A549人肺癌细胞系/615-SCID小鼠转移瘤的生物学特征

目的通过建立A549人肺腺癌细胞/615-SCID小鼠模型,评价重度联合免疫缺陷615-SCID小鼠在建立人类肺癌转移模型方面的应用价值.方法将1×107A549细胞接种到615-SCID及SCID小鼠右上肢背部皮下,观察成瘤时间、成瘤率、肿瘤生长速度及转移发生.结果两品系小鼠接种后的成瘤率均为100%,615-SCID小鼠移植瘤潜伏期较长、生长较缓慢,更容易发生转移.结论 615-SCID小鼠比SCID小鼠更易于构建人类肺腺癌转移模型,对于肺癌转移特性研究具有较大的意义.     

野生来源TW小鼠近交系培育及其生物学特性的研究

目的　培育中国特有TW (TianjinWild)野生小鼠来源的实验近交小鼠品系 ,筛选其重要的生物学特征 ,丰富现有实验动物基因库。方法　严格按照国际培育近交系动物标准 ,即每代繁育的雌雄小鼠严格按照同胎雌雄 (兄妹 )进行交配。结果　经过 1 2年的精心培育 ,培育TW小鼠至F2 2代 ,其他 1 5地野生小鼠品系均因故中断。结论　该项研究将为丰富国际现有实验小鼠基因库资源 ,建立抗肺肿瘤特性实验小鼠模型动物奠定坚实基础。     

重症联合免疫缺陷病的分类及其相关研究进展

重症联合免疫缺陷病又称SCID,是一种因机体体液免疫与细胞免疫同时缺陷导致的严重免疫缺陷综合征,患者可出现多种病原体的反复性感染、自身免疫性疾病及恶性肿瘤。多种免疫相关基因的突变和异常均可能导致SCID的发生,主要遗传方式包括X连锁隐性遗传和常染色体隐性遗传。SCID患者预后较差,但近年来研究人员在其发病机制和治疗等方面取得了一系列进展。对SCID的含义和分类等基本概念及相关进展进行简要介绍和总结。     

SCID-hu小鼠：HIV研究的小型动物模型

长期以来缺乏病毒体内感染的小动物模型是制约HIV-1研究取得突破性进展的一大障碍。研究者将胎儿的胸腺和胎肝组织移植到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内,构建了SCID-hu(Thy／Liv)人鼠嵌合模型。该模型具备正常功能性的人造血器官“Thy／Liv”,较真实地模拟了HIV-1感染人胸腺后的状况,是研究HIV-1体内感染较成功且很有潜力的嵌合鼠模型。SCID-hu(Thy／Liv)模型的构建使得在小型动物体内研究HIV的某些致病机制、临床前评价各种先导药物的体内抗HIV活性、评价新的治疗方案及寻求合适的基因治疗等成为可能,为在体内研究人造血系统和免疫系统的病理生理机能及人干细胞基因治疗提供了有力的工具,有广泛的应用前景。     

人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究

目的建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系.方法将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下,成瘤后行鼠间传代,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测.结果历时14个月传至5代,皮下移植瘤存活率为90%,持续6个月,体外建系(OVA-319)细胞生长稳定.镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征;染色体分布在12～46条之间,多为异倍体,显示人类肿瘤异常染色体;流式细胞术和RT-PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA-319细胞结果一致,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿,MAGE-2基因在mRNA水平异常表达.结论人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA-319细胞系为人类肿瘤的研究提供了良好的实验材料.     

严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠的饲养繁殖及其主要免疫器官的组织学观察

SCID小鼠是一种T和B淋巴细胞严重缺陷的动物,是肿瘤学和免疫学等学科研究的很有用的模型。 将SCID小鼠饲养于塑料薄膜隔离器内,保持无特定病原体状态。其平均每窝产仔数为3.4只,不育率为27.2％,离乳率为73.5％。该小鼠胸腺无皮质结构,髓质保留,缺乏淋巴细胞;脾脏内滤泡呈淋巴细胞脱空状态;淋巴结皮质区不明显,整个淋巴结呈淋巴细胞脱空状态;小肠粘膜下淋巴样组织无淋巴细胞聚集。外周血淋巴细胞仅占白细胞总数的10-24％。该小鼠基本符合免疫学试验要求。     

人免疫重建SCID小鼠的研究

４２只不渗漏ＳＣＩＤ小鼠分别腹腔注射经冷冻、复苏的胎肝或胎肝加胎胸腺细胞,每鼠２×１０７活细胞,建立人胎肝细胞ＳＣＩＤ小鼠模型Ⅰ和Ⅱ,研究人免疫系统。用人肝癌细胞（ＨＨＣＣ）免疫,ＳＣＩＤ鼠出现初始免疫答应,血清人ＩｇＧ平均滴度分别达到５１３．０±８４．２ｎｇ／ｍｌ和７１９．７±２０１．６ｎｇ／ｍｌ,ＩｇＧ峰值分别出现在免疫重建后１０～１２和１０～１４周,特异性抗ＨＨＣＣ抗体滴度分别达到１∶７０．４±３５．０５和１∶２９４．４±１６８．５２,免疫重建后７～８周龄,ＡＢＣ法免疫组化染色,免疫鼠模型肝、脾中可检出标记人的ＣＤ３＋、ＣＤ２０＋Ｔ和Ｂ淋巴细胞克隆和细胞岛。流式细胞仪检测了抗原免疫组和模型组外周血、脾脏、肝脏的人ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ２０＋标记的淋巴细胞数,其中标记ＣＤ２０＋淋巴细胞平均值外周血３．１２±３．０３％、脾脏１．４±０．２０％、肝脏２．３２±１．４９％。而无抗原免疫的模型组在肝脏仅有微量或检测不到人标记淋巴细胞。     

严重联合免疫缺陷小鼠的免疫重建及建在病毒学研究中的应用

本文主要讨论由ＣＢ－１７纯系小鼠突变形成的严重联合免疫缺陷（ＳＣＩＤ）小鼠的免疫学特征,人免疫系统在ＳＣＩＤ小鼠重建的影响因素以及利用ＳＣＩＤ小鼠在病毒学研究中的一些进展。     

近交系NJS小鼠的育种及其特性研究

近交系NJS小鼠是通过连续全同胞交配和在固定的普通日粮下以70日龄血清胆固醇含量为选育指标定向选育而成,经多项遗传监测证实已符合近交系动物的纯度要求,并具有独特的遗传概貌和特性。近交20世代后,该品系血清胆固醇含量为5.65±0.83mmol/L, 已超过小鼠的正常值范围,显示该品系小鼠已呈自发性高胆固醇血症状态。该品系8-10月龄动脉硬化在好发部位,如主动脉窦、升主动脉的阳性检出率为100%,主要是处于脂斑和脂纹期的病变。该品系可作为自发性高胆固醇血症和动脉粥样硬化症的模型动物。Abstract:Inbred NJS mouse strain was bred by using continuous brother-sister mating and directive breeding on the common diet with serum cholesterol at 70 days as breeding index,Acording to various genetic monitoring,the strain has been bred as a standard inbred strain of mice in genetic homogeneity,with particular genetic system and specific property.After 20th generation,serum cholesterol of the strain was 5.65±0.83 mmol/L.This value went outside the normal range in mice showing that the strain was in a situation of spontaneous hypercholesterolemia.Its incidence of atheroscerosis was 100% in some liable positions such as aortic sac and ascending aorta at 8~10 months.Most of the pathological changes were in fatty streaks.The strain may be used as a animal model of spontaneous hypercholesterolemia and atherosclerosis.     

荷瘤SCID-hu鼠模型及其肿瘤实验研究现状

严重联合免疫缺陷鼠（severe combined immune deficiency mice,SCID）具有T、B淋巴细胞联合免疫缺陷等生物学特性,可以将人类有关免疫细胞、免疫组织和器官移植入其体内进行人免疫功能重建-SCID-hu鼠。荷瘤SCID-hu鼠模型为人类肿瘤的发病机制、生物治疗等方面的研究提供了良好的实验平台。     

615小鼠ES细胞集落的分离及初步鉴定

目的　分离和培养 6 15小鼠的ES细胞集落 ,为建系打下基础。方法　以PMEF为饲养层分离 6 15小鼠的ES细胞集落 ,进行无饲养层培养 ,并对其进行初步鉴定。结果　ES细胞集落的出现率和传代成功率为 2 2 6 %和 0 94 % ,其ALP染色阳性 ,具有稳定的二倍体核型 ,可自发分化为多种类型的细胞。结论　成功分离和培养了6 15小鼠的ES细胞集落     

乌司他丁联合血必净治疗重症脓毒症的研究

目的:评估乌司他丁联合血必净注射液治疗重症脓毒症的临床疗效。方法:将符合入选标准的脓毒症患者40例,按照随机分组原则分为观察组和对照组,每组20例。所有患者给予常规抗感染治疗(根据培养结果给予敏感抗生素)和必要的对症支持治疗。观察组患者加用血必净注射液50ml静脉滴注,1次/12h,乌司他丁60万U静脉滴注,1次/12h,连用7d。记录治疗前后所有患者的体温、脉搏、呼吸、血白细胞(WBC)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEⅡ)、7天病死率。结果:疗程结束时观察组脉搏、呼吸、WBC、PCT、CRP、APACHEⅡ评分、7天病死率均较治疗前明显下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血必净注射液联合乌司他丁对重症脓毒症有明确疗效,改善临床症状,降低病死率。     

Enhanced Engraftment of HTLV-I-Infected Human T Cells in Severe Combined Immunodeficiency Mice by Anti-asialo GM-1 Antibody Treatment

The effects of anti-asialo GM-1 antibody (AAGM) treatment on the engraftment of human T-cell leukemia virus type I (HTLV-I)-infected human T cells in severe combined immunodeficiency (SCID) mice were studied. The frequency of tumor formation in an HTLV-I-transformed human T-cell line, MT-2 cells, at the site of inoculation was significantly higher in AAGM-treated than untreated mice (P<0.05): 16/18 (89%) and 16/26 (62%), respectively. The promotive effect of AAGM treatment on tumor development was marked in the early stage (less than 3 weeks), suggesting that the immediate reaction of natural killers to the inoculated cells may be important for the prevention of tumor development. The surface phenotypes and clonality of the tumor cells were the same as the MT-2 cells inoculated. Inoculation of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from one of the 4 adult T-cell leukemia/lymphoma (ATL) patients resulted in the development of tumors in AAGM-treated SCID mice. However, the surface phenotypes of the cells from these tumors were a mixture of B cells and T cells, suggesting that these tumors consisted of Epstein-Barr virus-transformed B cells and HTLV-I-transformed T cells. In addition, HTLV-I was detected by polymerase chain reaction in various organs of the mice inoculated with PBMC from the ATL patient and the asymptomatic carrier examined. These results suggest that elimination of natural killer function by AAGM treatment is important, although such treatment is not always necessary for the engraftment of HTLV-I-infected cells in SCID mice.     

Effect of hepatocyte growth factor on long term hematopoiesis of human progenitor cells in transgenic-severe combined immunodeficiency mice

Hepatocyte growth factor (HGF), which was originally isolated as a liver generating factor, enhances hematopoiesis. To study the effect of HGF on hematopoietic stem cells (HSCs) and hematopoietic progenitor cells (HPCs), we generated severe combined immunodeficiency (SCID) mice producing human (h) HGF and/or stem cell factor (SCF) by transferring the relevant genes to fertilized eggs, and then transplanted hematopoietic progenitors from human cord blood into the transgenic (Tg) SCID mice. Six months after transplantation, a significantly larger number of human cells were found in the Tg SCID mice than in non-Tg controls. Characteristically, the recipient SCID mice producing h HGF (HGF-SCID) had a significantly increased number of h CD41+ cells, whereas the SCF-SCID recipients had more CD11b+ cells. Significantly large numbers of CD34+ progenitors were found in the SCID mice transferred with both h HGF and h SCF genes (HGF/SCF-SCID) when compared with HGF-SCID or SCF-SCID mice. These results imply that HGF supports the differentiation of progenitors in megakaryocyte lineage, whereas SCF supports that in myeloid lineage. The results also imply that HGF acts on HSCs/HPCs as a synergistic proliferative factor combined with SCF. We have demonstrated the advantage of the human cytokine-producing animal in the maintenance of human HSCs.     

小鼠心梗模型的建立与无创评价

目的建立小鼠的心肌梗死模型,提高动物存活率,并使用心脏超声进行无创心功能评价。方法昆明雄性小鼠20只,气管插管后由左侧第4肋间进胸,结扎冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,在模型建立的前1 d和术后1 d、1周分别使用心脏超声检测左室收缩末直径、舒张末直径、缩短分数和射血分数,并于术后第8天进行病理检查。结果小鼠心肌梗死模型建立过程中早期死亡率10%（2/20）,术后1周内死亡率15%（3/20）,经过超声评价,造模成功率为75%（15/20）。小鼠心功能明显下降,射血分数由手术前的（92.1±3.45）%下降到术后1周的（49.8±14.20）%,缩短分数由手术前的（61.4±2.85）%下降到（26.1±9.01）%;心室明显扩大,左室收缩末直径由（13.9±1.98）μm扩大到（36.5±7.37）μm,舒张末直径由（35.9±3.12）μm扩大到（48.9±6.05）μm。病理学检查见明显瘢痕形成。结论通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立了小鼠心肌梗死模型并可以使用超声心动图评价这一模型。     

痘苗病毒毒力测定及其免疫血清的制备

目的测试痘苗病毒毒力,制备痘苗病毒免疫血清,为药物评价和病毒检测奠定基础。方法鸡胚绒毛尿囊膜培养痘苗病毒,测定病毒的TCID50和小鼠毒力。将痘苗病毒悬液稀释成100TCID550,0．2％福尔马林灭活,分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫BALB／c小鼠,用IFA、IEA、ELISA方法评价血清的敏感性和特异性。结果痘苗病毒TCID50／0．05mL=1．8×10^4,小鼠LD50／0．2mL=10^6.8;制备的免疫血清经IFA法测定效价为1：320,IEA法测血清效价为1：160,ELISA测血清效价1：6400。结论确定的细胞和小鼠毒力将为药物测定提供基础比对数据;制备的痘苗病毒免疫血清具有高度的敏感性和特异性,可作为测试对照血清使用。     

思他宁联合美常安治疗重症急性胰腺炎的临床研究

目的 探讨思他宁联合美常安治疗重症急性胰腺炎(SAP)的疗效.方法 将2005年至2009年SAP患者35例设为A组,按照SAP常规处理原则予监护、止痛、禁食、胃肠减压、抑酸、抗生素、纠正水电解质酸碱平衡治疗及给予静脉持续滴注思他宁(250 μg/h),连用5～10 d;另将SAP患者45例设为B组,B组在A组治疗方案...     

用饲养层分离胚胎干细胞集落的实验初探

目的 用饲养层分离胚胎干细胞集落。方法 用胚龄为13~14 d的小鼠胚胎分离原代成纤维细胞,制成饲养层,用于囊胚的培养。结果 小鼠原代胚胎成纤维细胞（PMEF）贴壁能力较好,增殖快,易铺层。囊胚和内细胞团（ICM）在饲养层上贴壁生长良好,当培养4~5 d时,其增殖率为16/28（57%）。在ICM离散48 h后,各种胚胎干细胞（ES）集落开始出现。此种集落经碱性磷酸酶染色成阳性。结论 用饲养层分离胚胎干细胞获得初步成功。