胶酶（EC3.2.1.-）和β-琼胶酶（EC3.2.1.81）。中从琼胶酶的分类及酶活测定,酶的来源,产酶微生物的酶系及酶学性质,琼胶酶的分子生物学研究,酶的应用几个方面综述了琼胶酶的研究进展。     

难肝黄嘌呤脱氢酶的研究

(一)和 Morell 的观察相同鸡肝黄嘌呤脱氢酶能还原辅酶 I,活力和用2,6-二氯酚靛酚作受体相近。次黄嘌呤同样也能作底料。(二)辅酶 I 氧化黄嘌呤的作用是可逆的,鸡肝黄嘌呤脱氢酶能接鉵还原辅酶 I 为尿酸所氧化的作用。(三)辅酶 I 明显地增加鸡肝黄嘌呤氧化酶系和黄嘌呤细胞色素 c 还原酶系的活力。(四)用辅酶 I 及用2,6-二氯酚靛酚作受体的二种黄嘌呤脱氢酶活力受氰化物作用失效的程度相同,两种活力的比例在提纯过程中基本上不变,因此认为二种活力由同一酶所接触。     

植酸酶的纯化及其酶学性质初步研究

从绿色木霉LH374固态发酵产物中提取植酸酶。粗酶液经硫酸铵沉淀、凝胶过滤、离子交换层析纯化后,提纯倍数可达13.3,回收率为27.1%。酶学性质研究表明,植酸酶最适作用温度为55℃、最适作用pH为6.0,米氏常数Km为0.15mmol/L。     

中华大蟾蜍胚胎孵化酶的分离和提纯

研究证明,海胆、鱼、两栖类胚胎孵化主要是由孵化腺细胞分泌的孵化酶(hatching enzyme, HE)作用的结果。研究HE的意义在于:1.研究孵化腺细胞的分化和溶解卵膜的机理。2.搞清HE的性质将有助于提高水生动物的孵化率。我们在研究中华大蟾蜍孵化腺细胞的形成、分化及结构的基础上进一步对孵化酶进行了分离和提纯。     

兔肝谷胱甘肽过氧化物酶的亲和层析纯化

<正> 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX,EC1.11.1.9)与过氧化氢酶、超氧化物歧化酶一起共同构成细胞内抗脂质过氧化作用的酶性保护系统。近年来,随着人们对脂质过氧化作用机理及其对细胞组织损伤和遗传物质变异作用的认识的日趋深入,GSH-PX越来越受到人们的重视。关于GSH-PX的提纯已有大量的文献报导,但利用共价亲和层析来分离提纯此酶的文献报导则较少。本文根据GSH-PX的催化机理及其存在的不同状态,发展了一种独特的共价亲和层析的提纯方法。     

猪骨骼肌磷酸葡萄糖异构酶的提纯及性质研究

本文报道猪骨骼肌磷酸葡萄糖异构酶（ＧＰＩ．ＥＣ ５．３．１．９）的提纯及其性质。设计了四步提纯法（稀盐溶液抽提、有机溶媒沉淀、透析、葡聚糖Ｇ－１００柱层析），对猪的五种不同解剖部位的骨骼风进行了ＧＰＩ的提纯。结果均得到聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）图谱为一条带的产品。提纯效果以猪股二头肌为例：提纯１０．６８倍、活力回收３２．３７％，比活力１．６×１０５单位。对提纯酶性质的研究表明；猪肌提纯的ＧＰＩ由三个亚基组成。分子量约为１２０Ｋｄ，等电点为 ６． ６，最适ｐＨ８．５，最适温度 ３５℃，米氏常数：６．０２ｍｍｏｌ／Ｌ，活化能为３２３７８．４焦耳／Ｋ，ｍｏｌ。免疫电泳实验证实猪肌提纯酶具抗原性。其免疫血清与自牛、兔、鸡、鱼的骨骼肌用同法提纯的ＧＰＩ有交叉免疫反应。免疫血清且对原酶液有抑制作用。猪肌ＧＰＩ与其它数种动物肌肉之ＧＰＩ的ＰＡＧＥ行为、混合电泳行为，等电聚焦行为、氨基酸组成等各方面基本相同，可以认为这是猪肌ＧＰＩ与其它数种动物肌肉的ＧＰＩ为同源蛋白质的佐证。     

叶绿体中果糖-1,6-双磷酯酶(FDP-酶)的研究 Ⅰ.菠菜叶绿体中FDP-酶的提纯与某些动力学特性

分离的 FDP-酶在 pH 8—9下催化活性最高,而在 pH6下可在几个月内保持其活性。电泳的结果表明提纯后的酶只有一个区带。比较存在于低渗涨破的叶绿体中的 FDP-酶与提纯的 FDP-酶,初步结果说明这两种状态下的酶在动力学特性上有明显差异。虽然它们的活性都与 Mg~( )浓度有关,但涨破叶绿体中的 FDP-酶对 Mg~( )的 Km 较小。Mg~( )浓度明显限制着此酶的活性。EDTA 对其活性也有抑制作用。EDTA 对提纯的 FDP-酶与涨破叶绿体中的 FDP-酶的抑制效应不同,15μmoleEDTA 可完全抑制前者的活性,但30—45μmole EDTA 只能抑制后者活性的70%。用0.2% Triton X-100处理叶绿体,对其中的 FDP-酶有增活效应。这说明 FDP-酶的活性与叶绿体中的层膜可能有关。     

呼吸链酶系结构与功能

简单综述了近年来对呼吸链酶系的研究.介绍了筛选的泛醌反应抑制剂的性质及其在醌催化机制研究中的应用,以及酶与酶之间和脂与酶之间的相互关系,及其在电子传递功能中的作用.     

变形链球菌葡糖基转移酶和葡聚糖的提纯

变形链球菌葡糖基转移酶和葡聚糖的提纯李鸣宇，刘正（上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科学教研室，２０００１１）日前已普遍公认葡糖基转移酶（以下简称ＧＴＦ）和由该酶催化生成的葡聚糖在龋病的发生过程中起重要作用。欲清楚这些机制的前提是得到它们的纯品。...     

两种类型聚半乳糖醛酸酶的提纯及性质

黑曲霉(AspergilluS niger)AS 3.3883所产果胶酶经DEAE Sephadex A50及Sephadex G100柱层析分离出电泳纯的两种聚半乳糖醛酸酶(PG1,PG2),并对它们的性质及结构进行了比较研究。结果证明两种酶作用的最适条件、动力学性质、分子量、氨基酸组成及金属离子对酶活力影响等方面有很大差异,但二者的每个摩尔的活力及酶的构象很相似。     

β—葡萄糖苷酶的分离纯化和性质研究

采用分子筛和离子交换层析技术从黑曲霉Ｌ－２２菌株发酵液中分离提纯了一个由两个相同的亚基组成的β葡萄糖苷酶。研究了其酶学性质和底物专一性。     

油菜花叶病毒的提纯及其理化性质的研究

在浙江省油菜产区分离到的对油菜作物造成危害的油菜花叶病毒6号(YMV_6),从病毒形态、血清学、沉降常数和其他性质的研究都说明它是一种新的球形病毒,并具有较高的稳定性。为了对油菜病毒病的诊断和防治积累一些资料,进一步研究了其提纯和理化性质。前已用琼脂凝胶过滤法部分提纯了YMV_6,此法虽简而易行,但由此获得供理化性质研究用的提纯样品仍有困难。本文报导用聚乙二醇浓缩和差速离心法提纯YMV_6及其若干理化性质的研究结果。