虎杖愈伤组织的诱导及高产白藜芦醇材料的筛选

将虎杖(Polygonum cuspidatum)不同外植体经不同消毒时间处理后,接种在添加不同激素种类和水平的相同基本培养基上或相同激素种类和水平基本培养基上进行诱导实验,同时对根、根茎芽、叶、韧皮诱导的愈伤组织进行白藜芦醇的含量测定实验,其结果表明:基本培养基以MS较好,外植体叶对激素种类较为敏感,其中适当浓度的NAA诱导愈伤组织比2,4-D的效果要好,KT比BA要好,在有KT存在的培养基上诱导愈伤组织比较紧密,有利于分化;在MS NAA2m g/L KT0.1mg/L培养基上诱导愈伤组织较好,根茎芽的诱导率最高,为73%.愈伤组织的生长趋势从接种的第3d开始生长,到21d时生长达到最高峰,干重为0.461g,以后生长速度减慢.不同材料诱导的愈伤组织中白藜芦醇的含量以根茎部芽的愈伤组织含白藜芦醇最高,其次是叶和根,最低的为韧皮.     

培养矮牵牛叶肉原生质体的几种较好的培养基

本文对培养在8种不同培养基上的矮牵牛(Petunia hybrida)叶肉原生质体的生长情况进行了比较。在所用的培养基上,原生质体都再生了细胞壁、产生了持续的细胞分裂并发育成小细胞团。在其中6种培养基上得到了愈伤组织。最好的两种培养基是我们组合的G培养基及修改的K培养基,它们的植板效率分别达到56％及70％。 还进行了一些激素组合对愈伤组织生长和分化影响的试验,某些激素组合对愈伤组织的生长有较大的影响,在某些激素组合的培养基上愈伤组织已分化出根。     

5,6-二氯-吲哚乙酸对烟草愈伤组织衰老的延缓作用

5,6-二氯-吲哚乙酸对革新烟草愈伤组织生长有影响。当愈伤组织在MS_0(对照)和MS 2,4-D培养基上培养22d时,生长停滞,细胞已呈空泡状,正常的超微结构完全破坏,细胞器不复存在,愈伤组织明显褐化。但在MS 5,6-Gl_2-IAA培养基上的愈伤组织仍能正常生长,鲜重和干重下降亦明显延缓,细胞含有原生质内含物,各种细胞器的超微结构仍保持正常。此外,后者的SOD同工酶也明显不同于其它培养基上的愈伤组织,暗示5,6-Gl_2-IAA对烟草愈伤组织衰老的延缓作用可能与SOD同工酶的调节作用有关。     

烟草愈伤组织分化和芽原基形成期间呼吸代谢途径的改变

接种在继代培养基上的柳叶烟草愈伤组织,未观察到组织分化和芽原基形成。在分化培养基上生长的愈伤组织,接种后第6天可见拟分生组织和管胞分化,9—12天有芽原基形成,15—18天可观察到苗端结构。根据碘乙酸、Na_3PO_4和丙二酸抑制试验,以及3-磷酸甘油醛脱氢酶与琥珀酸脱氢酶活性测定结果,初步表明烟草愈伤组织呼吸中存在有EMP、HMP和TCAC代谢途径.在发生输导组织和芽原基分化的愈伤组织中(接种后第6—12天),HMP途径的运行程度较高;而芽原基的继续生长(培养12天以后),则与EMP途径的增加有关;分化培养基上生长的愈伤组织,始终较继代培养愈伤组织具有较高的FCAC活性水平。     

甜高粱再生体系的建立

利用甜高粱成熟种子和成熟胚作为外植体, 通过愈伤组织再生途径建立了植株再生体系。结果表明, 成熟种子在添加1.38 g.L-1脯氨酸、500 mg.L-1水解酪蛋白和3.0 mg.L-1 2, 4-D的MS培养基上可以较快地诱导出生长状态良好的愈伤组织;成熟胚在添加1.38 g.L-1脯氨酸、500 mg.L-1水解酪蛋白、2.5 mg.L-1 2, 4-D和0.1 mg.L-1KT的MS培养基上也能诱导出生长良好的愈伤组织。将愈伤组织转移到MS+1 mg.L-1 IAA + 0.5 mg.L-1 6-BA培养基上诱导芽, 然后再转移到MS+3 mg.L- 1IBA培养基上生根后, 可发育成为完整的植株。     

水稻花粉植株的诱导条件及影响诱导频率的某些因素

在离体培养条件下,测定了水稻花药中花粉愈伤组织形成的条件,并对影响花粉愈伤组织的形成和分化的某些因素进行了实验,得到以下主要结果: 1.掌握合适的花粉发育时期(单核后期接近第一次花粉分裂),在仅仅含有2毫克/升2,4-D和6％蔗糖的简单培养基上就得到了花粉愈伤组织,对于花粉细胞最初分裂的推动,生长素、碳源和渗透压是必要的条件。由无机盐、微量元素、维生素、糖及生长物质组成的复杂培养基对于花粉愈伤组织的发生和早期生长并非必需,但有利于愈伤组织的进一步生长。 2.培养基中蔗糖的作用,在于充当碳源和调节渗透压,在维持一定渗透压的条件下,过高浓度的蔗糖会抑制愈伤组织的形成。 3.椰乳、酪蛋白水解物及单核苷酸等有机附加物对花粉愈伤组织的形成及以后的器官分化都有明显的良好作用。 4.培养基中附加低浓度8p.p.m.、40p.p.m的2-氯乙基磷酸(乙烯利)和接种前在10℃下,预先处理稻穗48小时,都有明显的提高花粉愈伤组织发生频率的作用。 5.花粉愈伤组织的年龄对愈伤组织的器官分化能力有明显的影响,随愈伤组织年龄的增长而降低了花粉植株的诱导频率。     

水稻愈伤组织对不同培养基的适应性、潮霉素的敏感性及其在遗传转化中的利用

取粳稻 (Oryza sativa L.japonica) 品种中花11号开花授粉后15天的幼胚诱导愈伤组织, 在N6D、N6B5D、MsD和B5D 4种培养基上比较愈伤组织生长情况,证明3种培养基均可以用于水稻愈伤组织的培养,但B5D的效果不如另3种培养基,N6D和N6B5D的培养效果优于Ms培养基,N6B5D的效果略好于N6D。后续实验主要采用N6D培养基。进一步对愈伤组织的HygB敏感性试验,发现30mg/L的HygB对愈伤组织生长有明显的抑制作用,50mg/L的浓度对愈伤的生长抑制作用更彻底,因此认为采用50mg/L的浓度进行抗HygB的愈伤组织筛选比较可靠。利用上述结果,在水稻遗传转化方面进行了应用和验证,发现效果比较明显。     

甜高粱再生体系的建立

利用甜高粱成熟种子和成熟胚作为外植体,通过愈伤组织再生途径建立了植株再生体系。结果表明,成熟种子在添加1.38 g·L^-1脯氨酸、500 mg·L^-1水解酪蛋白和3.0 mg·L^-1 2,4-D的MS培养基上可以较快地诱导出生长状态良好的愈伤组织;成熟胚在添加1.38 g·L^-1脯氨酸、500mg·L^-1水解酪蛋白、2.5 mg·L^-1 2,4-D和0.1 mg·L^-1KT的MS培养基上也能诱导出生长良好的愈伤组织。将愈伤组织转移到MS＋1 mg.L^-1 IAA＋0.5 mg·L^-1 6-BA培养基上诱导芽,然后再转移到MS＋3 mg·L^-1IBA培养基上生根后,可发育成为完整的植株。     

植物体外培养和遗传育种

<正>油菜(Brassica catnpestris)黄沙森品种的种子经表面消毒后在无菌条件一下培养。从15天苗龄的植株上取10mm长的下胚轴段,培养在加有各种生长物质的ms琼脂固体培养基上。在加有激动素和引噪乙酸的培养基上愈伤组织形成最好,愈伤组织在这种培养基上按月继代繁殖。把愈伤组织转移到     

热击对麝香石竹茎段培养物培养效率的影响

本文研究了热击对麝香石竹茎段培养物培养效率的影响。结果表明,43℃2h热击麝香石竹茎段能促进或拟制不定芽的直接分化,提高愈伤组织的诱导率。热击愈伤组织能显著促进愈伤组织在继代培养基上的生长,但抑制愈伤组织在分化培养基上的生长。热击也能提高再生苗和愈伤组织的干重百分率。我们认为,热击所产生的生物学效应是与配合条件、特别是外源激素状况密切相关的。     

不同培养基对水稻胚性愈伤组织诱导及分化的影响

以水稻成熟胚为材料诱导愈伤组织,统计在不同基本培养基上的愈伤诱导率以及绿苗分化率,分析不同基本培养基及外源激素的含量和比例对愈伤组织生长及分化的影响。结果表明,试验材料对基本培养基具有选择性,MS培养基对籼稻种胚愈伤的诱导培养效果较好,NB培养基则更适合粳稻种胚愈伤的诱导培养;诱导继代培养基中加入多种氨基酸组合可有效提高出愈率和分化率,特别是粳稻的愈伤组织的诱导和分化需要多种氨基酸的共同作用;不同基因型水稻材料对激素和氨基酸组合的需求不同。     

银杏组织培养研究Ⅰ．不同培养条件对银杏愈伤组织形成的影响

取银杏树干上萌生的幼嫩枝条的基尖、茎段和叶片分别接种到高生长素含量的ＭＳ培养基上,愈伤组织诱导频率可高达９０％。在低生长素浓度下,诱导频率较低,但能促进茎外植体顶芽和侧芽的生长。以银杏幼茎、幼叶作外植体,形成的愈伤组织形态结构不同：幼基愈伤组织较疏松,呈粒状,色浅黄,生长迅速;幼叶愈伤组织较致密,平滑,色黄绿,生长稍慢。叶片的放置方式很重要：下表皮接触培养基时,愈伤组织只从上表皮发生,而反向放置,上下表皮都不形成愈伤组织。     

三尖杉外植体来源与培养基成分对愈伤组织生长的影响

为了建立和优化获得有效生物碱成分的三尖杉愈伤组织的培养技术和方法,以大连地区移栽自庐山植物园的三尖杉(Cephalotaxus)植株为原料,就外植体种类、基本培养基种类、激素种类和浓度等因素对愈伤组织诱导、生长的影响进行了系统的研究和归纳。实验发现,幼茎外植体因其出愈率早、诱导率高而最佳;培养基MS NAA3.0mg/L KT0.1mg/L为最佳诱导愈伤培养基,其诱导率达91%,继代培养基中一定浓度的NAA(1.0～3.0mg/L)有利于愈伤组织的产生,但是高浓度的NAA(8.0mg/L)则对愈伤组织的生长有抑制作用,其在MS基础培养基上较在B5和1/2MS培养基上褐化轻,生物量增长快,冬季诱导的愈伤组织,其诱导率普遍高于夏季所诱导的愈伤组织。结果表明,以11月份三尖杉幼茎为外植体,以MS NAA3.0mg/L KT0.1mg/L为诱导培养基和继代培养基,继代6～8代,每代培养30～35d,收获愈伤组织或细胞培养物,该程序是获得大量三尖杉愈伤组织的较佳培养程序。     

印楝愈伤组织开矿及其印楝素含量测定

取印楝不同器官作外植体,研究培养基和继代次数对愈伤组织生长及其印楝素生物合成的影响。印楝的不同器官（根、叶、茎及皮）均能诱导出愈伤组织,这些愈伤组织均有合成印楝素的能力。其中以叶诱导的愈伤组织生长速率及印楝素含量为最高。含有较低铵盐的Ｂ５培养基有利于细胞生长,含有较高铵盐的ＭＳ培养基有利于印楝素积累,不含铵盐的Ｗｈｉｔｅ培养基对两者均不利。愈伤组织继代２－３代,有利于愈伤组织生长和印楝素合成。     

红豆杉的愈伤组织诱导及培养研究（初报）

以红豆杉雄球花、茎切段等为外植体诱导产生了愈伤组织。适宜愈伤组织诱导及其生长的培养基为１／２ＭＳ培养基附加２,４—Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ。在不同浓度激素配比的培养基上均未观察到愈伤组织发生再分化。     

在分化条件下水稻花粉愈伤组织超微结构的变化

对分别生长在含有2,4-D2毫克/升的诱导培养基上和生长在不含2,4-D 而含有激动素0.5毫克/升、萘乙酸0.2毫克/升的分化培养基上的水稻花粉愈伤组织进行了透射电子显微镜的对比观察。发现当愈伤组织由诱导培养基上转移到分化培养基上之后,细胞发生了一定的超微结构上的变化。处于旺盛分裂状态有可能分化成芽原基的某些愈伤组织表层细胞中的线粒体、质体、核糖核蛋白体的数量增多了。愈伤组织内部薄壁细胞的液泡化程度变小,类脂体、淀粉粒等贮藏物质大大减少或完全消失。愈伤组织中除了有导管分子的分化外还发生了筛管分子的分化。细胞的类型增多了,出现了一些电子密度极高的细胞。虽然愈伤组织转移到分化培养基上之后所发生的上述变化是明确的,但我们认为这不一定是细胞分化的特异标志。为了进一步揭露细胞分化的实质,需要在细胞化学和分子生物学方面进行更多的工作。     

印楝愈伤组织形成及其印楝素含量测定

取印楝（AzadirachtaindicaA．Juss）不同器官作外植体,研究培养基和继代次数对愈伤组织生长及其印楝素（Azadirachtin）生物合成的影响．印楝的不同器官（根、叶、茎及皮）均能诱导出愈伤组织,这些愈伤组织均有合成印楝素的能力．其中以叶诱导的愈伤组织生长速率及印楝素含量为最高．含有较低按盐的B5培养基有利于细胞生长,含有较高铵盐的MS培养基有利于印楝素积累,不含铰盐的White培养基对两者均不利．愈伤组织继代2—3代,有利于愈伤组织生长和印楝素合成。     

矮生龙船花的组织培养和快速繁殖

矮生龙船花(IxoracoccineaL.)的带节茎段在MS 2,4D2.0mg/L培养基上产生大量的愈伤组织;在MS 6BA1.0mg/L NAA0.2mg/L培养基上芽的增殖系数达413,并产生少量的愈伤组织;在MS NAA0.2～2.0mg/L培养基上只产生芽而无愈伤组织形成。愈伤组织在MS 6BA0.5mg/L NAA0.5mg/L培养基上产生大量的不定芽,丛生芽在MS 6BA0.5mg/L NAA0.5mg/L培养基上生长较快并产生较多分枝,将分枝节下或切成段后在MS 6BA0.5mg/L NAA0.5mg/L培养基上能迅速生长并产生新的分枝。试管内小苗在1/2MS NAA0.5mg/L培养基上的生根壮苗效果较好。矮生龙船花试管苗成活率为935%。     

芹菜原生质体培养条件与再生植株的研究

芹菜愈伤组织原生质体,在Du和MS培养基上均能正常生长和分化;通过以形成胚状体为主要的途径,最后获得再生完整植株。在NT,MS,Du三种培养基中,Du的效果优于MS,NT培养基最差,不能形成细胞团。在双层培养中,愈伤组织生长较快,植板率较高。     

生长调节剂对马蹄金外植体离体培养的影响

以草坪地被植物马蹄金的无菌苗子叶、叶片和下胚轴作为外植体进行离体培养,探讨了不同植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明,从不同外植体在含有不同生长调节剂的诱导培养基中进行离体培养时,都可诱导出愈伤且出愈率为43.3%～100%,其中诱导培养基(MS 100 mg/L水解酪蛋白 0.5 mg/Lα-NAA 0.2 mg/L ZT)适合于三种外植体的愈伤诱导,出愈率为100%,愈伤生长旺盛.在所有愈伤分化试验中均形成了绿色芽点,其频率为25.0%～95.0%,仅从下胚轴诱导的愈伤分化获得了再生植株,且在分化培养基(MS 100mg/L水解酪蛋白 0.1 mg/Lα-NAA 3.0 mg/L 6-BA)上的最高愈伤分化频率为20.0%.