无神经支配血管的内皮细胞调控机制

机体血管主要受血管周围神经丛和血管内皮细胞的双重调控。这一事实已为科技工作者所公认。但机体还有一些血管是无神经支配的,其中代表性的,如人脐血管。它们是否存在局部调控机制,其调控途径是什么？作者通过系列研究证明,无神经支配血管也存在局部调控机制,其调控主要通过无神经支配血管内皮细胞合成和释放的血管活性多肽经细胞内信号转导途径而实现的。     

内皮前体细胞的动员与调节

胚胎发生时期,内皮前体细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)参与了原始血管形成的最初过程(血管发生)。已有的证据显示,分化为内皮细胞(endothelial cells,Ecs)的前体也存在于成人中,正常情况下,EPCs停留在成人的骨髓,但是,可以通过细胞因子或血管生成因子信号被动员到循环血,迁移到生理或病理条件下的新血管形成位点,并原位分化成内皮细胞,快速和及时地修复损伤的血管。自源的EPCs原住动员或移植是治疗性血管再生的一个潜在、有效的方法,因此,探究EPCs从骨髓的动员和调节,对血管再生以及修复器官功能具有重要的意义。     

肺循环调节的研究进展

近年来的研究表明,肺血管除接受交感、副交感神经支配外,还接受肽能神经支配,其末梢释放血管活性肠肽(ViP),当其兴奋时,可使肺血管舒张.此外,肺血管壁本身具有一套主动的自身调节系统.体内某些活性物质如乙酰胆碱、舒缓激肽等舒张肺血管作用是通过肺血管内皮细胞释放内皮细胞舒张因子(EDRF)而实现的.血栓素A_2(TXA_2)和前列腺环素(PGI_2)是花生四烯酸的代谢产物.前者可使肺血管收缩,后者可使肺血管舒张.二者间的平衡,对调节肺血管紧张性有重要作用.     

内皮祖细胞及其在组织工程中的应用

目前,组织工程化血管的构建和工程化组织器官的血管化因内皮种子细胞的扩增能力不足和生物活性不强而受到限制。内皮祖细胞(EPC)是内皮细胞的前体细胞。出生后,EPC主要存在于骨髓,可向外周血液缓慢释放,参与机体缺血组织的血管重建和损伤血管的重新内皮化。现对EPC的来源、分布、表型特征、动员、分化、归巢、分离、培养与鉴定等生物学特性和EPC在组织工程中的应用进行了全面的综述,并指出目前存在的问题和研究方向。     

哺乳动物脑下垂体前叶的直接神经调节

内分泌系统的活动受神经系的调节。脑下垂体前叶,作为内分泌系的核心器官,其神经调节历来是神经内分泌学的一个中心课题。早期对于垂体前叶的神经支配有过大量的研究,从无神经支配、仅有少量神经纤维到有较丰富神经,众说不一。多数认为这些神经纤维属血管运动性,主要来自交感神经系。也有从下丘脑发出大量神经纤维到垂体前叶的报告。Ha-     

部分股骨移植:一个新的带血管的骨髓移植模型

目的:大鼠后肢移植是带血管的骨髓移植的主要模型,同时含有骨髓和骨髓微环境,有利于免疫耐受的诱导.但其成分复杂,为研究其中骨髓的作用,构建一个成分相对单一的带血管的骨髓移植模型.方法:以MHC不相符的近交系Lewis和BN大鼠分别作为供体或受体,将含血管蒂的供体2/3股骨移植到受体腹股沟区,显微吻合供受体间的股动静脉.实验分为3组:同基因移植组Lewis→Lewis;排斥组Lewis→BN;免疫抑制组Lewis→BN,术后给予环孢素A.通过大体和病理学检查观察各组移植物存活情况,外周血流式监测排斥组和免疫抑制组的嵌合水平.结果:术后7d,排斥组排斥反应显著,骨髓细胞明显减少、坏死,外周血嵌合水平几乎为0,而同基因移植组股骨存活良好,骨髓HE染色大致正常,可见髓腔内有大量的嗜碱性骨髓细胞;术后60 d,同系移植组和免疫抑制组的大体观察及组织病理学大致相同,均证实移植物存活良好,同时流式可见免疫抑制组术后7、28、60 d外周血中存在供体特异性的嵌合.结论:带血管蒂的部分股骨移植物是一个简便可靠的带血管的骨髓移植模型,嵌合分析表明其具有诱导耐受的潜能,有利于阐明异体复合组织中骨髓对免疫耐受诱导的作用和机制.     

内皮祖细胞(EPCs)研究进展

组织工程血管以及组织工程化组织的血管化因目前内皮种子细胞扩增能力和生物活力的不足而受到限制。EPCs(内皮祖细胞)是内皮细胞的前体细胞。在胚胎期,内皮细胞系与造血细胞系来源于血岛内共同的祖先细胞;出生后,EPCs存在于骨髓,并可被转移至外周血,参与缺血组织的血管重建和血管的内膜化。因此EPCs有望成为今后组织工程内皮种子细胞的重要来源。     

兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的诱导分化

目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的定向诱导分化,为血管化组织工程骨研究提供实验基础.方法:采集2周龄兔后肢长骨骨髓,用全骨骨髓贴壁法进行原代培养,将获得的第2代骨髓基质干细胞以1× 105/mL密度接种于内皮细胞条件培养基(含10 μg/L VEGF,10 μg/L bFGF,10％胎牛血清的DMEM/F12培养液)进行体外诱导培养,对诱导2周的细胞进行细胞形态观察和表型、功能鉴定.结果:经血管内皮细胞条件培养基诱导2周后的细胞呈扁平形,多边形,表达血管内皮细胞特异性标志CD31、VWF因子,细胞具有吞噬DiI-Ac-LDL和摄取FITC-UEA-1的功能,诱导的细胞可在BD基质胶内形成管腔样结构.结论:血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可以成功诱导兔骨髓基质干细胞为血管内皮样细胞,有希望作为组织工程骨的血管化的种子细胞.     

自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病一例

雷诺氏病属上肢缺血性疾病,治疗手段包括药物、血管旁路移植术和介入手术等,疗效常不理想,致残率高。再生医学的发展使细胞治疗成为近年尝试的一项新技术。动物实验及临床研究均表明人体外周血、脐血及骨髓问充质干细胞有修复病变血管和促进血管新生的功能。我院近来用自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病1例。     

柴胡多糖对照射小鼠骨髓血管机能及造血的影响

本文研究了柴胡多糖对γ线全身照射小鼠骨髓血管机能及GM-CFU-C增殖的影响。结果表明,照前1小时腹腔注射柴胡多糖能减轻照后骨體血管通透性增高的程度,并可加速照射小鼠移植骨髓后股骨内GM-CFU-C的增殖。     

人脐静脉内皮细胞的生物学特性及细胞内信号转导机制

本实验对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）合成与释放篾这活性多肽（ＶＰｓ）及其作用机制进行了研究。结果表明：（１）无神经支配的人脐血管内皮细胞（ＶＥＣ）所含ＶＰｓ较有神经支配的肠系膜血管ＶＥＣ多;（２）这些ＶＰＳ是ＶＥＣ自身合成且能释放到胞外;（３）血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）使ＨＵＶＥＣ膜上Ｃａ＾２＋通道开放概率明显增加,生长抑制（ＳＯＭ）使其明显降低,但它们均使胞浆内「Ｃａ＾２＋」和ＣＡ     

微循环研究常用部位的肽能和胺能神经支配

以逆行追踪与免疫细胞化学相结合法,探讨了大鼠提睾肌、盲肠系膜和耳廓等微循环研究常用部位的神经肽Ｙ（ＮＰＹ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、甲啡吠（Ｍ－ＥＮＤ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）等肽能和胺能神经的支配。结果表明：支配提睾肌的运动和感觉神经元分别含有５－ＨＴ和ＣＧＲＰ。支配提睾肌血管、盲肠系膜及其血管的交感神经元,一部分含有ＮＰＹ,一部分含有Ｍ－ＥＮＫ;支配耳廓局部的运动和感觉神经元均含有ＣＧＲ     

内皮祖细胞分离培养及应用技术新进展

内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)是能够增殖、迁移、粘附并分化为血管内皮细胞潜能的一种原始细胞,在修复血管内皮和促进血管生成中具有重要的作用。EPC来源于骨髓,存在于骨髓、外周血、脐带血,新研究表明在脂肪组织、心肌中也能发现EPC的存在。EPC与干细胞的细胞表面标志物相似,功能上亦接近干细胞,但不具有自我更新的功能。近年来EPC已成为热点问题,对疾病诊断,预后判断和靶向治疗方面发挥重要作用,在冠状动脉粥样硬化性疾病、糖尿病血管病变、恶性肿瘤等治疗中全身或局部注射EPC具有更广泛的前景和应用价值。但关于分离培养EPC的方法及细胞表面标志物不完全相同,报道较少,至今尚没有形成统一的标准,本文就对于内皮祖细胞基本现状、分离培养技术、分选鉴定及临床应用方面做一综述。     

骨髓间充质干细胞捕获支架对犬冠状动脉再狭窄影响的研究

目的:观察骨髓间充质(MSCs)干细胞捕获支架能否预防和减少犬冠状动脉支架植入术后再狭窄.方法:①用乙基纤维素作为包被底物对支架进行包被,然后再包被骨髓间充质干细胞抗体.②以球囊损伤法建立犬冠状动脉狭窄模型,应用标准球囊导管技术,将包被有抗体的支架植入犬(n=20)冠状动脉前将支损伤段远端,再以相同方法在损伤段近端植入裸支架作为对照组(n=20).4w后处死动物,取出支架段血管行血管内超声(IVUS)及血管形态学检测分析血管管腔面积和内膜增生面积.结果:术后4周,骨髓间充质干细胞捕获支架组较裸支架组的最小管腔直径和新生内膜面积较明显减少(P<0.05),而最小管腔面积则明显增加(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞捕获支架能快速修复损伤的血管内膜,降低再狭窄的发生.     

骨髓造血干细胞龛

造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）位于骨髓的造血微环境即龛（niche）中,它们与龛内特定的细胞相互作用以调节其自我更新和定向分化。研究发现,骨髓中的成骨细胞和内皮细胞与造血干细胞关系密切,分别构成了HSC龛中的成骨龛和血管龛,其中成骨龛维持静态的HSC微环境,而血管龛调控HSC的增殖、分化和动员等行为。对骨髓HSC龛的研究为将来临床治疗血液系统相关疾病提供了新的思路。     

大鼠垂体前叶中的TH-,ChAT-免疫阳性神经纤维

长期以来,人们一直认为垂体前叶腺细胞没有直接神经支配,前叶内只有自主神经纤维支配垂体前叶的血管。本文在大鼠垂体的相邻切片上,应用免疫组织化学技术,对前叶中的儿茶酚胺的特征性酶——酪氨酸羟化酶（ＴＨ）和乙酰胆碱的特征性酶——胆碱乙酰转移酶（ＣｈＡＴ）进行显色。结果显示,大鼠垂体前叶中存在着ＴＨ－和ＣｈＡＴ－免疫阳性神经终末,两者可同时分布于垂体前叶的同一区域,且有较多终末分布于腺细胞周围。本文提示：儿茶酚胺和胆碱能神经纤维有可能直接调节腺细胞的活动     

急性白血病患者骨髓组织血管新生与Bcl-2蛋白关系的研究

目的：探讨急性白血病患者骨髓组织血管新生与Bcl-2蛋白的关系,为临床治疗白血病提供可靠的理论依据。方法：回顾性分析2007年3月～2011月6月我院收治的42例急性白血病患者和42例增生性贫血和疑为血液系统疾病的患者作为对照组的临床资料。结果：对照组患者骨髓组织中的微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）及Bcl-2蛋白的表达水平均显著低于急性白血病患者,两组比较差异有极显著统计学意义（P〈0.01）。急性白血病患者骨髓组织中VEGF、MVD及Bcl-2蛋白之间,彼此两两呈正相关性。结论：Bcl-2蛋白的阳性表达在白血病的抗凋亡与血管新生方面,都发挥着重要的作用,通过对Bcl-2蛋白的研究,为临床治疗白血病提供了一条诊断、治疗白血病的新思路。     

外周动脉疾病治疗进展

外周动脉疾病(PAD)与心血管疾病(CV)的发病率和死亡率有着密切的联系。ACCF/AHA指南建议无症状和症状性PAD患者戒烟并应用抗血小板/抗凝药物。对于存在严重肢体缺血(CLI)的PAD患者应考虑接受腔内与开放保肢手术治疗。即便存在CLI的PAD患者接受如上治疗,有时仍无法为患肢提供足够的血流灌注以消除症状。为建立有效血供,许多研究已经深入细胞治疗层面。内皮干细胞、单核细胞和骨髓间充质干细胞在临床应用中得到了很好的研究。血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子和肝细胞生长因子(HGF)也被应用于PAD患者,以诱导血管生成。其中,HGF最有优势,因为它可诱导血管生成却不伴有反应性血管炎及血管通透性增高。同时,血管腔内治疗器械及技术,如药物涂层球囊等也获得较快发展。本文将PAD治疗进展综述如下。     

胆碱能神经及其递质乙酰胆碱对肺血管的作用

人与动物的肺血管都具有肾上腺素能和胆碱能双重神经支配。大量工作证实,肺血管壁存在着α和β两种肾上腺素能受体,在数量和功能上似乎较胆碱能系统占明显优势。阻断β受体可使缺氧对肺循环的缩血管作用增强,而阻断α受体,或者影响不大,或者使之削弱。因此,交感肾上腺素能系统参与肺血管运动的调节已经比较明确,而胆碱能系统在其中的作用则不太清楚。本文拟就迷走神经和胆碱能神经递质乙酰胆碱(ACh)对肺血管的作用问题作一些讨论。     

骨髓动员对骨髓造血干细胞在心肌梗死后心脏中定植及分化的影响

目的观察小鼠心肌梗死后骨髓造血干细胞在心脏内的分化及细胞因子的影响。方法C57/BL6小鼠60只分为骨髓动员组和对照组,先后行脾切除、骨髓移植（骨髓供体为增强绿色荧光蛋白转基因小鼠）、骨髓动员及建立心肌梗死模型。心肌梗死后3周将小鼠心脏取出并切片行组织学及激光共聚焦显微镜免疫荧光检查。结果骨髓动员可以增加EGFP阳性细胞在心脏中梗死区和边缘区的定植,但绝大多数EGFP阳性细胞都同时表达CD45。仅发现有极少数骨髓来源的心肌细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞,且与骨髓动员无相关性。结论骨髓动员能够明显促进骨髓来源细胞定植入小鼠心脏的梗死区;极少数骨髓造血干细胞可以分化为心肌细胞,其数量远不足以修复梗死心肌及改善心功能;骨髓造血干细胞不参与梗死区疤痕形成的病理过程。