紫檀茋诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡

该文主要研究不同浓度紫檀对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响并分析细胞凋亡的可能机制。用不同浓度紫檀作用人胃癌SGC-7901细胞48 h后,通过MTT法检测细胞活性,荧光显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,qRT-PCR和Western blot检测bax(B-cell lymphoma-2 associated X)及bcl-2(B-cell lymphoma-2)m RNA和蛋白表达水平。结果显示,紫檀处理细胞48 h的IC_(50)值为53.44μg/m L,显微镜下可观察到明显凋亡现象,随着药物浓度的增加早期凋亡和晚期凋亡所占百分比均不断增加,细胞阻滞于G1期,bcl-2基因表达下降,bax基因表达增加。综上所述,在一定浓度范围内,紫檀能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,并可上调bax基因表达,下调bcl-2基因表达。     

白念珠菌凋亡诱导研究进展

近年来,白念珠菌为主的真菌感染病例日渐增多,新型抗真菌药物研发成为热点。在原有抗真菌机制的基础上,通过诱导凋亡抗真菌成为目前探寻抗真菌药物作用机制的一个新趋向。本文对目前国内外关于药物诱导白念珠菌凋亡研究做一综述。     

白头翁汤正丁醇提取物诱导白念珠菌生物被膜细胞凋亡

目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对白念珠菌生物被膜细胞凋亡的影响。方法分别以DCFH-DA染色和JC-1染色,用流式细胞仪检测白念珠菌生物被膜细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Annexin V-FITC/PI染色染色荧光显微镜观察白念珠菌生物被膜细胞磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻并检测凋亡率;FITC-VAD-FMK染色观察白念珠菌生物被膜细胞metacaspase活性;DAPI染色观察白念珠菌生物被膜细胞核形态。结果≥128μg/mL BAEB处理后白念珠菌生物被膜细胞内活性氧水平显著升高,线粒体膜电位显著降低,PS外翻增加,凋亡率明显升高,metacaspase酶活性显著升高,细胞核出现固缩和碎裂。结论白头翁汤正丁醇提取物可诱导白念珠菌生物被膜细胞凋亡。     

白念珠菌生物膜的研究

细菌生物膜相关感染发病率不断上升,且治疗困难,已受到广泛的关注。对于真菌,生物膜以及生物膜在真菌感染与耐药性产生过程中的作用只是近年来才受到国内外学者与临床专家的关注,目前的研究多集中在念珠菌属。本文综述了白念珠菌生物膜的形成与特征、影响因素、耐药性的分子机制等几方面内容。     

白念珠菌基因功能研究的策略

白念珠菌是临床最常见的致病真菌,共有约6 100个基因,阐明其基因功能,尤其是致病性和耐药性相关基因的功能对发现抗真菌的新策略和新靶点有举足轻重的意义。白念珠菌基因功能研究的策略主要包括基因敲除和基因表达调控,近年来,白念珠菌基因功能研究的技术手段不断发展,本文就常用技术的发展进行综述,对相关技术存在的不足和发展前景也进行了分析。     

白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡通路的探究

研究发现白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡与白色念珠菌上调小鼠血清ＴＮＦ α水平、胸腺细胞ｃａｓｐａｓｅ 3的活性及ｂａｘ ,ｐ5 3基因表达有关。尾静脉注射 4× 10 6白色念珠菌 ,于 2 4ｈ处死小鼠 ,用流式细胞仪检测发现白色念珠菌组小鼠胸腺细胞凋亡百分率 (2 3.6 3± 1.85 ) %显著高于正常对照组 (1.87±0 .81) %,Ｐ <0 .0 1。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果显示 ,白色念珠菌组呈现典型的凋亡“梯状带” ,而正常对照组无“梯状带”出现。ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠血清ＴＮＦ α水平结果发现 ,正常对照组小鼠血清ＴＮＦ α小于 2 5ｎｇ/Ｌ ,而…     

白念珠菌感染分子机制研究

白念珠菌是临床上最常见的条件致病真菌。白念珠菌在感染宿主时会遭遇机械阻碍(如上皮细胞),生物、化学和物理拮抗(如胆汁、黏液、p H)及宿主免疫细胞(如吞噬细胞)的杀伤。白念珠菌生物化学、形态学的灵活性及逃逸宿主天然免疫的能力对其发挥致病性至关重要。该文就白念珠菌感染宿主过程中涉及的分子机制做一综述,为进一步探索新的治疗药物提供参考。     

中药抗白念珠菌研究新进展

以白念珠菌为主的真菌感染近年来呈上升态势,氟康唑等一线抗真菌药物因长期应用导致耐药菌株不断出现,中药在抗真菌感染方面具有独特的优势。本课题组在多项国家与省级课题资助下,对中药的体内外抗真菌作用及机制进行了较系统深入的研究,现结合课题组自身与国内外在中药抗真菌感染领域的最新研究成果,对中药抗真菌(主要是白念珠菌)近5年的研究进展进行综述。     

白念珠菌ATP酶活性的试验研究

近年来,由于皮质类固醇激素、抗生素、免疫抑制剂及抗肿瘤药物的应用,真菌病发病率日益增高,其中以白念珠菌病发病率增高尤为显著。为了正确诊断及治疗白念珠菌病,从真菌与宿主相适应的关系方面了解其发病机理十分重要。真菌与宿     

白念珠菌基因分型的相关研究

白色念珠菌定植于大多数人群的口腔中,在一定条件下可成为优势菌种而导致感染。基因分型是近年来白念分子生物学研究中的一个热点,随着医学科学技术的发展,由于深部真菌感染比例不断增加,分子生物学方法已经越来越广泛的应用于临床真菌病的研究中,从而为控制白念感染及为早期诊断、治疗提供基础。本文综述了限制性片段长度多态性、随机扩增多态性DNA分析、ITS区域序列分析等分子生物学技术在白念珠菌基因分型方面的相关研究,比较了它们的优缺点,并且讨论了将基因分型研究应用于临床诊断、治疗及开发新型抗真菌药物的发展趋势和广阔前景。认为目前更倾向于多种分型方法联合应用,并借助计算机软件进行分析,但是仍需进一步探索。     

体液免疫抗白念珠菌感染的研究

探讨抗白念珠菌IgY及其免疫血清对多种动物模型感染白念珠菌的保护作用。制备烧伤继发感染白念珠菌大鼠、白念珠菌性阴道炎小鼠及免疫功能低下小鼠多种动物感染模型 ,分别应用抗白念珠菌IgY、鼠免疫血清和生理盐水对照 ,观察比较各自的作用。抗白念珠菌IgY对烧伤继发感染白念珠菌大鼠及白念珠菌性阴道炎小鼠均有明显的保护作用 ;鼠免疫血清则对阻止远程靶器官的白念珠菌扩散有较好的作用。体液免疫成份抗白念珠菌IgY及其免疫血清对烧伤继发感染白念珠菌大鼠、白念珠菌性阴道炎小鼠及免疫功能低下小鼠均有良好的保护作用。     

白念珠菌V-ATPase研究进展

白念珠菌是临床最常见的条件致病真菌,V-ATPase是真核生物中高度保守的质子泵转运复合物,可以维持液泡和细胞质pH稳态.近年来,V-ATPase作为一个抗白念珠菌感染的潜在靶点为人们所关注,本文就V-ATPase抑制剂、相关的其他靶点及抑制剂筛选等方面的研究进展作一综述.     

白念珠菌致病性研究进展

白念珠菌是一种重要的条件致病菌,多在体表及黏膜宿主共栖生存,可引起皮肤黏膜及内脏的广泛感染。白念珠菌是单细胞假菌丝酵母菌,形态上具有双相性,即菌丝相和孢子相。其中菌丝相更易黏附和入侵宿主组织,是该菌在体内的主要致病形式。白念珠菌的致病机制与多种因素如黏附、芽管、水解酶、生物膜、群体感应等有关。该文综述了白念珠菌致病机制的研究新进展。     

都柏林念珠菌与白念珠菌的实验室鉴别进展

都柏林念珠菌是新命名的可以产生芽管和厚壁孢子的致病念珠菌,常规的实验室检测方法很难将其与白念珠菌相鉴别。本文综述了都柏林念珠菌和白念珠菌的生物形态学特征及形态学、血清学、分子生物学鉴别进展。     

白念珠菌抗氧化基因体外表达研究

目的检测白念珠菌体外抗氧化及调节转录的基因表达情况,进一步了解白念珠菌抗氧化机制在体外生长状态下的作用。方法选取白念珠菌标准株sc5314、3株临床分离保存株及7例临床念珠菌性阴道炎分泌物分离株（白念珠菌）,接种培养鉴定为白念珠菌后,分别将体外SDB振荡培养2 h、6 h、24 h、72 h、120 d的菌液（含未培养0h）,用Trizol法提取总RNA,反转录为cDNA后进行实时荧光定量PCR,检测体外各时间点抗氧化基因及抗氧化转录因子的基因表达情况,运用Ct值比较法进行表达量的相对定量分析。结果与0 h相比,体外6 hSOD2表达增加7.47倍,经Wilcoxon配对符号秩和检验显示P值小于0.01,差异具有统计学意义。其他各基因2 h及6 h分别与0 h相比P值均〉0.01,其表达差异不具有统计学意义。体外培养1 d后各基因表达明显增加,CaHog1、CAP1、CAT及SOD5在第3天达最高,分别为24.23、3.34、33.64及14.72倍;SOD2在第1天达最高为68.95倍;CaSkn7在第5天达最高为7.21倍。经Wilcoxon配对符号秩和检验显示SOD5第1天P值为0.013,其余基因表达P均〈0.01,表达差异具有统计学意义。结论当外界营养逐渐耗竭时,白念珠菌会动态加强抗氧化基因的表达,以抵抗机体内、外产生的氧化压力,其中SOD2可能是最早增加表达的抗氧化基因,3条抗氧化感受通路的转录调节基因均有增加表达,提示3条抗氧化感受通路在适应体外营养限制过程中起了重要作用。     

APNP对白念珠菌杀菌效果研究

目的 研究常压低温等离子体(APNP)喷流对白念珠菌的杀灭作用,并初步探讨其杀菌机制.方法 观察白念珠菌标准株经不同放电气体流量、作用时间及作用距离的APNP喷流处理后的菌落生长情况,并利用扫描电镜与透射电镜观察处理后念珠菌细胞内外超微结构的变化.结果 经APNP处理后的菌株生长明显被抑制,通入的放电气体He/O2以2/0.06 L/min的抑制作用比2/0.02 L/min明显,处理时间10 min明显优于2 min,作用距离1 cm优于2 cm.扫描电镜观察APNP处理后的菌体细胞壁有不同程度的破裂,菌体干瘪,透射电镜下可见菌体细胞壁、细胞膜破裂,胞内物质外漏,细胞内物质稀疏.结论 APNP喷流对白念珠菌有明显的杀灭效果,且放电气体中氧气含量相对越大,处理时间越长,作用距离越短,杀菌效果也越明显.其主要杀菌机制可能与APNP中活性粒子导致微生物细胞壁、细胞膜的破裂有关.     

白念珠菌破壁方法的研究应用进展

细胞壁作为真菌中特殊和必须的细胞结构,相对于哺乳动物的细胞膜更加坚硬,难以用简单的方法使其充分破碎。因此,达到理想的破壁效果是白念珠菌研究中的关键步骤之一。在提取白念珠菌RNA、DNA和蛋白质等细胞组分的过程中,为获得足量和稳定的实验样品。该文对多种白念珠菌破壁方法作一综述,以便为白念珠菌相关研究提供适用、高效的破壁方案。     

硼酸抗白念珠菌作用的试验研究

目的探讨硼酸对白念珠菌临床分离株菌株的生长状态和细胞形态的影响。方法用加入0%、0.1%、0.15%硼酸(w/v)的Lee’s glucose培养基于25℃和37℃分别培养8株临床分离的白念珠菌,观察各菌株在不同培养条件下生长状况。结果 25℃培养条件下,0.1%的硼酸明显抑制白念珠菌生长,其中对HJ065的抑制效果最明显,0.15%的硼酸进一步抑制白念珠菌生长,并且SC5314、HJ058菌株的菌丝生长能力随硼酸浓度增高而减弱。37℃培养条件下,硼酸对白念珠菌生长状态和菌丝生长能力的抑制效果较25℃更明显。相同培养条件下,硼酸对不同CAI重复数的白念珠菌的抑制效应存在差异。结论硼酸对白念珠菌临床分离菌株的抑制作用表现出明显菌株的差异性。其抑制作用与培养温度有关:表现为生理温度下抑制作用更明显。硼酸对8株白念珠菌抑制作用与CAI的重复数无明显相关性。     

白念珠菌对特比萘芬耐药性的体外梯级诱导和回复研究

目的以浓度梯级倍增的特比萘芬在体外诱导白念珠菌标准株获得耐药子代菌株,并观察其耐药稳定性,从细胞水平研究白念珠菌对特比萘芬耐药前后生物学特性的变化,为进一步采用基因芯片在基因表达水平上研究特比萘芬对白念珠菌的药理作用及其诱导耐药机制提供理想的实验模型。方法将白念珠菌ATCC90028株在特比萘芬浓度逐渐梯级倍增的YPD液体培养基中分别转种传代,直到最后转种至含1024μg／ml特比萘芬的YPD液体培养基中培养,分别测定诱导后形成的各子代菌株的MIC值;选用以1024μg／ml特比萘芬诱导形成的耐药菌株,在不含特比萘芬的YPD液体培养基中连续传代10次后,测定其MIC值,观察其耐药表型的稳定性;并分别用肉眼、光镜和电镜观察白念珠菌耐药性产生前后的形态学特征。结果特比萘芬MIC值为8μg／ml的白念珠菌母本菌株（白念珠菌ATCC90028）成功地被诱导成特比萘芬MIC值为≥512μg/ml的子代菌株,进一步的耐药稳定性实验说明诱导后形成的子代菌株的表型是相对稳定的,诱导后的子代耐药菌株与其母本相比,生长繁殖速度减慢,细胞形态不规则,部分细胞胞膜不完整。结论通过在药物浓度梯级倍增的培养基中连续传代培养的方法可成功建立相同基因型的对特比萘芬敏感的白念珠菌母本和对特比萘芬耐药的子代模型,为获取有亲本的耐药白念珠菌菌株提供了一个有效的实验方法,是在基因水平研究白念珠菌对特比萘芬耐药机制的理想实验模型。     

白念珠菌耐药机制研究进展

近年来院内白念珠菌感染发病率逐年升高。随着耐药菌株的产生,念珠菌感染的治疗难度也在加大。文章主要就靶酶变异、外排泵高表达、生物被膜等经典耐药途径,以及线粒体氧化呼吸抑制和钙依赖调节方式等最新进展开展综述,为针对耐药机制研发新型抗真菌药物提供参考。