鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品的研制

目的研制鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)抗原检测试剂用国家参考品。方法通过对5株鼠疫耶尔森菌和10株非鼠疫耶尔森菌的菌种检定、培养及灭活、抗原检测,组建鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品。对参考品进行样品均匀性以及稳定性评估,组织5家实验室协作标定。结果参考品由5份阳性、10份阴性、1份最低检出量以及1份重复性样品组成,均匀性和稳定性良好。协作标定结果显示:①5份阳性参考品阳性率100%;②10份阴性参考品阴性率100%;③最低检出量参考品的检出量不高于1.0×10~6个菌/mL;④重复性参考品检测反应结果应一致(酶联免疫法、上转发光免疫层析法等CV<5%)。结论建立的鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品填补了相关领域的空白,可用于相关试剂的质量控制。     

鼠疫重组亚单位疫苗

传统的鼠疫疫苗有两种类型：①灭活疫苗。1896年Haffkine首先研制并应用。美国一直采用鼠疫强毒菌株(195/P)生产USP死疫苗用于军队和高危人群免疫接种;②活疫苗。1926年Girard和Robic在马达加斯加分离选育出EV减毒株,1932年开始在该岛进行疫区人群免疫观察,随后在一些国家高危人群接种。     

美国微生物学会会讯摘要(2000年第10期)

1.在美国,已发现草原野犬中通过体表蚤类有鼠疫杆菌感染,并可致这种野生动物死亡.在Colorado州Derver市附近郊外已发现鼠疫.从1977～1998年已发现由家猫传播引起的鼠疫病,其中5名患者已死亡.在美国西部几个州中,每年有10～20例腺鼠疫病例,其中15%最终死亡.虽然链霉素或庆大霉素可有效地治疗鼠疫,但因本病实属罕见,常常不能被早期诊断.有学者认为可用杀昆虫的制品喷洒消灭草原野犬体表的跳蚤,也许可控制在个别人中鼠疫的发生.     

鼠疫疫苗研究的现状与展望

鼠疫（Plague）是由鼠疫耶尔森菌(Yersina pestis，Y. pestis)（简称鼠疫菌）引起的一种烈性传染病，属甲类传染病，具有高度传染性和致病性。在过去的鼠疫大流行中近2亿感染者死亡。疫苗接种是疾病预防控制的重要方法。现就鼠疫疫苗的研究进展作一综述，为新疫苗的研制提供参考。     

鼠疫的发病机制研究进展

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis，Y. pestis)感染引起的一种人畜共患病。鼠疫在世界范围内出现过3次大流行，均引起致命的瘟疫。由于自然疫源面积不断扩大和人口流动愈加频繁，我国的鼠疫防治形势依旧严峻。本文就鼠疫耶尔森菌的毒力因子、对宿主细胞的黏附和侵袭、胞内繁殖、宿主内播散等机制的研究进展进行总结，有助于揭示鼠疫独特的致病和传播机制，为精准防治鼠疫提供工作基础。     

鼠疫的流行病学概述

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)引起严重危害人类健康的烈性传染病。本文介绍了鼠疫病原体——鼠疫耶尔森菌的一般特性及生物学特性, 并对国内、外鼠疫疫情现状进行总结。目前鼠疫在全球范围内的流行已进入新的活跃期,世界卫生组织将鼠疫列为近20年来重新流行的急性传染病之一。当前,全球疫区主要分布在非洲、亚洲和南美洲。我国人间鼠疫自20世纪80年代开始处于明显回升势态,近10年流行逐渐下降,但防控形势依然艰巨。     

鼠疫及其预防

鼠疫及其预防梁秀梅（内蒙古呼伦贝尔大学０２１００８）于潜（内蒙古呼伦贝尔盟教研室０２１００８）鼠疫俗名“黑死病”（死于鼠疫的人一般都有皮下出血，全身呈青黑色），是一种严重威胁人类生命的急性传染病，是我国法定的甲类传染病，又称“一号病”。１当前世界上流...     

鼠疫简史

对大多数人来说,在传染性疾病中,鼠疫远不如天花那么有名,可能也没有艾滋病那么恐怖。这是因为我们没有可靠的鼠疫疫苗,也就没有全球性的鼠疫疫苗接种,并且,天花作为第一种被几乎彻底消灭的烈性传染病,经常被媒体所提及。至于流感和艾滋病,作为当前正在流行的传染病,一向是医学界和媒体所关注的焦点。     

鼠疫简史

对大多数人来说,在传染性疾病中,鼠疫远不如天花那么有名,可能也没有艾滋病那么恐怖。这是因为我们没有可靠的鼠疫疫苗,也就没有全球性的鼠疫疫苗接种,并且,天花作为第一种被几乎彻底消灭的烈性传染病,经常被媒体所提及。至于流感和艾滋病,作为当前正在流行的传染病,一向是医学界和媒体所关注的焦点。     

典型人兽共患病枚举

鼠疫鼠疫是鼠疫杆菌引起的一种烈性传染病,最先流行于鼠类及其他野生啮齿动物之间,借助鼠蚤叮咬而传染给人,也可以通过直接接触受感染的动物或被病兽咬伤而感染。病人死后皮肤会出现大片黑色瘀斑,因此又被人们称为"黑死病"。鼠疫通常有腺型、肺型和败血症型三种,病人发生肺部感染后,病原体可以借助飞沫传播。人类普遍易感,但病后可获得持久免疫。鼠疫传染性强、     

中国鼠疫宿主鼠类丰富度格局及疫区环境因子分析

鼠疫等媒介疾病地理分布规律的认识对于疫病防控具有重要意义,分析影响疾病地理分布的因素进而预测疾病发生趋势已经成为目前研究的热点。本文在分析鼠间鼠疫及其宿主鼠类地理分布数据以及相关环境数据的基础上,探讨了鼠疫宿主丰富度与环境因子的关系以及影响鼠间鼠疫发生的主要环境因素。我国的鼠疫宿主鼠类在干旱区和季风区过渡带的县级行政单元中物种丰富度最高,物种丰富度与高度差正相关性最高。发生鼠间鼠疫的地区,宿主鼠类丰富度较高,未发生鼠间鼠疫的地区,宿主鼠类丰富度较低。影响鼠间鼠疫发生的主要环境因子包括蚤类物种数、年均气温、年降雨量、年均相对湿度和年日照时数和气候因子,其次是包括高度差、植被类型数、土壤类型数和地貌类型数的景观因子,以及反映海拔和宿主鼠类物种数的地形和宿主鼠类因子。在未来全国气候变干变暖条件下,我国鼠间鼠疫发病区可能随宿主鼠类的迁移而扩展。     

鼠疫菌重要调控子蛋白的表达纯化及DNA结合活性分析

目的:利用大肠杆菌BL21(λDE3)的表达系统,表达7个有活性的、与鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)传播及致病密切相关的调控子蛋白,并对这些蛋白与DNA的结合活性进行分析,为构建鼠疫菌毒力基因转录调控网络建立分子生化实验平台。方法:通过分子克隆技术构建鼠疫菌调控子蛋白的表达菌株,所得菌株经IPTG诱导后能分别表达鼠疫菌CRP、Fur、PhoP、OxyR、OmpR、RcsB和RovA带His标签的融合蛋白;对这些蛋白与DNA的结合基序进行生物信息学预测;通过体外凝胶迁移实验验证上述蛋白与靶DNA的结合活性。结果:表达了7种有活性的鼠疫菌调控子蛋白,这些蛋白与靶基因启动子区具有体外结合活性。结论:表达的7种调控子蛋白在鼠疫菌的传播致病中有重要作用,这些调控子蛋白与DNA体外结合实验平台的建立,是构建鼠疫菌毒力基因转录调控网络的基础。     

鼠疫耶尔森氏菌环二鸟苷酸代谢及生物被膜形成调控研究进展

鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis,以下简称"鼠疫菌")是烈性传染病鼠疫的病原菌,以鼠蚤作为传播媒介。鼠疫菌在其传播媒介鼠蚤的前胃中形成生物被膜从而促进其在宿主间传播。鼠疫菌生物被膜的形成受第二信使分子环二鸟苷酸(c-di-GMP)的正向调控。鼠疫菌中c-di-GMP由二鸟苷酸环化酶(DGC)HmsT和HmsD合成,由磷酸二酯酶(PDE)HmsP降解。文中主要介绍影响鼠疫菌环二鸟苷酸代谢及生物被膜形成的调控因子,并对其作用机制进行讨论和总结。     

用提呈载体构建鼠疫肽疫苗

鼠疫菌是肺、腺鼠疫病原因子。由于当前注册的疫苗有局限性,需要更合理有效的亚单位疫苗战胜各型鼠疫。结合佐剂的新方法使形成新疫苗有了新方案。为了开发新一代鼠疫疫苗,我们选择了一个免疫主基,鼠疫菌荚膜蛋白F1。已知此肽具有B(3个序列B1,     

鼠疫菌H-NS蛋白的表达与纯化及其DNA结合活性

摘要：【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3的表达系统,表达出有活性的鼠疫耶尔森氏菌（以下简称鼠疫菌）调控子蛋白H-NS,为进一步研究H-NS的转录调控奠定基础。【方法】 PCR扩增鼠疫菌201株hns基因的编码区,将其直接克隆入pET28a质粒中,再将pET28a-hns重组质粒转入大肠杆菌BL21λDE3菌株中,所得菌株经IPTG诱导后能表达出鼠疫菌His-H-NS蛋白;通过体外的凝胶迁移实验（EMSA）和DNaseⅠ足迹实验对His-H-NS蛋白与DNA的结合活性进行分析。【结果】成功表达出有活性的鼠疫菌His-H-NS蛋白,该蛋白对鼠疫菌pH6抗原基因（psaA、psaE）及rovA基因均有结合活性。【结论】鼠疫菌His-H-NS具有DNA结合活性,说明H-NS能调控鼠疫菌基因的转录。     

鼠疫F1抗原和V抗原双组分候选疫苗的免疫学评价

目的通过由提取的鼠疫F1抗原和重组鼠疫V(rV)抗原组成的鼠疫候选疫苗免疫豚鼠,对其免疫效果进行评价。方法将豚鼠随机分成5个试验组,在免疫后不同时间点采血进行抗体检测、MTT法淋巴细胞增殖试验以及皮肤迟发型超敏反应(DTH)检测。结果抗体检测结果显示,双组分鼠疫候选疫苗能诱导较强的体液免疫应答;MTT细胞增殖结果显示,脾脏淋巴细胞特异性增殖不明显;中剂量组、高剂量组针对F1和rV抗原DTH阳转率均为100%。结论双组分鼠疫候选疫苗能诱导豚鼠体液免疫和细胞免疫应答,该疫苗有希望成为我国新一代鼠疫疫苗。     

鼠疫新疫苗的研究进展

鼠疫传统疫苗包括死疫苗和活疫苗存在不少缺陷,特别是安全和效果不够理想,接种反应率高,对肺鼠疫不能保护。近些年来开展的鼠疫亚单位疫苗研究,证明能产生保护性抗体,并且对鼠疫毒菌皮下注射和气溶胶攻击均有较好保护效果。本文综述了鼠疫当前流行态势,传统疫苗再评价和鼠疫亚单位疫苗的研究进展。     

鼠疫耶尔森菌rV抗原单抗系统及其ELISA检测方法的建立

目的建立ELISA双抗体夹心法,测定重组毒力因子rV抗原含量。方法采用杂交瘤技术,制备鼠疫菌rV抗原的鼠单克隆抗体,对抗原表位和单抗特异性进行分析及鉴定,建立ELISA双抗体夹心法,并验证方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。结果成功组建了鼠疫菌rV抗原诊断试剂,灵敏度最低检测值为10 ng/mL。结论该方法可用于免疫学检测鼠疫组分疫苗原液rV抗原含量及制备过程中抗原活性,是鼠疫组分疫苗制备中一种重要的质量控制手段,也为进一步开发鼠疫诊断试剂盒及其他相关研究奠定了基础。     

IS1OO周围序列多态性分析技术的建立及其在鼠疫耶尔森氏菌分型中的应用

建立鼠疫耶尔森氏菌IS1000周围序列多态性（ISCP）分析技术,并探讨其在鼠疫耶尔森氏菌分型中的应用,根据鼠疫杆菌CO92株IS100的基因序列在其两端设计两条向外延伸的引物进行PCR扩增,电泳,获得的指纹图用RAPD,PHYLIP和Treeview软件分析,建立的ISCP分析技术稳定,可靠,利用该技术分析17个生态型的271株鼠疫耶尔森氏菌,扩增结果表明,指纹图有一定的差异,经RAPD,PHYLIP和Treeview分析可分为3个类型,IS100在鼠疫耶尔森氏菌染色体中虽然分布较广,但其周围序列变异较小,在遗传上较稳定,可作为鼠疫耶尔森氏菌的基因标志,研究该菌的分型与进化。     

鼠疫减毒活疫苗研究现状与展望

鼠疫(plague)是由鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pesits)引起的烈性传染病,在人类历史上曾造成约2亿人的死亡,在我国被列为甲类传染病。由于鼠疫菌具有高度致病性、传染性,被列为最具潜力的生物战剂和生物恐怖剂。在面临鼠疫威胁时,疫苗是最为有力的武器。鼠疫疫苗研究中,减毒活疫苗是重要的研究方向,现就鼠疫减毒活疫苗的研究现状进行综述,为新疫苗的研制提供参考。