甲2巨球蛋白对辐照细胞的保护效应

用~3H—TdR掺入办法观察电离辐射对培养的人成纤维细胞的影响。在0—500cGy钻-60γ射线照射剂量范围内,细胞~3H-TdR掺入计数与照射剂量呈线性关系。y=33745.4e~(-0.0036×)。低浓度α_2M对细胞~3H-TdR掺入没有影响,高浓度α_2M能抑制细胞~3H-TdR掺入。4×10~5细胞经钻-60γ射线500cGy照射后加α_2M制剂,细胞~3H-TdR掺入计数与不照射对照组相比有明显升高(P<0.05)。在照射前加α_2M制剂与对照组相比无明显差别。     

甲2巨球蛋白对电离辐射引起人血中O2-·自由基释放的影响

本实验用 ⁶⁰Coγ线照射正常人新鲜全血,观察电离辐射对多形核白细胞(PMN)释放超氧化物阴离子自由基(O₂^-_·)的影响,以及人血甲2巨球蛋白(α₂M)制剂对辐射引起的PMN释放O₂^-_·的作用。结果表明:正常人新鲜全血照射(5-20Gy)后1h,PMN释放O₂^-_·的量较不照射组增高(P<0.01),红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活力较不照射组降低(P<0.01)。照前1h加入人血α₂M制剂(每ml全血中加入138.5单位)能有效地降低PMN的O₂^-_·释放量,提高红细胞中SOD的活力。离体实验结果提示α₂M治疗辐射损伤作用可能与其抑制过多的O₂^-_·产生有关。     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠外周血CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞的影响

探讨雷公藤甲素在治疗哮喘中对外周血T淋巴细胞的影响机制,采用免疫细胞化学方法检测30例豚鼠外周血淋巴细胞CD4^ 、CD8^＋的表达。实验动物分为对照组、哮喘组和雷公藤甲素治疗组（治疗组）,每组各10只。结果表明,治疗组CD4^ 淋巴细胞表达阳性率及表达强度明显低于哮喘组（P＜0.01）,CD8^ 阳性率高于哮喘组（P＜0.05）,与对照组比较差异无显性,本研究认为,雷公藤甲素可能通过增高哮喘豚鼠CD8^ 淋巴细胞,降低CD4^ 淋巴细胞来发挥抗哮喘气道炎症作用。     

X射线对人外周血淋巴细胞DNA损伤修复和凋亡的影响

目的 研究不同时间诱导X射线照射的淋巴细胞进入细胞周期DNA损伤修复与凋亡的影响.方法 X射线（0.5 Gy）作用于正常人外周血淋巴细胞,以照射后不同时间点（0、4 h）分别加入PHA并分成两组,即照射后0 h加PHA组（A组）和照射后4 h加PHA组（B组）,再分别培养0、0.5、2 h,用流式细胞术和免疫印迹法检测A组和B组γ-H2AX蛋白的表达,Annexin-V/PI法分析A、B两组的细胞凋亡率.结果 流式细胞术及免疫印迹结果均显示A组的γ-H2AX蛋白表达高于B组（P＜0.05）,且均先升高后降低.A组细胞凋亡率亦大于B组.结论 不同时间诱导被打击的淋巴细胞进入周期其可能发生DNA修复并同时伴随细胞凋亡的发生.     

单核细胞促进人外周血淋巴细胞离体增殖的自由基机理

在人外周血淋巴细胞培养体系中加入不同数量的单核细胞共同培养,以~3H-TdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定淋巴细胞增殖能力和培养介质中O_2~-浓度;加入NADPH氧化酶抑制剂DPI实验性地下调O_2~-浓度,观察淋巴细胞增殖能力的变化。结果显示加入单核细胞可增加培养介质中O_2~-浓度,进而促进淋巴细胞增殖,提示O_2~-浓度的升高是淋巴细胞和单核细胞共培养体系中淋巴细胞增殖的重要因素。     

猪血浆a2巨球蛋白部分性质的研究

对猪血浆α２巨球蛋白性质研究表明其大部分理化性质与人α２巨球蛋白十分相似,而且猪α２巨球蛋白也存在有活性的天然的Ｓｌｏｗ－Ｆｏｒｍ和构象发生变化并不可逆失活的Ｆａｓｔ－Ｆｏｒｍ。猪α２巨球蛋白经测定其ＰＩ为４．５５,５．１。紫外吸收光谱在２７６ｍｍ处有最大吸收,其糖含量为９．３％。氨基酸组成表明酸性氨基酸含量较高。圆二色谱分析说明分子中含有较多的Ｂ折叠。它还具有连接锌离子的性质。     

人外周血淋巴细胞酶超微结构定位与活性研究

应用电镜酶细胞化学方法研究了人外周血淋巴细胞ＡＴＰ酶、Ｇ６Ｐ酶、５′ＮＤ酶的超微结构定位与活性。结果：１ＡＴＰ酶主要定位在淋巴细胞膜下方,在内质网及线粒体等膜相结构也见到此酶的分布。Ｇ６Ｐ酶主要定位在内质网、线粒体等膜相结构。５′ＮＤ酶主要定位在细胞膜外表面。三种酶定位准确,颗粒清晰。２此结果与我们对人体淋巴结淋巴细胞酶超微结构定位结果相同。结果提示应用电镜酶细胞化学方法可以检测人外周血淋巴细胞酶活性变化,对于判定免疫细胞功能状态,具有一定意义。     

人体外周血淋巴细胞核损伤指标的比较研究

核异常作为组织特异性的遗传毒理体内短期检测法,现已日益受到重视。它比微核测试更敏感和合理。核异常包括多种形式的核损伤,而它们与致癌因子的损伤有着不同程度的相关性。本文以r-射线作为致癌与诱变因子,在人体外周血淋巴细胞中系统地比较研究了常用核损伤指标:微核、核变形、核碎裂和核固缩等的剂量(0-5Grag)一反应关系,并作线形回归分析。作者认为,作为人体淋巴细胞核异常测试法,应包括微核,核变形及核碎裂3个核损伤指标。     

人的外周血淋巴细胞培养及染色体制作技术

从肘静脉采血于含有肝素的一次性注射器中,采用RPMI1640全培养基进行体外淋巴细胞培养。通过对采血后细胞培养时间、秋水仙素浓度及加入时间、低渗时间及培养温度等条件的模索．建立了较成熟的淋巴细胞体外培养方法及染色体制作技术。     

猪血浆α_2巨球蛋白部分性质的研究

对猪血浆α２巨球蛋白性质研究表明其大部分理化性质与人α２巨球蛋白十分相似。而且猪α２巨球蛋白也存在有活性的天然的Ｓｌｏｗ－Ｆｏｒｍ和构象发生变化并不可逆失活的Ｆａｓｔ－Ｆｏｒｍ。猪α２巨球蛋白经测定其ｐＩ为４．５５,５．１。紫外吸收光谱在２７６ｍｍ处有最大吸收,Ｅ＝９．１４。其糖含量为９．３％。氨其酸组成分析表明酸性氨基酸含量较高。圆二色谱分析说明分子中含有较多的β折叠。它还具有连接锌离子的性质。     

半导体激光（650nm,5mW）血管内照射对人外周血淋巴细胞凋亡的影响

本文报道了用半导体激光进行血管内照射（ＩＬＩＢ）对十三例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响。发现照射前ＰＣＤ为５．４７±３．６５％,第一次照射后为７．１±３．１６％,第五次照射后为１６．７１±９．５％。二者均有非常显著性差异（ｐ＜０．０１）。     

SLE患者外周血淋巴细胞膜K(V)通道电流的变化及意义

目的 :探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞膜电压依赖性钾 [K(V) ]通道电流的变化及意义。方法 :采用膜片钳全细胞电流记录方法 ,记录了SLE患者外周血淋巴细胞膜K(V)通道电流。结果 :SLE患者淋巴细胞膜K(V)通道电流明显下降 ,正常人该通道电流幅度为 (2 5 8.6± 112 .5 )pA ,SLE患者的为 (139.4± 5 8.5 )pA(P <0 .0 5 )。通道的其它特性包括激活电压、失活特性、通道关闭动力学特性及药理学特性未见变化。结论 :SLE患者细胞免疫功能下降可能与淋巴细胞膜K(V)通道电流幅度减小有关     

α2巨球蛋白的应用研究进展

α2巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2M)是血浆中含量丰富的大分子糖蛋白,是一种广谱的蛋白酶抑制剂,主要通过调节内源或外源性蛋白酶广泛参与许多重要的生理病理过程。α2M还通过与细胞因子、生长因子和激素等分子结合调节它们在体内的分布、半衰期和生物学活性。研究发现α2M具有广泛的应用前景:α2M对辐射损伤、脓毒症、阿尔茨海默病等疾病具有很好的保护作用。此外,α2M还可以作为药物传递的载体和疫苗佐剂,并且可以作为许多疾病诊断和预后的生物标志物。本文主要综述α2M在应用方面的新进展。     

高龄老年心衰患者外周血淋巴细胞GRK2的表达研究

目的:观察高龄老年心衰患者外周血淋巴细胞GRK2的表达及其与心脏射血分数(EF)的关系。方法:选取80岁以上心衰患者16例,按EF分为两组:EF45%组(n=7),EF≥45%组(n=9),80岁以上高龄健康老人作为对照组(n=8),分别抽取外周血2ml,分离淋巴细胞,提取RNA,检测GRK2mRNA的表达。结果:EF45%组的高龄心衰患者外周血淋巴细胞GRK2mRNA的表达高于EF≥45%组(P0.05),且两组明显高于对照组。随着EF的减低,外周血淋巴细胞GRK2mRNA的表达增加。结论:随着EF的减低,高龄心衰患者外周血淋巴细胞GRK2mRNA的表达增加,外周血淋巴细胞GRK2的检测有助于判断高龄老年心衰患者心功能状况及临床治疗心衰疗效的判定。     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠外周血CD_4~+和CD_8~+淋巴细胞的影响

探讨雷公藤甲素在治疗哮喘中对外周血 T淋巴细胞的影响机制 ,采用免疫细胞化学方法检测 30例豚鼠外周血淋巴细胞 CD+ 4 、 CD+ 8的表达。实验动物分为对照组、哮喘组和雷公藤甲素治疗组 (治疗组 ) ,每组各 1 0只。结果表明 ,治疗组CD+ 4 淋巴细胞表达阳性率及表达强度明显低于哮喘组 (P<0 .0 1 ) ,CD+ 8阳性率高于哮喘组 (P<0 .0 5 ) ,与对照组比较差异无显著性。本研究认为 ,雷公藤甲素可能通过增高哮喘豚鼠 CD+ 8淋巴细胞 ,降低 CD+ 4 淋巴细胞来发挥抗哮喘气道炎症作用。     

血管内照射（He－Ne）对患者外周血淋巴细胞中凋亡细胞（PCD）的影响

本文报道了用氦氖激光血管内照射（ＩＬＩＢ）治疗九例患者过程中,应用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中凋亡细胞的发生,结果提示,照射后凋亡细胞百分率为（６．４３±５．０７％）与照射前比较（０．３８±０．５３％）,ｐ＜０．０５。     

外周血T淋巴细胞亚群流式检测方法的优化及验证

为优化外周血T淋巴细胞亚群流式检测方法,采集小鼠肝素钠抗凝血,用FITC rat anti-mouse CD3、APC rat antimouse CD4和PE rat anti-mouse CD8a荧光抗体进行染色,裂解红细胞,通过流式细胞仪检测各亚类细胞占淋巴细胞百分比。从样本体积(50μL和100μL)、FITC rat anti-mouse CD3抗体的工作浓度(1.25～40.00μg·mL^-1)、APC rat anti-mouse CD4抗体的工作浓度(0.625～20.000μg·mL^-1)、PE rat anti-mouse CD8a抗体的工作浓度(1.25～40.00μg·mL^-1)及红细胞裂解条件(时间和裂解次数)等方面对检测方法进行了优化,并验证方法的精密度(批内差异和批间差异);同时对样品4℃放置24 h、室温放置24 h、染色处理后4℃放置24 h的稳定性进行验证。结果表明,50μL抗凝血中加入终浓度1.25μg·mL^-1FITC rat anti-mouse CD3、1...     

三角帆蚌alpha-2巨球蛋白活性测定及不同组织的表达

alpha-2巨球蛋白(alpha-2 Macroglobulin,α2M)是一种蛋白酶结合蛋白,是重要的天然免疫因子。利用α2M的作用原理,用三角帆蚌血浆保护胰蛋白酶,后用大豆蛋白酶抑制剂抑制未被保护的胰蛋白酶。利用Na-benzoyl-DL-arg-nine-p-nitroanilide(BAPNA)作为酶底物检测被保护的蛋白酶活性的方法,首次证明了三角帆蚌体内α2M的存在。在此基础上,克隆了α2M基因保守区受体结合区片段,进一步证明了α2M在三角帆蚌体内的存在。同时,还进行了α2M不同组织的表达检测,结果显示,α2M基因在血细胞中有表达,而在外套膜、闭壳肌、肠和性腺中没有表达。