日本沼虾三群体线粒体16S rRNA基因片段序列的差异与系统进化

通过对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)3个群体线粒体DNA 16S rRNA基因片段进行扩增和测定,得到长度为495bp的片段,其碱基A、T、G和C的平均含量分别为28.6%、36.1%、22.7%和12.5%,AT含量明显高于GC含量。通过对日本沼虾16SrRNA基因片段遗传特征的研究发现其种内变异很小,在3个群体中只有5个位点发生转换。另外,利用其454bp的同源序列,以中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)为外群探讨了沼虾属日本沼虾、罗氏沼虾(M.rosenbergii)等8种沼虾的系统进化关系。用MEGA3.1软件中的NJ法构建的分子进化树,日本沼虾3个群体先聚在一起后与海南沼虾聚在一起;另外,罗氏沼虾与马氏沼虾、短腕沼虾与贪食沼虾亲缘关系较近先聚在一起,然后再与大臂沼虾和等齿沼虾聚在一起,最后才与外群中国明对虾聚在一起。     

饥饿对不同食性甲壳类动物肝脏谷丙转氨酶活力的影响

通过对饥饿前,饥饿7d以及饥饿30d后日本沼虾与中华绒鳌蟹肝脏谷丙转氨酶活力测定,对比分析了饥饿期间不同食性甲壳类动物肝脏谷丙转氨酶活力变化的特点。发现饥饿7d以及饥饿30d后,其肝脏谷丙转氨酶活力均呈升高趋势,但升高幅度在日本沼虾及中华绒螯蟹肝脏中各不相同,推断可能与二者食性不同有关。     

三种沼虾的COI基因序列变异及其分类地位探讨(英文)

罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)和日本沼虾(M.nipponense)经在我国得到广泛的养殖,产生巨大的经济效益.祁连沼虾(M. qilianensis)是自然分布在我国甘肃省的土著虾种,因其外部形态符合沼虾属的特征,而被前人归入沼虾属.为了从分子生物学的角度理解罗氏沼虾、日本沼虾与祁连沼虾的遗传差异,为合理开发和利用沼虾资源提供理论基础,作者对这3种沼虾的线粒体COI基因序列进行研究.从甘肃、浙江等地分别采集这三种沼虾的样本各10尾,共30尾,其中祁连沼虾是野生样本,而罗氏沼虾和日本沼虾都是养殖样本.通过PCR方法扩增线粒体COI基因,并测序.通过比对,获得一致序列649 bp.在30个样本中共检测到169个变异位点,占总变异的26.04%;共检测到7种单倍型.3种沼虾的核苷酸多态性分别为:罗氏沼虾0.411%、日本沼虾0.092%、祁连沼虾0.031%.野生的祁连沼虾遗传多样性远远低于养殖的罗氏沼虾和日本沼虾.三种沼虾单倍型之间的Kimura双参数遗传距离在19.87%～23.84%,三者之间的遗传距离较大,提示三者均为有效种.为进一步确定这三种沼虾在长臂虾科的分类地位, 我们从NCBI数据库中下载了长臂虾科的其它种类的COI序列进行系统发生分析.用NJ法构建的分子系统树显示:日本沼虾和罗氏沼虾与沼虾属的其它种类聚成一枝,而祁连沼虾与同亚科的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)和长角长臂虾(Palaemon debilis)较沼虾属另10种虾的遗传距离近,即祁连沼虾与白虾属及长臂虾属聚成另一枝.凶此,COI序列的结果不支持祁连沼虾归入沼虾属.但其分类地位应该综合多方面证据重新进行分析确定.     

饥饿对日本沼虾摄食节律的影响

本文研究了不同饥饿时间对开本沼虾Macrobrachium nipponense摄食节律的影响.结果表明,饥饿后恢复投饵初始日本沼虾表现出强烈的摄食,摄食节律为单峰型,随着时间的延长,多峰型摄食节律出现.饥饿4 d的日本沼虾在饥饿过程中并未出现饥饿死亡现象,恢复投喂后在较短时间内(5 d)即可恢复正常的摄食节律.饥饿8 d组在饥饿的第6～8 d便可明显观察到虾体色异常并有部分死亡,说明饥饿8 d已经影响到了日本沼虾的存活.饥饿8 d组日本沼虾摄食高峰的变化无明显规律,恢复到正常摄食节律需要较长时间.     

饵料淀粉水平对饥饿后日本沼虾生长代谢的影响

研究了饵料淀粉水平对饥饿后日本沼虾生长代谢的影响,探讨营养水平对日本沼虾补偿生长的作用.结果表明,在4 d饥饿后,饵料中20%、25%的淀粉水平能使日本沼虾达到完全补偿生长,机体代谢率高于对照组,而8 d的饥饿处理,各组日本沼虾的生长代谢均低于对照组,说明饥饿时间及恢复投喂后饵料淀粉水平对日本沼虾补偿生长有一定的影响.     

罗氏沼虾与克氏原螯虾血细胞的比较研究

对罗氏沼虾与克氏原螫虾血细胞的分类与组成进行了染色观察比较研究。根据染色后光镜下血细胞的核质比、颗粒的大小和数量等来对血细胞进行分类,罗氏沼虾与克氏原螯虾的血细胞均可分为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞三类;其血细胞浓度分别为1.02±0.21×10⁷ Ind·ml^-1和0.85±0.15×10⁷Ind·ml^-1。2种虾血细胞的颗粒形态存在显著差异;透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞占血细胞总量的百分比在罗氏沼虾为21.3±6.3%,45.7±2.5%,33.0±6.8%:在克氏原螯虾为12.0±5.8%、49.5±5.1%和38.5±9.5%。     

不同形态型雄性罗氏沼虾的交配能力

从行为生态学角度,对采自孟加拉国库尔纳专区羌纳县布苏尔河罗氏沼虾原产地池塘种群中3种不同形态型雄虾的繁殖行为及交配能力进行了初步研究.结果表明：社群中蓝螯型（BC）、橙螯型(OC)和小型(SM)雄性罗氏沼虾的交配行为模式没有明显的区别,但BC、OC和SM雄虾在交媾前守卫、交媾及精荚传递和交媾后守卫3个典型行为中投入的时间存在明显差异.BC雄虾交媾前守卫、交媾及精荚传递用时明显比OC、SM雄虾短,而交媾后守卫用时明显比OC 、SM雄虾长.SM雄虾在交媾前守卫和精荚传递上投入的时间最长,而交媾后守卫用时最短.在雌虾体质量为雄虾体质量的80%,且♀∶♂为8∶1性比条件下,BC、OC和SM雄虾在120 h内平均交媾次数分别为4.6、2.2、1.3,BC雄虾具有较强的连续交媾能力.罗氏沼虾的交配能力与其体质量相关,雄、雌虾的体质量相匹配才能保证成功交媾.否则会出现“假交”现象.     

长江口安氏白虾与日本沼虾营养成分比较

本文对长江口安氏白虾和日本沼虾的营养成分和营养品质进行了比较.结果表明:安氏白虾的水分和粗灰分含量显著低于日本沼虾 (P<0.05),而粗脂肪和粗蛋白含量显著高于日本沼虾(P<0.05);安氏白虾和日本沼虾的氨基酸组成基本一致,均含有17种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为52.77和52.67,其构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准;安氏白虾脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的总量明显高于日本沼虾,分别为28.32%±0.49%和14.89%±0.63%;矿物元素中常量和微量元素含量均较丰富,微量元素之间的比例较合理,其中,安氏白虾的常量元素含量较高,而日本沼虾的微量元素含量较高,而日本沼虾的微量元素含量较高,从以上结果可见,安氏白虾和日本沼虾均含有较丰富的各种营养成分,但从EPA和DHA的含量来看,脂肪酸的营养价值安氏白虾高于日本沼虾;从Fe、Cu、Zn和Se的含量来看,微量元素营养价值日本沼虾高于安氏白虾.     

日本沼虾生精细胞核的形态变化及其在真虾部Caridea生殖进化中的地位

应用透射电镜（ＴＥＭ）技术研究了日本沼虾精子发生过程中细胞核的形态变异。生精细胞的核经历了由圆形或椭圆形变为浅碟状的一系列变化过程;其核膜由原来的完整变为不完整,成熟精子仅在精子尾部具有核膜;核内染色质由松散逐渐聚合分化,在成熟精子核内形成了泡状和丝状两种形态的核物质。精子具备泡状和丝状两种核物质是日本沼虾的重要特征之一。精核的形态可以作为十足类甲壳动物的重要分类依据;研究精子发生过程中细胞核的形     

两种沼虾溶菌酶基因ORF的克隆和罗氏沼虾溶菌酶基因的组织表达(英文)

分别提取罗氏沼虾和日本沼虾血细胞总RNA,RT-PCR扩增获得特异性cDNA片段,纯化后克隆到T载体上。序列测定表明所克隆的两种沼虾溶菌酶基因的开放阅读框(ORF)为477bp,共编码158个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽140个氨基酸残基和信号肽18个氨基酸残基。同源性分析表明,罗氏沼虾和日本沼虾溶菌酶基因的碱基序列及推测氨基酸序列高度同源,分别为99.4%和98.1%。两种沼虾溶菌酶基因的碱基序列和推测氨基酸序列与Gen-Bank上其他对虾溶菌酶的同源性达83.0%和80.0%以上。两种沼虾溶菌酶都具有c-型溶菌酶典型的两个酶活性位点(Glu51)和(Asp68),以及8个保守结构氨基酸残基Cys,且在101、106和107位上缺少Asp,因而推测本实验所克隆的两种沼虾溶菌酶基因属c-型溶菌酶基因的非钙结合亚型。以PCR法制备罗氏沼虾溶菌酶基因的生物素标记探针,斑点杂交检测感染弧菌后溶菌酶基因mRNA在各组织中的转录水平,结果表明受感染6h后在眼、肌肉、鳃、肝胰腺、肠管中的表达量均有升高,其中在肝胰腺中的表达量最高,约为对照组的560%。在不同感染时间里,肝胰腺中该基因表达量有较大的变化:感染后3h表达量最低,24h后表达量升至最高,大约为对照组的430%,48h时的表达量又有所下降,但仍明显高于对照组(约为330%)。受弧菌感染后罗氏沼虾溶菌酶基因转录的上调证明溶菌酶基因在非特异性免疫中的直接作用,同时表明肝胰腺可能在沼虾的免疫防御过程起重要作用。