绿脓杆菌外毒素A的研究进展

<正>绿脓杆菌广泛存在于土壤、水及各种动物体内,是一种常见条件致病菌。绿脓杆菌导致的感染占革兰氏阴性感染的10%,常继发于肿瘤,大面积烧伤、面积创伤及免疫抑制剂使用者。感染类型多种多样,有急、慢性局部感染,也有全身性感染。因为感染绿脓杆菌的患者往往免疫功能低下、临床有效的抗生素种类少,又缺乏有效的疫苗等因素给临床治疗带来了很大困难。     

绿脓杆菌外毒素A的最新研究进展

在免疫缺失、囊肿性纤维化、烧伤烫伤等患者的临床继发感染中,绿脓杆菌是引起感染的主要病原菌之一,其合成的细胞外毒性物质—绿脓杆菌外毒素A(PEA)被认为是引起感染的最关键内在机制。该文对中外学者们在PEA的结构、功能、提取和纯化方法、重组毒素、基因工程疫苗以及应用等方面的研究进行归纳总结,并对研究和应用中存在的问题加以分析,对预防和治疗绿脓菌感染、抗肿瘤、抗移植排斥和治疗自身免疫性疾病等具有重要而深远的意义。     

重组含绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白的表达、纯化、复性及细胞生物学活性研究

绿脓杆菌是烧伤及外科手术感染的主要病原菌之一,而绿脓杆菌外毒素A(PEA)是该菌的最主要的毒力因子之一,极微量的PEA便可引起肝、肾等组织细胞死亡,进而导致肝、肾等多器官功能衰竭,这是临床上绿脓杆菌感染后高死亡率的主要原因。同时,PEA还严重影响创口的愈合。目前临床上对于绿脓杆菌感染的控制以及对PEA毒血症的防治尚无有效的方法与手段。本实验是利用基因工程手段克隆表     

绿脓杆菌的粘附物质及其粘附抗体

绿脓杆菌的粘附机理在其致病性中占有重要地位。本文对绿脓杆菌粘附的物质基础、囊性纤维化（ＣＦ）患者感染绿脓杆菌后的抗体水平等作一简要介绍。     

绿脓杆菌菌苗研究进展

<正>在革兰氏阴性杆菌感染中,绿脓杆菌感染的发生率日趋上升。由于绿脓杆菌对抗生素和磺胺类药物有高度的耐药性,使绿脓杆菌败血症严重地威胁着烧伤和战伤病人的生命。近年来,对绿脓杆菌的主动和被动免疫的研究,已经广泛开展。下面就几种菌苗研制作一简介。     

防治绿脓杆菌感染研究进展（续）

(4)共同抗原(common antig-en)大量的动物实验和临床的初步观察已经证实了,从绿脓杆菌中分离的脂多糖(LPS)仅仅能保护相同血清型菌株的感染,对异源性菌株几乎无保护作用,因此,为了保护所有血清型别的绿脓杆菌感染,就需将许多型的脂多糖混合起来制备,这样做的结果,往往是随着免疫原性的增加,毒性也增强了,因此可以认为脂多糖的免疫源性和毒性很难分开.加之从所有型别株提取脂多糖,给疫苗的制备也带来了一定困难.鉴于此种情     

健康人和感染患者抗绿脓杆菌内毒素蛋白(EP)抗体水平的测定分析

用微量间接血凝法检测了健康人和绿脓杆菌感染患者血清抗EP抗体.健康人共检测154人.基础抗体水平绝大部分在1:8以下(占85.05%)EP—HA GMT为1:7.3.无性别差异(x~2=3.04、P>0.05).绿脓杆菌感染患者检测38例,免疫前GMT高于健康人1.43倍,免疫后较免疫前GMT提高4倍.绿脓杆菌EP是绿脓杆菌共同抗原,检查人抗EP抗体水平对诊断、防治绿脓杆菌感染具有重要临床意义.     

药品中绿脓杆菌的快速检验

绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)是假单胞菌属的代表菌种,为革兰氏阴性杆菌。在自然界分布很广,空气、水、土壤、正常人的皮肤以及肠道、呼吸道都有存在。绿脓杆菌对人体有致病性,外伤、烧伤和眼科疾病常因绿脓杆菌的感染而病情加重。它是目前革兰氏阴性感染中最常见的菌种之一,严重时可导致败血症。药品卫生标准规定,滴眼剂及外伤用药不得含有绿脓杆菌。     

绿脓杆菌感染肺炎大鼠模型中的PCR检测方法及IL23的动态变化

目的:探讨PCR技术在绿脓杆菌感染肺炎大鼠模型中进行检测的方法可行性以及大鼠体内IL23的表达水平变化。方法:将健康SD大鼠随机分为3组,空白对照组、实验对照组和肺炎感染组。在绿脓杆菌肺炎模型建立后,设计绿脓杆菌的特异性引物,进行3组大鼠体内绿脓杆菌感染的PCR鉴定,并用qPCR和ELISA技术检测大鼠体内IL23水平变化。结果:①PCR技术检测到肺炎大鼠模型中的绿脓杆菌,其中肺组织检出率为100%,而对照组的PCR结果是阴性。②绿脓杆菌感染肺炎大鼠模型建立后,大鼠的IL23 m RNA逐渐上升,在第3天达到最高值,相比对照组,有显著差异(分别是60852.9±1474.2和1987.7±246.4拷贝,P0.05);血清中的IL23蛋白水平也逐渐上升,在第1周到达最高值,相比对照组,有显著差异(分别是297.4±14.7和123.8±18.3pg/m L,P0.05)。结论:本研究建立了大鼠体内的高特异性、快速、简便绿脓杆菌感染检测PCR方法,发现大鼠IL23在绿脓杆菌感染后显著升高,在绿脓杆菌肺炎和IL23之间建立了联系。     

应用人型单克隆抗体治疗感染疾病

<正> 接受免疫仰制剂治疗癌症、重度烧伤等免疫功能低下的患者,常招致严重的绿脓杆菌(P、aeruginosa)感染。此外,可对现有抗生素很快产生抗药性,用化学疗法很难治疗。 Millican等(1958年)首次报道抗绿脓杆菌免疫血清抗体疗法有实用价值。以后,许多作者对抗绿脓杆菌各种成分的抗体进行了深入研究,结果发现脂多糖(LPS,存在于菌体外膜)抗体,可借助吞噬细胞的免疫吞噬作用而感染。用鼠型单克隆抗体(McAp)试验也有同样的结果,并发现抗外膜蛋白McAp的防御感染作用比抗LPSMcAp效果差。 最近,制备抗绿脓杆菌脂多糖的人型McAp已获成功,产生人型McAp的细胞是采用Epstein-Barr病毒(EBV)转化法或杂交细胞瘤法。作者对健康人未梢血淋巴细胞的病毒转化细胞产生的抗绿脓杆菌人型     

黑龙江省科学院微生物研究所 应用医学微生物研究室

<正>应用医学微生物研究室成立于1969年,前身为免疫研究室,是国内第一家免疫专业实验室,主要从事感染与免疫方面的研究,卫生部绿脓杆菌专业实验室依托该室技术力量组建。近年来,共承担完成国家、省部级项目30余项,获国家、省部级奖7项。发表论文100余篇,出版专著5部,申请发明专利30余项,获10余项发明专利授权。拥有百级无菌间、微生物生化实验室、动物实验室及配套仪器设备等。具有良好的科研基础和研发能力。真诚希望与社会各界携手共赢。疫苗及相关产品项目疫苗的研究领域涵盖了疫苗发展的全部三个阶     

肾移植术后抗生素预防性使用与绿脓杆菌的定植及感染

本文就肾移植术后的预防性抗生素使用与控制咽部绿脓杆菌的定值及其感染作了前瞻性研究。36例上述病人分为常规抗生素治疗和改进治疗两组各18人。肾移植术后常规治疗组病人咽部定植绿脓杆菌的16人(88.89%),发生绿脓杆菌继发感染的7人,感染率为38.89%。改进治疗组中,18例病人咽部定植绿脓杆菌的5人(27.78%),发生感染的1人,感染率为5.56%,此组患者感染明显低于常规治疗组(P<0.05)。绿脓杆菌的血清型83.15%为第四群6型。质粒分析表明咽部定植绿脓杆菌的同感染灶上的绿脓杆菌具有相同的质粒图谱。作者认为:肾移植术后预防性使用抗生素可以有效地预防术后感染,但必须控制抗生素的疗程和剂量,否则将会导致机体正常菌群微生态平衡失调,耐药性绿脓杆菌定植于局部,极易造成感染的爆发.     

236株绿脓杆菌的临床分析及耐药性测定

绿脓杆菌是常见的条件致病菌,当机体免疫力低下时,能感染任何组织和部位,甚至通过血流导致败血症,国内文献报告绿脓杆菌败血症死亡率在80％以上。近年来,由绿脓杆菌所致医院内感染也日益受重视。随着抗生素的广泛应用,绿脓杆菌的耐药率也在不断增长。这给临床治     

AIDS疫苗在灵长类动物模型中的发展

AIDS病是HIV感染引起的一种世界性的严重病毒病。发展一个安全、高效的疫苗将是最终控制HIV蔓延的方法。目前对AIDS疫苗的研究主要集中在全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒疫苗、亚单位疫苗和多肽疫苗、减毒活疫苗、活载体疫苗和核酸疫苗等。在检验新型AIDS疫苗策略方面 ,非人灵长类动物模型能较好地反映HIV感染人体过程 ,有很重要的价值。现在主要有三种非人灵长类模型 :HIV 1感染的大猩猩、HIV 2感染的恒河猴 ;SIV感染的恒河猴及SHIV感染的恒河猴。本文就AIDS疫苗在灵长类动物模型中的最新发展作一综述。     

不同防腐剂对绿脓杆菌菌体疫苗凝集价、免疫原性和保护力试验的影响

将甲醛、苯酚、叠氮钠、氯仿、硫柳汞、苯甲醇作防腐剂分别加入绿脓杆菌菌体疫苗中,并用本菌抗血清定期检测疫苗的滴度。在此基础上,进一步进行CMCC(B)-10118和CMCC(B)-10123疫苗的免疫原性和免疫保护性试验,结果显示,加入甲醛防腐剂的疫苗凝集滴度是稳定的,而加入硫柳汞、叠氮钠等防腐剂则有显著影响,特别是对CMCC(B)-10115和CMCC(B)-10123疫苗的影响最大,凝集滴度从l：2560～l：5120降到l：20。不同防腐剂的CMCC(B)-10118和CMCC(B)-10123疫苗的家兔和小鼠试验表明,防腐剂对疫苗的免疫原性影响不大,对5LD50剂量活菌攻击的免疫保护作用未见差别。苯酚和苯甲醇等对人体毒性小,可用作疫苗防腐剂,而对人体毒性大的甲醛适用于检定用抗原的制备。     

铜绿假单胞菌耐药机制的研究进展

铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)是目前临床上常见的致病菌,具有多重耐药的特性.多重耐药性是指绿脓杆菌同时对多种结构完全各异的药物耐药.绿脓杆菌中存在的抗菌药物主动泵出系统和生物膜形成是绿脓杆菌产生耐药的主要原因.本文综述了绿脓杆菌主动泵出系统和生物膜在耐药过程中的作用、结构、功能及表达的调节.     

重组绿脓杆菌外膜蛋白OprF的表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定

绿脓杆菌外膜蛋白Opr F可有效激活机体的免疫机制对抗细菌的感染,在疫苗上有很好的应用前景。采用分子克隆方法获得绿脓杆菌外膜蛋白Opr F表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得Opr F蛋白,免疫小鼠制备Opr F蛋白多克隆抗体。ELISA法表明,Opr F抗血清滴度达1∶12 800倍,Western blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对Opr F序列同源性分析发现其C端在不同细菌间存在较高同源性;采用MEGA软件对Opr F的系统发生分析发现假单胞菌属细菌的亲缘关系高于其它属细菌。     

AIDS疫苗在录长类动物模型中的发展

ＡＩＤＳ病是ＨＩＶ感染引起的一种世界性的严重病毒病。发展一个安全、高效的疫苗将是最终控制ＨＩＶ蔓延的方法。目前对ＡＩＤＳ疫苗的研究主要集中在全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒疫苗、亚单位疫苗和多肽疫苗、减毒活疫苗、活载体疫苗和核酸疫苗等。在检验新型ＡＩＤＳ疫苗策略方面,非人灵长类动物模型能较好地反映ＨＩＶ感染人体过程,有很重要的价值。现在主要有三种非人类模型：ＨＩＶ－１感染的大猩猩、ＨＩＶ－２感染的恒河猴;ＳＩＶ感染的恒河猴及ＳＨＩＶ感染的恒河猴。本文就ＡＩＤＳ疫苗在灵长类动物模型中的最新发展作一综述。     

丽珠肠乐对绿脓杆菌感染创面治疗的体会

绿脓杆菌感染是外科创伤的常见感染,尤其开放性创伤最常见,往往因其感染致创面长时间不愈合而影响了创面修复,甚至形成慢性溃疡或者骨髓炎。本文通过对３ｏ例开放性创伤创面长时间绿脓杆菌感染不愈合的或者愈合比较慢的病例,采用内服和创面湿敷丽珠肠乐进行治疗,取得很满意的效果。     

抗绿脓杆菌核糖核酸的免疫活性研究

在应用抗菌素比较容易地解决了各种细菌感染的治疗之后,临床上出现了“条件致病菌”的感染问题。在革兰氏阴性杆菌中,绿脓杆菌是分布广、自然抗药性发生率高的一类条件致病细菌。它所引起的感染性疾病,近来有逐年增加的趋势,已经成为死亡率较高的难治病之一。绿脓杆菌感染常在机体防御功能低下时发生。虽然临床上不断使用新的抗菌素,但如果机体条件不改善,疗效就受到一定限制。因此国内外都在研究应用各种免疫制剂治疗和予防绿脓杆菌的感染,以便给临床控制和治疗绿脓杆菌感染寻找新途径。鉴于免疫核糖核酸有特异促进噬菌细