魔芋葡甘聚糖的分光光度法测定

魔芋为天南星科(Araooae)魔芋属(Amorphophallus blume)植物,是唯一大量提供葡甘聚糖(Glucomannan,下称GM)的新兴特种经济作物。魔芋GM是由D-葡萄糖和D-甘露糖主要通过β-1,4糖苷键结合的高分子多糖,在食品、医药、石油、化工、轻纺等工业中有着重要的用途。GM的定量测定虽有过甘露糖腙重量法和斐林试剂沉淀     

重组共表达大肠杆菌细胞从D-葡萄糖一锅法生产D-甘露糖

【背景】D-甘露糖的酶促转化方法已受到相当大的关注。【目的】研究D-葡萄糖异构酶(D-glucoseisomerase,D-GIase)和D-来苏糖异构酶(D-lyxoseisomerase,D-LIase)共表达于大肠杆菌细胞生产D-甘露糖的工艺条件。【方法】将D-GIase和D-LIase基因片段合成后酶切连接到载体p CDFDuet-1上,构建p CDFDuet-Acce-DGI/Peba-DLI重组质粒并导入到大肠杆菌BL21(DE3)中共表达,通过摇瓶培养得到产D-GIase和D-LIase的菌体,测定该共表达细胞体系的反应条件。【结果】添加1 mmol/L Co~(2+),共表达体系酶的最适温度和p H分别为70°C和6.0。以浓度分别为100、300、500 g/L的D-葡萄糖为底物生产D-甘露糖,平衡后D-甘露糖质量浓度分别为13.8、38.1、62.6 g/L,相应的转化率分别为13.8%、12.7%、12.5%,D-葡萄糖、D-果糖和D-甘露糖的平衡比约为50:37.5:12.5。【结论】D-GIase和D-LIase在大肠杆菌细胞中组成的共表达体系通过一锅法可利用D-葡萄糖为底物生产D-甘露糖。     

湘西地区木通果实微量元素的测定

采用马弗炉干法灰化消化样品,火馅原子吸收法连续测定白木通Akebia trifoliata var.australis (Cieli._Kehd、三叶木通A.trifoliata(Thumb.)Koidz、木通A.quinata Decne.果实中微量金属元素,检测出K,Ca,Na,Mg,Fe,Zn,Mn,Cu等8种元素含量。3种植物果实中K,Ca,Mg含量较高(＞0．1000mg/g),其中K元素远高于其他元素,Na,Cu含量较低(＜0．0100mg/g)。Fe,Zn,Mn的含量处于中等水平。白木通果实中K,Me,Zn,Mn 4种矿质元素高于三叶木通和木通。木通果实中Ca,Fe两种元素稍高于白木通、三叶木通。Na,Cu两种微量元素在3种果实中含量基本相拟。     

一株产常温葡甘聚糖酶的芽孢杆菌的分离、鉴定及产酶发酵条件的研究

以魔芋生粉为唯一碳源的筛选培养基,从魔芋废渣中分离筛选出一株可以降解魔芋生粉的细菌菌株,编号为LS-6。根据16SrDNA序列和生理生化特性,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。胞内外葡甘露聚糖酶酶活分析结果表明,LS-6产生的葡甘聚糖酶为胞外酶。LS-6产生葡甘聚糖酶的最佳培养基组分和条件是:1%魔芋生粉,0.5%酵母粉,0.5%NaCl,培养基初始pH为6.0,最佳发酵条件是25℃,摇床转速200r/min,培养48h。酶解产物的高效液相色谱分析结果表明,LS-6粗酶液的酶解产物主要为葡萄糖和甘露糖。LS-6的分离为进一步克隆常温葡甘聚糖酶基因和产酶工程菌的构建奠定了基础。     

遗传工程在工业酶生产上的应用

一 D-木糖异构酶和D-葡萄糖异构酶 利用D-木糖异构酶和D-葡萄糖异构酶从半纤维素(木糖)制备乙醇和从淀粉(葡萄糖)制备高果葡糖浆具有巨大的经济价值。最近,美国Upjohn公司用遗传工程方法获得了具有高酶活力的大肠杆菌(E.coli)。方法和结果如下。     

3个木薯品种嫩茎叶中氢氰酸、总黄酮及主要营养成分含量的变化

以木薯(Manihot esculenta Crantz)品种'华南7号'('South China 7')、'华南9号'('South China 9')和'华南205号'('South China 205')为研究对象,分别对种植后90、120、150、180和210 d的3个木薯品种嫩茎叶中氢氰酸、总黄酮及主要营养成分含量的变化进行了分析;在此基础上,明确供试3个品种嫩茎叶作为饲料的最佳采收期.结果表明:随种植后时间延长,3个品种嫩茎叶中的氢氰酸和总黄酮含量变化均呈波动趋势,其中,'华南7号'嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后150和210 d显著降低(分别为347843和320507 mg·kg-1),'华南9号'嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后150 d最低(313643 mg·kg-1),'华南205号'嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后210 d最低(75103 mg·kg-1);'华南7号'和'华南205号'嫩茎叶的总黄酮含量在种植后120 d最高(分别为1963%和1917%),而'华南9号'嫩茎叶的总黄酮含量则在种植后210 d最高(1801%).不同生长期3个木薯品种嫩茎叶的粗蛋白质和粗灰分含量均符合相关动物饲料的标准,而总磷含量均较低.其中,'华南7号'嫩茎叶的粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和总钙含量在种植后150 d相对较高,分别为25273%、7687%、23077%、7157%和1660%,其无氮浸出物含量(26823%)相对较低;'华南9号'嫩茎叶的上述5种营养成分含量在种植后120 d相对较高,分别为28050%、6990%、21557%、8467%和1493%,其无氮浸出物含量(24723%)相对较低;'华南205号'嫩茎叶的粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量在种植后120 d相对较高,分别为24273%、7080%和7633%,其粗纤维(18470%)、无氮浸出物(32037%)和总钙(1323%)含量相对较低.综合分析结果显示:'华南7号'、'华南9号'和'华南205号'嫩茎叶作为饲料的最佳采收时间分别为种植后150、120和120 d.     

黄芪多糖结构及其单糖组成的气相色谱-质谱研究

目的:研究不同样品黄芪多糖的结构和单糖组成差异.方法:采用闪式提取、乙醇沉淀法从黄芪根部提取多种多糖化合物,脱除蛋白、凝胶层析后的多糖化合物经水解、乙酰化后利用气相色谱-质谱法分析黄芪水溶性多糖中单糖组成、结构及其比例,将同样的方法应用到8个不同产地或不同级别的黄芪样品中.结果:黄芪多糖所含单糖种类主要有L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、L-木糖、D-核糖、L-核糖、D-半乳糖,D-葡萄糖,D-甘露糖,且不同黄芪样品所含黄芪多糖里含有的单糖种类及含量有较大差别.结论:该研究可为黄芪品种甄别及黄芪多糖品质分析提供参考.     

贵州三叶木通遗传多样性及亲缘关系分析

为科学保存和利用贵州三叶木通资源,采用AFLP和ISSR分子标记技术对贵州省部分县(市)的31份三叶木通资源进行遗传多样性及亲缘关系分析。结果显示:(1)两种标记方法分别通过8对引物扩增出9 252条、11 643条DNA谱带,多态性条带分别为8 818、11 643,扩增多态率分别为95.31%和100%,说明供试种质资源遗传多样性较丰富。(2)AFLP和ISSR方法所得遗传相似系数区间分别为0.762 3~0.893 5和0.828 9~0.917 1,说明不同种质间存在一定的遗传差异。(3)聚类分析表明,在遗传相似系数0.85处,31份三叶木通种质资源分别被聚为5组(AFLP)和3组(ISSR),其中26号(7-4-中1)、27号(8-1-1)、28号(8-3-中)和30号(9-3-中1)4个资源及31号(9-4-1)和29号(9-2-S1)2个资源在两组分析方法中分别处于同一亚组内,说明其为亲缘关系较近的样本,且样本4号(2-2-N1)、8号(3-1-S1)和样本26号(7-4-中1)、27号(8-1-1)两两相似系数最大,可能是同一来源的种质。     

一株结皮真菌胞外多糖的初步研究

探究一株真菌胞外多糖最佳生产时间及其组成成分。通过对其发酵液胞外多糖含量及上清液黏度的测定,确定其最佳产糖时间,并用此条件提取胞外多糖粗品,用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量,薄层色谱法对所得的胞外多糖进行组分分析。当发酵至第5天时该株真菌的生物量、胞外多糖产量及发酵液的黏度均达到最高峰,分别为0.606 4 g/60 mL、20.22 μg/mL和4.74 mPa/s,并且胞外多糖含量与发酵上清液黏度在一定程度上呈正相关。用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量为19.58 μg/mL,并用4 mol/L的硫酸完全水解,硅胶G薄层层析,甲醇-氯仿(1:1,体积比）展层,苯胺-二苯胺-磷酸显色,表明其组成成分可能为D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖。该菌株所产的胞外多糖具有提高结皮能力和防沙保水作用,为利用微生物治沙提供参考和种质资源。     

盐胁迫下两个亚麻品种幼苗的生理生化特性

目的:探讨两个亚麻品种('双亚5号'和'范妮')幼苗对盐胁迫的生理反应.方法:当'双亚5号'和'范妮'的种苗长出第二片真叶时,对其进行不同浓度的NaCl胁迫(0、70、100、150、200、250mmol/L),处理7d后研究其不同盐浓度胁迫下的丙二醛含量、过氧化物酶和过氧化氢酶活性、酯酶同功酶和过氧化物酶同功酶谱带变化.结果:获得了盐胁迫下'双亚5号'和'范妮'幼苗的生理生化数据和图谱.结论:在100mmol/L NaCl胁迫后,'双亚5号'幼苗POD和CAT酶活性均达到峰值;在200mmol/L和100mmol/L NaCl胁迫后,'范妮'幼苗的POD和CAT酶活性分别达到最大值.对于各组处理,'范妮'幼苗的POD和CAT酶活性均明显高于'双亚5号'幼苗的.因此,认为'范尼'幼苗比'双亚5号'幼苗更具耐盐潜力.     

Pollination Ecology ofChloranthus serratus(Thunb.) Roem. et Schult. andCh. fortunei(A. Gray) Solms-Laub. (Chloranthaceae)

Flowering and pollination biology ofChloranthus serratusandChloranthusfortuneiwere studied. Flowering took place from early Marchto mid–April inCh. fortunei, and from April to September,the whole growth period, inCh. serratus.The flowering periodof an inflorescence ofCh. serratusaveraged about 8 d and anthesisof a single flower was 5–6 d. Flowers are slightly protogynous.The flower emitted fragrance when the androecium became white.Both species are entomophilous with thrips as exclusive pollinators.Under natural conditions, fruit set occurs mainly as a resultof cross-pollination, but self-pollination and agamospermy mayoccur in some cases. In flowers ofCh. fortuneiandCh. serratus,theincurved androecium, the carpel and the spike axis form a nearlyclosed chamber that contains the anthers and stigma. The developmentof a floral-axial chamber may be an important step towards amore economical and effective pollination system. Floral morphology,pollination biology and fossil evidence suggest that the mainevolutionary trend in the genusChloranthusis towards developmentof ‘closed’ flowers. The fidelity of the relationshipbetweenChloranthusand thrips is regarded as a specialized featureof pollination biology and this relationship may have originatedearly in the evolutionary lineage.Copyright 1999 Annals of BotanyCompany Chloranthaceae,Chloranthus, Thysanoptera,flowering, floral-axial chamber, pollination, evolution trends.     

Organolanthanoids. XIII. Bis(pentadeuterocyclopentadienyl)ytterbium(II)

The complex (C₅D₅)₂Yb(dme) (dme = 1,2- dimethoxyethane) has been prepared by reaction of Tl(C₅D₅) with ytterbium metal in dme and is isostructural with (C₅H₅)₂Yb(dme). Thermal desolvation under vacuum yields (C₅D₅)₂Yb, for which essentially identical high resolution neutron powder diffraction data were obtained at 294 K and 77 K, but the structure could not be determined.     

Alginate encapsulation of axillary buds of Ocimum americanum L. (hoary basil), O. Basilicum L. (sweet basil), O. Gratissimum L. (shrubby basil), and O. Sanctum. L. (sacred basil)

Summary Propagation and conservation of four pharmaceutically important herbs, Ocimum americanum L. syn. O. canum Sims. (hoary basil); O basilicum L. (swett basil); O. gratissimum L. (shrubby basil); and O. sanctum L. (sacred basil) was attempted using synthetic seed technology. Synthetic seeds were produced by encapsulating axillary vegetative buds harvested from garden-grown plants of these four Ocimum species in calcium alginate gel. The gel contained Murashige and Skoog (MS) nutrients and 1.1-4.4 μM benzyladenine (BA). Shoots emerged from the encapsulated buds on all six planting media tested. However, the highest frequency shoot emergence and maximum number of shoots per bud were recorded on media containing BA. Of the six planting media tested, both shoot and root emergence from the encapsulated buds in a single step was recorded on growth regulator-free MS medium as well as on vermi-compost moistened with halfstrength MS medium. Rooted shoots were retrieved from the encapsulated buds of O. americanum, O. basilicum, and O. sanctum on these two media, whereas shoots of O. gratissimum failed to root. The encapsulated buds could be stored for 60 d at 4°C. Plants retrieved from the encapsulated buds were hardened off and established in soil.     

Nachruf. (A. Goffin.)

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