肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其与肿瘤治疗前景

肿瘤坏因子相关的凋亡诱导配体（ＴＮＦ－related apoptosis inducing ligand,TRALL)属于肿瘤坏死因子家族,可激活肿瘤细胞的凋亡。本文介绍了ＴＲＡＩＬ的结构与功能,凋亡诱导途径及其肿瘤治疗应用前景。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及抗肿瘤作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员之一,能选择性的诱导肿瘤细胞、转化细胞凋亡,而对正常组织无毒性,有望成为肿瘤治疗的新方法,备受人们的关注。本文从TRAIL的结构、受体、诱导肿瘤细胞凋亡机制及在肿瘤治疗中的应用等方面作了介绍,以期为TRAIL临床应用提供参考。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体研究进展

TRAIL(又称为Apo2L)是TNF超家族的新成员。它可以选择性诱导肿瘤细胞的凋亡,而对正常细胞无凋亡作用本介绍了TRAIL的结构和功能、凋亡途径、肝毒性研究及应用前景。TRAIL很可能成为新一代的抗肿瘤制剂。     

程序性死亡配体-1在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法:选取2015年7月-2017年6月期间在我院接受治疗的鼻咽癌患者333例,收集其鼻咽癌组织作为观察组标本,另选取同期在我院接受治疗的慢性鼻咽炎患者102例的鼻咽炎组织作为对照组标本。采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组患者鼻咽组织中PD-L1蛋白和PD-L1 mRNA的表达,并分析观察组患者鼻咽癌组织中PD-L1蛋白和PD-L1 mRNA的表达与临床病理参数的关系。结果:对照组患者鼻咽炎组织中PD-L1蛋白的阳性率为0.00%(0/102),观察组患者鼻咽癌组织中PD-L1蛋白的阳性率为69.37%(231/333),两组PD-L1蛋白的阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR结果显示,对照组患者鼻咽炎组织中未见PD-L1 mRNA表达,观察组患者鼻咽癌组织中PD-L1 mRNA的相对表达水平为(0.82±0.27),差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者鼻咽癌组织中PD-L1蛋白和PD-L1 mRNA的表达与年龄、性别无关(P0.05),而TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移、有吸烟史患者鼻咽癌组织中PD-L1蛋白阳性率和PD-L1 mRNA的表达均高于TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移、无吸烟史患者(P0.05)。结论:在鼻咽癌组织中PD-L1蛋白和PD-L1 mRNA呈现高表达,且其表达与TNM分期、淋巴结转移、吸烟史有关。     

分子伴侣对可溶性肿瘤坏死因子相关促凋亡配体在巴斯德毕赤酵母中表达的影响

目的:提高外源蛋白可溶性肿瘤坏死因子相关促凋亡配体(sTRAIL)在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达。方法:根据GenBank公共数据库中公布的模式生物酿酒酵母的分子伴侣(Ssa1p、YDJ1、Kar2p和PDI)基因序列设计引物,利用PCR方法从酿酒酵母基因组中得到各基因片段,并将单独Ssa1p或Kar2p、组合YDJ1 PDI、Kar2p PDI或YDJ1 PDI PDI分别构建到pPIB2Z表达载体中,并整合到外源蛋白sTRAIL工程菌(毕赤酵母GS115)中进行筛选和诱导表达。结果:SDS-PAGE分析表明,sTRAIL的表达量明显提高,特别是整合了分子伴侣组合YDJ1 PDI的工程菌。Western印迹分析整合的分子伴侣基因后,分子伴侣蛋白在工程菌中的表达量得到了提高。结论:提高细胞内分子伴侣的表达,可以增加外源蛋白的分泌表达,为进一步研究巴斯德毕赤酵母奠定了基础。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因抑制小鼠子宫基质细胞的蜕膜化

为了观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对体外培养的小鼠蜕膜基质细胞增殖及凋亡的作用,探讨TRAIL对小鼠子宫蜕膜化进程的影响,构建TRAIL过表达及干扰质粒,转染小鼠基质细胞后诱导蜕膜化发生.转染72h后,应用半定量RT-PCR和Western blotting检测蜕膜基质细胞中TRAILmRNA和蛋白质的表达情况、MTT法观察蜕膜基质细胞的生长和增殖能力、流式细胞术检测蜕膜基质细胞的细胞周期分布情况和凋亡率.经酶切和核苷酸测序证实,TRAIL基因正确克隆入真核表达载体且能够上调TRAIL的表达,干扰质粒能有效地抑制TRAIL基因的表达.TRAIL过表达和RNA干扰的结果表明:TRAIL具有将蜕膜基质细胞阻滞在G0/G1期、抑制蜕膜基质细胞增殖并促使其凋亡的功效,提示TRAIL可能参与调节胚胎植入后基质细胞的有序蜕膜化进程.     

宫颈癌组织中PD-L1的表达及临床意义分析

目的:探讨宫颈癌组织中程序性死亡因子配体(Programmed death ligand 1,PD-L1)的表达及临床意义,为宫颈癌免疫治疗提供理论和实验基础。方法:采用免疫组织化学染色的方法检测10例正常宫颈组织、71例宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasias,CIN)组织和89例宫颈癌组织中PD-L1蛋白的表达,分析PD-L1的表达与宫颈癌患者临床病理参数(临床分期、病理类型、年龄、淋巴转移)的相关性。结果:正常宫颈组织中无PD-L1表达,CIN中PD-L1表达的免疫评分低,呈弱阳性;宫颈癌中PD-L1表达的免疫评分高,呈强阳性。CIN和宫颈癌组织中PD-L1的阳性表达率分别为42%(30/41)和75%(66/89),其差异有统计学意义(P0.05)。PD-L1的表达与宫颈癌患者年龄、病理分级、淋巴转移无关(P0.05),而与患者临床分期显著相关(P=0.0021)。结论:PD-L1的表达上调可能参与了宫颈癌的发生和发展。     

肿瘤坏死因子家族新成员——TRAIL

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand, Apo-2L), 是TNF家族的新成员.它是从表达序列标签库(expressed sequenced tag, EST)中寻找TNF的同源分子时发现的.TRAIL是一种分子质量为32.5 ku的Ⅱ型跨膜糖蛋白, 活性形式呈同源三聚体.TRAIL和可溶性的TRAIL强烈诱导肿瘤细胞株凋亡.新近发现的TRAIL受体DR4和DR5及TRID说明了TRAIL与TNF和Fas/Apo-1配体的作用途径是不同的.随着对TRAIL的受体及作用机理研究的深入, TRAIL很可能成为新一代抗肿瘤制剂.     

胰腺癌对TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)的抗性与逆转研究

TRAIL(TNF-related apoptosis-inducing ligand)是一种能识别和选择性杀伤肿瘤细胞的蛋白质因子,但研究发现胰腺癌对TRAIL的敏感程度远远不及其他肿瘤,其抵抗机制主要集中于胞内水平的调节,如c-FLIPS、BCL-2/BCL-xL、XIAP表达上调等,且针对性的逆转策略也进行了深入的研究.本文就TRAIL途径在胰腺癌中的研究进展作一概要的介绍.     

肿瘤坏死因子α和β对电离辐射诱导细胞凋亡的效应

为探讨肿瘤坏死因子（tumor necrosis foctor)α和β（TNFα和β）对电离辐射诱发细胞凋亡的效应及其机理,采用DNA琼脂糖凝胶电泳和FACS分析等方法,观察了人肿瘤坏死因子α（hTNFα)和β（hTNFβ)对^60Co-γ射线诱发细胞凋亡的形态学,生化学变化。结果显示：hTNFα或hTNFβ均可明显抑制^60Co-γ射线诱发正常人胚肺二倍体细胞（2BS）的凋亡,而相同剂量的hTNFα能促进^60Co-γ射线诱发的人体肺腺癌细胞系A549细胞凋亡,而对另一株人体肺癌SPC细胞的效应比A549降低1倍;hTNFβ能分别增强A549和SPC的细胞凋亡频率。由此认为,hTNFα和hTNFβ均可通过调节细胞的生理生化反应来改变细胞对电离辐射的敏感性,可保护正常细胞免受辐射损伤,而增加某些肿瘤细胞对辐射的敏感性。     

烧伤患者血浆IGFBP-1水平的变化及临床意义

目的:探究烧伤患者血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)水平的变化及其临床意义。方法:选择2013年1月-2015年1月我院收治的70例烧伤患者作为研究组,依据总体表烧伤面积(TBSA)将患者分为4个亚组:Ⅰ组(1%~15%)34例、Ⅱ组(16%~30%)9例、Ⅲ组(31%~50%)17例、Ⅳ组(51%~95%)10例;选取同期于我院体检健康者50例作为对照组。测定研究者IGFBP-1、胰岛素样生长因子(IGF-1)水平,分析其与TBSA的相关性。结果:在10d观察期内,Ⅲ组和Ⅳ组患者的IGF-1水平均显著低于对照组(P0.05),而Ⅱ组患者IGF-1水平仅在烧伤后1 d时与对照组存在差异(P0.05),且在烧伤后2 d,随着分级的增加,血浆IGF-1水平有下降的趋势,组间差异具有统计学意义(P0.05);研究组患者的IGFBP-1水平均显著高于对照组(P0.05);随着分级的增加,血浆IGFBP-1有上升的趋势,组间差异具有统计学意义(P0.05);线性相关性分析显示,烧伤患者血浆IGF-1水平与TBSA值呈负相关(r=-0.693,P0.05);血浆IGFBP-1水平与TBSA值呈正相关(r=0.377,P0.05)。结论:烧伤患者血浆IGF-1水平显著下降,而IGFBP-1水平则显著升高,与烧伤严重程度密切相关,二者可作为判断烧伤患者预后的重要预警指标。     

宫颈癌组织中的PTEN, VEGF和CD105的表达及临床意义

目的:探讨宫颈癌组织中的人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮因子(CD105)的表达及临床意义。方法:收集2010年1月至2016年2月我院收治的宫颈癌患者组织标本320例和同期正常宫颈组织标本100例,采用SP免疫组化法检测宫颈癌和正常宫颈组织中的PTEN、VEGF和CD105,分析各指标在宫颈癌、正常宫颈组织及不同类型宫颈癌组织中的表达,并采用Sperman分析三者相关关系。结果:宫颈癌组织VEGF阳性率、CD105-MVD高于正常宫颈组织,而PTEN阳性率低于正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P0.05);宫颈癌组织FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期的VEGF阳性率、CD105-MVD低于Ⅲ~Ⅳ期,而PTEN阳性率高于Ⅲ~Ⅳ期;宫颈癌组织伴有淋巴结转移的VEGF阳性率、CD105-MVD高于无转移,而PTEN阳性率低于无转移,差异均有统计学意义(P0.05);Sperman相关性显示VEGF与PTEN,CD105-MVD与PTEN呈现明显的负相关关系(rs=-0.564,-0.893,P0.05),VEGF与CD105-MVD呈现正相关关系(rs=0.825,P0.05)。结论:PTEN在宫颈癌组织表达降低,CD105和VEGF升高,三个指标在宫颈癌的发生、发展、转移及预后中具有重要作用。     

血清LncRNA XIST与miR-33a在膀胱癌中的表达及临床意义

目的:探究血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(Lnc RNA XIST)与微小RNA-33a(mi R-33a)在膀胱癌中的表达及临床意义。方法:选择2017年4月至2019年8月青岛大学附属医院诊治的95例膀胱癌患者作为膀胱癌组,选择同期体检的95例健康者作为健康组。采用荧光定量PCR检测两组的血清LncRNA XIST与mi R-33a表达水平,分析患者的临床病理参数与血清LncRNA XIST、mi R-33a表达水平的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清LncRNA XIST与mi R-33a对膀胱癌的预测价值。结果:与健康组相比,膀胱癌组的血清LncRNA XIST表达水平明显升高(P0.05),而血清mi R-33a表达水平明显下降(P0.05)。血清LncRNA XIST与mi R-33a表达均与膀胱癌患者的TNM分期和淋巴结转移情况相关(P0.05)。血清LncRNA XIST联合mi R-33a(AUC=0.830,敏感性=90.47%,特异性=89.85%)预测膀胱癌的临床价值明显高于血清LncRNA XIST(AUC=0.716,敏感性=81.36%,特异性=80.74%)及血清mi R-33a(AUC=0.736,敏感性=82.19%,特异性=81.09%)单独检测。结论:血清LncRNA XIST表达异常升高、血清mi R-33a表达降低与膀胱癌发生密切相关,联合检测有助于预测膀胱癌发生的风险,从而为临床制定针对性干预和治疗方案提供参考。     

Caspase-1、OPN在慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者血清中的表达及其临床意义

摘要 目的：探讨半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)、骨桥蛋白（OPN）在慢加急性乙型肝炎肝衰竭（HBV-ACLF）患者血清中的表达及其临床意义。方法：选择2020年6月至2022年6月中国人民解放军联勤保障部队第九七Ο医院收治的86例HBV-ACLF患者（HBV-ACLF组）;另选取同时段接诊的58例慢性HBV感染患者（CHB组）;收集同时间段60例体检的健康志愿者（对照组）。检测所有受试者血清Caspase-1、OPN、肝功能指标水平,探讨HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平与肝功能指标的相关性,单因素分析及Logistic多元逐步回归分析影响HBV-ACLF患者预后的危险因素。结果：三组血清Caspase-1、OPN、肝功能指标水平比较差异有统计学意义（P＜0.01）。HBV-ACLF组、CHB组血清Caspase-1、OPN、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平高于对照组（P＜0.05）,白蛋白（Alb）、胆碱酯酶（CHE）水平低于对照组（P＜0.05）,HBV-ACLF组血清Caspase-1、OPN 、ALT 、AST 、TBIL水平高于CHB组（P＜0.05）,Alb、CHE水平低于CHB组（P＜0.05）。Pearson相关分析显示,HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平均与ALT、AST、TBIL呈正相关（P＜0.05）,与Alb、CHE呈负相关（P＜0.05）。单因素分析显示,HBV-ACLF患者预后与肝硬化、肝性脑病、腹膜炎发生率、终末期肝病评分模型（MELD）评分、白细胞计数（WBC）、血小板计数（PLT）、肌酐（Cr）、国际标准化比值（INR）、TBIL、HBV-DNA载量（HBV-DNA）、Caspase-1、OPN有关（P＜0.05）;而与年龄、性别、血红蛋白（HGB）、BUN、ALT、AST、CHE、Alb无关（P>0.05）。Logistic多元逐步回归分析模型结果显示,HBV-DNA、MELD评分、Caspase-1、OPN是影响HBV-ACLF患者预后的危险因素（P＜0.05）。结论：HBV-ACLF患者血清Caspase-1、OPN水平呈异常高表达,且Caspase-1、OPN高表达水平与肝功能恶化和不良临床结局有关,可为HBV-ACLF患者病情进展及预后评估提供依据。     

高脂血症患者血管内皮微颗粒水平的表达及临床意义

目的:探讨高脂血症患者血管内皮微颗粒(EMPs)水平的表达及临床意义。方法:选取2016年5月到2017年8月期间我院收治的高脂血症患者64例,将其作为研究组。另选取同期在我院体检的健康志愿者50例作为对照组。检测两组研究对象的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、EMPs、压力-应变弹性系数(Ep)、顺应性(AC)、硬度指数(β)、脉搏波传导速度(PWV)水平,并采用Pearson相关性分析研究组患者EMPs水平与TC、TG、LDL-C、Ep、AC、β、PWV的相关性。结果:研究组血清中TC、TG、LDL-C、EMPs水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);研究组的Ep、β、PWV均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),但两组AC比较无统计学差异(P0.05)。研究组患者的EMPs水平与TC、TG、LDL-C、Ep、β、PWV均呈正相关(r=0.567,0.645,0.763,0.426,0.398,0.364,P均0.05)。结论:高脂血症患者的EMPs水平明显高于健康人群,且其水平与TC、TG、LDL-C、Ep、β、PWV均呈正相关。     

肺癌患者外周血淋巴细胞亚群水平的表达及临床意义

目的:探讨肺癌患者外周血淋巴细胞亚群水平的表达及临床意义。方法:选择2016年3月~2017年3月期间我院收治的88例肺癌患者作为研究组,选择同期于我院进行健康体检的88例受检者作为对照组。两组研究对象均通过流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群水平。观察对比两组研究对象外周血T淋巴细胞亚群的表达水平,以及研究组不同临床病理特征患者外周血T淋巴细胞亚群的表达水平。结果:研究组CD4~+/CD8~+、CD4~+、CD3~+表达水平均低于对照组,CD8~+表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。研究组Ⅲ期与Ⅳ期患者CD4~+/CD8~+、CD4~+、CD3~+表达水平均低于Ⅰ期与Ⅱ期,Ⅲ期与Ⅳ期患者CD8~+表达水平高于Ⅰ期与Ⅱ期(P0.05);小细胞肺癌患者CD4~+/CD8~+、CD4~+、CD3~+表达水平均低于非小细胞肺癌患者,CD8~+表达水平高于非小细胞肺癌患者,差异具有统计学意义(P0.05)。不同性别、年龄、肿瘤分化程度肺癌患者CD4~+/CD8~+、CD8~+、CD4~+、CD3~+水平无统计学差异(P0.05)。结论:肺癌患者外周血淋巴细胞亚群水平的表达呈现异常状态,且表达水平与疾病的分期和病理分型有关。     

Tumor Necrosis Factor-related Apoptosis-inducing Ligand (TRAIL)-Troglitazone-induced Apoptosis in Prostate Cancer Cells Involve AMP-activated Protein Kinase

Prostate cancer (PCa) is one of the most frequently diagnosed cancers in men with limited treatment options for the hormone-resistant forms. Development of novel therapeutic options is critically needed to target advanced forms. Here we demonstrate that combinatorial treatment with the thiazolidinedione troglitazone (TZD) and TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) can induce significant apoptosis in various PCa cells independent of androgen receptor status. Because TZD is known to activate AMP-activated protein kinase (AMPK), we determined whether AMPK is a molecular target mediating this apoptotic cascade by utilizing PCa cell lines stably overexpressing AMPKα1 dominant negative (C4-2-DN) or empty vector (C4-2-EV). Our results indicated a significantly higher degree of apoptosis with TRAIL-TZD combination in C4-2-EV cells compared with C4-2-DN cells. Similarly, results from a 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay showed a larger reduction of viability of C4-2-EV cells compared with C4-2-DN cells when treated with TRAIL-TZD, thus suggesting that C4-2-DN cells were more apoptosis-resistant. Additionally, siRNA-mediated knockdown of endogenous AMPKα1 expression showed a reduction of TRAIL-TZD-induced apoptosis, further confirming the participation of AMPK in mediating this apoptosis. Apoptosis induction by this combinatorial treatment was also associated with a cleavage of β-catenin that was inhibited in both C4-2-DN cells and those cells in which AMPKα1 was knocked down. In addition, time course studies showed an increase in pACC^S79 (AMPK target) levels coinciding with the time of apoptosis. These studies indicate the involvement of AMPK in TRAIL-TZD-mediated apoptosis and β-catenin cleavage and suggest the possibility of utilizing AMPK as a therapeutic target in apoptosis-resistant prostate cancer.     

腹腔镜膀胱癌根治术的治疗效果及对血清前梯度蛋白-2的影响及其意义

目的:探讨腹腔镜膀胱癌根治术的治疗效果及对血清前梯度蛋白-2(AGR2)的影响及其意义。方法:选取2013年3月～2016年5月我院收治的80例膀胱癌患者为研究对象,同时选取同期体检健康的志愿者30例作对照组。膀胱癌患者择期行腹腔镜根治术,观察手术时间、术中出血量、术后肠道排气时间、住院时间和术后并发症。采用ELISA法检测膀胱癌患者术前和术后4周血清AGR2水平的变化。术后随访至2017年12月25日,分析血清AGR2水平与患者总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的关系。结果:80例患者顺利完成腹腔镜根治术,无中转开放手术,无死亡,手术时间(359.8±45.7)min,术中出血量(423.8±109.4)mL,术后肠道排气时间(3.2±1.4)d,术后住院时间(12.9±2.4)d。膀胱癌患者术前血清AGR2水平显著高于对照组[(33.5±9.4) vs.(8.5±2.1)ng/m L,P0.05],术后4周血清AGR2较术前显著降低[(17.8±4.1) vs.(33.5±9.4) ng/mL,P0.05]。术后4周血清AGR2低水平患者PFS(23vs14月,P0.05)和OS (36vs23月,P0.05)均显著大于高水平患者(P0.05)。结论:腹腔镜膀胱癌根治术治疗效果满意,可显著降低患者血清AGR2水平。血清AGR2水平的变化有助于腹腔镜根治术的治疗效果和预后预测。