高速逆流色谱技术在生物大分子分离纯化中的应用

高速逆流色谱是一种连续液-液色谱技术,具有无固相载体、样品无需严格预处理等优点。近10年来,在设备结构和溶剂体系等方面进行了大量的研究开发,已推广应用于生物技术、医药、天然产物、环境监测、食品等领域。为适应生物大分子和活性细胞的分离,采用条件温和的双水相体系,研究开发相应的高速逆流色谱设备已成为热点。针对双水相体系的特点,已经开发出了多种具有较高固定相保留率的新型高速逆流色谱设备,通过优化实验条件,成功地进行了多种蛋白质的分离纯化。本对该领域的最新进展进行了综述与评价。     

生物色谱分离技术在生物技术产业化中的作用

色谱分离技术是生物产品的分离纯化的核心技术。目前,95％以上的生物制品、75％以上的天然产物和80％以上的海洋药物是通过色谱分离技术完成的．该技术决定着生物制品和中药现代化产品的生产成本。因此．色谱分离技术就成了生物技术产业化和中药现代中的关键和核心技术．多年的实践也证明这是我国通过开放市场换不来的技术。     

多维液相色谱及其在生命科学中的应用

介绍了一种适用于复杂体系样品分析的分离技术-多维液相色谱。对该技术的原理、分类、模式的选择做了介绍,并引证了其在蛋白质组研究、药物研究等复杂体系样品分析领域的最新应用及发展。     

生物大分子分离纯化技术的重大突破──灌注层析系统

生物大分子分离纯化技术的重大突破──灌注层析系统夏小燕（北京化工学院）傅仲华（中国科学院发育生物研究所）现代生物大分子分离纯化技术的发展,促进了生命科学,医学及医药工业的发展,液相色谱仪是生物分子分离纯化的重要工具,而其中分离介质尤为重要。     

高速逆流色谱结合制备液相色谱分离纯化桂枝中化学成分

本文首次采用高速逆流色谱结合高效液相色谱的方法对桂枝正丁醇相进行分离纯化。首先,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(8∶2∶6∶4,v/v)为高速逆流色谱溶剂系统,将桂枝正丁醇萃取相分为两个馏分,然后结合制备高效液相,共分离得到4个高纯度化合物。通过核磁共振波谱鉴定其化学结构,分别为香豆素(1)、反式-邻甲氧基桂皮酸(2)、桂皮酸(3)、反式-桂皮醛(4),这四种化合物纯度经高效液相检测均大于95%。该方法简便、快速、节省溶剂,可以对桂枝正丁醇相进行快速有效的分离纯化,具有较好的实用价值,为桂枝资源的进一步开发应用提供了技术和物质支持。     

离子交换色谱在细菌素分离纯化中的应用

近年来,乳酸菌细菌素在食品防腐剂和医药领域有着广泛的应用前景,而细菌素的分离纯化是其分子结构及遗传学特性等相关研究的重要基础。离子交换色谱是细菌素分离纯化的主要手段之一。本文阐述了离子交换色谱原理,分析了影响离子交换色谱分离纯化细菌素的各种因素,探讨了细菌素分离纯化中离子交换色谱条件的选择。     

制备液相色谱分离纯化埃博霉素B

基于制备液相色谱法开发与优化埃博霉素B的分离纯化工艺，制备得高纯度埃博霉素B样品。实验首先对埃博霉素B粗品进行了液相色谱（HPLC）分析，定位目标峰和杂质情况。其次，对两款正相色谱填料进行筛选和模拟制备，考查不同填料对埃博霉素B相关杂质的去除效果和回收率。结果表明，上样量为0.2%时，埃博霉素B在NPLC-2分析柱（250 mm×4.6 mm, 10μm）上保留得较好，可与杂质有效分离。最后，将优化好的纯化方法在制备水平上进行放大，以正庚烷和乙酸丁酯为洗脱剂，使用NPLC-2制备柱（260 mm×50 mm, 10μm）对埃博霉素B粗品进行分离纯化，样品的色谱纯度可达99.63%，回收率为90%，各项有关杂质均符合限量规定。该方法对埃博霉素B的相关杂质去除效果好，纯化效率和回收率均很高，为埃博霉素B分离纯化生产工艺的开发提供了新方法。     

多维液相色谱分离技术在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用

目的：随着蛋白组学技术的发展,液相色谱-串联质谱的联用技术（液质联用）逐渐成为蛋白组学的主流技术。方法：通过结合各种不同原理的色谱分离类型,多维液相色谱分离技术能够极大的提高分离系统的峰容量,达到有效分离复杂程度很高的蛋白质组学样品的目的。结果：最广泛使用的多维液相色谱分离系统是离子交换色谱（IEX）和反相色谱（RP）的二维结合,近年来又发展出了分离能力更强的三维液相色谱分离系统,并且已经在蛋白质组学研究中得到了应用。结论：本文综述了多种多维液相色谱分离方法,在这些方法中,不同的分离原理的色谱类型被用于肽段或蛋白混合物的预分离中,有效促进了样品的充分分离,极大地提高了复杂样品的蛋白组学鉴定能力。     

应用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化山茱萸中的没食子酸

应用高速逆流色谱（ＨＳＣＣＣ）分离山茱萸中的没食子酸并结合波谱技术进行结构鉴定。经过一次逆流色谱分离,可以得到纯度在７０％以上的没食子酸,第二次分离即可使其纯度达到９７％以上。     

生物大分子分离技术:过去、现状和未来

生物大分子包括多肽、酶、蛋白质、核酸(DNA和RNA)以及多糖等。生物大分子分离技术是生命科学研究中的关键技术之一。当前,各学科之间的交叉渗透为生物大分子分离技术的发展提供了更多的契机。对以沉淀、透析、超滤和溶剂萃取为代表的传统分离技术,以及色谱,电泳等现代分离技术的发展概况、原理、特点及应用进行了综述。并结合生命科学的发展现状,展望了生物大分子分离技术的发展前景。     

我国生物分离介质自主产业化进展

生物技术产业是21世纪最具发展潜力的行业。在生物技术产业化过程中,色谱技术已经成为下游纯化过程中公认的关键环节。决定着药物产品的生产成本．而支撑色谱技术的核心是色谱填料,即生物分离介质。因此．生物分离介质的制备及应用研究一直是生物技术产品从实验室走向应用的关键技术和核心技术。然而．多年来我国实验室研究、     

柱色谱硅胶的应用

色谱硅胶通常分为薄层色谱、柱色谱和液相色谱（含高效液相色谱）固定相用硅胶,它们在对物质分离、分析的机理方面基本一致。近几年由于生物技术和生物制药技术的发展,柱色谱硅胶的应用普及迅速,本文针对柱色谱硅胶的应用进行讨论与分析。     

现代提取分离技术在食药用菌多糖分离纯化中的应用

详细综述了超声波法,酶解法,超滤法,透析法,色谱法等现代提取分离技术在食药用菌多糖分离纯化中的应用,简单阐述了各种技术的优缺点,并对其应用前景作了简要探讨。     

反相色谱在重组多肽精细纯化中的应用

反相色谱因其高分辨率在蛋白质、多肽及其他有机分子的高效液相色谱分析中被广泛使用,特别在基因工程多肽类药物的精细化中起着难以替代的作用。采用反相色谱进行两种重组多肽的精细纯化,获得了好的分离效果。     

稀土荧光探针在生物大分子研究中的应用

钙(Ⅱ)、镁(Ⅱ)离子是生物体内最重要的闭壳层无机阳离子。引入具有适当光性质的、与钙(Ⅱ)等离子成键性质相近的铽(Ⅲ)或铕(Ⅲ),利用荧光光谱技术,是研究一些与钙(Ⅱ)有关的生物大分子在水溶液中构象的一条有效途径。本文综述了稀土荧光探针技术的研究进展。     

电喷雾离子化/质谱法(ESI/MS)及其在生物大分子研究中的应用

电喷雾离子化／质谱法（ESI／MS）在各种有机化合物、多肽、蛋白质（含糖蛋白）、核苷酸、糖、脂类及合成高分子物质等分析领域获得了广泛的应用,本文系统介绍了ESI／MS的基本原理,其联用技术,及其在生物大分子研究,包括肽图谱测定,糖分析和核苷酸分析中的应用。     

β—鹅膏毒肽的反相高效液相色谱分离纯化

用反相高效液相色谱,以0．02mol/L醋酸铵—乙腈为流动相的梯度洗脱模式,在295nm吸收值的条件下,灰花纹鹅膏菌Amanita fuliginea的肽类毒素可以被成功的分离和纯化。单个肽类毒素的鉴定是用反相高效液相色谱和质谱同时进行。用这一方法可从灰花纹鹅膏菌中分离纯化出β-鹅膏毒肽(β-amanitin),产量可达到：1158μg／g(干重),产品纯度达98％以上,回收率为95．3％。β-鹅膏毒肽的分子量为919．3Da。这个方法可用于其它鹅膏菌肽类毒素的分离纯化。     

2007年生物产业技术研讨会筹备工作已全面展开

在生物技术产品生产中,分离纯化技术对生物技术产品的形态。收率和成本起着越来越重要的作用。在以小分子为主的传统发酵工业中,分离成本占总成本的60％左右。而在现代基因工程产品中,分离成本高达90%。因此分离纯化技术在生物技术产业化中起着十分重要的作用。为推动生物产业中应用技术的进步与发展,化学工业出版社和中国生物工程学会决定于2007年举办以工业生物技术及分离纯化技术为主题的专题研讨会。在邀请国内外知名专家作报告的同时,为科研院校（所）及企业提供交流与展示的平台。     

超滤技术在生物分离中的应用

“超滤”、“膜分离”和我们日常生活,生产实践息息相关,如安全可用的净化水、血液透析或血液滤过人工肾、发酵产物的分离、牛奶浓缩等。超滤由于成本低．通量高．易于放大的优点,已得到广泛的应用。本文主要介绍了超滤技术在发酵液的澄清（固液分离）、生物产品的精制、药用蛋白的分离纯化以及质粒DNA的分离纯化中的研究进展和应用情况。