蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

四平地区六种优势蝗虫精巢发育的动态变化

在吉林省四平地区对6种优势蝗虫进行野外罩养,从成虫出现到死亡期间,对蝗虫精巢发育动态变化进行解剖学测量、统计分析和组织学观察。结果表明,蝗虫成虫刚出现时精巢发育水平较高,精巢长度显著增长但宽度增长差异不显著,随着虫体发育精巢体积达到峰值后出现下降趋势。不同种蝗虫精巢发育具有明显的种间差异,成虫出现时其精巢发育水平依次为长翅素木蝗>黄胫小车蝗>绿牧草蝗>素色异爪蝗>条纹异爪蝗>异翅负蝗,并且各蝗虫类群精巢发育的体积动态变化各不相同,体现出各蝗虫类群精巢生理功能的强弱。组织学观察显示,蝗虫发育不同时期精巢内以不同类型的精母细胞为主,精巢体积增长是精母细胞增长和成熟精子积累的结果,精巢体积下降为交配活动导致的大量精子外排以及其生理机能减退所至。     

青蛙精母细胞的减数分裂制片及观察

动物细胞减数分裂的实验通常用蝗虫精巢作材料,制成切片或者压片。该材料虽有不少优点,但现在许多地区蝗虫的来源已较困难。因此,我们参照有关资料,用青蛙精巢制作细胞悬液滴片观察精原细胞的减数分     

细胞减数分裂实验的简便方法

以蝗虫为材料做常规的细胞减数分裂实验,精巢经过固定后,需要较长的染色时间:30—60分钟(《中学生物学实验手册》)或2—3小时(《遗传学实验》刘祖洞等编),不易作为学生课堂实验,更难让学生了解实验的全过程。我用蝗虫的活体材料,不经固定直接染色观察,缩短了染色及整个实验过程的时间,可在一课时内完成,效果亦很好。在实验前两三天,于天气晴朗的中午,让学生到高     

蝗虫性细胞减数分裂永久玻片的制备方法

性细胞减数分裂是一个复杂的有丝分裂。在动物方面,雄性蝗虫是很好的材料,因为它的染色体数目少(■:2n=23,xo),蝗虫的种类很多,用任何一种都可以,从精巢里一般可得到大量减数分裂的图像。观察减数分裂的方法多采用临时压片法,其操作简便,染色体不易丢失,但标本不能长期保存,所以必须制备永久玻     

镉对黑斑蛙精巢组织结构的毒性效应

为了研究镉对两栖动物精巢组织结构的影响,用不同浓度Cd2 溶液对黑斑蛙(Rana nigromaculata)成体隔日皮下注射染毒,光镜下观察精巢组织的显微结构变化。结果表明,镉具有毒性效应,可以导致处理后的黑斑蛙精巢组织中的各级生精细胞、支持细胞和间质细胞受到损伤。对处理组和对照组的精巢组织分别用金属硫蛋白(MT)进行免疫组化定位观察,MT阳性颗粒在处理组和对照组均有表达,表达随处理组镉浓度的增大而减弱。     

小剂量电离辐射对哺乳动物细胞发生的影响

作者以年青的性成熟的雄性豚鼠做材料,用4伦的伦琴射线照射后,发现精巢精子染色体在有丝分裂后期发生染色体改组。分别在照射后经过1、3、6、30、60昼夜取被照射的动物之精巢,用(?)液固定,以(?)的醋酸洋红法染色。获得的重要结果略述如下:     

蟋蟀科睾丸减数分裂各相的观察

在生物学教学中,常用的昆虫实验材料是蝗虫,但目前蝗虫取材比较困难.根据本人几年来的实验观察,利用蟋蟀科昆虫的精巢进行减数分裂各相的观察,取材容易,制作方法简单,减数分裂各相界限清楚,染色体动态关系明显,且细胞核、细胞质界限清晰.     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

简易制备牛蛙精巢染色体——观察动物细胞减数分裂

简化常规染色体滴片的操作程序,对牛蛙精巢进行染色体制片,基本观察到精巢组织中细胞行减数分裂各阶段的染色体行为。实验结果表明．用牛蛙精巢制备染色体能相对简捷稳定的获得有效的实验结果．是一种观察动物细胞减数分裂行为的好方法。     

葱的花药—观察减数分裂过程的好材料

减数分裂一节,无论在高校或高中生物教学中都是很重要的.所以让学生亲自做这个实验,将对于加深理解和解决教学重点有极大的帮助.但是,传统做减数分裂实验所用的材料都是用蚕豆花粉或蝗虫精巢.这里介绍的葱花药作为减数分裂实验材料是许多材料所不及,其优点为:(1)染色体大;(2)染色体数目少,便于观察计数(z~n=16);(3)材     

17β-雌二醇对雄性剑尾鱼精巢和肝发育的影响

用组织学的方法研究了50μg/L 17β-雌二醇(E2)持续50 d暴露对剑尾鱼(Xiphophorus helleri)精巢和肝组织结构变化的影响.结果显示,剑尾鱼受E2暴露后,精巢内的精小囊数量减少,精原细胞发育停滞,精子数量稀少甚至没有;肝细胞胞质内出现脂肪空泡和脂肪沉积等脂肪肝症状.结果表明,E2具强雌激素效应,对剑尾鱼精巢和肝组织的损伤具有时间效应,随着暴露时间延长其损伤更严重,但都在其耐受范围之内,未造成鱼体的死亡.精巢组织结构损伤可作为检测水环境雌激素污染生物标记.     

17β-雌二醇对雄性剑尾鱼生长发育的影响

用组织学的方法研究了50μg/L 17β-雌二醇(E2)持续50d暴露对剑尾鱼精巢、肝脏和鳃组织结构变化的影响,结果显示,剑尾鱼受E2暴露后,精巢内的精小囊数量减少,精原细胞发育停滞,精子数量稀少甚至没有;肝细胞胞质内出现脂肪空泡和脂肪沉积等脂肪肝症状;鳃丝和鳃小片出现不同程度的肿胀、增生、融合现象.结果表明,E2具强雌激素效应.对剑尾鱼精巢、肝脏和鳃组织的损伤具有时间效应,随着暴露时间延长其损伤更严重,但都在其耐受范围之内,未造成鱼体的死亡.精巢组织结构损伤可作为检测水环境雌激素污染生物标记.     

应用VAN-Clear与低甲醛的病理组织处理改良方法的评价

目的探索一种可靠、稳定、高效、环保、可替代传统病理组织处理与制片方法的改良方法。方法选取10只实验大鼠,每只大鼠选取14种组织,每个组织均匀切成3块,第一块采用4%中性甲醛固定(改良中性甲醛组),第二块采用4%多聚甲醛固定(改良多聚甲醛组),第三块采用4%中性甲醛固定(传统中性甲醛组);两个改良组的组织经相应固定液固定后均用流水及75%酒精祛除组织的固定液,然后进入梯度酒精及VAN-Clear进行脱水透明;传统中性甲醛组在固定后不进行祛除固定液处理而直接入梯度酒精及二甲苯进行脱水透明。对比3组实验的HE、Masson、PAS及免疫组织化学染色效果和HE染色评分;比较取材室及技术室的甲醛、二甲苯及噪声污染的数据。结果两个改良组与传统组的HE、Masson、PAS及免疫组织化学染色效果及HE染色评分基本一致,3组HE切片的优良率均为100%,优级率均大于85%;甲醛及二甲苯检测结果远远低于我国的最高容许浓度,噪声监测优于中国环境噪声容许的夜间噪声标准。结论采用VAN-Clear以及低甲醛的病理组织处理改良方法可靠、稳定、高效、环保,可替代传统病理组织处理方法。     

蝗虫减数分裂的观察

观察减数分裂的材料很多。在动物材料中,蝗虫精子形成中的减数分裂是比较好的材料。蝗虫染色体数目较少(雄性2n=23,×0;雌性2n=24,××),染色体较大,易于观察。在同一玻片标本上能同时观察减数分裂各期的染色体,还可观察有丝分裂过程及精子的变态过程。其方法简介如下: (一)取材蝗虫雌雄个体易于区别,一般雄体成虫较小,其腹部末端如船尾状,雌体较大,腹部末端分叉。捕捉成体雄蝗,活体取其精巢。先将翅及附肢从基部剪去,沿腹     

克氏原螯虾精巢与输精管组织细胞原代培养方法初探

将剪碎的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)精巢与输精管组织块分别接种于含20?S、双抗以及添加了适量无机盐等的M199-MK、MEM、S20、Grace’s和L-15培养基中,25℃恒温静置培养。结果表明,在Grace’s培养基中,只有少量组织块贴壁。在其余培养基中,大多数组织块能在1～2周内逐渐贴壁,L-15和S20培养基培养效果最好。组织块贴壁后,一些成纤维细胞和上皮样细胞逐渐从组织块迁移出来。传代后组织块可继续贴壁并重新迁移出一些成纤维细胞与少量上皮样细胞。添加部分草鱼细胞系PSF或斜纹夜蛾细胞系Sl驯化的培养基进行培养,驯化培养基:新鲜培养基=1:5(v/v),结果表明,Sl驯化培养基能促进细胞的迁移。组织块一般可离体培养2～4个月,但是都未能形成细胞单层。胰蛋白酶消化后分散的虾细胞不能贴壁。     

蝗虫精母细胞减数分裂各时期的识别

蝗虫具有材料易得、染色体大、染色体数相对较少等优点, 被普遍用于观察精子发生中减数分裂各个过程。蝗虫精巢制片简单、快速, 但初学者普遍感到辨别分裂相较为困难。鉴于此, 文章以东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis (Meyen))精母细胞的减数分裂过程为例, 介绍如何根据染色体的数目及染色体构象, 识别减数分裂各个时期。此外, 文章也简要描述了东亚飞蝗精母细胞的有丝分裂及精子形成过程, 供初学者参考。     

超声波照射蝗虫卵的生物效应的研究

用固定频率、固定功率的超声波照射不同阶段的蝗虫卵,研究不同的作用时间对蝗虫卵孵化率和孵化时间的影响。探求超声波作用于生物所产生的效果及一些定量的数据,为今后研究超声波的育种和杀虫提供一些实验依据。结果表明:超声波对蝗虫卵的孵化率和孵化时间有明显的影响,既可以促进其孵化,也可以抑制其孵化,甚至导致其死亡。     

乌梢蛇精巢显微结构的年周期变化

用光镜观察了乌梢蛇(Zaocys dhumnades)精巢显微结构的年周期变化,并结合精巢重量、精巢体积及精巢系数的年周期变化探讨了其生殖规律。结果表明,乌梢蛇精巢重量、精巢体积、精巢系数、曲细精管直径、生精上皮厚度及组成均具有明显的季节性变化。据此将乌梢蛇精巢的年周期活动划分为6个时期,其精子发生属于非连续型,生殖周期的类型属于交配后型。用精巢系数的年周期变化作为参数来判定精子发生进程是可靠的。     

黑鲷DMRT1基因cDNA的克隆、组织表达谱及在性别逆转前后性腺中的表达

利用RT—PCR和3′-RACE的方法从黑鲷精巢中克隆丁DMRT1基因cDNA的部分序列。组织特异性表达分析表明DMRT1基因只在精巢中表达,半定量RT—PCR检测显示DMRT1基因在性别逆转前、性别逆转期和性别逆转后的精巢中的表达量无显著差异,在鱼类成体的精巢中,DMRT1的表达量可能不会因精巢结构或生理状态的改变而发生改变,而始终维持一定量的表达。