仙居县儿童下呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的分析仙居人民医院住院下呼吸道感染患儿临床分离肺炎克雷伯菌的耐药特征,为临床合理用药提供依据。方法选择2012年7月至2013年7月该院下呼吸道感染肺炎克雷伯菌阳性患儿81例。对患儿的临床一般资料进行分析,对临床分离菌株进行细菌鉴定,用18种抗生素进行药敏试验,采用WHONET5．4分析软件进行统计。结果2012年7月至2013年7月共分离出81株肺炎克雷伯菌,ESBLs阳性42株,检出率为51．85％。所有菌株对亚胺培南、厄他培南、左旋氧氟沙星、丁胺卡那100％敏感。对氨苄西林耐药率为100％。ESBLs阴性菌株对氨曲南、头孢曲松、头孢他啶、头孢唑啉、头孢吡肟100％敏感,而ESBLs阳性菌株则100％耐药。ESBLs阴性菌株对其他抗生素的耐药率为氨苄西彬舒巴坦（12．82％）、环丙沙星（2．56％）、头孢替坦（O％）、呋喃妥因（20．51％）、庆大霉素（5．13％）、复方新诺明（17．85％）、妥布霉素（2．56％）、哌拉西林／他唑巴坦（2．56％）;ESBLs阳性菌株对其他抗生素的耐药率为氨苄西林／舒巴坦（73．80％）、环丙沙星（2．38％）、头孢替坦（16．67％）、呋喃妥因（61．90％）、庆大霉素（28．57％）、复方新诺明（54．76％）、妥布霉素（7．14％）、哌拉西林／他唑巴坦（7．14％）。结论本地区患儿中肺炎克雷伯菌耐药性较高,临床应重视病原菌的检测。     

头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌AmpC基因和ESBLs检测及耐药性分析

目的了解深圳地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌头孢菌素酶(AmpC酶)基因型分布、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点。方法收集深圳地区三家大型综合医院临床标本分离对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌73株。用碱裂解法提取菌株的质粒,采用多重PCR扩增AmpC基因,应用DNA测序确定其基因型。并对所有菌株进行ESBLs表型确证试验;用K-B法对其进行药物敏感试验。结果 48株(65.8%)AmpC基因扩增阳性,经DNA测序显示,其中46株为DHA-1型,1株为CMY-2型,1株同时产DHA-1和CMY-2型;73株肺炎克雷伯菌中49株ESBLs阳性,其中36株AmpC基因和ESBLs均为阳性。AmpC和(或)ESBLs阳性菌株对多数药物的耐药率高于AmpC和ESBLs均阴性者。结论本地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶检出率高,基因型主要为DHA-1,同时产AmpC酶和ESBLs菌株较常见。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解深圳市人民医院产ESBLs肺炎克雷伯菌中产AmpC酶的情况及其耐药性。方法收集产ESBLs肺炎克雷伯菌临床株126株,应用Tris-EDTA纸片法检测AmpC酶。用琼脂稀释法测定菌株对11种抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。结果126株ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌中12株检出AmpC酶,检出率为9.5%。AmpC阳性菌株对头孢西丁、头孢他啶、氨曲南、氨苄西林/舒巴坦和阿莫西林/克拉维酸的耐药率达100%,对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为83.3%和33.3%,其中头孢西丁、头孢他啶、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率显著高于AmpC阴性株（P〈0.05）。结论深圳市人民医院产ESBLs肺炎克雷伯菌中检出AmpC酶阳性株,其耐药性强于单产ESBLs菌株。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性研究

超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamase,ESBLs)与细菌耐药性密切相关,为了揭示产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性,本研究在2017年1月至2018年9月期间,共检测了466例肺炎克雷伯菌感染的患者标本,并分析了产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性。研究结果显示,466例患者中共检出562个肺炎克雷伯菌菌株。其中,呼吸内科的检出数最多(212株,37.72%),其次为重症监护科(106株,18.86%)。对于不同标本来源,痰液中检出菌数最多(331株),占总数的58.90%。562株肺炎克雷伯菌中共检测出237株产ESBLs(42.17%)。产ESBLs肺炎克雷伯菌对阿莫西林(89.03%)、替卡西林(87.34%)、氨苄西林(81.43%)的耐药率最高;而对替加环素(9.28%)、阿米卡星(6.75%)、亚胺培南(1.27%)和美罗培南(0.84%)的耐药率最低。237株产ESBLs的肺炎克雷伯菌菌株中,53.59%扩增出CTX-M型,48.95%扩增出TEM型,40.93%增出SHV型。另外,237株产ESBLs的肺炎克雷伯菌菌株中,产两个及以上的ESBLs的菌株共111株(46.84%)。     

致ICU和非ICU患者下呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药性分析

摘要：目的 分析致ICU与非ICU患者下呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药性差异,为临床科学选用抗菌药物,有效控制感染提供科学依据。方法 对2012年1月至2014年12月从临床下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌582株进行比较分析,常规方法分离培养肺炎克雷伯菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,利用WHONET 5.6软件分析处理实验数据。结果 检测菌株582株,其中ICU分离208株,占35.7%,非ICU分离374株,占64.3%;从ICU中分离出的肺炎克雷伯菌的耐药率除头孢替坦外明显高于非ICU,两者差异有统计学意义（P＜0.05）;两者对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛的耐药率都较高,均＞40.0%,对头孢替坦、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南都较敏感,耐药率＜25.0%;产ESBLs率ICU和非ICU分别为70.7%和40.4%,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 从ICU中分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs率高,且对18种抗菌药物耐药率明显高于非ICU,应用抗菌药物治疗该菌感染时,必须依据药敏试验结果,临床应加强对肺炎克雷伯菌的耐药性监测,了解其耐药趋势,减少耐药菌株的产生。     

产妇会阴切口感染肺炎克雷伯菌质粒介导AmpC酶基因型检测与分析

摘要：目的 回顾性分析我院产妇会阴切口感染分离的肺炎克雷伯菌质粒介导AmpC酶基因型。方法 采用K-B纸片扩散法对临床分离的肺炎克雷伯菌进行AmpC酶初筛;头孢西丁三维试验确证产AmpC酶;采用UNIQ-10柱式质粒小量抽提试剂盒提取细菌质粒;采用聚合酶链反应（PCR）和DNA测序检测分析质粒AmpC酶基因型别。结果 三维试验检出15株产AmpC酶菌株,经PCR扩增15株菌株均在405 bp处出现阳性条带,经DNA测序证实为DHA-1型质粒AmpC酶。结论 我院存在质粒介导AmpC酶流行菌株,质粒AmpC酶主要以DHA-1型为主。     

生物被膜肺炎克雷伯菌产ESBLs的耐药性和基因型分析

目的检测临床分离的肺炎克雷伯菌在体外形成生物被膜后产超广谱β-内酰胺酶（Extended-Spectrum β-Laetamases,ESBLs）的情况,分析及研究其耐药性和耐药基因的分型情况。方法采用改良平板法在体外建立肺炎克雷伯菌生物被膜模型,用三维试验确认产ESBLs菌株,用K-B法进行药敏试验,用聚合酶链反应（Polymerase chain reaction,PCR）进行blaSHV、blaTEM和blaCTX—M基因扩增,产物分别克隆人pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型。结果临床筛选出的60株ESBLs阴性肺炎克雷伯菌有46株在体外成功建立了生物被膜模型,并有9株产生了ESBLs表型。产酶后菌株的耐药性明显高于产酶前。PCR结果显示9株细菌均携带SHV基因,有4株同时携带TEM基因,没有检出携带CTX-M基因的菌株。9株细菌的SHV基因分别属于SHV-5、SHV-12和SHV-28亚型。4株携带TEM基因的细菌均为TEM-1亚型。结论生物被膜的形成能够诱导肺炎克雷伯菌产生ESBLs。本实验中检出的产ESBLs的基因型都是由SHV-1突变产生的。生物被膜的形成和产生ESBLs的协同作用是生物被膜肺炎克雷伯菌耐药性增强的主要原因之一。     

肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布检测与耐药特性的相关性研究

目的研究肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布与耐药特性的相关性。方法收集2008年1月至2013年12月临床分离的100株肺炎克雷伯菌,采用K-B法进行体外药敏试验,采用ESBLs确证试验和AmpC三维试验确定产酶表型,采用聚合酶链式反应进行ESBLs酶及AmpC酶基因的检测。结果60株检测出ESBLs酶,其中60株内检出ESBLs基因阳性56株,主要为SHV型基因;检出AmpC酶的检测6株,主要为DHA型基因。其中两种基因同时阳性者1株。除哌拉西林/他唑巴坦,单产AmpC酶、ESBLs及两种基因同时阳性菌（SSBLs）对其他17种常用抗生素的耐药率均高于不产酶菌株。结论医院肺炎克雷伯菌的主要耐药机制为ESBLs酶及AmpC酶基因。ESBLs耐药基因检出率高,ESBLs阳性株耐药率明显高于ESBLs基因阴性株。     

肺炎克雷伯菌AmpC β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的对肺炎克雷伯菌持续高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测及耐药性分析,揭示其耐药机制,指导临床合理用药.方法采用改良酶提取物三维试验法,在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠埃希菌ATCC 25922,在头孢西丁和头孢曲松药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽,待测菌的酶粗提物在槽内扩散,分别进行AmpC和ESBLs测定.结果121株肺炎克雷伯菌AmpC酶总检出率为2.5%,ESBLs检出率45.5%,AmpC＋ESBLs检出率为0.8%.它们对青霉素类,第1、第2、第3代头孢菌素,头霉素类,单环β-内酰胺类,氟喹诺酮类,磺胺类及一些酶抑制剂复合抗生素耐药率为50%～100%不等.哌拉西林/他唑巴坦耐药率小于50%,未检出亚胺培南的耐药菌株.结论产生ESBLs和Ampc酶是肺炎克雷伯菌对头孢菌素类抗生素耐药的主要机制,ESBLs和AmpC酶的肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,应加强对β-内酰胺酶的检测和其感染者的治疗.     

1997-2010年小儿肺炎克雷伯菌耐药性变迁分析

目的 了解1997-2010年肺炎克雷伯菌(KPN)在儿科及新生儿科临床感染中的流行状况及耐药性.方法 收集珠海市妇幼保健院儿科及新生儿科1997-2010年临床痰液标本中分离的肺炎克雷伯菌共633株,分析其对常用抗生素的耐药性.并分析2005年以后产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与不产ESBLs肺炎克雷伯菌株耐药性的差异.结果 根据14年来该院临床分离的肺炎克雷伯菌药敏试验结果显示,该菌对氨苄西林及哌拉西林的耐药率最高,可达100％.对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率各年有波动,但总体无明显变化(分别约28％、34％).对儿科临床限制使用药物如庆大霉素、左旋氧氟沙星、氯霉素、复方新诺明等耐药率呈逐年下降趋势.14年来尚未发现对亚胺培南耐药的KPN.2005年以后产ESBLs菌株的检出率呈逐年增高趋势(17％ ～38.7％),且对各种抗生素的耐药率较普通KPN明显增高.结论 肺炎克雷伯菌对临床常用β-内酰胺类抗生素耐药率高,儿科限制使用药物的耐药率有逐年下降趋势,产ESBLS菌株耐药情况严重.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对三种氨基糖苷类抗生素的耐药性分析

【摘 要】 目的 评价庆大霉素、妥布霉素及阿米卡星三种氨基糖苷类抗生素（AGs）对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的体外抗菌活性。方法 对902株大肠埃希菌和404株肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2全自动微生物分析仪配套的AST-GN13药敏卡进行庆大霉素、妥布霉素及阿米卡星的体外药敏试验。结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株检出率分别为40.8％和36.6％;产ESBLs的大肠埃希菌对庆大霉素、妥布霉素及阿米卡星的敏感率分别为42.4%、39.1%和96.5%,与非产ESBLs菌株比较,敏感率差异均有统计学意义（P<0.01）;产ESBLs的肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素及阿米卡星的敏感率分别为64.2%、62.8%和91.9%,与非产ESBLs菌株比较,敏感率差异均有统计学意义（P<0.01）;阿米卡星对产与非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均高度敏感,敏感率均在91%以上。结论 本地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株流行严重,ESBLs的产生可使大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对AGs的耐药情况加重,提示ESBLs和AGs引起的耐药可能存在一定的相关性。     

2014—2016年大连地区血流感染肺炎克雷伯菌的耐药性特征分析

目的 分析肺炎克雷伯菌所致血流感染患者的科室分布及其病原菌耐药性特征,为指导临床合理应用抗菌药物,有效控制感染提供依据。方法 选择2014—2016年大连医科大学附属第一医院送检血液标本中分离得到的289株肺炎克雷伯菌,对其进行细菌鉴定、药敏试验及ESBL确认试验,分析肺炎克雷伯菌所致血流感染的科室分布特征及其病原菌耐药性变迁。结果 患者血液中肺炎克雷伯菌检出率以急诊科（24.91%）和ICU为最高（23.88%）。3年中肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素和阿米卡星耐药率较低,均在20.00%左右。产ESBL肺炎克雷伯菌共135株,占46.71%,对常用抗生素的耐药率均显著高于非产ESBL菌株（P<0.01）。碳青霉烯类抗生素耐药菌株对常用抗生素耐药率均高于敏感菌株（P<0.01）,对四环素、复方新诺明和阿米卡星耐药率相对较低,分别为66.10%、66.10%、71.19%。结论 我院2014—2016年患者血液中肺炎克雷伯菌检出率以急诊科和ICU为最高。该菌对碳青霉烯类抗生素及阿米卡星的耐药率较低,碳青霉烯类抗生素耐药菌株对四环素、复方新诺明和阿米卡星尚有一定敏感性。     

Modulation of respiratory dendritic cells during Klebsiella pneumonia infection

Background

Klebsiella pneumoniae is a leading cause of severe hospital-acquired respiratory tract infections and death but little is known regarding the modulation of respiratory dendritic cell (DC) subsets. Plasmacytoid DC (pDC) are specialized type 1 interferon producing cells and considered to be classical mediators of antiviral immunity.

Method

By using multiparameter flow cytometry analysis we have analysed the modulation of respiratory DC subsets after intratracheal Klebsiella pneumonia infection.

Results

Data indicate that pDCs and MoDC were markedly elevated in the post acute pneumonia phase when compared to mock-infected controls. Analysis of draining mediastinal lymph nodes revealed a rapid increase of activated CD103⁺ DC, CD11b⁺ DC and MoDC within 48 h post infection. Lung pDC identification during bacterial pneumonia was confirmed by extended phenotyping for 120G8, mPDCA-1 and Siglec-H expression and by demonstration of high Interferon-alpha producing capacity after cell sorting. Cytokine expression analysis of ex vivo-sorted respiratory DC subpopulations from infected animals revealed elevated Interferon-alpha in pDC, elevated IFN-gamma, IL-4 and IL-13 in CD103⁺ DC and IL-19 and IL-12p35 in CD11b⁺ DC subsets in comparison to CD11c⁺ MHC-class II^low cells indicating distinct functional roles. Antigen-specific naive CD4⁺ T cell stimulatory capacity of purified respiratory DC subsets was analysed in a model system with purified ovalbumin T cell receptor transgenic naive CD4⁺ responder T cells and respiratory DC subsets, pulsed with ovalbumin and matured with Klebsiella pneumoniae lysate. CD103⁺ DC and CD11b⁺ DC subsets represented the most potent naive CD4⁺ T helper cell activators.

Conclusion

These results provide novel insight into the activation of respiratory DC subsets during Klebsiella pneumonia infection. The detection of increased respiratory pDC numbers in bacterial pneumonia may indicate possible novel pDC functions with respect to lung repair and regeneration.     

铜绿假单胞菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株ESBLs和AmpC酶的产生及对常用抗菌药物敏感性,指导临床合理选用抗生素。方法常规培养分离细菌,采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;按NCCLS推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法检测ESBLs和药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,确诊采用三维试验。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%。药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重。结论台州地区临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,临床上对产酶菌株引起感染的治疗应根据细菌药敏试验结果,合理选择有效的抗菌药物联合治疗,减少产酶菌株的产生和流行。     

下呼吸道感染中4种非发酵菌的临床分布及耐药性分析

目的了解下呼吸道感染中4种非发酵菌的临床分布及耐药现状。方法采用回顾性调查方法,对2007年6月至2009年12月浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科和ICU下呼吸道感染患者,调查其4种非发酵菌分离菌株,统计药敏试验结果及临床分布。结果共分离目标菌393株,包括鲍曼不动杆菌152株,铜绿假单胞菌127株,嗜麦芽窄食单胞菌73株,洋葱伯克霍尔德菌41株;分离菌株数最多的原发病依次是慢性阻塞性肺部疾患(24.4%),原发性支气管肺癌(16.5%),支气管扩张(14.8%)和肺炎(12.2%);药敏试验结果,4种非发酵菌普遍呈多药耐药趋势,其中氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、哌拉西林耐药率均>50%,亚胺培南和美罗培南的耐药率>37.8%;耐药率最低的是头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦,分别为14.2%~26.8%和25.2%~50.7%。结论下呼吸道标本中分离到非发酵菌的患者,主要集中在9类住院治疗的患者,分离的菌株数量以COPD、原发性支气管肺癌等原发病患者较多,这些患者是医院感染的易感人群,应予以严密监视。体外药敏试验表明,4种非发酵菌的耐药性非常严重,需要定期公布细菌检测和耐药率变迁信息,制订和完善预防措施,加强临床和实验室的协作和沟通,以降低医院感染发生率和细菌耐药率。     

2008-2012年484株肺炎克雷伯菌耐药性分析及耐药机制的初步研究

目的回顾性分析近五年来医院住院及门诊病原菌感染患者中肺炎克雷伯菌的分离趋势,探讨其对常规抗菌药物的耐药性变迁和相关耐药机制。方法采用法国梅里埃公司的Vitek-2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,部分菌株采用微量生化管鉴定,部分药敏试验采用琼脂扩散法（KB）,药敏结果判读按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）制定的标准判读,纸片法表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,EDTA双纸片法检测金属酶表型。结果五年间484株肺炎克雷伯菌部分药物耐药率正逐年上升,其常见药物平均耐药率如下：阿米卡星（3.0%）,复方新诺明（31.1%）,头孢三嗪（14.5%）,环丙沙星（18.7%）,氯霉素（21.6%）,特治星（6.3%）,头孢他啶（22.0%）,头孢噻肟（23.6%）,舒普深（4.2%）,呋喃妥英（26.9%）,美罗培南（2.1%）,ESBLs阳性99株（20.4%）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型阳性5株,EDTA双纸片法检测金属酶表型阳性2株。结论部分药物耐药率逐年上升的有复方新诺明、环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟;耐药率较低的有美罗培南、阿米卡星、舒普深、特治星、头孢三嗪。应加强细菌耐药性监测,以及耐碳青霉烯酶筛查试验,为临床提供用药参考。     

下呼吸道感染患者病原菌分布及耐药性

目的 分析下呼吸道感染患者病原菌分布及耐药性,指导临床合理用药。方法 收集我院2013年至2015年院内感染患者痰标本进行细菌培养和药物敏感性试验。结果 3年共收集下呼吸道痰液标本21 615份,分离病原菌5 621株,阳性率为26.0%;其中革兰阴性（G－）菌4 249株,占75.6%,以铜绿假单胞菌居多（20.7%）;真菌764株,占13.6%,以白假丝酵母居多（12.6%）;革兰阳性（G+）菌608株,占10.8%,以金黄色葡萄球菌居多（9.9%）。药物敏感试验结果显示：G-杆菌对亚胺培南、美洛培南耐药率最低,对青霉素类、喹诺酮类和部分三代头孢类等抗菌药耐药率较高（>50.0%）。G+球菌对万古霉素、利奈唑胺耐药率为零,对青霉素类、喹诺酮类和红霉素等抗菌药耐药率较高（>40.0%）。结论 下呼吸道感染患者病原菌以G-杆菌为主,耐药性呈增长趋势,临床应加大病原菌分布检测及其耐药性监测力度,及时调整抗菌药物用药。