大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响

给雄性、雌性和雄性去势大鼠皮下注射大豆黄酮［３ｍｇ／（１００ｇ体重·天）］１６天。结果：雄性大鼠日增重提高１４．７％（Ｐ＜０．０５）,耗料与增重比降低１２．０％,后腿肌重和后腿肌总ＲＮＡ含量显著增加,而总ＤＮＡ含量无显著变化;血清脲氮水平显著下降,血清睾酮、雌二醇、生长激素和β－内啡肽含量显著提高。雄性去势大鼠日增重、后腿肌重无显著变化,血清睾酮、生长激素和β－内啡肽水平虽显著高于对照组,但睾酮水平仅为同等条件下完整大鼠的８％左右。雌性大鼠日增重降低１９．０％（Ｐ＜０．０１）,耗料与增重比提高１７．８％,血清睾酮、雌二醇和生长激素水平显著降低。试验结果表明：大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响呈现性别差异,对雄性大鼠肌肉生长的促进作用依赖于睾丸的内分泌机能。     

Ghrelin及其类似物BIM-28131、BIM-28125对大鼠心衰模型肌肉生长抑制素表达的影响

目的:探讨Ghrelin及其类似物对大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型肌肉生长抑制素表达的影响。方法:实验组慢性心衰模型大鼠分别注射两种不同浓度的ghrelin、ghrelin类似物BIM-28125和BIM-28131(50和500 nmol/kg/天)而对照组则注射等量的安慰剂。通过渗透微型泵给药,RT-PCR和免疫印迹反应检测肌肉生长抑制素的表达,并且测定腓肠肌的重量以及血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与给予安慰剂的CHF大鼠相比,假手术组大鼠腓肠肌肌肉重量显著增加;高浓度的ghrelin类似物BIM-28125和BIM-28131可使肌肉生长抑制素m RNA的表达显著减少;两种浓度的ghrelin、BIM-28131及低浓度的BIM-28125可使肌肉生长抑制素蛋白表达明显减少。实验中使用的药物均能够缓解CHF动物模型血浆TNF-α水平的增加。结论:在CHF动物模型,应用ghrelin及类似物BIM-28125和BIM-28131后,肌肉生长抑制素的表达明显减少,这可能是由于抗炎作用导致的。     

小鼠肌肉生长抑制素基因短发夹RNA促进MyoD在C2C12细胞中的表达

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族,主要功能为负向调节骨骼肌的生长.肌肉生长抑制素基因敲除小鼠肌肉出现显著增加,而将干涉该基因的短发夹RNA注射并电击转化入大鼠胫前肌则引起肌肉重量、肌纤维以及MHCⅡ表达的增加.通过与小鼠肌肉生长抑制素基因表达载体共转染HEK293细胞,筛选到两条能够高效抑制小鼠肌肉生长抑制素基因表达的小干涉RNA.构建了这两条小RNA的表达载体Mst-shRNA1和Mst-shRNA2,用其分别转染小鼠C2C12成肌细胞,并通过G418药物筛选和流式细胞仪富集整合了短发夹RNA表达载体的阳性细胞.通过采用Real-time PCR和Western blot分析,检测到在分别整合了Mst-shRNA1和Mst-shRNA2的C2C12细胞中,内源性肌肉生长抑制素基因的mRNA水平分别下降了10.2%和35.5%,蛋白质表达则分别下降了29.3%和64.7%.同时,在这两组中MyoD的表达上升了24.4%和40.4%,证明通过RNA干涉实现的肌肉生长抑制素基因的抑制导致了下游MyoD基...     

济元阳口服液主要药效实验研究

以济元阳口服液7g/kg、14g/kg灌胃,使小鼠性器官、副性器官重量显著增加,去势大鼠副性器官亦有增加;小鼠附睾精子数量增加,精子活率提高,并能对抗环磷酰胺所致精子数量与活力下降,雄性小鼠及去势大鼠交配能力均有增强;肾阳虚小鼠体重、胸腺指数上升,自由活动、游泳耐力及耐寒能力均有所增强,以上实验结果表明,济元阳口服液有补肾壮阳、生精长力之功效。     

镉在大鼠前列腺组织内的蓄积

为比较重金属镉在去势与非去势雄性大鼠前列腺组织内蓄积量的变化,将60只健康雄性SD大鼠随机分为六组:对照组、去势对照组、低剂量镉组(2.5 mμmol·Kg^-1)、高剂量镉组(20 mμmol·Kg^-1)、去势低剂量镉(2.5 mμmol·Kg^-1)组、去势高剂量镉(20 mμmol·Kg^-1)组,18个月后取材进行实验.利用原子吸收分光光度法检测大鼠前列腺组织中重金属镉含量.与非去势对照组相比,各去势组大鼠前列腺组织内镉含量明显降低;注射镉后,大鼠前列腺组织镉含量明显高于对照组,但高、低剂量组之间无显著差别.实验表明长期镉暴露后,前列腺组织内镉含量明显增加;经去势手术的大鼠,长期镉暴露后前列腺组织内镉含量未升高,但机制并不明确.     

鱼肝油酸钠所致大鼠去势动物模型的实验研究

采用５ ％ 的鱼肝油酸钠（Ｓｏｄｉｕｍ ｍｏｒｒｈｕａｔｅ, ＳＭ） 直接注射入大鼠睾丸内, 结果发现大鼠睾丸萎缩变小; 曲细精管及间质组织完全变性坏死; 血清睾酮含量显著下降; 定量观察指标显示注射ＳＭ 大鼠的性功能基本丧失。此法操作简单, 安全有效, 可以替代动物的手术去势方法。     

雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响

目的探讨雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响。方法选用雄性SD大鼠随机分为37组,分别为:35个不同雌/雄激素比例组、正常和去势对照组。给药组分别注射不同配伍剂量的雌/雄激素、对照组均注射生理盐水各一个月。最后一次注药后24h取血、处死、取材,称取前列腺重量,测量体积,并计算脏器系数。结果当丙酸睾丸酮给药剂量分别为每只鼠0.02、0.5、2.5和12.5mg时,均未见器官增生程度与苯甲酸雌二醇注射剂量呈负相关。丙酸睾丸酮给药剂量每只鼠为0.1mg时,随着苯甲酸雌二醇注射量增加,前列腺体积及其系数均增大,而当每只鼠苯甲酸雌二醇注射量达到50μg/kg时,器官增生程度不再随苯甲酸雌二醇注射剂量增加而增加。结论雌激素发挥作用需以雄激素存在为前提,雌激素并非总是呈现对抗雄激素促进前列腺增生的作用,而是在一定范围内协同雄激素促进前列腺增生。     

高脂饮食和地塞米松联合诱导胰岛素抵抗大鼠模型

目的用高脂饲料＋地塞米松（dexamethasone,DEX）隔日腹腔注射建立实验性胰岛素抵抗大鼠模型,研究该模型糖代谢、脂代谢和激素水平等方面的变化。方法采用Wistar雄性大鼠,分为正常对照组、高脂组、DEX组（1mg/kg,i.p.）和高脂＋DEX组（1mg/kg,i.p.）,连续观察8周,每周测定大鼠空腹血糖,分别于造模第2周和第8周测糖耐量,8周后处死大鼠,测定胸腺、脾脏、肝脏等脏器重量。结果高脂饲料能加重腹腔注射DEX造成的空腹血糖升高,造模第8周空腹血糖（7.7±0.7）较空白组（6.5±0.6）显著升高。使模型动物糖耐量明显异常,肝糖原、肌糖原含量显著增加,血浆胰岛素及游离脂肪酸水平显著升高,各脏器指数明显增加。结论高脂＋DEX隔日腹腔注射能成功诱导胰岛素抵抗大鼠模型,这种造模方法较单纯注射DEX或单纯高脂饲养成模率高,造模周期短。     

硫化氢对1型糖尿病大鼠膈肌NO含量和iNOS活性的影响

目的：观察硫化氢（H2S）对1型糖尿病大鼠膈肌一氧化氮（NO）含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的影响。方法：将32只雄性SD大鼠随机分为4组：正常组（NC组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病治疗组（DM + NaHS组）和NaHS对照组（NaHS组）（n=8）。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备1型糖尿病大鼠模型,造模成功后第4周起,DM + NaHS组和NaHS组大鼠腹腔注射NaHS溶液14μmol/kg干预治疗。连续注射5周后,测大鼠空腹血糖值（FBG）和膈肌重量/体重量比（DW/BW）;HE染色观察膈肌显微结构变化;利用NOS分型测试盒测膈肌组织iNOS活性;硝酸还原法测定膈肌组织NO含量;利用RT-PCR和Western blot分别检测膈肌组织iNOS mRNA和蛋白表达。结果：与NC组比较,DM组大鼠FBG显著升高,膈肌显微结构损伤明显,DW/BW下降,膈肌组织iNOS活性和NO含量显著增加,iNOS mRNA和蛋白表达明显增高,NaHS组各项指标差异无统计学意义。与DM组比较,DM + NaHS组膈肌显微结构明显改善,DW/BW增高,膈肌组织iNOS活性和NO含量明显下降,iNOS mRNA和蛋白表达显著降低。结论：外源性补充H2S可能通过下调膈肌组织iNOS活性和蛋白表达,降低NO含量,进而保护糖尿病大鼠膈肌的功能。     

睾丸切除对麝鼠香腺形态和 麝鼠香成分的影响

对麝鼠(Ondatra zibethicus)去势,探讨睾丸切除对麝鼠香腺形态和麝鼠香成分的影响。6只成年雄性麝鼠,随机分为去势组和对照组,每组3只。麝鼠香腺内香液排尽后,施行去势手术。去势30 d后,麻醉处死动物,采集和分离麝鼠的血清备用,然后采集麝鼠香。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和麝鼠香中的睾酮(T)含量。取香腺,测量其长度,H.E染色观察香腺组织结构的变化,并测量腺细胞直径。同时,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)测定麝鼠香化学成分。去势组的血清中睾酮含量极显著低于对照组(t=5.270,P 0.01),去势组麝鼠香中睾酮含量显著低于对照组(t=3.229,P 0.05)。形态学上,去势组和对照组的麝鼠香腺长度无显著差异(t=1.243,P 0.05)。组织学上,去势组腺细胞直径显著缩小(t=9.434,P 0.01)。麝鼠香中,去势组和对照组含量最高的3类成分相同,均为大环类、类固醇和脂肪酸。其中,去势组的大环类物质含量显著升高(t=﹣3.084,P 0.05),而类固醇含量极显著降低(t=3.407,P 0.05)。完成建立麝鼠去势模型,切除睾丸后导致麝鼠香腺腺细胞形态和麝鼠香成分发生了变化。     

促乳素对促性腺激素诱导小鼠卵巢雌激素和孕酮形成的影响

给幼龄小鼠（２１－２３日龄）注射８ＩＵＰＭＳＧ促滤泡生长。４８ｈ后给一组动物只注射８ＩＵｈＣＧ,另一组注射８ＩＵｈＣＧ加１００μｇ促乳素（ＰＲＬ）。３,１２和２４ｈ后杀死动物,取血和卵巢,从后者分离颗粒细胞（ＧＣ）作离体培养。测定血清和培液中雌激素和孕激素含量表明,ＰＲＬ显著增强ｈＣＧ所致血中孕酮含量上升,但抑制ｈＣＧ所致雌激素的产生;对ＧＣ离体培养的测定结果也完全相同,上述结果表明,ＰＲＬ抑制Ｈ     

缺氧对冻伤兔足皮肤温度和肌糖元含量的影响

采用测定冻伤兔足皮肤温度和肌糖元含量的方法,间接观察在缺氧条件下兔足重度冻伤血液循环和肌肉能量代谢的改变。实验结果表明：平原冻伤组、急性缺氧冻伤组、缺氧两周冻伤组冻足皮肤温度和肌糖元含量均明显降低。经４０℃０．１％的洗必泰液多次温浸治疗冻伤兔足,平原冻伤组和急性缺氧冻伤组的治疗足皮肤温度和肌糖元含量均高于未治疗足,无明显差异,提示在此种条件下冻足的血液循环障碍可能更加严重。     

肌肉异位表达pGHRH的两种质粒对大鼠的促生长作用

构建了两种猪生长激素释放激素(GHRH)的肌肉特异表达质粒ppG-A53f-H6-GHRH(ppG-H6)及ppG-A53f-H4-GHRH(ppG-H4).通过对大鼠进行肌肉注射,并于注射后分别记录0,3,7,11,14,17,20,24,27,31,34,38以及第41天的体重变化结果,同时分析了第20、27、34和第41天的血清生长激素(GH)浓度,以研究促生长表达质粒在动物体内的促生长作用.通过研究表明,外源的GHRH表达质粒在肌肉中获得了表达,并使动物体内的GH水平维持在一个相对稳定的较高水平上,导致的直观效果表现为:通过肌肉注射表达质粒ppG-H6对大鼠的生长有促进效果,在第34天的净增重显著于对照组((200.57±3.99)gvs(185.85±9.45)g,P<0.05).实验结果预示,利用注射肌肉特异异位表达GHRH蛋白可能促进动物生长.     

不同灌溉量对头状沙拐枣幼苗生长和生理特性的影响

采用盆栽试验,分析了不同水分梯度下(田间持水量的30%、40%、50%、60%和85%)头状沙拐枣幼苗的干物质累积分配特征及生理生化特性,以探明头状沙拐枣幼苗能够良好生长的土壤水分条件。结果表明:(1)随灌溉量增加,沙拐枣幼苗同化枝的干物质累积量显著增加,但在最高灌溉量下同化枝出现严重病害。(2)在生长旺季,增加灌溉量后,同化枝的干物质分配比例也均显著增加,平均可占整株的39.5%;季末,分配比例受灌溉量的影响明显减弱,平均占整株的12.3%。(3)在整个生长季同化枝的全氮和硝态氮含量均处于较高水平,随灌溉量增加全氮含量有降低趋势,硝态氮含量则波动变化。(4)灌溉量对植株同化枝生理特性的影响主要表现在生长旺季。在最低灌溉量下,同化枝丙二醛含量明显较高,但植物可通过大量累积脯氨酸和可溶性糖来降低体内水势,以提高植物抗旱性;在最高和最低灌溉量下,同化枝硝酸还原酶活性和叶绿素含量均显著下降。研究认为,沙拐枣幼苗虽具有较强的抗旱性,但灌溉量过低或过高对同化枝的生长、氮素还原和叶绿素累积均有明显的抑制,因此中等灌溉量(田间持水量的50%~60%)对头状沙拐枣幼苗生长更有利。     

17—β—雌二醇诱发SD大鼠催乳素瘤形成过程中催乳素基因的表达

给SD大鼠皮下埋植内含17－β－雌二醇硅橡胶管30、60、120天后,发现大鼠垂体重量随给药时间延长呈持续性增加;用放射免疫法测定血浆催乳素（prolactin,PRL)含量,亦明显依次升高;用Northern印迹杂交方法检测垂体细胞中PRL基因,发现PRLmRNA含量也依次有显著增加,但其增加却远低于血浆PRL含量的增加,提示17－β－雌二醇除了促进PRL基因的转录外,还可能增加PRL mRNA的翻译效率。     

17－β－雌二醇诱发SD大鼠催乳素瘤形成过程中催乳素基因的表达

给ＳＤ大鼠皮下埋植内含１７－β－雌二醇硅橡胶管３０、６０、１２０天后，发现大鼠垂体重量随给药时间延长呈持续性增加；用放射免疫法测定血浆催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）含量，亦明显依次升高；用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交方法检测垂体细胞中ＰＲＬ基因，发现ＰＲＬｍＲＮＡ含量也依次有显著增加，但其增加却远低于血浆ＰＲＬ含量的增加，提示１７－β－雌二醇除了促进ＰＲＬ基因的转录外，还可能增加ＰＲＬｍＲＮＡ的翻译效率。     

猕猴前列腺增生动物模型的建立

利用猕猴（Macaca mulatta）建立前列腺增生动物模型,并探讨丙酸睾酮（TP）诱导猕猴前列腺增生模型的最佳剂量及给药时间。雄性猕猴12只,随机分为3个剂量的实验组和对照组共4组,每组3只。去势8周后,皮下注射给药。实验组按低、中、高剂量分别给予丙酸睾酮（TP）0.8、2.5、7.5 mg/(kg?d),对照组给予等体积溶剂,连续8周。B型超声探测去势前、去势后8周及TP干预4周、8周时猕猴前列腺体积,并采集分离各个实验阶段的血清备用。给药8周后处死动物,取前列腺,称量湿重,测量体积,计算前列腺重量指数及体积指数,H.E染色切片观察前列腺增生情况,并进一步测量腺腔面积及腺上皮细胞高度。同时,采用ELISA方法测定血清及前列腺组织中二氢睾酮（DHT）水平。B型超声结果显示,去势8周时,各组猕猴前列腺体积均明显小于去势前（P < 0.05）。TP干预4周及8周时,各剂量组猕猴前列腺体积均显著大于对照组（P < 0.05）,且在干预4周TP中剂量组达到最佳效果（P < 0.01）。而TP干预4周与8周相比,各组间并无显著性差异（P > 0.05）。解剖结果显示,各实验组猕猴前列腺湿重、体积及脏器指数均明显大于对照组（P < 0.05）,且在中剂量组达到最大值。而显微图像分析结果显示,实验组猕猴前列腺上皮细胞增生,与对照组比较,各剂量组猕猴前列腺腺腔面积明显增加（P < 0.01）,腺上皮细胞高度明显增高（P < 0.01）。二氢睾酮（DHT）水平检测结果显示,与对照组相比,药物干预后各实验组猕猴血清中DHT含量明显增高（P < 0.01）,且在中剂量组达到最大值。TP干预4周与8周相比,各组间并无显著性差异（P > 0.05）。同时,各实验组前列腺组织中DHT含量相较于对照组也明显增高,但剂量-效应关系不显著,中剂量组优于高、低剂量组。TP药物干预去势猕猴可成功建立猕猴前列腺增生模型,初步判定较为适宜的造模条件为丙酸睾酮给药剂量2.5 mg/(kg?d),给药时间4周。     

丹皮多糖-2b对肾上腺素模型小鼠降血糖作用研究

目的　观察丹皮多糖-2b(PSM-2b)对肾上腺素模型小鼠血糖的影响。方法　采用300μg·kg-1肾上腺素腹腔注射复制小鼠高血糖模型。将小鼠随机分为三大组,各大组分别连续灌胃1周、2周或3周。每大组又分为六小组:对照组、模型组、阳性(降糖灵)组、PSM-2b大剂量(90mg·kg-1)组、中剂量(60mg·kg-1)组、小剂量(30mg·kg-1)组。按葡萄糖氧化酶法测血糖,按苯酚-硫酸法测肝糖元含量。结果　PSM-2b能够显著降低肾上腺素模型小鼠的高血糖,且其降血糖作用呈一定的量效关系。PSM-2b还能够促进血糖转化为糖元,显著提高模型小鼠肝糖元的含量。结论　PSM-2b可以通过抑制肾上腺素升血糖作用而降低血糖。     

运动和制动大鼠腓肠肌内p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表达变化

本文旨在研究两种运动方式和制动状态下大鼠腓肠肌内p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表达变化,以揭示运动员不同的训练方式和停训状态下肌形态学改变的分子机制。Sprague Dawley(SD)大鼠随机分成对照组、耐力训练组、后肢悬垂组和离心训练组。耐力训练组接受跑台训练,悬吊组接受后肢悬垂,离心训练组接受坡度-16o的跑台训练。各组大鼠取腓肠肌,称取其重量,HE法测定骨骼肌细胞横截面积;免疫组化法测定p-Akt蛋白表达;免疫印迹法测定MuRF1、FoxO1的蛋白表达。结果显示,相对对照组,耐力训练组腓肠肌重量和细胞横截面积无显著变化,而离心训练组和后肢悬垂组显著降低;耐力训练组和离心训练组腓肠肌p-Akt蛋白表达显著增加,后肢悬垂组无明显变化。与对照组相比,耐力训练组MuRF1蛋白表达无明显变化,而离心训练组和后肢悬垂组则显著升高;耐力训练组FoxO1蛋白表达显著降低,而离心训练组与后肢悬垂组则显著升高。以上结果表明,增加活动的运动方式(耐力和离心训练)激活了Akt表达,但没有引起肌肉重量的增加;相反,离心训练和后肢悬垂均显著增加了MuRF1和FoxO1的蛋白表达,导致肌肉萎缩,提示MuRF1和FoxO1是造成肌肉萎缩的主要决定因素。     

睫状神经营养因子对大鼠去神经骨骼肌的营养作用

目的：了解睫状神经营养因子（CNTF）对去神经引起的肌肉萎缩的治疗作用。方法：离断SD大鼠一侧坐骨神经,连续给予CNTF20d,观察肌肉湿重、蛋白含量、肌纤维横截面积、收缩性能和残肢程度。结果：①给予0.2mg/kg的CNTF,可使损务侧肌纤维横截面积增加35％,肌肉湿重增加38％,胫前肌总蛋白含量增加24％,腓长肌强直收缩强度提高40％,显著改善肢残程度;②0.2mg/kg的CNTF作用明显强于0.05mg/kg的CNTF;③此目鱼肌（慢肌）比伸趾长肌（快肌）对CNTF更敏感。结论：CNTF能显著改善成年大鼠坐骨神经离断后骨骼肌的萎缩和功能丧失,该效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关。