小牛胸腺素F_5提取方法和体外活性测定方法的改进

胸腺素F_5的分离提纯方法,Goldstein等人已有报道,我们对以上方法进行改进和简化,并建立了应用人脐带血淋巴细胞作体外生物测定胸腺素活性的玫瑰花结方法。用此改进的方法制备的胸腺素F_5的生物化学和免疫化学的研究,以后将详细报道。     

胸腺激素对淋巴细胞免疫功能调节的研究:Ⅰ胸腺素F5对有丝分裂原诱导下小鼠胸腺细胞增殖反应的影响

本文介绍了用氚胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入微量法测定小鼠胸腺细胞增殖反应的方法与影响因素;并应用此方法研究胸腺素F_5在体外对小鼠胸腺细胞在有丝分裂原诱导下增殖反应的影响。实验结果表明:小鼠胸腺细胞对ConA刺激反应远较对PHA刺激反应明显。在ConA作用下~3H-TdR掺入强度与胸腺细胞数量,ConA浓度及作用时间有关。同位素浓度与标记时间也直接影响。~3H-TdR掺入。胸腺素F_5在体外与小鼠胸腺细胞预育20小时左右(16—24小时)可增强胸腺细胞对ConA刺激的反应,但对PHA刺激无此作用。胸腺素F_5对小鼠胸腺细胞作用的有效剂量为50—200微克/1×10~7细胞/毫升。胸腺素F_5的这种增强作用,对各年龄组小鼠胸腺细胞都有所表现,但年龄较老的8月龄小鼠胸腺细胞对胸腺素F_5作用反应微弱。胸腺素F_5能增强胸腺细胞对ConA刺激的反应是否由于它能通过某种机制加速T细胞功能分化成熟有关,有待今后进一步研究确定。     

胸腺素:环核苷酸和T细胞的分化

本文对第二信使参与胸腺依赖的淋巴细胞分化的证据进行了归纳,着重点放在这样一些研究上,即他们认为不仅在胸腺素和其它胸腺因子间,而且在胸腺素F_5所包含的各种肽之间亦存在着差异性和相似性。     

小牛胸腺素F_5提取和活性测定方法的改进及其性质的研究

前言胸腺对机体免疫特别是细胞免疫的演化、成熟和功能调节作用的研究是当代免疫学的一个重大进展。1972年 Goldstein.等从小牛胸腺中成功地提纯了具有生物活性的多肽,命名为胸腺素(Thymosin)。胸腺素 F_5(Thym-osin Fraction 5即第五步提取得到的半纯品,以下简称 F_5),在先天性无胸腺鼠,去除胸腺成熟鼠,有严重自家免疫反应的 NZB小鼠,带瘤小鼠,以及由酪蛋白诱发的淀粉样变性症的小鼠中,具有诱导 T 细胞分     

人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用２０ｕｇ／ｍｌ植物血球凝集素（ＰＨＡ）和５００Ｕ／ｍｌ重组人白细胞介素２（ＩＬ－２）联合刺激人胎儿胸腺细胞,从中提取总ＲＮＡ,经反转录ＰＣＲ获得了人胸腺素α原ｃＤＮＡ;将之克隆入ｐＵＣ１９中,序列测定表明与已报道序列一致,进一步将之亚克隆入原核表达载体ｐＢＶ２２０,转化大肠杆菌ＤＨ５ａ．观察到在不改变氨基酸编码的前提下,增加胸腺素ａ原上游引物中Ａ、Ｔ含量,可以明显提高胸腺素α原的表达量,同时,不同培养基对它的表达也有影响。胸腺素α原在大肠杆菌中以可溶形式表达,不需复性。初步活性测定显示,它可明显刺激人外周血淋巴细胞Ｅ－玫瑰花结形成率。重组人胸腺素α原在大肠杆菌中表达,为其临床应用及基础研究奠定了基础。     

人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用２０μｇ／ｍｌ植物血球凝集素（ＰＨＡ）和５００Ｕ／ｍｌ重组人白细胞介素２（ＩＬ－２）联合刺激人胎儿胸腺细胞,从中提取总ＲＮＳ,经反转录ＰＣＲ获得了人胸腺素α原ｃＤＮＡ;将之克隆入ｐＵＣ１９中,序列测定表明与已报道序列一致,进一步将之亚克隆入原核表达载体ｐＢＶ２２０,转化大肠杆菌ＤＨ５α,观察到在不改变氨基酸编码的前提下,增加胸腺素α原上游引物中Ａ、Ｔ含量     

小牛胸腺mRNA的提纯与翻译活性

胸腺的多种功能是通过自身分泌的一类胸腺素组分完成的。这些胸腺素组分是由不同种类和数量的氨基酸分子所组成的小分子多肽。目前国内外已报道了从小牛或猪的胸腺提出不同的胸腺素组分,进行了氨基酸组成与结构、理化性质、生物活性和临床应用等研     

人胚胸腺素的生物活性和理化性质

<正> 胸腺素由美国学者Goldstein等于1966年首次从小牛胸腺提取并命名。经一系列研究证实为一族生物活性多肽,能增加E-玫瑰花形成细胞数,并能纠正各种免疫功能紊乱。以异种动物胸腺为原料制各的胸腺素在临床上存在着过敏问题,Schulof等1983年报道。轻度反应达20%,中度反应占10%之多。利用人胚胸腺为原料,采用简便工艺可望得到具有活性高、疗效好、不存在异种蛋白副作用的制品。同时,研究人胚胸腺素(HET)对探讨人胸腺的免疫学功能,具有重要的学术意义。     

胸腺素的两种制备工艺对比

<正> 目前胸腺素或胸腺肽的生产工艺有中性提取和酸性提取等。不同工艺所得产品在活性上有无差别未见报道。我们在胸腺素简易制备工艺的基础上对比研究了中性提取和酸性提取所得产品的活性差异。     

胸腺素对带瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数影响的研究

本文报道胸腺素对正常及带瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数的影响。试验结果表明,注射胸腺素组的胸腺淋巴细胞有丝分裂指数均高于对照组。其中不同瘤龄之间有一定差异。     

胸腺素α原基因的克隆与序列分析

应用RT-PCR法从正常成人外周血和胎儿胸腺中分别克隆得到了四种胸腺素α原基因,经序列分析结果表明,克隆的四种ProTα基因的核苷酸序列并不一致。与已报道的胸腺素α原基因进行比较,胎儿胸腺中克隆的胸腺素α原基因几乎无变化,而从成人外周血中所克隆的则变化较大,但变化区域有一定规律,109-120位都有GGGAATGCTAAT碱基的缺失,变化较多的氨基酸集中为天冬氨酸和谷氨酸,而胸腺素α原前28个氨基酸、中心酸性区和末端核定位信号区域变化较小。该结果为胸腺素α原的结构、功能和演化研究提供了信息。     

胸腺素α1及其临床应用

胸腺素α１及其临床应用傅华林甘人宝（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词胸腺素α１临床应用１．胸腺和胸腺素１９６１年,Ｍｉｌｅｒ［１］等首先发现了胸腺的功能。新生老鼠在胸腺被摘除后,生长以及淋巴组织和发育都受到严重阻碍。以后的一些研...     

基因工程的现状与未来(续)

借助基因工程制造药物 谈起基因工程在实际生产中的应用时,话题是药物生产,而人干扰素、人生长激素和胰岛素更是它们的三大支柱。此外还有关于β内啡肽和生长激素释放抑制因子(这两种物质有调节脑神经的作用)、肠促胰液肽和胸腺素d_1(调节免疫反应)等药物生产的报道。     

胸腺素含量的ELISA测定法

用胸腺素免疫新西兰兔,获得抗胸腺素抗体,建立了胸腺素ＥＬＩＳＡ定量测定法。该法检测灵敏度为３．２ｎｇ／ｍｌ,批内和批间变异系数分别为４．４％和８．９％,方法特异性鉴定显示与另外７种激素无明显交叉反应。该方法灵敏度高、专一性强、重复性好,可用于胸腺素产品的质量检测,具有较大实用价值     

激素和活性多肽

951652约码一藤素一口一1人工基因的合成及其与人肿■坏死因子的融合蛋白在大肠杆菌中的衰达亡俄]/Ko—robko,V.G.…/Bioorg.Khim..1992。lg(5).一646～659E译自DBA,1992,11(23),92一120703 构建的编码具免疫活性的胸腺素一d—l和人肿瘤坏死因子(hTNF)为具有N一末端的人工融合蛋白基因。在C一末端融合蛋白中,hTNF和胸腺素一口-1通过甲硫氨酸残基连接,便于融合蛋白用澳化氰切削,在N一末端融合蛋白,胸腺素-口一1和hTNF问的接头为酸不稳定的二肽Asp—Pro。N一末端融合蛋白分泌到周质内,而C一末端融合蛋白,由千形成不溶的凝块而留在细…     

抗玉米素核苷的单克隆抗体制备及内源玉米素核苷的酶联免疫吸附测定

通过二次成功的细胞融合,共获得三株分泌抗玉米素核苷(ZR)单克隆抗体的稳定杂交瘤系F_2E_6、F_3G_6和F_1B_9。其中F_2E_6分泌的单抗属IgG_1、F_3G_6、F_1B_9分泌的单抗均属IgM。以F_2E_6、F_3G_6单抗为基础的ELISA对ZR的检测灵敏度为0.05pmol(—18pg),线性检测范围为0.05—50pmol。除玉米素(Z)外,F_2E_6、F_3G_6单抗与IPA、6-BA、KT和腺苷几种ZR类似物的交叉反应值都小于0.18％。用ELISA测定F_2E_6单抗与ZR反应的亲和常数为2.36±0.99×10~(-8)M。本文还报道了包埋抗原的ELISA在植物内源细胞分裂素测定中的应用,并用此方法测定了黄化玉米(Zea mays L.)幼苗中ZR的含量。     

前列腺素介导胸腺素的免疫调节作用

胸腺素具有促T淋巴细胞分化和成熟的功能。它通过什么环节发挥作用呢?近年来,根据国外不少实验研究结果,如:胸腺上皮细胞内前列腺素(PGs)含量增加;胸腺细胞对PGs敏感性增强;PGs可影响T淋巴细胞的分化和成熟;PGE_2同类物可恢复被抑制的小鼠体内的免疫反应;抗PGE血清能抑制细胞免疫反应,等等。有人认为,PGs可能是胸腺素作用的介质。Garaci等为证实上述假设,观察了胸腺素和PGs的关系。他们采用出生4—8周的雄性小鼠,利用放射免疫测定法进行了三步实验。首先,取正常小鼠和去胸腺小鼠的脾细胞,分别和100μg胸腺素片段5(Fr5)孵育,并与加入消炎痛的组对照。5min后,测PGs的释放量。其次,用正常小鼠脾细胞和去胸腺小鼠脾细胞,分别与不同浓度的Fr5孵育,15min后,测PGs的释放量。最后,用3×10~6去胸腺小鼠脾细胞、不     

胸腺素在治疗原发性免疫缺陷病和恶性肿瘤中的应用

胸腺素是从小牛胸腺提取出来的一组多肽(至少12个),其分子量范围为1,200～14,000,此外,还含有少量的单核苷酸、寡核苷酸,醣和脂肪。经初步临床试验,胸腺素治疗原发性免疫缺损病有显著的效果,减少病人的感染情况,增加血中的T细胞数目和淋巴细胞功能以及对回忆试验抗原的迟缓超敏反应。在恶性肿瘤病人中,胸腺素使血中T细胞百分率显著增高。应用胸腺素在动物中和临床上所进行的研究表明自家免疫病可能是胸腺素分泌不足的结果。本文通过所报导的实验结果企图阐明胸腺素在治疗免疫缺损症的功效的前景。     

计算自花传粉后代相对性状比数的公式

当我们用黄粒豌豆与绿粒豌豆杂交,得到F_1,全部为黄粒豌豆。F_1自交,F_2中黄粒豌豆与绿粒豌豆比数为3:1。若再进一步白花传粉到F_3、F_4、F_5代。那么F_5代个体中与F_1相同基因型的应占百分之几?纯合体个体应占百分之几? (理论上) 这是一对相对性状的遗传实验。黄色为显性,绿色为隐性。从F_1全部为黄粒豌豆,可以判断两个亲本均为纯合体。现以“Y”表示黄色,“y”表示绿色,F_1的基因型为     

胸腺素α1二聚体蛋白的初步毒理学研究

目的:对胸腺素α1二聚体蛋白开展初步的毒理学研究,为后续系统地进行临床前研究提供依据。方法:将BALB/c小鼠随机分为生理盐水对照组和胸腺素α1二聚体蛋白高、中、低剂量组,观察胸腺素α1二聚体蛋白给药后小鼠的一般行为,进行血液生化学指征及组织病理学检测。结果:动物未见明显的中毒症状和死亡,与对照组相比,高、中、低各剂量胸腺素α1二聚体蛋白注射组的动物行为、活动、体重、进食量等与对照组无显著差异,血液生化指标与主要脏器组织形态学检查也均未见异常。结论:未发现胸腺素α1二聚体对小鼠有明显的毒性作用。