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马槟榔甜味蛋白的研究 Ⅳ.稳定性和变性 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对马槟榔甜昧蛋白Ⅰ和Ⅱ热变性试验,发现MaⅠ在80℃水浴中很快失甜味;圆二色谱证明其主链构象中的α螺旋几乎全部消失了。但Ma Ⅱ却能经受长时间保温而不失去甜味;电泳行为亦不发生改变。 在盐酸胍和尿素变性试验中发现,随变性剂浓度加大,蛋白质荧光发射光谱中色氨酸峰发生红移,直至蛋白质发生完全变性为止。以此为指标发现在酸性条件下,马槟榔甜蛋白更稳定;一般情况下3—5M的盐酸胍就足以使它变性;但即使是8M的尿素也不能使它完全变性。此和横向变性剂梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果是一致的。当脱掉8M尿素或—6M盐酸胍-MaⅠ溶液中的变性剂后,MaⅠ的甜味可恢复,其二级结构及电泳行为只发生微小的变化。 MaⅠ在SDS聚丙烯酰胺电泳分析中出现了一条双分子聚合体带,但将MaⅠ热变性、还原变性或羧甲基化等后,随MaⅠ甜味的消失,这条聚合体带也消失了。MaⅡ在任何情况下均不出现上述现象,因此认为这条带的形成与MaⅠ本身和甜味相关的一种特殊结构有关。 相似文献
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从马槟榔(Capparis masaikai Levl.)种子分离鉴定了二种甜蛋白:甜蛋白I(mabinlinⅠ或MaⅠ)分子量MWll600,等电点PⅠll.8;甜蛋白Ⅱ(mabinlinⅡ或MaⅡ)MW 10400,PⅠll.3。另一组分mabinlinⅡ MW10200,pl 11.8,可能是提取过程产物。MaⅡ有84个氨基酸残基,比MaⅠ少15个。它们有80个氨基酸残基是共同的,都是缺丝氨酸和蛋氨酸的单一多肽链。MaⅠ还缺赖氨酸和酪氨酸。测不出有自由SH基。在8 M尿素中用巯基乙醇还原处理,两种甜蛋白分子都可转变为二聚体而失去甜味。 相似文献
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马槟榔甜味蛋白的研究Ⅱ.甜蛋白Ⅱ和甜蛋白Ⅰ的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
从马槟榔(Capparis masaikai Levl.)种子分离鉴定了二种甜蛋白:甜蛋白Ⅰ(mabinlinⅠ或MaⅠ)分子量MW11600,等电点pI 11.8;甜蛋白Ⅱ(mabinlinⅡ或MaⅡ)MW10400,pI 11.3。另一组分mabinlinⅢ MW10200,pI 11.8,可能是提取过程产物。MaⅡ有84个氨基酸残基,比MaⅠ少15个。它们有80个氨基酸残基是共同的,都是缺丝氨酸和蛋氨酸的单一多肽链。MaⅠ还缺赖氨酸和酪氨酸。测不出有自由SH基。在8M尿素中用巯基乙醇还原处理,两种甜蛋白分子都可转变为二聚体而失去甜味。 自去壳脱脂的种子干粉中提取MaⅠ和MaⅡ的得率依所用溶剂和提取条件而异。用50%丙酮水溶液提取,继用CM-纤维素分离,甜蛋白的得率达13%。用水或0.1N pH6.2磷酸缓冲液提取,得率低于1%。 相似文献
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从马槟榔(Capparis masaikai)种子中曾分离出二种甜味蛋白,称为Mabinlin Ⅰ和Ⅱ,分子量分别为11.6kD和10.4kD。用Edmail降解和反相HPLC鉴定PTH-aa方法测定证明:二者的N末端均因焦谷氨酸环化而封闭。采用1mol/l HCl-甲醇溶液35℃处理24小时的方法可使之开环。二种蛋白N端肽8个氨基酸残基顺序均为:Pyroglutamic acid-Pro-Arg-Gly-Pro-Ala-Leu-Arg-。羧肽酶酶解的动态分析证明MaI羧端的氨基酸顺序为-Phe-Gln-Leu-Ala-Ser,MaⅡ为-Phe-Gln-Leu-Ala。其差别仅在于MaⅡ缺一个Ser,这一结果表明MaⅠ和MaⅡ的主要差异不是在端肽。 相似文献
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甜味蛋白和矫味蛋白的研究进展 总被引:4,自引:1,他引:4
迄今为止,已发现了六种甜味蛋白和一种矫味蛋白,它们具有无毒、安全、热量低等优点,因此有可能取代蔗糖成为一类新型甜味剂。这些蛋白结构虽然都能诱发甜味,但他们结构却不一样。许多生物技术被应用到这类蛋白的研究中,但廉价而安全地把这类蛋白推向市场还需进一步研究。 相似文献
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牛胰多肽(BPP)二级结构的红外光谱和圆二色谱分析 总被引:4,自引:0,他引:4
牛胰多肽(bovine pancreatic polypeptide,BPP)是胰脏分泌的一种含有36个氨基酸的多肽「1」,BPP能预防和治疗由胆酸盐诱发的大鼠急性胰腺炎,具有细胞保护作用。本文用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和圆二色谱(CD),对BPP在水溶液中的二级结构进行了研究,两种方法的分析结果互相补充,进一步确定了BPP在溶液状态的二级结构,本研究为进一步探讨BPP抑制膜融合的机理打下 相似文献
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振动光谱与蛋白质二级结构 总被引:3,自引:0,他引:3
红外光谱和拉曼光谱(统称分子振动光谱)应用于蛋白质构象研究经历了定性阶段和半定量阶段.近5年来,去卷积和二阶导教等提高分辨率方法以及曲线拟合方法的应用,使得振动光谱在定量计算蛋白质二级结构和监测蛋白质构象变化等方面取得突破性的进展,进入了定量化的阶段. 相似文献
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曝氧后,棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的催化活性和圆二色信号都显著降低,而吸收光谱则显著增加。与钼、铁、硫化合物和二硫苏糖醇组成的重组溶液保温后,曝氢蛋白的圆二色信号和吸收光谱几乎完全恢复至天然状态的同时,乙炔还原活性也得到了显著的恢复,表明重组溶液可使曝氧蛋白中的 P-cluster和其它活性部位都得到了不同程度的修复。 相似文献
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He—Ne激光诱变白细胞DNA的拉曼光谱研究 总被引:5,自引:0,他引:5
报道了He—Ne激光对白细胞DNA诱变的拉曼光谱研究。He—Ne激光辐射前,白细胞DNA主链振动区域出现二条强的A,C构型特征线812cm-1和872cm-1,以及弱的B型语线1092cm-1。辐射后,A型特征线812cm-1消失,代之是与B型结构有关的二条强的语线800cm-1和1090cm-1。试验结果表明,He—Ne激光可诱变DNA构型(AM-B型)。在碱基振动区域,辐射前其拉曼谱出现强而宽的C=0伸长振动谱线1680cm-1,这是与酮基结构有关的谱线,辐射后该谱线强度大大减弱。实验结果提示,He一Ne激光有可能使碱基发生互变异构。 相似文献
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棕色固氮菌固氮酶FeMo蛋白与过量(5-6个当量)的酸性靛蓝保温30-60分钟后,蛋白中的P-金属原子族全部氧化,然而蛋白中的FeMoCo全都处于还原状态。Na2S2O4使这种部分氧化的FeMo蛋白中的P-ciuster重新不,甲基紫精可加快这种还原,而亚甲蓝等氧化剂则使这种蛋白中的FeMoCo受到氧化,对这种部分氧化的FeMo蛋白分别进行CD还原滴定和测定氧化过程中的EPR/ABS的变化已经得到p-Cluster和FeMoCo的氧化还原当量数目。 相似文献
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高效马铃薯遗传转化体系的建立及甜蛋白基因的导入 总被引:25,自引:0,他引:25
杨美珠 《Acta Botanica Sinica》1992,34(1):31-36
本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄片的转化速度最快,经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)共培养后,薄片在100mg/L 卡那霉素的分化培养上,2—3周就可产生出抗性小芽,这些小芽进一步仲长后可在50—100mg/L 卡那霉素的无激素MS 培养基上生根。从共培养到转化植株的获得只需6—7周。微型薯和试管薯的转化频率较高,最高可达67.5%。大多数抗性植株均能检测到胭脂碱合成酶或 GUS 基因的表达。把带有甜蛋白基因和胭脂碱合成酶标记基因的Ti质粒导入马铃薯,获得大量转化植株。叶片抗性检测和 nopaline 检测可推断外源甜蛋白基因已进入马铃薯基因组。 相似文献
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