平板恒压式 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)作为分离分析生物大分子的有效手段已广泛应用于生物科学研究及医学临床工作中.国内文献所见SDS-PAGE分离蛋白质常用圆盘式管状电泳.近年来板状电泳逐渐增多,其中多为板状恒流方式,采用板状恒压者不多.本实验室采用垂直平板恒压式SDS-PAGE分析了粗制肌浆网(CSR)蛋白,获得良好结果.试剂及仪器CSR由本实验室从兔骨骼肌制备.β-半乳糖苷酶和乳酸脱氢酶;牛血清白蛋白和卵清蛋白;溶菌酶和四甲基乙烯二胺(TEMED);丙烯酰胺、三羟基氨基甲烷(Tris)和考马斯亮蓝G250分别为Mannheim、Phar-     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

Shapiro于1967年首次报告了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,根据他对11种蛋白质电泳获得的结果,发现蛋白质(或亚基)分子量的对数与蛋白质分子的迁移率之间有直线关系。Weber等人的深入研究,肯定了Shapiro的发现,确立了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量的新方法。 Shapiro和Weber所应用的SDS-凝胶电泳缓冲系统为连续的磷酸盐系统,后来     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳用于根瘤菌鉴定的研究

运用凝胶电泳技宋分析了40余个根瘤菌菌株的可溶性蛋白。对蛋白质电泳图谱做了紫外扫描。结果发现,供试的慢生根瘤菌与快生根瘤菌各个种有明显区别,快生根瘤菌种间也有明显差别。蛋白质电泳图谱可用于种群鉴定,用于区分各种群的主要区域在相对迁移率为0.42至1.0之间。该方法比裂解气相色谱法费时多些,但比生理生化鉴定快,且重复性好,方法简便。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳

电泳是分离混合物中离子成分的最有效方法之一。以聚丙烯酰胺凝胶作支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。这种电泳方法分辨率高,灵敏度大,重复性强,并且操作简便,因此广泛应用于分子生物学,生物化学,细胞学,免疫学,酶学等学科的研究,近年来在微生物分类上的应用也逐渐引起人们的注意。例如1968年     

五种啮齿类动物核型和血清蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

本文对5种啮齿类动物(岩松鼠、花鼠、五趾跳鼠、棕背(鼠平)和岢岚绒鼠)的核型及其血清蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了分析。通过分析结果,探讨了它们的核型及血清蛋白在其分类中的意义。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳技术

聚丙烯酰胺凝胶用于分析和制备长度小于1,000碱基对的DNA片段。 根据所研究的DNA片段的大小,可以选用从3.5％到20％的不同浓度的聚丙烯胺凝胶。     

核糖核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳

自从1959年报道了聚丙烯酰胺凝胶电泳以来,这种电泳方法已有了迅速的发展和广泛的应用。它与纸电泳、琼脂电泳、淀粉胶电泳等相比,具有更多的优点。例如:机械强度好、无色透明、纯度高;在很多种溶剂中不溶解、不带电荷,故没有造成污染的问题,也没有     

两种硬蜱表皮水溶性蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳

<正> Hackman(1953 a,b);Shawky et al.(1978);Hillerton(1979)曾对一些昆虫表皮蛋白的溶解性,氨基酸组成、分子量及等电点进行分析,证实了昆虫表皮蛋白的异质性,并且表明:以不同种昆虫中提取的表皮蛋白各异。不过,迄今尚未能将这些蛋白质成功地分离,并确定究竟有多少种蛋白质存在,对某生物学功能则所知甚少。     

一种利于蛋白质回收的快速SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色-脱色方法

在实践基础上摸索出一种快速并有利于蛋白质回收的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色-脱色方法：经常用的考马斯亮蓝R-250染色液短暂染色后直接用250 mmol/L KCl溶液脱色.这种方法染色-脱色的清晰程度与常规的染色-脱色方法接近,而且能使蛋白质回收率提高三倍多.     

检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇蛋白的新方法——海波银染法

介绍一种检测SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法-海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进,省略了乙醇固定与洗涤步骤,只需20 min即可完成全部染色过程,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下,灵敏度可达毫微克级水平。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的初步经验

聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前认为具有较高分辨能力的分离和分析蛋白质等物质的一种方法。为了鉴定一些生物化学制剂的纯度以及观察在疾病中血清蛋白的变化情况,我们初步建立了这一方法,并用以观察了人、狗血清的电泳情况和一种酶分离的电泳图谱。     

硝酸还原酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性染色

高等植物的硝酸还原酶除诱导酶(NR,E.C.1.6.6.1.)外,还有以组成酶(constitative enzyme,E.C.1.6.6.2.)的形式存在,分别以还原辅酶Ⅱ(NADPH,C_1NR)及还原辅酶Ⅰ(NADH,C_2NR)为电子供体。为深入研究NR各同工酶的特性,我们以聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对NR粗酶液(油菜子叶)进行分离,完善了以甲基紫精(MV)为电子供体的NR同工酶染色法,并在甲(月替)反应原理基础上首次建立了以NAD(P)H为电子供体的NR活性染色系统。     

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。     

超薄板状聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳

在分析蛋白的工作中,常常遇到被分析的试样数目多但含量甚微等问题。使普通用的板状凝胶电泳,往往达不到分离的效果。因此,必须寻找一种分离效果好,又能进行大批量微量试样分析的方法。我们在进行单肌细胞蛋白成份的超微量分析时,经过反复摸索试验,成功地制成一种“超薄板状聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳”。凝胶的厚     

冷冻前后人红细胞膜蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

冷冻保存红细胞在血液保存工作中是一项新技术。以甘油为冷冻保护剂,加入新鲜红细胞中,在-80℃冷冻保存,可达到长期保存的目的,为了检验在血液保存过程中红细胞的质量,国外也曾对血库内保存的枸椽酸、枸椽酸钠、葡萄糖(简称ACD)全血中红细胞膜上蛋白质组分的改变情况进行研究。例如1969年布莱纳(Brener)等曾用淀粉凝胶电泳分析新鲜红细胞膜蛋白与保存一定时间后红细胞膜蛋白;1971年穆尔(Moore)对常规方法保存的全血,红细胞膜上蛋白质改变情况进行分析。本文使用硫酸十二醋钠盐(SDS)聚丙烯酰胺凝膜电泳分析冷冻前后红细胞膜蛋白,通过了解红细胞膜改变情况,进一步证明冷冻保存后红细胞结构完整,并肯定了其保存价值。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的快速脱色方法

以牛血清白蛋白为材料进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶固定后,用考马斯亮蓝R-250染色后比较传统脱色液(冰乙酸-甲醇溶液)和不同盐溶液(NACL、KCL、CUCL2)的脱色效果的结果表明:PAGE和SDS-PAGE胶,0.25和0.5MOL·L-1NACL,在70℃(PAGE)、50℃(SDS-PAGE)下脱色,约2￣4H,效果好,灵敏度高,背景低。     

细菌蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定

细菌蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定华西医科大学口腔医学院口腔生物医学工程重点实验室成都６１００４１黄毅早在１９０８年,电泳现象就已被发现,Ｔｉｓｅｌｉｕｓ于１９３７年对电泳仪器作了重大改进,随后电泳技术才日益普及并成为鉴定生物大分子的基本工具。Ｆｏｗｌ...     

聚丙烯酰胺凝胶电泳方法的一些改进

聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质时所使用的“高pH系统”的电极缓冲液,通常是Glycine-Tris缓冲液。这两种试剂比较贵,虽然可以重复使用,但消耗量大,不利于普及。此外凝胶的常规染色和脱色需要较长的时间。作者在研究天然橡胶蛋白质的分离分析时,对这些方法作了一些改进:使用“改进高pH系统”的电极缓冲液——硼酸、NaOH缓冲液、改进分离凝胶的制备,并采用了快速染色和脱色,缩短了试验的时间。本法应用于人血清蛋白的测定,亦得到满意的结果。材料与方法 1.天然橡胶的蛋白质新鲜天然胶乳用2％醋酸凝固(5∶1v/v),用压榨的方法取出天然橡胶乳清(乳清相当于人血清),可溶性蛋白质存在于乳清中。 2.正常人血清湛江医学院附属医院提供。     

重组人绒毛膜促性腺激素嵌合肽12的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜隔离形成收集槽这两步改进 ,从包涵体抽提液中一步纯化了目的表达产物。结果表明 ,一次上样总蛋白质量为 3～ 4mg的PAGE ,可获得 5 0～ 1 0 0 μgCP1 2蛋白 ,其相对均一性达到 95 %。研究提示此改良的制备性PAGE新技术 ,是一种分离纯化低分子量目的蛋白质的好方法