熊去氧胆酸的微生物转化条件及其制备

从416株泡木贼镰刀菌中,筛选出一株92-5菌株,它能在30℃转化石胆酸为熊去氧胆酸.研究了该菌株的最适转化条件,在该条件下,熊去氧胆酸的重量收率为42.3%.建立了适于工业化生产的产物分离制备方法.     

三株梭菌通过生物转化形成熊去氧胆酸的研究

用改进的薄层层析法定量测定了三株厌氧梭菌——产气荚膜梭菌(Clostridium perfr-ingens)HS-10、丁酸梭菌(C.butyrium)DL-20和LQ-29形成熊去氧胆酸(UDCA)的生物转化能力,并用正交法确定了HS-10菌株的最佳转化条件。发现该菌株在含O．2mmol／L鹅去氧胆酸(CDCA)的RCM培养基中培养6-48小时内,UDCA转化率均在80％以上。而且,当CDCA的浓度高达0．8-1．0 mmol／L时,其转化率仍在70％以上。此外,还初步发现未加任何营养成分的豆腐废水也可作为良好的转化培养基。本文是这两种菌能单独将CDCA 转化为UDCA的首次报道。     

熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化临床观察

目的探讨熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化的临床效果。方法选取某医院于2014年7月至2015年7月收治的原发性胆汁性肝硬化患者98例作为临床研究对象,随机将患者分为观察组和对照组,每组49例。两组患者均给予基础治疗,之后对照组患者采用通胆汤进行治疗,观察组患者在对照组的基础上加用熊去氧胆酸进行治疗。比较两组患者的治疗效果。结果根据分析结果,观察组患者的完全反应率明显高于对照组,并且肝功能指标明显优于对照组,比较结果具有显著差异性(P0.05)。结论熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化的临床效果良好,值得推广使用。     

牛磺熊去氧胆酸的合成进展

牛磺熊去氧胆酸是由熊去氧胆酸的羧基和牛磺酸的氨基之间缩水而形成的结合型胆汁酸。主要介绍了目前四种牛磺熊去氧胆酸合成方法,并对四种方法的优缺点进行了全面的评价,从而为牛磺熊去氧胆酸的合理开发和利用提供思路。     

熊去氧胆酸对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞的影响及机制研究

目的:探讨熊去氧胆酸(UDCA)对阿霉素(DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响及机制.方法:体外培养H9c2细胞,1 μMDOX和不同浓度UDCA处理H9c2,CCK-8法测定细胞活力;实时定量聚合酶链反应检测心肌细胞凋亡分子Bax及炎症因子IL-1β、IL-6的表达;Western blotting检测UDCA对...     

维生素E与熊去氧胆酸对非酒精性脂肪肝大鼠的协同肝保护机制

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是全世界最常见的肝病,而非酒精性脂肪肝炎(NASH)是其中一种,具有潜在的严重性,其发展涉及多次打击过程。一些临床研究表明,熊去氧胆酸(UDCA)和维生素E单独或联用对治疗NASH患者有明显的改善作用,但效果具有一定可逆性。而关于UDCA和维生素E联用治疗NASH的机制研究也尚少,因此本研究希望通过探究UDCA与维生素E联用对改善NASH大鼠的效果与机制,为NASH的治疗提供更多的理论依据。构建NASH大鼠模型,通过喂养不同饮食分别设立对照组,模型组和2组给药治疗组(UDCA单独用药;UDCA/VitE联合用药),12周后对大鼠肝组织进行病理分析,检测AST、ALT、MDA、SOD等生化指标和组织NF-κB、TNF-α蛋白表达水平,对比不同组间差异,评估给药治疗的疗效,分析可能的机制;UDCA能有效改善NASH的各种组织特征或生化指标,并且与维生素E一起对NASH大鼠的肝保护具有协同作用,这种协同作用可能与抑制肝细胞脂肪变性和炎细胞浸润,减轻肝损伤和胰岛素抵抗有关。     

茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸的临床研究

目的:探讨茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸的临床疗效和安全性。方法:选择2016年9月-2018年3月我院收治的胆汁淤积性黄疸儿童94例,按随机抽签方式分为对照组及观察组,每组47例。对照组给予熊去氧胆酸胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予茵栀黄口服液治疗,比较两组患儿治疗前后血清胆红素水平、肝功能及免疫指标水平的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,两组总胆红素(Total Bilirubin,TBil)、直接胆红素(Direct Bilirubin,DBil)、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(Glutamyl transpeptidase,GGT)、CD8~+水平均较治疗前显著下降(P0.05),且观察组TBil、DBil、ALT、AST、ALP、GGT、CD8~+水平均显著低于对照组[(86.29±11.07)μmol/L vs.(132.75±16.53)μmol/L、(53.47±6.71)μmol/L vs.(86.72±9.09)μmol/L、(76.53±8.60) U/L vs.(127.05±11.79) U/L、(138.59±12.14) U/L vs.(160.08±15.82) U/L、(206.88±79.04) U/L vs.(270.40±68.19) U/L、(223.04±89.59) U/L vs.(280.62±96.17) U/L、(22.80±3.79)%vs.(26.52±4.30)%](P0.05)。治疗后,两组CD4~+、CD4~+/CD8~+均较治疗前显著上升(P0.05),且观察组CD4~+、CD4~+/CD8~+[(38.91±7.20)%、(1.69±0.55)]均显著高于对照组[(34.67±6.26)%、(1.31±0.49)](P0.05)。治疗期间,两组患儿均没有出现相关不良反应。结论:茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸患儿可有效改善其胆红素水平及肝功能,且具有一定的免疫调节作用。     

熊去氧胆酸联合双歧三联活菌对结肠炎小鼠炎症因子及肠道菌群影响

目的 探究熊去氧胆酸(UDCA)联合双歧三联活菌对溃疡性结肠炎(UC)小鼠IL 10、TLR4及肠道菌群的影响。 方法 购自中国科学院微生物研究所SPF级BALB/c小鼠60只,按照区间分组法将小鼠分为对照组、UC组、UDCA组、双歧三联活菌组、UDCA联合组各12只。每日观察小鼠一般情况、收集粪便做大便隐血实验检测、采用疾病活动指数(DAI)评分判断疾病活动指数;于建模成功7 d后采集各组眼眶静脉血、断头法处死后获取结肠组织,检测IL 10、TLR4,进行UC组织病理学评分,并取小鼠粪便分析其肠道菌群变化。 结果 第3、7、21 d UDCA组、双歧三联活菌组、UDCA联合组DAI评分均低于UC组,且UDCA联合组DAI评分低于UDCA组、双歧三联活菌组;第21 d UC组、UDCA组、双歧三联活菌组的体质量均低于对照组,UDCA组、双歧三联活菌组、UDCA联合组体质量均高于UC组,且UDCA联合组体质量高于UDCA组、双歧三联活菌组(P结论 熊去氧胆酸联合双歧三联活菌治疗UC小鼠,可明显降低IL 10、TLR4水平,增加肠道菌群数量,治疗效果更佳。     

脐带间充质干细胞治疗熊去氧胆酸应答不佳的原发性胆汁性胆管炎的临床观察

目的探讨脐带间充质干细胞（UC-MSCs）输注治疗熊去氧胆酸（UDCA）应答不佳的原发性胆汁性胆管炎（PBC）患者的安全性和有效性，分析影响UC-MSCs疗效应答的相关因素。 方法选取解放军总医院第五医学中心2010年8月至2017年10月接受UC-MSCs输注治疗UDCA应答不佳的PBC患者29例。患者均以4周为间隔给予3次外周静脉输注细胞1.0×10⁶个/kg。通过实验室指标、生命体征及不良事件发生情况评估UC-MSCs治疗的安全性。通过患者临床症状、肝功指标和Child-Pugh评分评估治疗的有效性。以"巴黎Ⅰ标准"作为疗效标准，评价患者UC-MSCs治疗后的疗效应答情况，比较有效患者及无效患者基线临床症状和肝脏功能差异，分析影响UC-MSCs疗效的相关因素。采用独立样本t检验分析年龄；采用Mann-Whitney U检验比较两组UDCA治疗时间、激素治疗时间、实验室数据等，采用Wilcoxon秩和检验比较组间数据；采用χ²检验比较性别、临床症状和Child-Pugh分级等指标。多因素Cox回归分析对影响UC-MSCs疗效的相关因素。 结果1例患者在治疗后因合并严重感染出现高热，所有患者未出现UC-MSCs相关严重不良事件。UC-MSCs输注后与基线相比，患者的血清碱性磷酸酶（ALP）[281.00 （182.50，428.50）比201.00 （149.50，402.00）]、γ-谷氨酰转移酶（GGT）[156.00 （73.00，390.00）比84.00 （43.50，312.50）]、总胆固醇（TC）[5.10 （3.14，7.69）比3.94 （3.00，6.01）]均下降（P < 0.05）。其中，9例（31﹪）患者治疗后疗效明显，达到"巴黎Ⅰ标准"，与无效组患者基线相比，有效组患者天冬氨酸转氨酶（AST）[93.50 （77.75，100.75）比53.00 （46.00，78.00）]、ALP[342.00 （237.25，516.00）比185.00 （152.50，295.50）]、总胆红素（TBIL）[58.50 （33.45，69.33）比13.10 （11.25，20.25）]均下降（P < 0.05）。多因素Cox回归分析显示，血清TBIL是影响UC-MSCs疗效的重要独立因素[HR为0.817 （95﹪CI：0.715 ~ 0.935），P < 0.05]。 结论UC-MSCs输注对UDCA治疗应答不佳的PBC患者是安全可行的且耐受性良好，部分患者肝功能得到一定的改善。血清TBIL是影响UC-MSCs治疗疗效的独立重要因素，提示在疾病进展早期TBIL较低的阶段进行UC-MSCs治疗可能有效改善和减缓患者疾病进程。     

肝纤维化程度及自身抗体表达对熊去氧胆酸单药治疗自身免疫性肝病重 叠综合征患者临床疗效的影响

目的:肝纤维化程度及自身抗体表达对熊去氧胆酸单药治疗自身免疫性肝病重叠综合征患者临床疗效的影响。方法:回顾性收集2007年-2011年住院的20例做过肝穿活检的经熊去氧胆酸单药治疗达到满意效果的自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化重叠综合征患者的临床资料。结果:20例患者中,12例患者(60%)的肝穿标本活检评估处于肝纤维化S3或S4期,其初诊时基线特征与肝纤维化处于S0-S2期的患者基线特征无统计学差异。此外,该20例患者的血清抗平滑肌抗体的阳性率较低(1/20)。结论:肝脏纤维化程度不会引起熊去氧胆酸治疗效果的下降。     

L-苹果酸产生菌筛选及高产突变株诱变选育

通过广泛收集和分离,获得根霉属(Rhizopus)、曲霉属(Aspergillus)及裂褶菌属(Schizophyllum)等属菌株897株。产酸指示平板上的变色圈测定结果表明,它们中间628株为产酸菌。通过纸层析对产酸菌发酵液酸谱的分析,获得129株L-苹果酸产生菌,经进一步测定发酵液中L-苹果酸的含量,筛选出以葡萄糖为原料,摇瓶发酵140小时,L-苹果酸产率48．37g／L,对糖转化率48．37×10^-2 的菌株LMO2。经初步鉴定,这一菌株为曲霉(Asper-gillus sp.)以LM02作为出发株,采用亚硝基胍、自然污染细菌、甲基磺酸乙酯及紫外线进行诱变处理,选育出葡萄糖为原料,L-苹果酸产率较高的突变抹N1-14、N1-14、NE1412、NU1416及NU1419。其中N1-14 的L-苹果酸产量最高,比出发株提高46．2×10^-2。N1-14 的菌丝生长速度快,产孢能力强,摇瓶发酵葡萄糖140小时,平均L-苹果酸产率为72．53g／L,对糖转化率53．74×10^-2。全发酵液经薄层层析测定,不含黄曲霉毒素。发酵产物分离提纯后,得到白色粉末状结晶,经纸层析、质谱及红外光谱测定,证明为L-苹果酸。     

高溶纤酶活性枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定

从多个枯草样品中分离纯化得到 2 0株芽孢杆菌 ,并进行了鉴定。通过对固体发酵所产生的溶纤酶的研究 ,发现均能不同程度地产生溶纤酶 ,其中菌株FM-S1、FM-S2、FM-S8、FM-S6、FM-S11产生的溶纤酶活性均高于日本的纳豆杆菌。同时对筛选的菌株的形态和菌落形态、生理生化特性进行鉴定 ,确认所筛选到产酶菌株均属于枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。另外 ,对FM S2作固体发酵确定在熟大豆上枯草杆菌溶纤酶生物合成的模式为同步合成型。     

脱落酸产生菌的遗传育种

从南京蔬菜研究所植物致病株中分离到3株脱落酸（ABA）产量较高菌株,经初步鉴定均为灰葡萄孢（BolrytiscinereaPers．）。分别命名为A23,A101,A160通过紫外诱变及菌株生长状况比较,选出一株菌A101作为出发菌,经紫外,硫酸二乙酯多次诱变,在ANA合成代谢关键酶抑制剂平板上定向选育出一株ANA高产菌UUD－1,该菌固体发酵可产生ABA374μg／ml,是出发菌株产量的14倍,且其产量连续培养5代稳定。     

羊肚菌原生质体诱变筛选高生物量高氨基酸含量菌株

研究影响尖顶羊肚菌（MOrchellaconicaPers、）CGAC－9506原生质体制备、再生因素基础上,首次诱变羊肚菌原生质体,进行高生物量高氨基酸含量菌株选育。原生质体诱变再生株MconicaCGAC－950637生物量比出发株提高7．3％,总氨基酸比出发株提高38％。     

产二十二碳六烯酸等多不饱和脂肪酸真菌的筛选*

从土壤中筛选出一株产二十二碳六烯酸（DHA）的丝状真菌,菌丝含油21.23％,DHA占总脂肪酸2.51％;同时含二十碳五烯酸（EPA）,占总脂肪酸的0．41％;不饱和脂肪酸占总脂肪酸的80％。经鉴定为头孢霉属（Caphalosporiumsp．）真菌。同时发现两株菌含EPA,经鉴定为小克银汉霉（Cunninghamellasp.）和毛霉（Mucorsp．）。在这几个属中发现DHA和EPA尚属首次。头孢霉菌DHA产量及百分含量和斜面菌种在不同温度下储藏有关。菌种在20℃储藏10天,在液体PDA培养基上发酵,DHA可占总脂肪酸11．27％,产量达63．35mg／L。     

产壳聚糖酶菌株的初步筛选

通过大量的筛选,获得了产壳聚糖酶较好的菌株Y2、Y4、Y8。其发酵液所产壳聚糖酶的酶活力分别为2．0U／ml,2．1U／ml,2．2U／ml。     

产胞外黑色素菌株的筛选*

对不同来源获得的47株菌株在酪素培养基上生长、产色素情况进行了对比研究。从中选取了T4和Neurospora crassa AS3．1602,比较了二利用5种不同培养基产黑色素的能力。对T4菌株产生的黑色素做了初步研究,并初步鉴定T4菌株为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis）。     

产多聚唾液酸的菌种筛选及产酸条件

通过对40株大肠杆菌进行产多聚唾液酸的筛选,得到一株高产多聚唾液酸菌株C-8,对该菌的一系列培养条件进行了研究。最佳培养基为：山梨醇2.5％,硫酸铵0.5％,磷酸氢二钾90mmol／L,胰蛋白陈1.5％,硫酸镁0.04％,pH7．8。在37℃,250r／min摇床培养65h,可使菌体在每毫升培养液中产多聚唾液酸1200μg。     

二十碳五烯酸等多不饱和脂肪酸高产菌的筛选

自从Dyerbers在1978年指出二十碳五烯酸（EPA）有益于人类健康以来,人们已发现二十碳五烯酸等N－3多不饱和脂肪酸具有预防和治疗动脉粥样硬化、血栓的形成和高血压,防癌抗癌,促进大脑发育,预防老年痴呆,保护视力等功能。目前其唯一商业来源为深海鱼油,但由于鱼油资源有限,且其中的N－3PU－FA由于被氢化和掺入人造黄油或起酥油而破坏,远远不能满足市场的需要（徐天宇,1995）。人们一直在探索EPA等多不饱和脂肪酸的新来源。研究表明,能产生有意义EPA的微生物主要有真菌和藻类（戴传超等,1995）。藻类的培养由于受外界的影响…