葛根素对大鼠心室肌细胞动作电位及钾通道电流的影响

目的:观察葛根素对大鼠心室肌细胞动作电位及钾通道电流的影响。方法:用常规微电极方法记录大鼠心室肌细胞动作电位,用全细胞膜片钳技术记录游离心室肌细胞钾离子流。结果:不同浓度的葛根素均能延长大鼠心室肌细胞动作电位时程(APD)及抑制内向整流钾电流,具有明显的浓度依赖关系。结论:葛根素延长APD,抑制内向整流钾电流,可能是其抗心律失常的机制。     

孕酮对豚鼠心室肌细胞动作电位的影响

目的：观察孕酮(pfogesterone)对心室肌细胞动作电位的影响。方法：采用玻璃微电极技术,引导离体豚鼠心室乳头肌细胞动作电位,观察孕酮不同浓度及作用时间对心室肌细胞动作电位及有效不应期的影响。结果：①较高浓度的孕酮使心室肌细胞动作电位零期最大除极速率(Vmax)和动作电位幅度(APA)降低,使心室肌细胞有效不应期(ERP)延长;②较高浓度孕酮使心室肌细胞动作电位时程APD20缩短;使动作电位时程APD90、APD延长。结论：孕酮具有抑制心室肌细胞Na^ 通道、K^ 通道和Ca^2 通道的作用。     

血小板活化因子对豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响

应用全细胞膜片钳技术研究了血小板活化因子(platelet activatingfactor,PAF)对豚鼠心室肌细胞动作电位和钾电流的影响.结果发现,当电极内液ATP浓度为5 mmol/L(模拟正常条件)时,1 μmol/L PAF使APD90由对照的225.8±23.3 ms延长至352.8±29.8ms(n=5,P＜0.05);使IK尾电流在指令电压 30 mV由对照的173.5±16.7 pA降至152.1±11.5 pA(P＜0.05,n=4);使Ikl在指令电压为-120 mV时由对照组的-6.1±1.3 nA降至-5.6±1.1 nA(P＜0.05,n=5);但PAF在生理膜电位范围(-90mV～ 20mV)对IK1没有影响.当电极内液ATP浓度为0mmol/L时,IK·ATP开放(模拟缺血条件),1 μmol/LPAF却显著缩短APD90,由对照的153±24.6 ms缩短至88.2±19.4 ms(n=5,P＜0.01).而用1 μmol/L格列本脲(IK·ATP的特异阻断剂)预处理后,恢复了PAF可显著延长动作电位时程的作用.结果提示,PAF可能扩大缺血心肌和正常心肌细胞动作电位时程的不均一性,是缺血/再灌注性心律失常发生的重要原因.     

葛根素对大鼠心室肌细胞动作电位的影响

目的:从电生理角度探讨葛根素抗心律失常的可能机制。方法:采用膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞动作电位(AP)、转染的人胚胎肾细胞缓慢延迟整流钾电流(IKs),观察加药前、后葛根素对AP和IKs的影响。结果:0.01、0.1、1 mmol/L葛根素可浓度依赖性地延长动作电位时程,分别使APD50从(71.8±11.8)ms延长至(86.9±10.7)ms、(100.5±14.1)ms和(123.6±25.4)ms;使APD90从(164.6±21.4)ms延长至(188.3±11.5)ms、(221.6±25.7)ms和(278.7±38.2)ms(n=6,均P0.05),而对RMP、APA和APD20无显著影响。此外,0.01、0.1、1 mmol/L葛根素对IKs抑制率分别为(17.8±2.5)%、(40.4±1.9)%和(60.9±3.2)%(n=6,均P0.05)。结论:葛根素可能通过抑制IKs来延长动作电位时程,发挥抗心律失常作用。     

银杏酮酯对模拟缺血豚鼠心室肌细胞I_K的影响

目的:观察银杏酮酯(GBE50)对模拟缺血豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)的影响,探讨GBE50抗心肌缺血的机制。方法:采用标准膜片钳全细胞记录方法观察GBE50对正常及模拟缺血豚鼠心室肌细胞IK的影响。结果:在细胞外液中分别加入25,50,100mg/L GBE50灌流,仅100mg/L GBE50对正常心室肌细胞IK有影响(P0.05),使IK电流密度减小,I-V曲线下移;模拟缺血液灌流20minIK减小,I-V曲线下移,在模拟缺血液中分别加入25,50,100mg/L GBE50后,仅25mg/L无效,50,100mg/LGBE50灌流20min后IK稍减小,I-V曲线稍有下移,与缺血前相比无显著性差异(P0.05)。结论:100mg/LGBE50可减少正常豚鼠心室肌细胞IK;在模拟缺血条件下豚鼠心室肌细胞IK受到明显的抑制,GBE50可明显逆转缺血所致IK的抑制效应,这可能是GBE50产生心肌保护作用的重要机制之一。     

葛根素对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响

目的 :观察葛根素对豚鼠单个心室肌细胞钾离子通道的影响。方法 :采用内面向外膜片钳单通道记录技术。结果 :葛根素 2 0 μmol/L ,4 0 μmol/L ,80 μmol/L对单个心肌细胞钾离子通道的开放概率 (P0 )有抑制作用 ,在 80μmol/L时 ,P0 值从 0 .86 7± 0 .13降至 0 .0 19± 0 .0 1,与用药前比较有显著差异 (n =5 ,P <0 .0 1)。结论 :葛根素能抑制心肌细胞钾离子通道是其抗心律失常的分子机制     

血管紧张素Ⅱ对模拟缺血心室肌细胞L-型钙通道的影响

实验研究了血管紧张素II（AngⅡ)对模拟缺血心室肌细胞L－型钙离子通道的作用,用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳方法记录心室肌细胞的L－型钙电流（ICa L.)。采用低氧,无糖,高乳酸和酸中毒综合方式模拟缺血液灌流,造成心室肌细胞的模拟缺血,并在缺血的基础上继续用含100mmol/A AngⅡ灌流细胞,观察AngⅡ对模拟缺血心室肌细胞钙离子通道的影响,实验结果显示,模拟缺血时ICa.L峰值电流明显减小,最大激活电压为0mV,AngⅡ能抵抗模拟缺血对ICa,L的抑制效应,使ICa,L峰值电流增大,并使最大激活电压左移至－10mV。     

兔左室壁三层心肌细胞的分离及动作电位、钙和钾电流分布的异质性

探讨兔左室壁三层心肌单个细胞的分离方法以及电生理特征,实验以胶原酶按二步消化法分离兔心肌细胞,其中用剃须刀分离左室游离壁内,中,外三层心肌,采用全细胞膜片钳记录AP和离子电流,结果显示：（1）中层细胞上的动作电位时程明显长于内膜下心肌和外膜下心肌,且存在显著的1相切迹和2相驼峰;（2）中层细胞的Ica,L和Lto较内,外膜下的大,IK,s相反,可见三层心肌细胞上多种电流存在显著差异。     

脂布福吉宁、哇巴因对豚鼠心室肌细胞外K~＋活度及跨膜动作电位的影响

用离子敏感微电极和常规微电极研究脂布福吉宁（Ｒｅｓ）和哇巴因（Ｏｕａ）对豚鼠心室肌细胞外Ｋ＾＋活度和动作电位（ＴＡＰ）的影响。结果表明：Ｒｅｓ可降低静息电位,动作电位振幅、间期,最大上升速率,使ａ＾ｏＫ升高;并诱发延迟性后去极化（ＤＡＤ）;Ｒｅｓ的作用与Ｏｕａ相似;电剌激使Ｋ＾＋在细胞间积累,积累量与频率相关。     

银杏苦内酯B对缺血豚鼠心室肌动作电位、L-型钙电流和延迟整流钾电流的作用

目的:研究银杏苦内酯B对正常和缺血心室肌细胞动作电位(action potential,AP),L-型钙电流(L-type calcium current,ICa-L)、延迟整流钾电流(Delayed Rectifier Currennt,IK)的影响.方法:用常规细胞内微电极方法记录豚鼠心室肌细胞动作电位,用全细胞膜片钳技术记录游离心室肌细胞离子流.结果:①在生理条件下,银杏苦内酯B可缩短心室肌细胞动作电位时程 (action potential duration,APD),但对AP其他参数无影响,银杏苦内酯B可增大IK,呈浓度依赖性,但对ICa-L无显著作用;②在缺血条件下,APD50、APD90明显缩短,RP、APA减小,Vmax减慢,而银杏苦内酯B则可延缓和减轻缺血所引起上述参数的变化;3.在缺血条件下,IK和ICa-L均受到抑制,但加入银杏苦内酯B后可逆转缺血所造成这两种离子流的减小.结论:银杏苦内酯B可对抗心肌缺血所引起的心肌电生理的变化,提示银杏苦内酯B可预防心律失常的发生.     

The Venom of Ornithoctonus huwena affect the electrophysiological stability of neonatal rat ventricular myocytes by inhibiting sodium,potassium and calcium current

Spider venoms are known to contain various toxins that are used as an effective means to capture their prey or to defend themselves against predators. An investigation of the properties of Ornithoctonus huwena (O.huwena) crude venom found that the venom can block neuromuscular transmission of isolated mouse phrenic nerve-diaphragm and sciatic nerve-sartorius preparations. However, little is known about its electrophysiological effects on cardiac myocytes. In this study, electrophysiological activities of ventricular myocytes were detected by 100 μg/mL venom of O.huwena, and whole cell patch-clamp technique was used to study the acute effects of the venom on action potential (AP), sodium current (I_Na), potassium currents (I_Kr, I_Ks, I_to1 and I_K1) and L-type calcium current (I_CaL). The results indicated that the venom prolongs APD₉₀ in a frequency-dependent manner in isolated neonatal rat ventricular myocytes. 100 μg/mL venom inhibited 72.3 ± 3.6% I_Na current, 58.3 ± 4.2% summit current and 54 ± 6.1% the end current of I_Kr, and 65 ± 3.3% I_CaL current, yet, didn't have obvious effect on I_Ks, I_to1 and I_K1 currents. In conclusion, the O.huwena venom represented a multifaceted pharmacological profile. It contains abundant of cardiac channel antagonists and might be valuable tools for investigation of both channels and anti- arrhythmic therapy development.     

镉对豚鼠乳头肌动作电位的影响

目的:研究氯化镉(CdCl2)对正常豚鼠心室乳头肌细胞动作电位(AP)的影响。方法:用常规细胞内微电极方法记录乳头肌细胞AP。结果:在生理条件下,CdCl2可使APo期振幅(APA)和最大除极速率(Vmax)降低,动作电位时程(APD)缩短,且具有剂量依赖性。结论:CdCl2可使心室肌AP的APA、Vmax、APD发生改变,提示CdCl2有抑制Na 、Ca2 内流和激活K 外流作用。     

蛋白激酶A和蛋白激酶C对豚鼠心肌细胞延迟整流钾电流的作用

目的 :研究蛋白激酶A和蛋白激酶C对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流 (Ik)的影响。方法 :采用电极内液浓度差扩散法进行细胞内给药 ,利用全细胞膜片箝技术测定单细胞Ik。结果 :cAMP15 0 μmol/L使Ik及Ik ,tail(pA/pF)从 13.7± 2 .1和 6 .1± 0 .3增至 18.5± 3.3和 6 .4± 2 .1(P <0 .0 1,n =6 ) ;8 CPT cAMP15 0 μmol/L使电流 (pA/pF)从 11.4± 1.8及 5 .3± 0 .6增至 17.9± 4 .0和 6 .2± 1.3,PKA的选择性抑制剂 6 2 2 1.0 μmol/L的可逆转二者的作用。cAMP使Ik的激活曲线左移 ,半激活电压 (V1/ 2 )从 2 3.3mV移至 18.7mV ,激活曲线斜率 (k)在用药前后变化较小。 10 μmol/LPMA可以分别使Ik和Ik ,tial(pA/pF)从 12 .9± 1.8和 5 .0± 1.7升至 2 3.7± 2 .8和 7.5±1.1。PMA使I V曲线幅值增加 ,并随去极化电压的升高其作用加强 ,同时PMA使通道的激活曲线k从 15 .3mV升到 2 5 .6mV ,但对V1/ 2 基本无影响。结论 :蛋白激酶A和蛋白激酶C均可增加豚鼠心肌细胞Ik,但二者作用特点有所不同     

幼鼠和成年大鼠心室肌细胞起搏电流的改变

目的:运用膜片钳全细胞技术和实时定量聚合酶链式反应(PCR),探讨幼鼠和成年大鼠心室肌细胞起搏电流(If)及超极化激活的环核苷酸门控通道(HCN)亚型的改变。方法:分离3d的幼鼠和成年大鼠的心室肌细胞;测定HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA的表达;记录If并研究其特性。结果:在新生大鼠心室肌细胞记录到If并得到电流密度-电压曲线,其激活电压约为-75mV;实时定量PCR检测HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA在总HCN mRNA的表达中所占比例分别为0.23%±0.01%、83.58%±0.04%、0.79%±0.01%和15.44%±0.01%。在成年大鼠心室肌细胞也记录到超极化激活、并可以被4mmol/LCsCl阻断的If,其激活电压约为-115mV;HCN1、HCN2、HCN3和HCN4 mRNA在总HCN mRNA中所占比例分别为0.72%±0.02%、91.58%±0.08%、0.27%±0.02%和7.12%±0.02%。HCN2∶HCN4为(13.06±0.21)∶1。结论:随着年龄的增长,大鼠心室肌细胞HCN2所占比例增加;If值减小,激活电压变负。     

乳酸左氧氟沙星对豚鼠心肌细胞电生理的影响

目的了解乳酸左氧氟沙星(LVFX)对豚鼠心室肌细胞电生理的影响.方法经腹腔注射不同剂量的LVFX,记录并分析注药后5～360 min豚鼠Ⅱ导联心电图的QT间期,以及校正的QT间期(QTc).采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度LVFX对体外单个心室肌细胞的延迟整流钾电流(IK)的作用.结果①LVFX给药量为200 mg/kg时,心电图QT间期延长19.38%±3.15%(P＜0.05);在50 mg/kg和100 mg/kg等较低剂量时,QT间期延长不明显(P＞0.05).②LVFX抑制IK电流,且抑制作用呈现电压依赖性和浓度依赖性.结论LVFX可能通过抑制心肌细胞IK电流引起心脏QT间期延长,临床应谨慎使用.     

严重烫伤延长大鼠心室肌细胞动作电位时程的机制

严重烫伤引起心肌细胞动作电位时程（action potential duration,APD）延长,通过加重烫伤心肌细胞钙紊乱和诱发室性心律失常,促进烫伤心功能障碍的发生,但APD延长的机制尚不清楚。通过制作约40％体表面积（total body surface area,TBSA）Ⅲ度烫伤大鼠模型,在伤后12h大鼠心功能明显减弱时分离其心肌细胞,采用膜片钳技术观察心肌细胞APD以及动作电位复极化相关的重要离子通道电流,包括瞬间外向钾电流（transient outward K^＋ current,Ito）,L-型钙电流（L-type Ca^2＋ current,ICa-L）和内向整流钾电流（inward rectifier K^＋ current,IK1）。结果显示,烫伤后12h单个心肌细胞APD明显延长,APD50和APD90在烫伤组分别为（46．02±3．78）ms、（123．24±12．48）ms（n=19）,明显长于对照组的（23．28±4．85）ms、（72．12±3．57）ms（n=17）（P〈0．01）。烫伤引起,Ito电流密度降低,＋60 mV下烫伤组的电流密度（20．39±1．98）pA／pF（n=25）明显低于对照组的（34．15±3．78）pA／pF（n=20,P〈0．01）;烫伤组在-120至-80mV电压刺激下所产生的IK1电流密度显著低于对照组：而两组之间ICa-L电流密度、电压依赖性的激活和失活无显著性差异。结果提示,烫伤引起心肌细胞APD延长的机制与瞬间外向钾通道和内向整流钾通道功能下调有关。