研究细胞凋亡的几种光镜形态学检测方法比较

细胞凋亡是目前细胞生物学的研究热点之一,其研究方法有形态学,生物化学,酶联免疫分析以及分子生物学等等不胜枚举,本文着重对形态学方法中的姬姆萨（Miasma's)染色,荧光（Hoechest 33342)加典化丙啶（PI）排斥分析法以及台盼兰排染法等加以分析比较,找出以上各方法之特点,以便在凋亡细胞的光镜分析中择其所长,避开局限,灵活进行联合或选择性运用。     

植物细胞凋亡的检测方法

细胞凋亡是一种在动、植物中普遍存在的现象,在动、植物的发育过程中起着非常重要的作用。从形态学、生化及分子生物学、免疫学、生理学等方面介绍了几种检测细胞凋亡的方法,以及各种方法在检测不同植物凋亡时的应用,并对植物细胞凋亡检测技术的前景进行了展望。     

细胞凋亡检测方法探讨

采用图例法和比较法分析评价细胞凋亡检测方法的应用范围和检测结果的相关性,指出只有选择多种适当的方法进行综合检测,才能对结果做出正确而合理的分析判断。流式细胞术简便、快速,从膜上分子、胞内蛋白到DNA水平全方位多角度分析凋亡,可作为检测细胞凋亡的首选方法。     

细胞凋亡检测技术的进展

细胞凋亡是多细胞生物体内一个重要的生命现象,它已成为当前科学和医学领域的研究热点。随着对细胞凋亡的研究不断扩展和深化,许多新的指标逐渐被采纳;同时伴随着一些先进仪器的应用,原有一些指标的灵敏性和准确性也得到了提高,这些都将细胞凋亡的检测水平提升到一个新的高度。     

细胞凋亡检测方法的研究进展

细胞凋亡在生命活动中具有重要的地位,多年以来一直都是生命科学领域的研究热点.为了准确、快速的检测细胞凋亡,人们发明了多种方法,并且随着科技的发展和技术的进步,新的检测方法不断涌现.就近年来关于细胞凋亡的一些检测方法进行综述.     

植物细胞凋亡的ELISA检测

本文利用TUNEL方法在单个细胞水平上对苯胺灵诱导的玉米根尖细胞死亡进行了检测。结果表明,一定浓度的苯胺灵能诱导玉米根尖细胞发生主动性的细胞凋亡,具有细胞凋亡典型的形态和生化特征即细胞核浓缩并形成核碎片、染色质边缘化及DNA特异片段化等（Fig.1)。首次利用ELISA方法在群体水平上对这种细胞凋亡进行了进一步检测。结果表明：动物细胞研究常用的ELISA方法同样也适合用于植物细胞凋亡的检测。在凋亡前期,随着凋亡过程的进行,细胞质中的OD值逐渐上升（Fig.2)。剂量实验表明,0．2mg/mL苯胺灵最适合于诱导细胞凋亡（Fig.3)。     

两种方法检测线索细胞的比较

越来越多研究证明线索细胞(clue cell)是细菌性阴道病的重要致病因子,而细菌性阴道病(bacterial vaginosis BV)是妇产科最常见的疾病之一,感染率在15%～50%,且易复发[1,2].在BV的诊断中线索细胞检查是一项重要的指标.我们采用妇科细胞学涂片快速多项染色法(CTB)和盐水湿片法检查白带中的线索细胞,并且进行比较,了解二种方法的特异性和敏感性.     

一种基于荧光强度分析的高通量定量检测细胞凋亡方法

根据正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞膜对核酸荧光染料的不同选择通透性,用4μmol/L YO-PRO-1（YP）和4μg/ml 碘化丙啶（Propidium iodide, PI）染色96孔板中的细胞样品。分别在485/538 (Ex/Em, nm) 和530/590 (Ex/Em, nm) 的检测波长下借助荧光分光光度计检测细胞样品孔的YP和PI荧光强度。将YP和PI荧光强度值与用荧光显微镜对同一细胞样品细胞凋亡和坏死的定量分析结果相对应,通过对YP荧光强度值与凋亡细胞数的直线回归分析 (r = 0.999,P<0.01),得到依据YP荧光强度值求得凋亡细胞数的直线相关方程。该方法可检测出样品中少至180个的凋亡细胞,具有灵敏度高和快速高效的特点。     

一种检测早期凋亡细胞的方法

本文介绍了一种定量检测早期凋亡细胞的流式细胞术——Annexin V-PI双染色法,并作了一些改进。     

两种体外细胞毒性检测方法的比较研究

目的比较两种常用的细胞毒性检测方法在医疗器械生物学评价中的相关性。方法分别采用MTT比色法和细胞增殖度法,在37℃条件下,将五种医疗器械／生物材料的浸提液分别与小鼠成纤维细胞（L-929）接触2天和2,4,7天,比较材料对细胞的毒性影响。结果5种不同的材料浸提液分别表现出不同程度的细胞毒性反应（0～2级）。将MTT比色法与细胞增殖度法（2天）的实验数据进行相关性分析,显示两者之间具有良好的相关性（R=0．977）。结论MTT比色法由于其检测所需的细胞量相对较少,试验步骤相对简便、检测周期短,因此具有一定的优越性,是个值得推荐的细胞毒性检测方法。     

细胞凋亡检测方法新进展

细胞凋亡是生命科学研究的热点之一,检测细胞凋亡的方法层出不穷。目前,用于体外细胞凋亡检测的方法已相对成熟,比如:流式细胞术、TUNEL检测法、DNA片断检测等。而用于体内细胞凋亡检测的试剂则正在研究之中,各种检测试剂不断出现。其中,Annexin V、Synap-totagmin I-C2A、ApoSense家族分子与其他检测试剂相比具有一定的优势。该文在介绍几种常用的体外细胞凋亡检测方法的同时,重点介绍上述三种试剂。     

钝裂银莲花花粉活力测定方法的研究

以3种花色（黄色、浅黄色和白色）钝裂银莲花为研究对象,分别采用TTC染色、I2-I染色、无机酸测定和蔗糖萌发4种方法,测定了钝裂银莲花（Anemone obtusiloba）的花粉活力,同时比较了不种方法对花粉活力的测定效果,并了解了花粉活力在一天内的动态变化情况。结果表明：（1）钝裂银莲花花粉可育率很高,达80%左右。花粉直径为28.75~33.75 m 。（2）TTC浓度影响花粉活力的测定,当浓度为0.5%时,所测花粉活力的效果较好。（3）I2-I法的染色效果不理想,染色率仅为8.33%~22.2%,且3种花色花粉活力测定数据间差异不显著。（4）3种花色钝裂银莲花花粉活力有差异,黄色最高,浅黄色次之,白色最低。TTC染色法是简单快速测定钝裂银莲花花粉活力的最适方法。一天内花粉活力在12:00~14:00最大。     

应用不同方法检测食品中大肠菌群结果的比较

评价检测食品中大肠菌群不同方法。比较国家标准、行业标准和显色培养基检测方法检测大肠菌群结果的差别。国家标准和行业标准检测结果基本一致,但有差异,应用显色培养基检测大肠菌群优于目前使用的国家标准和出口食品检验行业标准方法。检测食品中大肠菌群,显色培养基检测方法快速、灵敏、特异。     

食源性致病菌多重分子生物学检测技术研究进展

快速、可靠的食源性致病菌高通量检测方法对于确保食品安全具有重要意义,近年基于DNA水平的多重分子生物学检测技术迅速发展,针对各种不同的食源性致病菌建立了多种多重分子检测技术,包括多重PCR、多重实时荧光PCR以及基因芯片等。对这些多重分子检测技术的最新研究进展作一综述,并且建议在今后该技术的研究中,仍需要在食品中多种致病菌同时选择性增菌培养、亚致死损伤修复以及检测内标的构建等方面取得突破,从而能够更好地实现食源性致病菌的高通量检测。     

神经元凋亡的离体模型及其检测技术

近年来,随着细胞凋亡研究的深入,神经元凋亡与神经退变病的关系愈发引人注目,已建立多种神经元凋亡的离体模型.多种因素如营养剥夺、自由基、谷氨酸、低钙及β-淀粉样蛋白等均可诱发神经元凋亡.凋亡的检测,可先从酶或蛋白质的变化判断神经元的损伤情况,再结合形态学观察,最后通过DNA电泳等确证.     

细菌c-di-AMP检测方法的研究进展

环二腺苷酸(cyclic diadenylate monophosphate,c-di-AMP)是一种广泛存在于细菌中的重要核苷酸第二信使分子,在病原体细菌,尤其是许多革兰阴性细菌中发挥着重要作用.研究表明,c-di-AMP在细菌生长、耐药性、抗应激、侵袭力和生物膜形成等方面担当不可取代的角色,同时参与激活和调节宿主的...     

产脂酵母产脂培养条件研究及脂肪检测方法初探

目的：研究产脂酵母产脂条件及脂肪提取方法。方法：探讨了单因素如：pH、碳源、氮源、葡萄糖浓度、金属微量元素等对其产脂能力的影响,并进行了正交试验;脂肪测定方法研究,用对比分析法,并对其中的方法加以改进,采用光谱扫描以确定酵母脂肪最大吸收波长。结果：试验范围所得酵母产脂最佳条件是：接种量3%,MnCl_2 0．05%、FesO_4 0．04%、(NH_4)_2SO_4 0．3%、葡萄糖2%、pH 6．5,培养5d,45ml的发酵液其油脂的吸光度(252nm)可达2．4082;酵母脂肪最大吸收波长为252nm,在此波长下测定,获得了快速、准确的结果。结论：所得产脂条件可为进一步的开发研究打下基础。研究出的酵母脂肪测定方法,是一种快速、简便的方法,可满足产脂酵母菌种筛选和产脂条件研究的需要。     

分子探针在细胞凋亡检测中的研究进展

分子探针应用于细胞凋亡检测具有直观、无创伤和实时动态观察凋亡分子信息的特点,在疾病早期诊断、监测疾病发展进程、评估疾病治疗效果、发展新的治疗方案等方面具有较好的应用前景.综述了近年来靶向细胞凋亡探针的设计、作用机制、应用等相关的研究进展,并根据亲和组件的作用机制对分子探针进行分类介绍.     

2种微小RNA实时定量PCR检测方法的比较

目的:对目前最常用的检测微小RNA(miRNA)的茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法进行比较。方法:分别用茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法检测人乳腺癌细胞MCF-7中U6和23种miRNA的表达,利用定量PCR分析软件和琼脂糖凝胶电泳方法,将2种方法在引物设计难度、特异性与灵敏度,以及检测通量方面进行比较。结果:茎环法的特异性和灵敏度比PAP法高,但引物设计难度大,检测通量低;PAP法引物设计难度较低,检测通量较高,但特异性和灵敏度较差。结论:茎环法实时定量PCR适于有针对性地检测小规模miRNA,而PAP法则适于大规模miRNA筛选实验。