血清S-100B蛋白和NSE含量变化评估脑损伤程度的意义

目的探讨颅脑损伤后血清S-100B蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化及其在损伤程度的临床意义。方法采用酶联免疫测定法检测90例颅脑损伤患者入院时及入院后6、12、24h和3、7天血清S-100B蛋白、NSE水平,并分析其与颅脑损伤严重程度的关系。同时选择30例健康体检者作为对照组进行比较分析。结果颅脑损伤后血清S-100B蛋白、NSE水平较对照组明显升高(P0.05或P0.01);重型组患者的血清S-100B蛋白和NSE水平明显高于轻、中型组患者(P0.05或P0.01);动态检测结果显示,血清S-100B蛋白在伤后12h达峰值(P0.05),NSE含量在伤后24h达峰值(P0.05),然后缓慢下降。GCS评分与S-100B、NSE浓度呈负相关(分别为r=-0.814,P0.01;r=-0.726,P0.05)。结论颅脑损伤后血清S-100B蛋白、NSE水平升高,其与脑损伤程度有较好的相关性,2种标记物水平对颅脑损伤程度有较高的评估价值。     

缺血缺氧脑损伤大鼠NSE和S-100β蛋白的变化及其临床意义

目的探讨缺血缺氧脑损伤大鼠神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100β蛋白（S-100β）的变化及其临床意义。方法75只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,再将实验组按造模后4 h、8 h、12 h和24 h不同时点分为4个亚组。利用夹闭双侧颈总动脉,并进行缺氧的方法制备模型。以放射免疫法（RIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定血清和脑组织中NSE和S-100β蛋白的变化。结果造模后24 h内,血清和脑组织中NSE和S-100β的含量是一个动态变化过程,呈同步变化的趋势,在12 h时均达到峰值。而且,实验组中各亚组的二者含量明显高于对照组（P〈0.01或P〈0.05）。结论缺血缺氧后不同时点NSE和S-100β的含量呈动态变化;二者可作为缺血缺氧后脑组织损伤程度及修复的一个临床参考指标。     

血清S100β蛋白和NSE水平与急性脑梗死患者预后关系的探讨

目的:探讨急性脑梗死(ACI)患者血清S100β蛋白及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化与预后的关系。方法:采用双抗体夹心ELISA法测对33例脑梗死患者及25例健康对照组的血清S100B蛋白水平进行测定;用电化学发光的方法对NSE含量的观察,并比较ACI患者在不同病情、不同梗死面积时的血清S100β蛋白和NSE含量变化,采用Pearson法对二者进行相关性分析。结果:脑梗死组患者血清S100β蛋和NSE水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。并且随着神经功能损伤程度的增高和梗死面积的增加,血清S100β蛋白和NSE含量亦明显升;S100β蛋白水平和NSE水平呈正相关(P<0.01)。结论:急性脑梗死患者血清NSE和S-100B蛋白浓度均明显增高。血清S100β蛋白和NSE水平可作为疾病诊断、判断病情及评估预后的重要参数。尤其适用于无法进行影像学检查的急性脑梗死患者。     

羊瘙痒因子263K感染仓鼠终末期脑中胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达和分布变化研究

为了探讨羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织中星形胶质细胞和神经元的数量及功能改变,利用免疫印迹、免疫组化方法研究了胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)在受染仓鼠各脑区中表达变化的特点,同时比较其与神经病理学改变及PrPSc沉积的关系.结果表明,感染终末期仓鼠的脑组织中GFAP表达量明显增高,与正常对照相比,大脑皮质、脑干和小脑区域GFAP着色细胞数量分别增高3.69、2.41和1.56倍.感染仓鼠脑组织NSE表达量低于正常对照,小脑、海马CA1区和大脑皮质NSE着色细胞数量分别仅为正常对照相应区域的22.5%、54.2%和53.9%.这些变化与PrPSc在脑组织中的沉积程度和空泡样变性程度相吻合.结果提示,GFAP和NSE的检测可分别很好地反映星形胶质细胞和神经元的数量及功能状态,成为在朊病毒病发病过程中重要的病理变化指标.     

碘过量对后代鼠脑NSE和GFAP表达的影响

目的观察碘过量对后代鼠神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白表达的影响。方法将断乳后一个月Wistar大鼠随机分为五组（NI、5HI、10HI、50HI和100HI）,饮用不同浓度的碘水,饲养3个月后雌雄合笼,取第二代60日龄鼠,测量血清甲状腺激素值,以NSE和GFAP为观察指标,研究后代鼠大脑的发育情况。结果各碘过量组甲状腺激素水平呈下降趋势,100HI组呈明显甲低状态;NSE的免疫组化和形态计量学显示：海马CA3区NSE阳性细胞的NA、VV,和灰度值随碘过量的严重程度而呈下降趋势,在100HI组呈明显的统计学差异。各组GFAP阳性星形胶质细胞阳性显色强弱未见明显不同。结论大鼠对碘摄入量的增高,只有在100HI组可以观察到以NSE表达降低为主要特点的脑发育障碍,其发病机理可能与碘过量所致的甲状腺功能低下有关。     

胚胎大鼠背根神经节细胞的分离培养、纯化及生物学特性的研究

本实验取E15 SD胎鼠的背根神经节,用胰蛋白酶消化分离成单细胞,在NBl培养基中培养,并通过差速贴壁法进行背根神经节神经元(DRGn)的分离纯化,用神经元特异性的烯醇化酶(NSE)鉴定培养的神经元。结果发现DRGn在体外合适条件下可存活3-4周,DRGn纯化培养的纯度达91％左右。DRGn在体外能存活较长时间,可作为神经科学研究的细胞模型。     

醒脑静对颅脑创伤的保护作用

目的：探讨醒脑静对颅脑损伤大鼠的保护作用及其机制。方法：健康雄性成年SD大鼠63只,随机分为3组（n=21）：假手术组、模型组、醒脑静组。模型组与醒脑静组均采用自由落体撞击伤方法制作创伤性脑损伤模型,假手术组仅行开颅术,不造成脑损伤。醒脑静组盆大鼠造模后10min内经尾静脉注射醒脑静注射液10ml／（kg·d）,模型组与假手术组则经尾静脉注射等量0．9％氯化钠溶液,三组均连续给药7d。给药第7天比较各组大鼠血清中S-100B蛋白和神经特异性烯醇化酶（NSE）水平,脑组织含水量,检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）含量,并对各组大鼠进行神经功能缺损评分。结果：与假手术组比较,醒脑静组和模型组均有明显的神经缺损,脑组织含水量、MDA、S-100B蛋白和NSE水平明显升高,SOD、GSH-Px含量明显降低;醒脑静组与模型组比较,醒脑静组神经缺损程度及脑含水量显著低于模型组,血清中MDA和NSE水平明显低于模型组,SOD、GSH-Px活性明显高于模型组。结论：醒脑静注射液对大鼠颅脑损伤具有保护作用,其作用机制可能与减轻颅脑损伤后脑水肿及抑制氧自由基反应、保护神经细胞有关。     

不同训练方法对大鼠骨折后脊髓功能恢复的影响

摘要 目的：分析不同训练方法对大鼠骨折后脊髓功能恢复的影响。方法：随机选取40只Sprague Dawley (SD)大鼠,建立骨折合并脊髓损伤模型,另取10只大鼠作为正常组。将建模成功的SD大鼠随机分为模型组、减重平板训练组、游泳训练组和转笼训练组。分别于损伤前和损伤后对大鼠的运动功能进行评测;术后35 d对大鼠的运动诱发电位（(motor evoked potentials, MEP）、脑源性神经生长因子（brain-derived neuotrophyic factor, BDNF）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase, NSE）和脊髓组织Cleaved Caspase-3表达量、肌纤维横截面积和直径进行评测。结果：损伤后,手术组大鼠运动功能评分均降低;经不同方式训练后,大鼠的运动功能评分均上升,14 d～35 d数据差异有统计学意义（P＜0.05）。术后35 d,与模型组相比,训练组大鼠运动诱发电位潜伏期均缩短,波幅、BDNF和NSE表达量、肌纤维横截面积和直径均增大,Cleaved Caspase-3表达量均降低,14 d～35 d数据差异有统计学意义（P＜0.05）。其中,减重平板训练组各指标检测结果最优。结论：三种训练方式均可促进大鼠骨折后脊髓功能恢复,其中减重平板训练组恢复效果＞游泳训练组＞转笼训练组。     

瑞芬太尼联合七氟烷对老年全髋关节置换术患者苏醒质量、应激反应和血清NSE、S-100β蛋白的影响

摘要 目的：探讨瑞芬太尼联合七氟烷对老年全髋关节置换术（THA）患者苏醒质量、应激反应和血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S-100β蛋白的影响。方法：选择2020年4月~2022年5月期间蚌埠医学院第三附属医院收治的85例老年THA患者,按照随机数字表法将患者分为观察组（七氟烷、瑞芬太尼复合麻醉,n=43）和对照组（瑞芬太尼麻醉,n=42）。观察并比较两组苏醒质量、镇静、镇痛情况、应激反应指标和血清NSE、S-100β蛋白水平、术后认知功能障碍（POCD）发生率以及围术期不良反应发生率。结果：与对照组相比,观察组的意识消失时间、拔管时间、苏醒时间更短（P<0.05）。观察组术后12 h肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）、皮质醇（Cor）均低于对照组同时间点（P<0.05）。观察组术后12 h视觉疼痛模拟评分（VAS）低于对照组同时间点;Ramsay镇静评分高于对照组同时间点（P<0.05）。观察组术后12 h NSE、S-100β蛋白低于对照组同时间点（P<0.05）。观察组的POCD发生率低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比无统计学差异（P>0.05）。结论：瑞芬太尼联合七氟烷应用于老年THA患者,镇静、镇痛效果较好,可提高苏醒质量,减轻应激反应程度,降低POCD发生率,调节血清NSE、S-100β蛋白水平。     

血清pNF-H、NSE、ESR与老年脊柱手术患者病情和术后认知功能的相关性研究

摘要 目的：研究老年脊柱手术患者血清神经丝蛋白H磷酸化亚型（pNF-H）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）以及红细胞沉降率（ESR）水平与患者病情以及术后认知功能障碍发生的相关性。方法：选取2017年6月到2021年6月在我院进行脊柱手术的老年患者82例,根据病情严重程度分为脊髓未损伤组（n=35）、脊髓不完全损伤组（n=27）和脊髓完全损伤组（n=20）,根据术后是否发生认知功能障碍（POCD）分为认知功能障碍组（POCD组,n=30）和无认知功能障碍组（No-POCD组,n=52）。比较各组患者术前和术后1天、3天、7天血清pNF-H、NSE和ESR水平。结果：（1）脊髓未完全损伤组患者血清pNF-H、NSE和ESR均显著高于脊髓未损伤组患者,而均显著低于脊髓完全损伤组患者（P<0.05）;（2）No-POCD组和POCD组在性别、年龄、体重、BMI、手术时间以及术中失血量均具有可比性（P>0.05）;（3）POCD组患者术前和术后1天、3天、7天血清pNF-H、NSE和ESR水平均显著高于No-POCD组患者（P<0.05）。结论：老年脊柱手术患者血清pNF-H、NSE和ESR水平与患者病情以及术后认知功能障碍发生有关,术前及术后血清pNF-H、NSE和ESR水平升高可能增加老年脊柱手术患者术后认知功能障碍风险,检测血清pNF-H、NSE和ESR水平有助于评估老年手术患者病情和术后认知功能障碍发生风险。     

COMPARATIVE STUDIES ON THE MYELIN PROTEINS OF BOVINE PERIPHERAL NERVE AND SPINAL CORD

Abstract— (1) Two myelin fractions of bovine peripheral nerve and spinal cord have been studied comparatively. Cholesterol as well as cerebroside content per mg of protein in the peripheral nerve myelin was less than that in the spinal cord myelin, while no significant difference in the total phospholipid content was noted.
(2) The basic proteins in myelin fractions were quantitatively estimated by disc gel electrophoresis. Around one-fourth of the total myelin protein in the bovine peripheral nerve was a basic protein with a mobility of 1.07 relative to lysozyme by Reisfeld's disc gel electrophoresis.
(3) The myelin proteins in the peripheral nerve were less completely solubilized than those of the spinal cord by treatment with deoxycholate as well as by Triton-salt solution. The protein fractions obtained from the peripheral nerve myelin by techniques similar to that for obtaining the proteolipids from the spinal cord myelin, contained different types of protein.
(4) 2',3'-Cyclic nucleotide 3'-phosphohydrolase activity in the peripheral nerve myelin was only one tenth of that in the spinal cord myelin. The Triton-salt insoluble fraction showed remarkable high activity among subfractions of the spinal cord myelin.
(5) By immunological studies, it may be concluded that an antigenic substance for experimental allergic neuritis was localized in the peripheral nerve myelin, but not in its basic protein.     

爪蟾(Xenopus Laevis)脊髓神经纤维早期发育的吻尾向顺序

过去用3H胸腺嘧啶标记细胞核DNA的方法,已经证明脊椎动物中枢神经系统的许多部位在细胞增殖过程中存在着时空上的顺序(spatiotemporal gradient)。至于在神经系统的进一步发生过程中,如神经元分化、突触形成乃至功能发挥等～系列过程,是否也存在一个时空上的顺序,则是发育神经生物学中尚     

大白鼠脊髓、脑干和海马乙酰胆碱酯酶活性的研究

采用乙酰胆碱酯酶 (ACh E)组织化学方法 ,观察了大白鼠脊髓、脑干和海马等脑区 ACh E阳性神经元的活性。结果显示 :(1)脊髓 :脊髓前角、后角神经元 ACh E均为中等阳性 ( ) ,脊髓中间外侧核 ACh E呈强阳性 ( )。 (2 )脑干 :延髓中的三叉神经脊束核、舌下神经核 ACh E均呈强阳性 ( ) ,中缝大核 ACh E呈中等阳性 ( ) ;脑桥的蓝斑核 ACh E呈强阳性 ( ) ,而三叉神经中脑核等核团 ACh E呈中等阳性 ( ) ;中脑的非脑神经核团红核、黑质 ACh E呈阳性 (+ )或中等阳性 ( ) ,脑神经核团动眼神经核和动眼神经副交感核 ACh E呈强阳性 ( )。 (3)海马 :海马 CA3区 ACh E为强阳性( ) ,CA2 和 CA1 区为中等阳性 ( )。本实验表明 ACh E阳性神经元广泛分布于中枢神经系统不同脑区 ,为进一步探讨 ACh在中枢神经系统中的作用提供了形态学资料。     

坐骨神经结扎后大鼠背根神经节和脊髓CGRP表达的变化

目的研究大鼠坐骨神经结扎后降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)表达变化。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1、3、5、7、14、21和28d(n=8),免疫荧光(双标法)和免疫组织化学(SABC法)观察术后不同时间点CGRP和NGF在坐骨神经、背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)和脊髓的表达变化,Westernblot结合图像分析技术对不同时间的变化进行定量测定。结果术后1d结扎远端坐骨神经内NGF大量堆积,持续到28d仍高于正常。结扎后7dDRG内CGRP阳性细胞百分率减少,持续到28d仍低于正常;结扎后14d脊髓后角CGRP下降,28d仍低于正常,各时间点脊髓前角CGRP表达未见明显变化。结论神经结扎可导致DRG和脊髓后角的CGRP表达下调,可能与靶源性的NGF来源减少有关。     

脊髓培养神经元中微管相关蛋白-5的分布及可塑性

用新生 Wistar大鼠进行脊髓神经元培养 ,研究微管相关蛋白 - 5与其单克隆抗体结合后的分布情况。使用微管解聚药 nocodazole处理神经元 ,应用免疫组织化学染色来观察微管相关蛋白 - 5的改变。另一组神经元使用 nocodazole处理后再用 PMA处理 ,观察微管相关蛋白 - 5及神经元的改变。结果表明 ,微管相关蛋白 - 5在胞浆及突起中均有分布 ,并随着培养天数的递增而递减。使用 nocodazole后神经元中微管相关蛋白 - 5的分布及数量明显减少。PMA处理神经元后尽管使微管相关蛋白 - 5的正常结构被破坏 ,而神经元的伸展却不受影响     

人脊髓前角运动神经元190KD蛋白的初步研究

本研究采用ＳＤＳ凝胶电泳方法从人脊神经前根中分离出人脊髓前角运动神经元特有的蛋白—１９０ＫＤ。将该蛋白作为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,经杂交瘤技术,获得了抗１９０ＫＤ蛋白的单克隆抗体。免疫细胞化学检测表明,１９０ＫＤ单抗与脊髓灰质前角神经元、前根及肌支发生阳性反应。实验结果提示,１９０ＫＤ蛋白分布在脊髓运动神经元胞体及脊神经的前根和肌支纤维中。     

两种亨廷顿蛋白相关蛋白1异构体—HAP1A和HAP1B在大鼠脊髓灰质内的分布特征

目的明确2种亨廷顿蛋白相关蛋白1(huntingtin-associated protein 1,HAP1)异构体—HAP1A和HAP1B在大鼠脊髓灰质内的分布特征。方法提取重组表达的谷胱甘肽S-转移酶(GST)-HAP1AC末端融合蛋白和GST-HAP1BC末端融合蛋白,免疫兔和豚鼠制备分别抗HAP1A和HAP1B特异性多克隆抗体,并采用免疫印迹技术对其特异性和效价进行鉴定和检测;用免疫组织化学技术检测HAP1A和HAP1B在大鼠脊髓灰质内的分布和定位特征。结果成功制备了分别特异性识别HAP1A和HAP1B的高效价多克隆抗体,应用这些抗体进行的免疫组织化学ABC法检测显示,HAP1A与HAP1B在大鼠脊髓灰质内的分布区域相似,二者均在大鼠脊髓灰质RexedⅠ-Ⅹ层表达,在RexedⅠ、Ⅱ层表达最强,中央管周围灰质(RexedX层)其次,在RexedⅢ-Ⅵ层表达水平较低,在脊髓前角(RexedⅦ-Ⅸ层)只有极微弱的或无阳性表达。HAP1A免疫反应产物主要定位在Stigmoid小体,在神经元胞质和近端突起内只有极少的弥散反应产物;HAP1B免疫反应性较强,其免疫反应产物弥散、均匀分布在神经元核周质和近端突起内,也定位在Stigmoid小体上。免疫荧光双重标记显示,约有80%的Stigmoid小体既表达HAP1A也表达HAP1B,其余的Stigmoid小体仅表达HAP1A。结论 HAP1A和HAP1B蛋白在大鼠脊髓灰质内具有相同的区域分布模式,但在神经元内的定位具有明显区别,提示二者可能具有不同的功能。     

神经营养素3和脑源性神经生长因子在大鼠脊髓中的定位表达

神经营养素3（NT－3）和脑源性神经生长因子（BDNF）是神经生长因子（NGF）的同源物,体外实验表明NT－3和BDNF能促进感觉神经元和交感神经元的存活,但是NT－3和BDNF在脊髓中的生物学作用和定位分布还不十分清楚。本用免疫组化ABC法观察了NT－3和BDNF的免疫阳性反应物在大鼠脊髓中的分布。结果表明：呈NT－3样免疫阳性反应的胶质细胞分布于脊髓的后索、侧索和前索中;免疫反应阳性的神经元主要见于脊髓前角,少数见于脊髓后角。BDNF位于大鼠的脊髓前角动物神经元;在脊髓Ⅱ板层中还可见较多的BDNF免疫反应阳性的神经终末。提示NT－3和BDNF在维持脊髓神经元和胶质细胞的生理功能中可能起重要作用。     

猕猴颈髓的GABA能神经元分布

应用免疫组织化学方法观察猕猴颈髓的γ-氨基丁酸（GABA）能神经元的分布,观察结果：除第X层外,在脊髓RexedⅠ-Ⅸ层可见GABA样免疫反应的胞体和纤维,标记的GABA胞体为卵圆形,三角形和多角形,可分为大、中、小型,在Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ层GABA阳性胞体较多,GABA阳性纤维以后角处最多,白质内也有GABA免疫反应阳性的胶质细胞和神经纤维。结果提示GABA能神经元不仅调节感觉信息的传导而且也调节运动信息的传导。     

神经生长因子样免疫反应在鸡胚脊髓发育期的配布

探讨神经生长因子（NGF）对脊髓和背根节（DRG）发育的影响。取Hamburger 30期和40期鸡胚腰段脊髓及DRG。制作20μm厚冰冻切片。用2.5S NGF抗体进行ABC免疫组化染色,观察NGF样免疫阳性反应（NGF－IR）在两时相脊髓和DRG的配布,结果在30期,强NGF－IR呈现在白质,且腹侧较强,灰质未阳生细胞。40期时,除白质显NGF－IR和背侧白质NGF－IR增强外,脊髓灰质和DRG内亦出现了一些NGF阳性细胞,特别是在背角细胞可见强NGF－IR。结果表明NGF与脊髓和DRG的发育有关。