利用石油发酵柠檬酸的菌体生产碱性蛋白酶

用正构烷烃发酵柠橡酸的培养液中,约有2—3%的酵母菌体产生。这些菌体一般当作废渣处理。为变废为宝,我们初步研究了用正构烷烃发酵柠檬酸后的酵母菌体发酵生产碱性蛋白酶。     

用凝胶电泳方法鉴定苏云金芽孢杆菌溶源性菌株

根据原噬菌体的可诱导性,将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称B t)培养液用丝裂霉素C(MMC)诱导,诱导液经高速离心除菌和2.5×SDS-EDTA染料混合液处理后,琼脂糖凝胶电泳检测有无DNA带,以确定菌株的溶源性。实验证明,该DNA为溶源菌诱导出的噬菌体DNA,而非溶源菌以同样方法不能获得DNA。用此方法,可作为鉴定B t溶源性菌株的一个手段,有助于B t工业发酵中噬菌体污染的预防。     

聚醚对提高纤维素酶活力的初步研究

在利用木霉发酵产生纤维素酶的过程中添加聚醚,证实聚醚是一种纤维素酶的激活剂。培养液中添加0.3—0.5%聚醚时酶活力增加最高,用20株不同来源的木霉菌株试验,聚醚同其它五种激活剂或诱导物比较,聚醚提高酶活菌株占总菌株的百分数最高,平均酶活提高45.5%。聚醚又是一种消泡剂,在发酵过程中可以起到一举两得之效。     

酶水解菊芋糖浆发酵生产琥珀酸的初步研究

用产菊粉酶的一株黑曲霉菌株进行产酶发酵条件和水解条件研究,在30℃,pH 6.0,摇床转速200 r/min,发酵时间为3 d的最适产酶条件下,酶活可以达到45.9 U/mL.以总糖含量为85.2 g/L的菊芋粉为初始底物,最适酶水解条件为温度50℃,加黑曲霉培养液的量为10%(v/v),水解12 h后,水解率达到99.6%.用此酶解液在5 L搅拌发酵罐中进行琥珀酸发酵,初始还原糖浓度53.5 g/L,36 h发酵产琥珀酸43.8 g/L,琥珀酸产率0.83 g/g,糖利用率99.0%,琥珀酸生产强度1.22 g/(L·h).     

枯草杆菌JSIM-1018糖代谢突变株积累D-核糖研究

从收集的Bacillus,Brevibacterum,Corynebacterium,Pseudomonas,Arthrobacter等属菌种中进行D-核糖产生菌的筛选,对其中BacillusSM-18菌株用紫外线和甲基磺酸乙酯诱变,选育到莽草酸营养缺陷型突变株JSIM-1018．发酵产物经物理、化学鉴定为D-核糖．某些有机氮源如酵母粉、玉米浆、牛肉膏、蛋白陈以及某些芳香族氨基酸对突变株积累D-核糖有促进作用。在以葡萄糖为碳源的培养液中,摇瓶发酵D-核糖最高可达929／L,3000L发酵罐中     

细胞培养液pH对慢病毒包装及感染效率的影响

为解决实验室中包装慢病毒转染效率低、感染效率低的问题,从培养液p H角度对病毒包装及感染进行优化。首先构建慢病毒载体cop GFP质粒,采用磷酸钙法和Lipofectamine2000法,转染不同p H培养液培养的293T细胞。在荧光显微镜下比较转染效率,发现磷酸钙法p H(6.5~7.5)转染效率高,培养液p H(6~8)对Lipofectamine2000法转染几乎无影响。使用标准p H(7.2~7.4)培养液包装慢病毒,收取病毒上清液后调节至不同p H,加或不加Polybrene感染293T细胞,发现p H在8~9附近感染效率高,调节慢病毒p H至弱碱性与Polybrene同时使用有助于提高感染效率。     

非发酵菌致肺癌患者肺部感染的病原学构成与耐药性分析

目的了解肺癌患者肺部非发酵菌感染的病原学构成及耐药特征,为非发酵菌感染的预防和治疗提供有效依据。方法对本院2009年7月至2014年6月肺癌并发肺部非发酵菌感染的病例进行回顾分析,常规方法培养及鉴定细菌,K-B法检测非发酵菌的耐药率,按CLSI 2013年标准判定药敏结果,用WHONET 5.6软件分析数据,研究其病原菌构成及耐药特征。结果 2009年7月至2014年6月,从本院住院治疗的肺癌合并肺部感染患者中共检出非发酵菌211株,其中铜绿假单胞菌最为常见(42.2%),其次为鲍氏不动杆菌(28.9%)和嗜麦芽寡养单胞菌(20.4%);药敏试验表明4种非发酵菌对常用抗菌药物均有不同程度的耐药甚至多重耐药。结论非发酵菌是导致肺癌合并肺部感染常见病原菌,其耐药率高,治疗困难,临床应高度重视,加强耐药性监测,为临床合理用药,防止继发感染提供依据。     

红内期诺氏疟原虫体外培养的研究

本文报道连续进行诺氏疟原虫(Plasmodium knowlesi)体外培养183天的试验。 试验比较了改良Harvard培养液,RPMI 1640培养液和199培养液,我们认为用199培养液为基础培养液,再加入几种生长因素和15％小牛血清,可获得良好结果。该原虫用Trager燃烛法在100毫升三角瓶内装5—6毫升于37℃培养。至少有5批培养均连续进行一个月以上,第一批培养已达l 83天,稀释倍数为5．4×1082。至于另4批,我们认为既已能超过一个月,就可以无限期地连续进行培养,故未继续。培养至6I、120、127和15l天时,取培养物静脉注射健康猴,每 次剂量为十万个已感染疟原虫的细胞,所有动物均显虫血症。除一只猴外均死于感染,存活的猴所注射的是培养1 z0天的样品。当虫血症达11％时,感染逐渐减少,形成低度带血。随后证实,培养127天和151天的疟原虫仍未失去感染性。试验还证明,低温保存的感染血液和新鲜血液同样可用于培养。     

灵芝液体发酵条件的研究

本文研究了某些因素对灵芝液体发酵的影响。4天菌龄的液体菌种发酵效果最好;300毫升三角瓶以装入60毫升培养液发酵较合适;蔗糖、花生饼粉分别为灵芝液体发酵的理想碳、氮源;液体发酵培养基最佳配方为:蔗糖4％、花生饼粉3％、硫酸铵0.15％、磷酸二氢钾0.15％,可得灵芝菌丝体百分干重为0.83,每100毫升发酵液得粗多糖0.3克。     

肠杆菌科的分类

肠杆菌科是细菌中的一大类群。它包括动物肠道寄生的致病菌和非致病菌,一些植物的致病菌和腐生型的细菌。这类细菌与人类生活关系密切。例如沙门氏菌属和志贺氏菌属等污染食品后引起人的感染和食物中毒,其他的多数菌属也都有一定的致病力,有的还引起肠道外的感染。此外,还可以利用能发酵乳糖的四个菌属,即所谓“大肠菌群”,作为检查粪便污染的卫生学指标。     

花生四烯酸高产菌株的选育

本研究以一株能产生花生四烯酸的被孢霉菌为出发菌株,通过紫外线诱变筛选出一株高产花生四烯酸的突变株Ｍ１０,发酵试验结果表明：突变株Ｍ１０的每升培养液中干菌体得率为３１ｇ,油脂含量为８．３ｇ,而原菌株仅为２０．３ｇ和５．４ｇ,气相色谱分析结果Ｍ１０所产花生四烯酸的量占总脂的１０．０６％（０．８３ｇ／Ｌ培养液）。同时对Ｍ１０菌株的生长和发酵特性及发酵过程中菌丝体形态变化作了一定的探讨。     

利用固化技术生产麦花啤

麦花啤是一种发酵饮料,深受广大消费者欢迎,但是旧生产工艺是自然发酵,即不能保证产品质量,而且又由于杂菌污染,而导致爆瓶,甚至伤人,后果严重,用固化酵母新技术生产麦花啤,完全克服了上述问题,结果十分令人满意。     

狂犬病毒在Vero细胞上的适应传代研究

我国目前用于预防狂犬病的疫苗主要是地鼠肾细胞狂犬病疫苗,由于其所用毒种是脑毒种,不仅容易导致外源因子污染,还会将脑组织成分带入疫苗。为了排除鼠脑毒种带来的外源因子污染,应用Vero细胞做基质生产液体毒种,可以得到理想的病毒滴度,而且免疫原性也较好。1材料与方法1．1材料1．1．1病毒株CTN－1V5由中国药品生物制品检定所提供。1．1．2细胞及其培养Vero细胞来源于ATCC,用常规方法培养。1．2方法1．2．1毒种的传代方法取CTN－1V5干燥毒种稀释后与Vero细胞混种于培养液中,用199培养液,33℃培养168h收获病毒液,如此连续…     

苏芸金杆菌抗噬菌体菌株的选育

苏芸金杆菌深层发酵过程中,噬菌体的危害是影响生产的主要障碍。用玉米浆培养基(玉米浆3.2%,豆饼1.2%,玉米粉0.6%,淀粉0.4%,酵母粉0.2%)发酵,最高峰菌数能达35—45亿/毫升,有时由于污染了噬菌体,放罐时菌数只剩20亿/毫升。用     

肺结核合并非发酵菌下呼吸道感染的临床特征及耐药性分析

目的了解肺结核患者合并非发酵菌下呼吸道感染的临床特征及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用ATB全自动细菌鉴定仪,对临床分离菌株进行菌种鉴定,用K．B法对非发酵菌做药物敏感试验。结果从肺结核患者下呼吸道标本中共分离非发酵菌156株,其中铜绿假单胞菌最多,占46．5％,其次为鲍曼不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌,分别占37．8％和9．6％。药敏试验显示5种非发酵菌对多种抗生素均表现为高度耐药或多重耐药,高于相关研究,差异有统计学意义（P≤0．05）。结论肺结核患者肺部感染非发酵菌的分离率较高,多重耐药现象严重,临床应重视非发酵菌感染和耐药性监测。     

枯草杆菌JSIM—1018糖代谢突变株积累D—核糖研究

从收集的Bacillus,Brevibacterum,Corynebacterium,Pseudomonas,Arthrobacter等属菌种中进行D-核糖产生菌的筛选,对其中BacillusSM-18菌株用紫外线和甲基磺酸乙酯诱变,选育到莽草酸营养缺陷型突变株JSIM-1018．发酵产物经物理、化学鉴定为D-核糖．某些有机氮源如酵母粉、玉米浆、牛肉膏、蛋白陈以及某些芳香族氨基酸对突变株积累D-核糖有促进作用。在以葡萄糖为碳源的培养液中,摇瓶发酵D-核糖最高可达929／L,3000L发酵罐中试D-核糖最高可达81．759／L,平均在64g／L以上,葡萄糖基本耗尽。     

三维胶原培养模型中MRC-5细胞的生长状态及病毒感染

该研究以鼠尾I型胶原为支架构建了人胚肺成纤维细胞MRC-5三维立体培养模型,探索在此模型中常规培养液和PDGF(platelet-derived growth factor)培养液对MRC-5细胞生长状态的影响,以及这两种培养液对细胞在胶原表面上生长状态的影响。应用此模型初步观察了人巨噬细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的感染。结果显示,常规培养液和PDGF培养液均能使细胞相互交错,形成多层的三维立体网状结构。PDGF培养液有利于早期促进细胞呈树突状伸展,常规培养液更有利于细胞在较长时间内维持多层立体的网状结构。常规培养液可促进细胞在胶原表面聚集,PDGF培养液则有利于细胞以单个细胞方式进行迁移。三维胶原体系内生长的MRC-5细胞感染HCMV病毒后,也能呈现明显的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)。由此提示,鼠尾I型胶原与MRC-5细胞构成的三维培养模型,有望进一步应用于细胞生物学、形态学以及病毒感染的研究。     

谷氨酸发酵溶氧变化的初步观察

在需氧的工业发酵过程中,培养液中溶氧量的高低对微生物的活动以及发酵产物的积累具有重要作用。谷氨酸发酵中,溶氧水平对谷氨酸蓄积的影响也有人作了一些研究,据Hirose等的报告指出,在适宜的溶氧条件(氧传递速度10.5×10~(-7)克分子氧/毫升/分/1     

烷烃对P450酶的诱导及二元酸发酵工艺改进

α、ω 长链二元酸 (Ｌｏｎｇ ｃｈａｉｎα ,ω ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄ ,ＤＣＡ)是一种重要的化工原料 ,是合成工程塑料、香料、耐寒性增塑剂、涂料、液晶等物质的重要原料。目前主要利用热带假丝酵母 (Ｃａｎｄｉｄａｔｒｏｐｌｉｃａｌｉｓ)转化烷烃生产[1,2 ] 。在以往发酵的过程中 ,通常在初始培养液中加入 5 %～10 %的烷烃。且有文献表明在发酵初期加入烷烃有利于产酸的提高。但我们的研究表明 ,在发酵初期加入烷烃也有其不利的一面 ,如高浓度的烷烃对于菌体的生长有一定的抑制作用。而且有实验表明 :适当提高细胞的培养液…     

诺维信公司开发出乙醇生产用新型酵母

正诺维信公司于2018年3月17日宣布,开发出乙醇生产用新型酵母——Innova Drive,该酵母所需发酵时间仅为2h,可将乙醇产量提高2%,生产速率提高5%。在传统发酵中,酿酒酵母一直是乙醇发酵的动力工厂。但对酿酒酵母来讲,影响发酵环境的因素非常复杂,包括乙醇浓度、温度、渗透压和细菌污染等,因而酿酒酵母需要靠减慢新陈代谢来抵抗这些压力。