用于猕猴的艾滋疫苗研制成功

波士顿哈佛医学院免疫学家 Norman L .Letvin及其同事研制成功一种基于 DNA的疫苗来抵抗猕猴的艾滋病 .这种猕猴感染的艾滋病毒是猴免疫缺陷病毒 (SIV)与人免疫缺陷病毒 (HIV)的融合物 .这种疫苗编码 2种蛋白质 ,一种在 SIV中找到 ,另一种在 HIV中找到 .疫苗吸引免疫系统注意 ,激发免疫反应 ,只形成少量抗体 ,主要是加强细胞免疫 ,即形成 T杀伤细胞 .为了加强该疫苗 ,研究者加入白细胞介素 - 2 (IL- 2 )以及免疫球蛋白 G(Ig G) ,或是加入编码它们的 DNA.IL- 2加速大量制造 T杀伤细胞 ,而 Ig G则延长 IL- 2的半衰期 .用该新疫…     

基因工程人白细胞介素－2的生物功能研究

重组白细胞介素－2(rIL－2),能维持T－淋巴细胞及CTLL-2细胞株(IL-2依赖)的增殖达一个月之久,细胞总数增加了近千倍。这种作用能被rJL-2专-的单克隆抗体破坏,显示rIL-2的专一性,rIL-2能增加天然杀伤细胞(NK)的活动达46—96％,但其剂量太高时反而起抑制作用,它能诱异淋巴因子激活的杀伤细胞(Lvmphokine Activated Killier,LAK)的生成,它还能杀伤转移性人肺癌细胞及抗NK的HL－60癌细胞株,其杀伤效率达37.06—54．84％。这说明我们获得的rIL－2在上述生物功能方面与天然lL－2相似。     

LAK细胞

一、LAK细胞的概念 1980年Rosenberg等首先观察到荷有甲基胆蒽纤维肉瘤的C57BL/6小鼠脾细胞经含有IL-2的培液培养后,可获得较强的抗自身甲基胆蒽纤维肉瘤的细胞毒作用,而对自身正常细胞无杀伤作用,未经IL-2培养的脾细胞或NK细胞对纤维肉瘤无杀伤活性。1982年Grimm等首次提出将这种由IL-2激活的能够杀伤NK抵抗性肿瘤细胞的杀伤细胞称为淋巴因子激活的杀伤细胞(Lymphokine-activated killer cells)简称LAK细胞。脾脏细胞、淋巴结细胞、外周血淋巴细胞(PBL)均可经IL-2诱导出显著的     

人胰腺内分泌细胞中CD 57免疫反应性的表达

CD57是一种分子量为110 KD的糖蛋白,它是人类自然杀伤细胞(NK)和杀伤细胞(K)的特异性表面抗原。用它免疫小鼠产生的抗CD57单克隆抗体可特异性识别人的NK 和K 细胞表面抗原。本文应用ABC 免疫组织化学染色结合葡萄糖氧化酶DAB-硫酸镍铵显色技术研究了CD 57在人胰腺的表达和分布。结果发现,CD 57免疫反应(CD 57一IR)细胞主要分布在胰腺的内分泌部(胰岛),偶见于胰腺外分泌部的腺泡和导管上皮中。多数CD 57-IR 细胞呈典型内分泌细胞的形态特征。相邻切片法证明大多数Glu,SS,HPP 和PS 免疫反应细胞呈CD 57阳性。胰腺内神经纤维亦呈CD 57阳性。少数呈CD 57阳性的NK 和K 细胞散布在胰腺结缔组织中。本文对CD 57免疫反应性在人胰腺内分泌细胞中表达的意义进行了讨论。     

Th17细胞在侵袭性烟曲霉病中双向调节作用的研究进展

辅助性T细胞17(Th17)在机体侵袭性肺烟曲霉病中有防御和破坏性作用,一方面经常可以观察到曲霉菌感染后Th17细胞数量的增加,IL-17水平升高、或者Th17细胞促稳定因子IL-23的升高,其机制可能为分泌特异的细胞因子、介导自身免疫反应或者趋化效应性T细胞等几个方面;另一方面体内Th17细胞免疫反应可导致免疫损伤,其机制中主要包含直接作用和间接作用两种,直接作用表现为IL-17在体内外均可以促进烟曲霉生长,间接作用表现为IL-17可通过上调促炎介质、抑制Th1免疫反应或促进Th2免疫反应等机制促进炎症发生发展。Th17细胞对侵袭性肺烟曲霉病的这种双向调节作用主要与烟曲霉与感染环境如宿主免疫状态、感染时间、真菌细胞壁的特异成分的相互作用等有关。     

淋巴因子激活的杀伤细胞和肿瘤继承免疫治疗的新进展

小鼠脾脏细胞和人外周血淋巴细胞与IL-2温育,可诱导产生抗各种新鲜实体瘤细胞的杀伤细胞。LAK细胞是一种不同于NK细胞和CTL的细胞毒系统。IL-2是激活LAK细胞的淋巴因子。LAK细胞和IL-2继承免疫治疗小鼠恶性肿瘤转移已取得成功。初步的临床试验结果表明,应用LAK细胞和IL-2治疗人类肿瘤也大有希望。     

异种“免疫”核糖核酸介导人肝癌细胞的免疫细胞溶解

从人肝癌细胞(BEL-7402)高度免疫过的绵羊的淋巴器官中抽提的肝癌“免疫”RNA,和正常人外周血淋巴细胞温育后,在体外能介导肝癌细胞的免疫细胞溶解。用5-~(125)碘-2′-脱氧尿嘧啶核苷标记人肝癌靶细胞的微量细胞毒性试验进行测定时观察到,正常人淋巴细胞经肝癌“免疫”RNA处理后,其细胞毒性指数在16次实验中有10次有显著增高,但是,在与对照RNA温育后其细胞毒性指数(除一次实验外)均未出现有显著意义的变化。肝癌“免疫”RNA在用RNA酶降解后,传递细胞毒性免疫反应的活性即消失,而用DNA酶或灰链霉菌蛋白酶处理,却仍保持这种传递能力。由此证明,异种“免疫”RNA能够把针对人肝癌细胞表面抗原的细胞免疫性传递给正常人淋巴细胞。     

草鱼IL-10单克隆抗体的制备与鉴定

白细胞介素10(Interleukin-10, IL-10)参与机体免疫应答调节, 协同其他细胞因子维持免疫系统稳态。为探究草鱼(Ctenopharyngodon idella)IL-10的细胞来源, 研究利用大肠杆菌(Escherichia coli, E. coli)表达系统制备了高纯度的草鱼IL-10重组蛋白, 免疫小鼠制备单克隆抗体后通过免疫印迹、激光共聚焦和流式细胞术对抗体进行分析。结果表明, 获得的单克隆抗体不仅能特异识别大肠杆菌表达的CiIL-10重组蛋白, 而且能识别HEK293细胞中表达的真核IL-10重组蛋白。脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)和草鱼白细胞介素1β(IL-1β)刺激草鱼性腺细胞系(GCO)36h的免疫荧光染色分析表明, 草鱼IL-10单克隆抗体能与草鱼内源IL-10结合, 但IL-10阳性细胞数量在LPS处理前后无明显变化。该研究成功制备了高纯度CiIL-10重组蛋白, 获得了特异性好的高质量单克隆抗体, 为研究草鱼ILC2和Th2细胞的增殖、分化和功能奠定了基础。     

草鱼、中华鳖IL-2活性影响因素的研究

结果显示:当年草鱼种和中华鳖脾细胞培养上清液中能检测出IL-2活性,而且1龄以上草鱼、中华鳖的IL-2活性高于当年孵化的草鱼和中华鳖.草鱼、中华鳖脾细胞在25℃培养温度条件下,其上清液中IL-2活性最高,35℃次之,15℃最低.因此,草鱼、中华鳖IL-2活性在一定范围内是随着年龄增加而增强和依赖温度的.通过小鼠胸腺细胞增殖和对小鼠L929细胞杀伤率的实验表明37℃比25℃检测温度下所测的IL-2活性高,而中华鳖胸腺细胞增殖实验却显示25℃检测温度下IL-2活性高于37℃.本文讨论了年龄、温度对免疫反应影响的机理.       

志贺毒素导向药物的初步研究

我们首次应用志贺毒素(Shiga毒素)A亚基基因(StxA)与IL2基因进行融合,并在二者之间插入IL2基因前10个氨基酸编码序列作为接头,构建了一种新的融合毒素StxA-IL2。所构建的融合毒素在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量达到细菌总蛋白的15％～20％。经初步纯化后测活,结果表明StxA-IL2能特异地杀伤含中亲和力IL2受体的淋巴肉瘤细胞MLA114而对不含IL-2受体的HeLa细胞无明显杀伤作用。在此基础上,我们用白喉毒素跨膜     

人白细胞介素—2 cDNA在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

白细胞介素—2(IL-2),过去曾称为T细胞生长因子(TCGF),是在促有丝分裂素或特异性抗原刺激下,由辅助性T细胞产生的一种淋巴因子,能在体外长期维持T细胞生长。它可调节免疫反应,促进细胞毒性T细胞和NK细胞增殖,诱生γ干扰素。因而是治疗肿瘤和免疫缺陷病人的非常有希望的药物之一。     

抗体依赖细胞介导的细胞毒性效应在抗人类免疫缺陷病毒1型感染过程中的作用

抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)效应是宿主抵抗病原微生物和清除病变细胞的一种重要的免疫反应机制.通过ADCC途径发挥作用的效应细胞包括:自然杀伤(NK)细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等.     

用于2型糖尿病研究的3D多器官芯片

2型糖尿病是一种全身性代谢性疾病,通常涉及多个组织和器官之间因相互作用而导致胰岛素抵抗以及胰岛功能衰竭的最终状态.本文建立了脂肪3D器官芯片、胰岛3D器官芯片及其联合应用的模型,可对2型糖尿病的发病过程和药物治疗进行多重评价.设计了一种双通道复合式微流控芯片,将脂肪器官分泌的细胞因子以及脂多糖(LPS)共同引入胰岛器官的芯片培养室,芯片通道连续灌流以模拟体液交换.通过分析脂肪细胞和胰岛细胞的脂联素(ADP)、白介素6 (IL-6)和白介素1β(IL-1β)等炎症因子的分泌情况,以及胰岛细胞的胰岛素分泌能力与对照组细胞相比较所产生的变化,分析胰岛细胞的损伤情况以及系统内炎症反应情况.结果表明,LPS可以引起胰岛细胞的炎症反应以及功能性变化,且脂肪组织的存在能一定程度上加重这种反应,利拉鲁肽(liraglutide)通过减少脂肪和胰岛细胞的炎症反应,能够减轻LPS以及脂肪组织对胰岛细胞的刺激,以改善胰岛细胞的功能.基于微流控芯片的脂肪器官和胰岛器官联合应用的平台可应用于由不同组织之间的相互作用而产生的多器官疾病反应,有望成为2型糖尿病等全身代谢类疾病药物评价的有力工具.     

CpG ODN增强rHBsAg疫苗对小鼠免疫应答影响的研究

通过CpG寡核苷酸(CpG ODN)与重组HBsAg蛋白疫苗(rHBsAg)联合免疫C57BL/6BL/6小鼠,观察CpG ODN对小鼠免疫状况的影响。试验分对照、乙肝疫苗以及用乙肝疫苗加CpG三组,MTT法分别进行HBsAg特异性刺激淋巴细胞转化试验、HBsAg特异性刺激细胞毒性T细胞杀伤试验、自然杀伤细胞非特异性杀伤试验,以及ConA刺激淋巴细胞转化试验;ELISA测定HBsAb、INF-γ、IL-12和IL-4结果中,疫苗加CpG组抗原特异性转化试验指数为4.05±0.31;疫苗加CpG组抗原特异性CTL率为82.27±22.64,在统计学上差异显著(P<0.05);而HBsAb、INF-γ、IL-12的结果分别为51.85±14.41、802.25±104.25和373.62±66.58,与对照组及疫苗组比较,差异显著(P<0.05)。CpG ODN能作为一种新的免疫佐剂更好地增强重组乙肝表面抗原蛋白疫苗诱导小鼠产生高效的体液和细胞免疫应答。     

重度子痫前期患者外周血NK 细胞功能的研究*

目的:探讨重度子痫前期患者外周血中NK细胞数量、杀伤功能以及相关细胞因子的变化。方法:选择重度子痫前期患者25例(研究组)以及正常妊娠妇女25例(对照组),流式细胞术测定外周血中NK细胞数量,细胞毒实验测定NK细胞的杀伤活性,ELISA法测定血清IFN-γ及IL-2的浓度。结果:研究组患者外周血中NK细胞的数量以及杀伤活性显著高于对照组;研究组外周血中IFN-γ、IL-2的浓度也显著高于对照组。结论:重度子痫前期患者外周血NK细胞数量增多,杀伤活性增强,血清中NK细胞相关细胞因子也增加。这些改变可能参与重度子痫前期的发病机制。     

不依赖IL-15的人类NK细胞的体内稳态

<正>IL-15是一种促炎细胞因子,在NK细胞的发育和活化作用中起重要作用,IL-15是炎性疾病治疗的潜在靶点。用IL-15-和IL-15R基因敲除的小鼠进行研究,证明了IL-15是维持NK细胞稳态的一种重要细胞因子,与基因改良小鼠的信息相吻合,作者证明了用小鼠抗-鼠IL-15单克隆抗体(M96)来中和IL-15的确减少了C57BL/6小鼠的NK细胞数量。针     

联合靶向免疫检查点CD47与PDL1的抗肿瘤研究进展

程序性死亡配体1(programmed cell death 1 ligand 1,PDL1)是适应性免疫系统中的一个关键的抑制性信号.CD47是先天性免疫系统中的一个关键的“不要吃我”信号,也是适应性免疫反应的调节剂.由于CD47和PDL1分子在许多肿瘤细胞表面过度表达,从而使肿瘤细胞能够逃避机体免疫系统监视.近年来...     

抗禽流感病毒H5N1亚型单克隆抗体制备初报

目的制备禽流感H5N1亚型病毒的单克隆抗体,为相关研究提供工具。方法以禽流感H5N1亚型病毒免疫BALBc小鼠,取其脾细胞和SP20细胞融合,用血凝抑制试验(HI)和酶联免疫反应(ELISA)检测培养上清,并将阳性融合细胞稀释克隆化3次直至100%孔均为阳性,筛选阳性克隆株,运用免疫荧光法评估单克隆抗体检测病毒感染的犬肾细胞(MDCK)。结果得到三株稳定分泌抗体的细胞并命名为F8、F9、G11,抗体亚型鉴定结果分别为IgG1、IgG2a和IgG2b;在免疫荧光法单克隆抗体能够检测出感染MDCK细胞的病毒。结论建立了3株抗禽流感H5N1亚型病毒的单克隆抗体细胞株,其产生的一株高特异性的McAbG11能够用于H5N1亚型禽流感病毒感染诊断,并可能应用于禽流感病毒H5N1亚型感染的防治。     

活化自然杀伤细胞对间充质干细胞杀伤作用研究

研究NK(natural killer)细胞对人脐血来源的MSCs(mesenehymal stem cells)是否有杀伤作用.重组IL-2激活的NK细胞与脐血来源的MSCs按一定比例共孵育,流式细胞仪收集靶细胞并测定被杀伤细胞的百分率.结果显示NK细胞对脐血来源的MSCs有杀伤作用.     

创伤小鼠血清,巨噬细胞,Ts细胞对反抑制T细胞的影响

研究了创伤小鼠反抑制T细胞(Tcs)比例、功能的变化及创伤血清、巨噬细胞、抑制性T细胞(Ts)对正常小鼠Tcs细胞的影响。结果表明,创伤小鼠脾细胞中VVL~ 细胞百分率于伤后一过性减少,Tcs细胞在T淋转、IL-2、IL-2R检测系统中的反抑制活性均明显受抑;创伤小鼠血清、巨噬细胞、Ts细胞在体外对正常Tcs细胞反抑制活性(T淋转、IL-2、IL-2R检测系统)均具有不同程度的抑制作用,创伤后4天小鼠血清在体内对正常小鼠脾脏VVL~ 细胞百分率无明显影响,但可明显降低正常小鼠Tcs细胞的反抑制活性。表明创伤可致Tcs细胞比例及功能发生改变,创伤后血清、巨噬细胞、Ts细胞参与介导了Tcs细胞功能的受抑过程。