LXJ-20冷冻高速离心机简介和试用体会

高速冷冻离心机,在科学研究工作中,特别是在生物化学、细菌学、病毒学、免疫学等领域内具有广泛的用途,是必不可少的常规设备之一。冷冻高速离心机正在我国逐步发展,上海医用分析仪器厂在研削成功40,000转/分冷冻高速离心机的基础上,为了使产品形成系列,满足科研单位的不     

GLL-18高速冷冻离心机

随着科学技术的发展,离心机的使用日趋广泛。除生物学、化学、医药卫生、食品等传统使用离心机的部门之外,在某些国防尖端部门也开始使用离心技术。因而各主要工业国家都对离心机的研制和生产给予一定的重视,并建立了自己的离心机系列,包括低速、高速和超速。高速冷冻离心机是离心机系列中不可缺少的一个组成部分。我国各科研和生产部门所用高速离心机基本依赖进口,这不仅要花费国家的大量外汇,而且仪器发生故障时,修理比较麻     

上海生化所试制成功高速冷冻离心机

1978年年初,生化所领导针对生化科研的常规实验手段——高速冷冻离心机——严重不足的现状,为了适应蒸蒸日上的科研形势,向所属工厂提出了在近期内试制较高性能的高速冷冻离心机的任务。经过全厂四个月的艰苦工作,终于在78年6月中旬比原计划提前近半年试制成功了第一台样机。在多次试车后即由实验室试用,经过近400小时的使用,特别是78年夏季高温考验,实验人员普遍反映良好,要求继续生产。11-12月份又用一个月的周期生产了第二台,并已投入试用。     

毛细管在离心机制冷系统中的应用

高速冷冻离心机是医学临床分析中不可缺少的设备,它的制冷系统一般均有四大关键部件,即压缩机、冷凝器、节流装置和蒸发器。国产离心机中制冷系统的节流装置均采用热力膨胀阀,但热力膨胀阀有其本身固有的缺点,如结构比较复杂,易泄漏制冷剂,易产生故障等。国外60年代以来已开始试验采用毛细管来替代热力膨胀阀,如美国Beck-man公司生产的高速、超速离心机,日本久保田、日立生产的高速、超速离心机均采用毛细管作为制冷系统的节流装置。毛细管与热力膨胀阀相比,有其独特的优点:     

TGLL-18台式高速冷冻离心机

为了满足生物、医学实验的高速(R.C.F.在10,000×g以上),低温(10℃以下),小容量(几十微升到几十毫升级)样品的分离纯化的需要,我们已研制成功了TGLL-18台式高速冷冻离心机。其特点是体积小,噪声低、降温好、转子多、容量宽,速控,温控,时控功能全面。1983年通过鉴定,今年已在江     

三种不同冷冻保护剂对小鼠附睾冷冻效果的比较

目的探讨三种不同冷冻保护剂对C57BL/6J小鼠附睾冷冻的效果。方法性成熟并交配过的6~8周龄C57BL/6J雄鼠附睾,分别用3种不同冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、R18S3进行玻璃化冷冻、复苏和精子采集,观察比较三个实验组的复苏精子形态、存活率以及生殖能力。结果三组冷冻复苏分离后的精子形态完整,具有镰刀头状结构;荧光染色后PROH组精子存活率为(88.17±3.43)%,明显高于DMSO组:(61.17±10.65)%和R18S3组(16.83±6.49)%(P0.05);经辅助体外受精后均具有受精能力。获得的胚胎移植后可得到正常子代小鼠(DMSO∶PROH∶R18S3=13∶8∶17)。结论 3种冷冻保护剂均适用于C57BL/6J小鼠附睾冷冻,但PROH冷冻效果较好。     

可与泊来品媲美的我国B超仪

超声诊断技术是四大医学成像技术之一。近年来我国B超研制和生产已跃上一个新水平,可以说起点低、速度快、水平高。目前,产品正向中、高档方向发展,其中高档B超取得了可喜的进展,如上海医用电子仪器厂生产的CX—960—Ⅱ型B超是扇扫加多普勒装置的高档B超诊断仪。该机除具有B型、M型、机械扇扫等功能外,还具有多普勒血流测量等多种功能。江苏雷声电子设备厂研制开发成功SJN2200型多功能B超诊断仪,可配用线阵、凸阵、机械扇扫和M式多种探头,可用于人体腹部、心脏及妇产科等作多种检查诊断。目前,世界上最为先进的彩色超声多普勒血流成像系统也已由中科院安科公司研制成功,其最大扫描角度为     

浸冷式医用冷刀在耳鼻咽喉科的应用

冷冻疗法是利用致冷剂产生0℃以下低温,冷冻局部活体组织使之破坏,以达到对某些疾病的治疗作用。自1967年Lewis和Cahan首先将冷冻治疗用于耳鼻喉科临床以来,已得到广泛开展。我科于1984年起采用南京大学低温物理系研制的浸冷式医用冷刀(耳鼻喉科型)冷冻治疗耳鼻喉科常见病425例取得了满意的疗效,现报道如下: 材料与方法所用器械由一组大小、形状、型号各不相同的八支冷刀组成(见图1)。     

蔗糖密度梯度离心法测定蛋白质的沉降系数

沉降系数(S值)是蛋白质的一个重要物理常数,一般在分析超迷离心机中进行分析。由于分析超速离心机需要配备特殊的分析转头和监测记录沉降粒子在离心过程中行为的装置,价格昂贵,一般实验室难以配备。Martin和Ames使用制备超速离心机,采用蔗糖密度梯度超离心法,测定了细菌组氨酸生物合成的有关酶的沉降系数,取得了较好的效果。我们参照该方法,并作了某些改进,现报告如下。     

饥饿对高体革鯻消化道黏液细胞分布的影响

利用石蜡组织切片与AB-PAS染色技术研究饥饿0天(S0)、10天(S10)、20天(S20)对高体革消化道黏液细胞形态及分布的影响。结果发现,高体革饥饿20天后存活率为100%,食道含有Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型黏液细胞, S0组黏液细胞总密度为(2 839.13±261.52)个/mm2,饥饿不影响食道黏液细胞的种类,但S10组黏液细胞总密度减少[(1 546.00±70.02)个/mm2], S20组则表现为增加[(3 095.00±162.04)个/mm2]。S0、S10、S20三组胃部黏液细胞分布差异不大。S0和S10组幽门盲囊含Ⅰ和Ⅱ型黏液细胞, S20组则只有Ⅱ型黏液细胞,总密度先增加后减少,分别是(215.22±21.52)、(466.31±63.05)、(369.46±43.49)个/mm2。肠道只含Ⅱ型黏液细胞,饥饿使其密度逐渐增多,尤其是后肠,S0、S10、S20组密度分别是(1 683.50±219.64)、(2 068.71±65.38)、(4 622.50±85.60)个/mm2。不同部位黏液细胞对饥饿的响应存在差异,反映消化道不同部位结构功能的差异,饥饿显著影响消化道中Ⅱ型黏液细胞的分布,推测Ⅱ型黏液细胞分泌的变化有可能是高体革响应饥饿应激的敏感指标之一。     

热烈祝贺《遗传学报》创刊30周年——云南大学人类遗传学研究中心

本研究中心成立于2000年6月。目前共有21人,其中博士生导师、教授2人,副教授、博士1人,高级实验师1人,在职博士2人,在读博士生和硕士生15人。中心拥有DNA测序仪、高速冷冻离心机、梯度PCR仪等精良的分子生物学仪器设备,具备开     

川芎嗪对转化生长因子β1刺激肝星状细胞CTGF及I型胶原表达的影响

研究川芎嗪对大鼠肝星状细胞株（hepatic stellate cell—T6,HSC—T6）结缔组织生长因子CTGF（connec tivetissue growth factor）及I型胶原表达的影响．培养HSC—T6细胞,不同浓度川芎嗪与转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-βl）刺激的HSC—T6共同孵育．用MTT（3-（4,5-Dimethyhhiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide）法检测HSC-T6增殖：免疫细胞化学法观察川芎嗪对CTGF表达的影响;Western印迹法检测CTGF蛋白的表达．ELISA（enzyme linked immunosorbent assay）法测定I型胶原表达．结果表明,一定浓度（100、200、400、600mg／L）川芎嗪能抑制HSC—T6增殖,且呈剂量依赖性．免疫细胞化学结果显示随着川芎嗪浓度的升高,CTGF表达依次递减,与正常对照纽比较,具有显著性差异（t=4．216,P〈0．01）．川芎嗪还可以明显抑制CTGF蛋白的表达,并可抑制I型胶原合成,二者抑制程度呈正相关关系（r=0．861,P〈0．01）．川芎嗪可能通过抑制HSC—T6细胞增殖,下调CTGF的表达,阻断I型胶原合成,从而发挥其抗肝纤维化的作用．     

IGF-Ⅱ、IGF-1R、IGFBP-3在结直肠癌中的表达及诊断价值研究

目的：探讨结直肠癌中IGF-Ⅱ、IGF-1R以及IGFBP-3等的阳性表达及诊断价值。方法：收集我院45例结直肠癌、33例炎性息肉、40例腺瘤以及35例正常肠粘膜组织予以免疫组织化学SP法进行IGF—Ⅱ、IGF—1R以及IGFBP-3检测,并统计结直肠腺瘤不同组织类型和结直肠癌不同Dukes分期的阳性表达差异。结果：结直肠癌组织中IGF—Ⅱ、IGF—1R以及IGFBP-3表达均呈高阳性率,并且显著高于其他3组（P〈0．05）。结直肠腺瘤管状、混合型、绒毛状等不同组织类型IGF-Ⅱ、IGF—1R以及IGFBP-3表达阳性率呈逐渐增高趋势,绒毛状腺瘤显著高于其他两型（P〈0．05）。45例结直肠癌中,Dukes分期A、B两期显著低于C期和D期,比较差异具有显著性（P〈0．05）。结论：IGF—Ⅱ、IGF-1R以及IGFBP-3可能在结直肠腺瘤发生、发展及进展为结直肠癌的过程中起一定作用,对结直肠癌早期诊断具有一定价值。     

表面活性蛋白A启动子指导Cre重组酶在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中表达

Ⅱ型肺上支细胞合成和分泌肺表面活性物质（PS）,与肺损伤后的修复有关,很多肺相关疾病的发生伴随有Ⅱ型肺上皮细胞功能不全及PS系统缺陷。Ⅱ型肺上皮细胞在肺的发育、机体免疫及疾病的发生发展过程中的具体功能尚不明确．对调控Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制也知之甚少。为了利用Cre-loxP系统研究调节Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制,研制了表面活性蛋白A（SP—A）启动子指导Cre重组酶基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中表达的转基因小鼠。将整合有Cre重组酶基因的首建者小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠及ROSA26报告小鼠交配,利用基因组PCR和LacZ染色检测Cre重组酶表达的组织分布及其钵内介导loxP位点间重组的活性。多组织基因组PCR显示Cre重组酶在转基因小鼠肺、脑和消化道组织中表达。LacZ染色显示仅在Ⅱ型肺上皮细胞中检测到Cre重组酶的活性。以上结果表明本研究研制的pSP—A—Cre转基因小鼠可用于在Ⅱ型肺上皮细胞中进行条件基因打靶和细胞谱系分析。     

26S蛋白酶体的结构生物学研究进展

26S蛋白酶体是真核细胞内负责蛋白质降解的主要分子机器,通过特异性降解目的蛋白质,几乎参与了生物体的绝大多数生命活动.26S蛋白酶体在结构上可分为19S调节颗粒和20S核心颗粒两部分.19S调节颗粒负责识别带有泛素链标记的蛋白质底物及对其进行去折叠,并最终将去折叠的蛋白质底物传送至20S核心颗粒中进行降解.由于26S蛋白酶体的结构组成复杂,分子量十分巨大,现有的X-ray技术和NMR技术对其完整结构的解析都无能为力,仅能解析出部分单个蛋白成员或分子量较低的亚复合物晶体结构.而冷冻电镜技术在相当一段时间内处于发展的初级阶段,导致其三维结构的研究进展曾经十分缓慢,严重阻碍了人们对其结构和功能的了解.近年来,随着在X-ray技术领域对大分子复合物结构解析的经验积累和冷冻电镜技术领域的技术革命,完整的26S蛋白酶体三维结构解析取得了飞速的发展.本文回顾了近几年在26S蛋白酶体结构生物学领域的重要进展,并展望了该领域未来的发展及面临的挑战.     

玻璃化冷冻对猪体外成熟卵母细胞染色体与纺锤体的影响

以冷冻环为载体,探讨玻璃化冷冻对猪体外成熟卵母细胞染色体与纺锤体影响。单用40%乙二醇(ethyleneglycol,EG)或20%EG与20%二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)联合作冷冻保护剂,用直投液氮或使用玻璃化冷冻仪法制冷冷冻猪体外成熟卵母细胞;解冻2h后固定并免疫荧光法染色纺锤体及染色体;挑选各试验组形态正常卵母细胞进行体外受精实验。结果表明,与单用EG以及EG和DMSO联合直投液氮方案比较,EG和DMSO联合应用并采用玻璃化冷冻仪制冷方案卵母细胞染色体正常率为30.1%,纺锤体正常率为37.2%,可明显降低卵母细胞染色体及纺锤体结构损伤(P<0.05),并明显提高卵母细胞的激活效果(P<0.05)。采用联合冷冻保护剂及玻璃化冷冻仪高速冷冻可较好维持猪卵母细胞染色体与纺锤体形态,但玻璃化冷冻明显影响猪卵母细胞体外受精后的发育能力。     

微型呼吸机问世

江苏无锡兴中医疗器械有限公司应用气动气控原理研制成WH—1型微型呼吸机,日前通过鉴定,并已投入批量生产。 该机的主要特点是体积小、耗氧量少、不用电、功能多、可定时、定容和限压保护,可作     

汉坦病毒S基因的克隆及体外转录

目的:通过基因克隆和体外转录,获得汉坦病毒汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的RNA全长cRNA,为汉坦病毒病原学检测提供阳性定量标准品。方法:设计汉滩型76118株和汉城型R22株S基因克隆引物,PCR获得相应片段,分别克隆至含双启动子的PCRⅡ载体中,测序鉴定无误后,重组质粒分别经内切酶SpeⅠ、SacⅠ线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,产物经DNase处理、纯化后测定浓度,经RT-PCR验证。结果:获得汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的cRNA片段,并可准确定量其拷贝数,76118株和R22株的质量浓度分别为80、17.58 ng/μL。结论:获得的cRNA样品可作为汉坦病毒核酸快速检测方法的阳性定量标准品。     

一种新型的截短型转化生长因子βⅡ型受体在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

克隆人源的截短型转化生长因子βⅡ型受体（tTGF-βRⅡ）,成功构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株。采用PCR技术扩增得到目的基因tTGF-βRⅡ,插入原核表达载体pGEX4T3的相应位点,并在大肠杆菌BL21（DE3）中获得高可溶性表达的重组蛋白,重组蛋白GST-tTGF-βRⅡ经Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化后,再经凝血酶酶切,然后经Glutathione-Sepharose 4B纯化获得目的蛋白tTGF-βRⅡ,SDS-PAGE分析表明：可以通过Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化得到GST-tTGF-βRⅡ,其分子量约37.0 KDa,和目的蛋白tTGF-βRⅡ,分子量为11.0 KDa。Western blot结果显示GST-tTGF-βRⅡ和tTGF-βRⅡ为特异性蛋白。运用基因工程的方法获得tTGF-βRⅡ目的蛋白,对瘢痕成纤维细胞增殖具有很好抑制作用。     

衡阳紫色土丘陵坡地不同恢复阶段土壤基础呼吸及代谢熵的变化

采用空间序列代替时间序列的方法,对衡阳紫色土丘陵坡地不同过程中的不同土层、根际(Rhizosphere,R)与非根际(Non-rhizosphere,S)的土壤基础呼吸(Soil basal respiration,SBR)及代谢熵(Metabolic quotient,qCO2)的变化特征以及它们与土壤理化性质的关系进行研究。结果表明：(1)不同恢复阶段SBR与qCO2存在明显差异,从裸地(Ⅰ)、草本群落(Ⅱ)、灌木群落(Ⅲ)至乔木群落阶段(Ⅳ),SBR显著增强,qCO2显著减小,反映土地质量正在逐渐恢复;(2)不同恢复阶段SBR与qCO2存在垂直变化特征,从0～20cm、20～40cm至40～60cm土层, SBR显著减弱,qCO2显著增加;(3)从Ⅱ→Ⅳ,R与S变化明显,R与S的SBR均显著增强, R/S显著减小,表现出R＞S的特点,R与S的qCO2的逐渐减小, R/S逐渐上升,也表现出R＞S的特点,因此,创造更好的土壤条件有利于该区域植被恢复。