EHEC的新型粘附因子研究进展

肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhage E-coli,EHEC）是一种重要的人畜共患病,世界各地包括中国都有不同规模的暴发流行。EHEC有多种血清型,其中毒力最强血清型是0157：H7。EHEC0157：H7感染除可使人发生常规腹泻外,还可在5％-10％的病例中引发严重并发症,甚至死亡。该菌是重要的食源性致病菌,危害严重,缺乏有效的防治手段,而抗生素治疗可能会加剧溶血性尿毒症（haemoluticuraemicsyndrome,HUS）。由于以上特点EHEC0157：H7成为世界公共卫生问题,引起微生物学家和公共卫生工作者的广泛关注。目前,临床针对EHEC感染只是对症治疗和适当的抗茵治疗。粘附是EHEC感染宿主细胞的第一步,没有这一步,细菌和宿主肠道细胞之间不会发生任何的相互作用,而且对于许多病原菌来说,粘附具有宿主特异性。本文概述了EHEC的流行病学及粘附机理,并对近年在EHEC研究中的发现一些新型粘附因子和一些假设的定植因子的研究背詈及作用机理作一综述。     

EHEC 的新型粘附因子研究进展*

摘要：肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhage ，EHEC）是一种重要的人畜共患病，世界各地包括中国都有不同规模的暴发流 行。EHEC有多种血清型，其中毒力最强血清型是O157：H7。EHEC O157：H7 感染除可使人发生常规腹泻外，还可在5%-10%的病 例中引发严重并发症，甚至死亡。该菌是重要的食源性致病菌，危害严重，缺乏有效的防治手段，而抗生素治疗可能会加剧溶血性 尿毒症（haemolutic uraemic syndrome，HUS）。由于以上特点EHEC O157：H7 成为世界公共卫生问题，引起微生物学家和公共卫生 工作者的广泛关注。目前，临床针对EHEC 感染只是对症治疗和适当的抗菌治疗。粘附是EHEC感染宿主细胞的第一步，没有这 一步，细菌和宿主肠道细胞之间不会发生任何的相互作用，而且对于许多病原菌来说，粘附具有宿主特异性。本文概述了EHEC 的流行病学及粘附机理，并对近年在EHEC 研究中的发现一些新型粘附因子和一些假设的定植因子的研究背景及作用机理作一 综述。     

人巨细胞病毒AD169株感染家兔致病机理的初步研究

本文试用家兔作HCMV感染致病机制模型研究,用家兔荧光法及病毒再分离技术考证了感染期间的病毒血症动态。观察到兔在原发性病毒感染后的第13无病毒首先在单核细胞(MC)、淋巴细胞(LC)中显现,并向血浆排放病毒,进而随血道播散至全身组织,引起相应靶器官感染致病。     

高海拔地区家兔挤压综合征模型的初步实验研究

目的:建立一种适合高海拔地区的、简单有效并且可复制的家兔挤压综合征(crush syndrome,CS)实验模型,为在高原地区进一步研究CS打下基础。方法:健康成年新西兰家兔50只(饲养和实验地为西宁,海拔2260 m)。随机分为1组对照组及9个实验组,按照挤压重量(20 kg、30 kg、40 kg)和挤压时间(4 h、6 h、8 h)的不同进行排列组合后形成9种不同的挤压条件,实验组于解除挤压后6 h取静脉血检测血BUN、Cr、AST、ALT、CK、K+,解除压迫后24小时取家兔心肌、肾脏、肝脏、挤压处大腿四头肌行病理检查。对照组5只家兔作为空白对照,仅作麻醉处理不做挤压,在相同的时间点上取血及组织标本。结果:所有实验组家兔双后肢出现了明显的肿胀(P0.05);所有实验组家兔在解压后6 h检测血BUN、Cr、AST、ALT、CK变化与对照组相比较均有统计学意义(p0.05),而且随着压迫重量和压迫时间的增加,各数值也随之增加;受压肌肉及肝肾组织活检提示均有显著的病理改变;但是随着压迫重量和时间的增加,实验组家兔死亡率也随之升高。结论:随着挤压重量和挤压时间的增加可加重挤压综合征的严重程度,在高海拔地区,为了保证较低死亡率可采取挤压双后肢、挤压重量为20 Kg、挤压时间为4 h作为高海拔地区挤压综合征家兔模型的实验条件。     

家兔肾下腹主动脉瘤模型的建立

目的:建立简易、稳定性高的家兔肾下腹主动脉瘤模型.方法:选取健康雄性家兔32只设立盐水灌注对照,采用弹力蛋白酶灌注肾下腹主动脉的方法进行模型制作,利用不同染色方法,分别于术后2天,7天取标本观察灌注段腹主动脉的成瘤情况,形态学变化及病理改变.结果:8只弹力蛋白酶灌注术后7天组有6只存活,腹主动脉直径扩张均大于100%,与各对照组相比差异有统计学意义.病理改变体现为炎性细胞浸润,血管中层弹力组织破坏.结论:家免腹主动脉瘤模型操作简易,病理特征稳定,建模成功率较高.     

志贺毒素及其预防治疗剂的研究进展

志贺毒素(Shigatoxin,Stx)主要由肠出血性大肠杆菌(EHEC)产生,是其主要的致病毒力因子,可通过引起急性肾衰竭导致死亡。迄今为止尚没有可推荐的治疗方案能够有效地预防或治疗Stx引起的疾病。目前,对于Stx的研究热点主要包括:Stx尚未清楚的致病机理研究,Stx与HUS的相关性研究,以及预防、治疗由Stx引起的疾病的研究。本文就以上几方面对国内外的相关研究进行总结及讨论。     

志贺毒素及其预防治疗剂的研究进展

志贺毒素（Shigatoxin,Stx）主要由肠出血性大肠杆菌（EHEC）产生,是其主要的致病毒力因子,可通过引起急性肾衰竭导致死亡。迄今为止尚没有可推荐的治疗方案能够有效地预防或治疗Stx引起的疾病。目前,对于Stx的研究热点主要包括：Stx尚未清楚的致病机理研究,Stx与HUS的相关性研究,以及预防、治疗由Stx引起的疾病的研究。本文就以上几方面对国内外的相关研究进行总结及讨论。     

家兔肝纤维化模型的建立

目的:寻找一种用四氯化碳腹腔注射建立家兔肝纤维化模型的方法。方法:用体积比为5%~27%四氯化碳溶液腹腔注射,诱导普通级别家兔形成肝纤维化。并于25天、50天、75天、100天分组处死家兔。结果:家兔肝脏纤维化程度随造模时间延长而逐渐增加。结论:长期给予四氯化碳可导致家兔的肝纤维化形成,并有较明显的阶段性变化。     

肠出血性大肠杆菌O157感染防治研究进展

肠出血性大肠杆菌 (EHEC)感染是一种重要的新发传染病 ,O15 7是EHEC的一个主要菌型 ,感染该菌可使人患腹泻、出血性结肠炎 (HC)、溶血性尿毒综合征 (HUS)等 ,死亡率较高。EHECO15 7感染在许多国家包括我国都有暴发流行。EHECO15 7产生的粘附因子Intimin可引起粘附擦拭 (A/E)损伤 ,并可产生致死性的毒素Stx。抗生素治疗可使患者并发HUS危险性增加 ,临床上无特效的治疗药物 ,疫苗研究将对EHECO15 7的控制起重要作用。     

转基因家兔模型制作方法

作为生物医学研究重要的实验动物模型,转基因家兔已经被广泛应用在人类心脑血管疾病、艾滋病以及癌症等生物医学研究领域,特别是利用转基因家兔模型在人类动脉粥样硬化实验研究中已经取得了令人注目的成绩。本文结合我们自己制作转基因家兔的经验、研究成果以及文献资料,详细介绍了利用原核显微注射法、直接将外源基因注入受精卵雄原核中的转基因家兔制作技术,回顾了利用转基因家兔模型在生物医学研究中取得的重要进展。     

杂种家兔贫血模型的建立

目的为建立溶血性贫血（ＨＡ）和再生障碍性贫血（ＡＡ）两种贫血动物模型,研究ＨＡ和ＡＡ的发病机理。方法５０只杂种健康家兔随机分为两组,２５只皮下注射盐酸苯肼制备溶血性贫血（ＨＡ）模型;另２５只行６０Ｃｏγ－射线亚致死量全身照射后输注同种异体胸腺淋巴细胞诱发ＡＡ型。结果ＨＡ组成功率１００％,死亡率５６％（１４／２５只）;ＡＡ组成功率为９２％（２３／２５只）。结论两种模型的发生时间较稳定,实验重复性好,结果可靠,这为ＨＡ和ＡＡ发病机理的探讨及实验性研究奠定了基础     

家兔心跳骤停复苏模型的研究进展

心跳骤停是临床医学中最为危急的事件之一,其发生发展过程涉及了一系列的病理生理学改变。近几年来,有关于心跳骤停复苏的研究有很多,也取得了一定的进展,但关于其各种不同类型心跳骤停的病理生理学改变的理解仍不是十分的全面,其有效地治疗药物和治疗手段也仍需要进一步的研究。因此,成功地制备与人类心跳骤停相似的动物模型就显得非常必要来,这不仅是深入研究心跳骤停复苏病理生理学改变的重要基础和研究途径,也是研制其治疗药物及方法的有效手段。本文重点讨论家兔各种类型心跳骤停复苏模型不同的研究方法。     

Lesch-Nyhan综合征家兔模型的建立及其表型分析

Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,目前致病机制尚未被完全阐明且无有效治愈手段。动物模型在疾病致病机理研究和治疗方式探索中发挥着重要功能。本研究采用高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射的方式敲除家兔(Oryctolagus cuniculus)HPRT基因建立了LNS家兔模型,以期能更好的模拟该疾病的表型。首先针对兔HPRT基因第3外显子设计一条sgRNA,将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到兔受精卵中,注射后的胚胎移植到代孕母兔子宫中,待仔兔出生后对其基因型及表型进行鉴定与分析。共出生4只仔兔(分别编号为R1、R2、R3和R4),测序结果显示4只仔兔都产生了不同程度的基因修饰,基因编辑效率达100%,其中R4仔兔T载体测序结果在基因编辑靶点未检测到野生型序列。通过6-硫代鸟嘌呤(6-Thiogua...     

蛇毒抗菌肽OH-CATH对大肠杆菌引起家兔泌尿系感染的保护作用

为探讨蛇毒抗菌肽OH-CATH对大肠杆菌标准株和临床耐药株引起家兔泌尿系感染的保护作用,该文利用大肠杆菌标准株(E.coli ATCC 25922)和耐头孢菌素大肠杆菌临床耐药株建立雄性家兔泌尿系感染模型.通过膀胱直接给药的方式,分别给予动物感染模型生理盐水、蛇毒抗菌肽OH-CATH及头孢哌酮舒巴坦,并于给药后第1、5、l0及14天留取家兔中段尿用于尿液培养.将动物膀胱标本行H-E染色石蜡切片及透射电镜观察.结果显示:使用蛇毒抗菌肽OH-CATH的大肠杆菌标准株和临床耐药株不同组别中段尿培养阳性率明显降低;给予头孢哌酮舒巴坦可降低大肠杆菌标准株(E.coli ATCC 25922)引起感染的阳性率,但对耐头孢菌素大肠杆菌引起的感染的阳性率则无明显作用(P＜0.05);使用蛇毒抗菌肽OH-CATH组炎症细胞浸润、坏死及钙化组织较其他组为少.该结果提示蛇毒抗菌肽OH-CATH对大肠杆菌标准株(E.coli ATCC 25922)及耐头孢菌素大肠埃希菌临床耐药株有稳定活性,对其引起的家兔泌尿系感染有较好的保护作用,并为临床日益严重的耐药病原菌感染的治疗提供了新的思路和方向.