血卟啉光敏治癌的分子机理

本世纪初,科学家们就发现了血卟啉对人和哺乳动物癌瘤的光敏治疗作用。近年来,随着激光技术的发展,利用血卟啉加激光诊治癌瘤,在世界各国得到了广泛的应用。通常用血卟啉的诊断方法是:给患者静脉注射血卟啉,二天后用蓝色激光照射可能的患癌部位,渗入到癌组织中的血卟啉在蓝光的激发下,可发出红色的荧光,以此来诊断癌瘤的位置。治疗方法与诊断方法大体相同,只须把照射光源改为红色激光即可。光照后,癌瘤逐渐发黑、结痂,然后脱落痊愈。     

激光照射胚泡对家兔和小鼠的抗早孕研究

本文在家兔、小鼠上探索了激光的抗旱孕效应,观察到血卟啉衍生物(HPD)和激光的光化效应能使早期胚泡完全坏死和吸收,无流血和晚期流产现象,通过PNQ_3荧光分光光度计测定HPD在胚胎组织中的荧光谱,证实HPD对胚胎组织有亲和力,其对滋养叶细胞比对宫壁组织的亲和力大4倍,借以解释激光光化效应抗早孕的可能机理。     

激光小剂量血卟啉及OMA系统在支气管肺癌诊断上的应用

目的 :研究激光小剂量血卟啉及 OMA计算机系统在支气管肺癌荧光诊断的临床应用。方法 :以2 mg/kg剂量的血卟啉衍生物 ( HPD)对 3 7例患者进行荧光诊断 ,其中 2 2例为肿癌患者 ,1 5例为非肿瘤患者。以 OMA计算机系统记录和分析荧光光谱 ,数据经归一化处理。结果 :肿瘤患者的标本荧光强度 Itumor/Ino-mal总平均为 1 .2 4± 0 .0 8,非肿瘤患者的标本荧光强度 Itumor/Inomal总平均为 0 .98± 0 .0 6,两组 t检验显示 p<0 .0 1 ,有非常显著的差异 ,以前者下限 1 .0 5为诊断肿瘤标准 ,2 2例恶性肿瘤患者的检测值全部符合标准 ,1 5例非恶性肿瘤患者中除 2例鳞状化生比值高于标准为假阳性外 ,其余均符合标准 ,据此诊断准确率为94 .6%。结论 :2 mg/kg小剂量血卟啉可作肿瘤荧光诊断。     

几种血卟啉衍生物在中性水溶液中的聚集状态和光敏产生单线态氧量子产额的比较

通过稀释溶液导致吸收谱变化的分析,探讨了三种国产血卟啉衍生物(BHpd、YHpd和DHE)、血卟啉二盐酸(HPdHC)和原卟啉二钠盐(PpdSS)等五种卟啉类化合物在中性水溶液中的聚集状态。结果表明,YHpd和DHE的聚集体与BHpd和HpdHC的聚集体的结合方式可能不同,前两者结合得牢固,后两者结合得较为松懈。PpdSS的聚集形式介於上述两种情况之间。 用色氨酸光降解法测定了相近条件下用628nm光照时,五种卟啉类化合物中性水溶液中的单线态氧相对 量子产额。BHpd产生单线态氧的相对量子产额分别为YHpd和DHE的1.6倍和8.6倍,而HpdHC和PpdSS在表(?)上观察不到单线态氧的产生,它们本身却遭到较多破坏。 研究启示:由于BHpd和YHpd、DHE在聚集体的结合方式上的差异,它们的光动力的作用性更亦有所不同。     

Nd:YAP激光辐照对雨生红球藻生理效应的荧光分析

目的：Nd：YAP激光辐照对雨生红球藻生理效应的荧光分析j方法：利用Nd：YAG激光（功率10W,辐照剂量为15s、35s、55s）辐照雨生红球藻,在对辐照细胞进行生长测定以及色素吸收光谱分析的基础上,进一步利用激光共聚焦扫描显微镜（LSCM）,在波长488nm的Ar^＋激发光条件下,对细胞的自体荧光以及吖啶橙染色的细胞核荧光物质进行定位定量分析,获得细胞自发荧光光谱和细胞核荧光物质的荧光光谱。结果：①低剂量的Nd：YAG激光辐照（15s左右）对藻细胞有促长作用,生长速率提高20．3％,色素吸收峰的峰值提高25．3％。较高剂量的Nd：YAG激光辐照（35s、55s）对藻细胞生长有抑制作用,并有明显的致死、致突效应。②对自体荧光的分析结果表明,与对照组相比,低剂量激光辐照组的细胞,在荧光光谱的峰型及峰值上变化不大,在682nm处均有较强的荧光发射,而高剂量激光辐照组的细胞多无明显的荧光发射。③对细胞核荧光物质的分析,雨生红球藻细胞在530nm（DNA）和640nm（RNA）处均有荧光发射峰。与对照组相比,低剂量激光辐照组的DNA荧光发射有所增强,但RNA的荧光发射则有所减弱;高剂量激光辐照组的核物质荧光发射谱,在峰型上与对照组存在差异,荧光强度也明显下降。结论：低剂量的Nd：YAP激光辐照对细胞核的DNA合成与复制有一定的刺激作用,可促进光合色素的合成并提高其对光能的吸收效率,从而增强光合活性,促进细胞的增殖与生长;高剂量激光辐照则对细胞的DNA有损伤作用,是致死率上升并发生突变的可能原因。     

超短脉冲技术测量癌细胞荧光光谱与荧光寿命

研究用于癌症诊断与治疗的光敏剂血卟啉（hematoporphyrin derivative,HPD）的超快光动力学过程,采用超短脉冲激光光谱技术和皮秒时间相关单光子计数系统,测量经血卟啉培养的活体癌细胞与正常细胞的荧光光谱、荧光寿命特性及荧光峰值强度随时间变化曲线,并测量单一细胞内部不同位置的荧光寿命特性,观测到：癌细胞样品在645 nm处具有特有的光谱谱峰;癌细胞样品荧光寿命的快成分约150 ps慢成分约1200 ps,而正常细胞样品快成分约300 ps慢成分约2500 ps;癌细胞样品的荧光峰值强度经12小时衰减约10%,而正常细胞样品衰减约55%;在细胞内部荧光寿命300 ps的快成分十分显著,且中心部位血卟啉浓度最高.癌细胞与正常细胞的荧光光谱、荧光寿命特性及荧光峰值强度随时间变化曲线相差十分明显,反映了癌细胞与正常细胞对血卟啉亲和特性有显著的差异,测量结果确认了荧光光谱技术诊断与治疗癌症的可行性,并对发展超短脉冲激光光谱技术早期诊断与治疗癌症具有重要的指导意义和临床应用价值.     

ZnS量子点的生物合成及对阿萨尔基亚芽胞杆菌的标记

通过微生物合成金属量子点是目前研究的热点。本研究通过白色念珠菌合成ZnS量子点,对合成的量子点用高分辨透射电镜(HR-TEM)和X射线衍射(XRD)进行表征,用生物合成的ZnS量子点标记生防菌阿萨尔基亚芽胞杆菌,为建立生防菌阿萨尔基亚芽胞杆菌的荧光探针标记提供科学依据。实验结果表明,ZnSO4浓度为20 mmol/L时白色念珠细胞内合成ZnS量子点,通过反复冻融破细胞壁提出胞内ZnS量子点,紫外-可见光谱(UV)检测ZnS量子点在348 nm处显示有吸收带,HR-TEM测其粒径约7. 06 nm,荧光分光光谱分析量子点激发波在280 nm和363 nm,XRD显示ZnS量子点特征峰。ZnS量子点中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联剂的芽胞杆菌样本的标记效率明显高于不加偶联剂的样本。白色念珠菌合成的ZnS量子点可以用于微生物标记。     

血卟啉在H-22肝癌荷瘤小鼠体内的分布

目的探讨声敏剂血卟啉衍生物在肿瘤组织中的富集情况,以便在给药后超声结合血卟啉治疗肿瘤时选择最佳的超声处理时间。方法H-22肝癌荷瘤小鼠尾静脉注射HpD后,不同时间点取材,采用荧光分光光度法测定不同组织提取液中HpD的荧光强度,研究HpD在不同组织中的分布以及代谢变化。结果给药后2 h肿瘤组织以外的其他各组织内(血浆、肝、肾、皮肤、肌肉)血卟啉含量均达到其代谢过程的最高点,后逐渐下降;肿瘤组织中的HpD含量注射后不断上升,6 h时达到顶峰,随后又开始下降,10~24 h代谢比较缓慢,表现为肿瘤组织中对HpD的滞留作用,24 h时肿瘤组织中的HpD含量高于其他各组织,48~72 h趋于稳定在较低水平。结论提出了不同部位的肿瘤应选择各自适当的时间点进行超声处理。     

血卟啉衍生物——组蛋白系统照光后光动力学效应的观察:一种新荧光物质的生成

血卟啉衍生物(Hpd)和组蛋白经照光产生一种新荧光物质.其发射波长为460nm,激发波长为370nm.当照光在43℃高温情况下进行时,高温对Hpd的光动力学效应有协同作用.用牛血清白蛋白、血红蛋白,核糖核酸酶、胰蛋白酶及培养的中国仓鼠细胞代替组蛋白均能生成新荧光物质.而所测试的半胱氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸及组氨酸中.唯有组氨酸可产生相似的荧光物质.这种荧光物质推测是Hpd与组蛋白中组氨酸所形成的一种加成物.形成新荧光物质的光化学反应机制主要是单线态氧(~1O_2)的氧化作用.     

YHPD及其分离组份在溶液中和CHO细胞内的吸收和荧光特征

本文报道了YHPD及其用HPLC方法分离得到的四种主要组份在溶液中和CHO细胞内的吸收和荧光特性.YHPD分离组份d在稀溶液状态(0.5μg/ml)与其它三种组份不同,表现出较稳定的聚集态性质,YHPD及组份摄入细胞后,荧光光谱和Soret吸收峰明显红移,荧光量子产额增高.同时看到YHPD的吸收和荧光特性受环境中H~ 浓度的影响     

不同激发波长的人体血清自体荧光光谱分析

利用分子荧光光度计测定了激发波长分别为457.9 nm,476.5 nm,488.0 nm,501.7 nm和514.5 nm光的血清自体荧光光谱,并对这些光谱的特征和产生机制进行了分析。实验和分析结果表明:在500 nm~750 nm的波长范围内,518 nm和640 nm附近有两个比较明显的荧光峰;590 nm处有一个非常弱的峰。它们可能主要来自于血清中胆红素,核黄素及其衍生物,β-胡萝卜素,锌卟啉及原卟啉IX等的贡献。这些研究结果将为利用氩离子激光器作为光源进行光谱诊断研究选择最佳激发波长提供一些参考。     

基于激光共聚焦扫描显微技术分析激光对扁藻的影响

本文以亚心形扁藻为样品,波长1 341 nm的Nd∶YAP激光为光源,通过激光共聚焦扫描显微技术,研究Nd∶YAP激光辐照亚心形扁藻对亚心形扁藻叶绿体自体荧光强度和叶绿体面积大小的影响。Nd∶YAP激光辐照后的亚心形扁藻通过488 nm Ar^+激光激发获得亚心形扁藻自体荧光图像及其荧光光谱。结果表明,试验中除(10 W,60 s)辐照剂量组外,其余辐照剂量组均提高了亚心形扁藻的自体荧光强度,且所有的辐照剂量组均增大了亚心形扁藻的叶绿体面积。Nd∶YAP激光可刺激亚心形扁藻的叶绿体发育,促进藻细胞的生长,改善叶绿体光合作用的活性。     

肽链及蛋白质N-末端喹喔啉类荧光衍生物的形成

蛋白质及肽链N-末端经Dixon转氨后的羰酰基与邻苯二胺作用可形成喹喔啉类荧光衍生物.形成这一发色团的过程较为缓慢;喹喔啉短肽的激发(Ex 293-305nm)与发射(Em 360-365nm)波长随肽链氨基酸残基组成不同而有一定变化;喹喔啉胰岛素荧光衍生物的激发光波长为Ex318nm,发射波长为Em 353nm.喹喔啉三肽的荧光在乙二醇溶液中的变化因其氨基酸残基组成的不同而有差异.以上结果提示:喹喔啉类荧光衍生物可能作为研究蛋白和肽结构与功能的一种手段.     

紫外激光消融主动脉斑块和感生荧光光谱观测

利用XeCI准分子激光辐照主动脉血管正常组织和斑块组织,观察到组织被激光消融。消融所产生的凹坑与辐射时间呈对数直线关系。308nm激光感生的血管壁荧光光谱在可见波段出现二个荧光极大值,用二极值的相对强度之比可以判断正常或斑块组织。     

紫外激光消融主动脉斑块和感生荧光光谱观测

利用XeCI准分子激光辐照主动脉血管正常组织和斑块组织,观察到组织被激光消融。消融所产生的凹坑与辐射时间呈对数直线关系。308nm激光感生的血管壁荧光光谱在可见波段出现二个荧光极大值,用二极值的相对强度之比可以判断正常或斑块组织。     

紫外光动力疗法合并化疗治疗晚期急性淋巴细胞白血病初探

血卟啉衍生物（ＨｐＤ）被肿瘤细胞吸收后,在长波紫外光（ＵＶＡ）辐照下,可以引发光动力杀伤肿瘤细胞效应。抽取白血病人静脉血,抗凝并加入ＨｐＤ,于充氧和流动状况下辐照ＵＶＡ,然后回输给病人,此即紫外光动力疗法（ＵＶＰＤＴ）。应用ＵＶＰＤＴ合并化疗试治了１０例曾经化疗未缓解或无效的晚期急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ患者）,其中ＣＲＩ例,ＰＲ７例,ＮＲ２例。近期疗效达８０％。提示ＵＶＰＤＴ不仅本身可以杀伤场细胞外,且能增强化疗作用。临床疗效和机理皆需进一步研究验证。     

紫光激发中药光敏剂用于早期胃癌的诊断

采用405nm紫光激发传统中药光敏剂(CpD4)发射的荧光中心波长在660nm。红色荧光能深入组织,因而能够应用在胃癌早期诊断及治疗中。本文测定了中药光敏剂的吸收光谱和发射荧光光谱,并提出了二种用于激发光敏剂的紫光光源。一种为“Hg-Xe”灯,发射峰为433nm;另一种为采用紫光LD,发射峰为405nm。这二种波长和中药光敏剂的吸收峰完全匹配。     

人体鼻咽组织的时间分辨自体荧光光谱研究

实验研究了在397 nm半导体脉冲激光激发下,人体离体鼻咽正常和癌变组织在600 nm荧光发射波长处的时间分辨自体荧光光谱特性。利用双指数衰减方程对时间分辨自体荧光光谱进行拟合后,获得相应的荧光强度随时间的指数衰减方程以及荧光平均寿命。人体鼻咽癌变和正常组织在600 nm处的自体荧光平均寿命分别为(2.94±0.51)ns和(4.29±0.71)ns,两者之间存在显著的差异。应用时间分辨光谱技术的诊断灵敏度和特异性分别为75%和100%。初步表明了时间分辨自体荧光光谱在早期鼻咽癌诊断的应用价值,该方法可望与传统的稳态荧光光谱结合起来,进一步提高早期鼻咽癌荧光诊断的准确率。     

血卟啉光动力作用对小鼠腹水肝癌细胞膜损伤的ESR波谱研究

已知血卟啉衍生物(以下简称HPD)能较长时间潴留在癌组织内,在可见光或低能量激光照射下受激,可以破坏生物分子和杀伤癌细胞。细胞膜在此过程中有肿胀和通透性发生改变等现象。然而,HPD对细胞膜类脂分子的物理性质有何影响未见报道。为此,我们用脂肪酸噁唑氮氧自由基自旋标记小鼠     

固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞的影响

为了为利用量子点标记细胞、组织,进一步研究其功能提供新的方法,本实验观察了3种发射波长的量子点（quautum dost,QDs）对所标记的小鼠腹腔巨噬细胞和正常皮肤的影响。利用发射波长610mm的红色荧光水溶液（量子点610）、发射波长为523mm的绿色荧光水溶液（量子点523）和发射波长576nm的黄色荧光脂溶性溶液（量子点576）的3种量子点（5mg／ml）以及具有吞噬能力的小鼠腹腔巨噬细胞、正常皮肤为载体,观察不同的除菌方式、温度、封片剂及固定剂对量子点标记细胞、组织的影响,为量子点在生物体内的应用及在生物制片过程中对其性能的影响等研究奠定基础。