H22腹水型肝癌荷瘤小鼠耐受性的性别差异

目的:观察性别对小鼠H22腹水型肝癌生长情况的影响,研究不同性别动物对肝癌耐受性的差异。方法:取30只8周龄昆明鼠,雌雄各半,随机分为四组,实验组每组10只,对照组每组5只,腹腔接种小鼠H22肝癌细胞,建立小鼠H22腹水型肝癌模型。每天测量小鼠体重并记录生存时间,直至实验组小鼠全部死亡,比较性别因素对小鼠H22腹水型肝癌的生存期是否存在差异。结果:小鼠接种瘤细胞后,逐渐产生腹水,体重增加。雌性小鼠的体重增加比雄性小鼠显著,P=0.049。雄性小鼠生存后期体重出现下降,呈明显恶液质状态。雌性小鼠的体重、腹水增加虽然较雄性动物明显,但生存期却并不少于雄性鼠,反而比雄性小鼠略长,P=0.1567。结论:性别对小鼠H22腹水型肝癌的生长有一定的差异,雌性小鼠的耐受性优于雄性小鼠。     

TRAIL联合顺铂对小鼠移植型肝癌抑制作用及机制研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联合顺铂(cisplatin,DDP)对小鼠移植型肝癌的抑制作用及机制。方法将H22小鼠移植型肝癌模型随机分为生理盐水组、TRAIL组、TRAIL+DDP组和DDP组,称取瘤重并分析抑瘤率,Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡,免疫组织化学染色检测Caspase-3表达。结果与生理盐水组比较,TRAIL、DDP对小鼠移植型肝癌生长具有明显的抑制作用(P<0.05);TRAIL与DDP联合用药具有增效作用(P<0.05),可明显提高肝癌细胞的凋亡率(P<0.05)、上调Caspase-3表达(P<0.01)。结论 TRAIL与DDP联合用药对小鼠移植型肝癌生长具有协同抑制作用,其机制可能与其协同促进Caspase-3的表达有关。     

佐剂增强的肿瘤细胞裂解物疫苗抗小鼠H22肝癌作用

以鼠源肝癌H22全细胞裂解物为抗原,通过化学偶联白喉毒素(DT)和串联重复的T辅助表位mH-SP70407-426肽段,混合OK432(链球菌A群)制成肿瘤全细胞疫苗H22-DT-M2-OK432(HDTMOK)。治疗性免疫结果显示,疫苗激发的免疫应答对H22肿瘤起到了有效的抑制作用。为进一步提高该疫苗的抗肿瘤效果,用偶联的疫苗制备免疫刺激复合物(ISCOM),并验证其抑瘤效果。治疗性免疫结果显示,与PBS组相比,ISCOM疫苗组平均瘤重和瘤体积显著降低(P<0.01),同时有效地抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01);ELISA法从血清中检测到高滴度的抗体。且与HDTMOK疫苗相比,ISCOM疫苗抑瘤作用提升显著(P<0.05)。HDTMOK能有效抑制小鼠肝癌实体瘤生长,佐剂配伍后的疫苗对H22的抑制更为显著,能够有效提升肿瘤全细胞疫苗的抗肿瘤能力。     

顺铂与小鼠艾氏腹水肝癌细胞膜的相互作用

本文研究了顺铂对小鼠艾氏腹水肝癌细胞膜蛋白内源性荧光的淬灭作用和测定了其在膜上的结合量。结果表明顺铂能与癌细胞膜结合。按存在两类结合部位,得到表观结合常数和结合部位数为: K_1=1.35×10~5L/mol n_1=6.80×10~(-4)mol/g(protein) K_2=2.50×10~3L/mol n_2=1.92×10~(-3)mol/g(protein)     

醉鱼草苷Ⅳ对H22肝癌小鼠的抑瘤作用

为观察醉鱼草苷Ⅳ对 H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用,取 H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,H22肝癌小鼠随机分为5组：模型组、醉鱼草苷Ⅳ高、中、低(1．00、0．50、0．25 mg/kg)3个剂量组和阳性药(CTX,20．0 mg/kg)对照组.每组10只,治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,连续腹腔注射10 d后,于第11天观测抑瘤率、脾腺指数、胸腺指数,同时进行血清中 SOD、MDA、GGT 和 AKP 含量检测.结果表明：与模型组比较,醉鱼草苷Ⅳ高、中剂量组对小鼠 H22移植性肝癌均有显著的抑瘤作用(P＜0．01),抑瘤率分别为56．96％和50．63％;与模型组相比,醉鱼草苷Ⅳ高剂量组小鼠血清SOD活性增加(P＜0．05),醉鱼草苷Ⅳ各剂量组血清MDA、GGT和AKP水平均降低(P＜0．01);除 SOD活性之外,环磷酰胺组与模型组比较无显著差异.说明醉鱼草苷Ⅳ在体内具有抗肝癌作用,其机理可能和机体的抗氧化能力有关,有待于进一步研究。     

不同来源H22细胞株的生物学特性比较研究

目的　对不同研究单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的基本生物学特性进行比较研究。方法　从国内3个不同研究单位 (武汉大学典型培养物保藏中心 ,山东省医学科学院药物研究所以及中国医学科学院药物研究所 )引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 (分别简称武汉H2 2 、山东H2 2 、北京H2 2 ) ,KM小鼠腹腔传代 ,然后对其体外培养特性、体内生长特征、病理形态、治疗学特征进行了比较分析。结果　 3株H2 2 细胞在体内、体外生长速度明显不同 ,武汉H2 2 生长速度较其他瘤株快 (P <0 .0 1) ,接种一致性好 ;而山东H2 2 则在 10 4 个细胞 只小鼠时即可接种成功。荷瘤小鼠体内未发现明显转移灶 ,但肿瘤形态各不相同。环磷酰胺治疗时 ,山东H2 2 抑瘤率最高为 74 6%。结论　不同研究单位H2 2 瘤株的生物学特性有很大不同 ,虽为同一起源 ,但经不同单位保存使用一定时间后 ,它们之间的生物学特性已存在较大的差异     

樟芝液体发酵粉对肝癌H22的体内生长抑制作用(英文)

本文采用肝癌H22荷瘤小鼠的肿瘤模型,对樟芝液体发酵粉的体内抗肿瘤活性进行评价。结果表明,樟芝液体发酵粉(500或1000 mg/kg b.w.)能够体内显著抑制H22肿瘤的生长,抑制率分别为42.0%和46.4%。同时,与模型组相比,樟芝发酵粉能够延长荷瘤小鼠的生存周期,延长率为29.4%。组织病理学研究结果表明,模型组小鼠的肿瘤细胞生长旺盛,而樟芝发酵粉处理组的小鼠肿瘤细胞具有明显的皱缩和坏死症状。樟芝发酵产物具有较好的体内抗肿瘤活性。     

黄瓜香等中药调整腹水瘤小鼠肠道菌群减轻化疗副作用的研究

目的通过黄瓜香等中药调整肝癌腹水瘤小鼠肠道菌群以减轻化疗的副作用达到预防和治疗肿瘤的目的。方法以小鼠腹腔内注射肝癌H22腹水瘤细胞造成肝癌腹水瘤模型,分别于造模型前1周用黄瓜香等和造模型后5 d用顺铂加上黄瓜香等进行治疗,并于注射后做HE染色检测肿瘤种植情况、血中白细胞、血小板的数量及巨噬细胞吞噬能力等。结果中药预防组与对照组相比肿瘤种植明显降低,中药加化疗组与阴性对照组比血中红细胞、白细胞和血小板均有回升(P0.01),巨噬细胞吞噬率增加明显。结论黄瓜香等能调节机体免疫力,防治腹水瘤和减轻化疗的副作用。     

小鼠宫内移植恶性肿瘤H22的实验研究

为了观察恶性肿瘤细胞处于宫内中晚期胚胎环境对胎鼠发育影响及恶性肿瘤的生物学行为,将8×106的H22细胞数量移植到胎鼠的羊膜腔(D9-D12)和腹腔(D13-D18),观察移植H22后的胎鼠分娩、新生鼠发育状况和荷瘤情况.结果发现,被移植H22的胚胎(D9-D18)能够继续在孕鼠子宫中发育至分娩,新生鼠无发育异常,新生鼠继续发育成熟,发育同正常鼠比较无异常,且一直无腹水荷瘤,H22荷瘤标志物AFP放射免疫法(radio-immunityRI)测定为阴性,RT-PCR法检测AFP阴性.     

髓过氧化物酶与大剂量顺铂所致小鼠肝功能变化关系的探讨

目的利用大剂量顺铂（Cisplatin,DDP）诱发小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,了解大剂量DDP在引起肾损伤的同时对小鼠肝的毒性作用,探讨髓过氧化物酶（Peroxidase,MPO）与DDP所致小鼠肝功能变化的关系。方法 C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,依体重随机分为DDP用药组和生理盐水（NS）对照组。15 mg/kg DDP单次腹腔内注射,等量NS对照。分别取对照组小鼠和DDP用药后6、12、24和48 h小鼠各10只,称重后乙醚麻醉,内眦静脉取血检测肝、肾功能;剖腹取肝、称重、计算肝系数,并取少量肝组织行HE染色、形态学观察;检测血浆和肝组织匀浆中MPO活性,统计学分析。结果大剂量DDP用药后48 h,小鼠出现急性肾功能衰竭。DDP用药后6 h血清谷丙转氨酶（ALT）含量达（91.0±11.3）IU/L,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,随后血清ALT含量持续维持在高水平。DDP用药后各组小鼠肝系数明显升高,光镜下见肝细胞广泛变性水肿,肝小叶中可见点状坏死及炎细胞浸润。DDP用药后6 h,小鼠肝组织匀浆MPO含量显著升高,达（1.54±0.45）U/g,与对照组（0.58±0.28）U/g差异有统计学意义（P〈0.01）,随后MPO含量降至正常水平;DDP用药后小鼠外周血MPO含量缓慢增高,用药后48 h达（12.78±2.78）U/L,与对照组（8.06±1.89）U/L比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论大剂量DDP在诱发小鼠急性肾功能衰竭的同时还可引起小鼠急性肝细胞的破坏,其发生可能与肝组织内白细胞的激活及MPO的释放有关。     

放射治疗联合血管内皮抑制素对大鼠移植性肝癌的治疗作用

目的:探讨放射治疗联合血管内皮抑制素对大鼠移植性肝癌的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,血管内皮抑素组,放疗组,联合组,血管内皮抑素组和联合组每日尾静脉注射浓度为10%重组人血管内皮抑素0.1 ml(20μg),共12天,联合组在第5天～10天时给予放射治疗,1次/2天。各组动物于移植术后12d处死,分离肿瘤组织备用。结果:血管内皮抑素组、放疗组、联合组均能显著抑制肿瘤生长,抑制VEGF表达,其中联合组抑制效果更为明显。结论:放射治疗联合血管内皮抑制素有明显肿瘤抑制作用,其机制可能与下调VEGF的表达有关。     

十全育真汤对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究十全育真汤对荷瘤小鼠免疫功能的影响,探讨十全育真汤抗肿瘤的作用机制。方法：SPF级雄性昆明种小鼠30只,制成荷H₂₂小鼠肝癌细胞移植瘤模型,随机分为模型组、阳性对照组及十全育真汤组（n=10）;另选择未接种小鼠10只为正常对照组。正常对照组、模型组每天按10 ml/kg灌胃生理盐水及蒸馏水,阳性对照组、十全育真汤组每天按8 g/kg、18 g/kg灌胃参一药液（80 mg/ml）与十全育真汤剂。连续给药14 d后处死小鼠,测量胸腺、脾脏指数及抑瘤率,检测外周血中白细胞、淋巴细胞含量及T细胞亚群CD3、CD4、CD8细胞百分比,血清中白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及干扰素-β（IFN-β）的含量,淋巴细胞增殖能力及NK细胞杀伤功能。结果：较正常对照组,十全育真汤组小鼠体重明显增加,脾脏指数显著增大（P<0.05）;白细胞、淋巴细胞CD4、CD8、CD3及TNF-α含量明显升高（P<0.05）;IL-2、IFN-β含量显著下降（P<0.05）;淋巴细胞增殖能力、NK细胞杀伤功能明显升高（P<0.05）。与模型组相比,十全育真汤组小鼠胸腺、脾脏指数显著增大（P<0.05）;白细胞、淋巴细胞CD3、CD4、IL-2、IFN-β及TNF-α含量明显升高（P<0.05）,CD8含量则显著降低（P<0.05）;NK细胞杀伤功能及淋巴细胞增殖能力显著增加（P<0.05）。结论：十全育真汤可促进H₂₂荷瘤小鼠免疫器官的生长,增强机体免疫功能,有利于肿瘤机体的恢复。     

小鼠正常肝、再生肝和腹水型肝癌H22a细胞酪氨酸蛋白磷酸酶的比较研究

小鼠肝在再生过程中,胞浆酪氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)活力比正常肝有明显升高,并且伴有时相变化,,手术后24—48h活力达到最高,而H22a细胞各组分的活力都比正常肝低。PTPP在正常肝细胞的溶酶体中分布最高;再生肝中则在细胞核、胞浆和微粒体中更集中;在H22a细胞中,PTPP的活力分布趋于平均化。再生肝和H22a细胞胞浆中都缺少正常肝的a、b两个PTPP活力峰,其它五个主要PTPP峰与正常肝无根本的差别。     

Antigenotoxic and anticytotoxic effect of camel milk in mice treated with cisplatin

Camel milk (CM) has good nutritive value, in addition to its antigenotoxic and anticytotoxic effects. Therefore the aim of this investigation was to evaluate the capacity of CM to inhibit the micronucleated polychromatic erythrocytes (MnPCEs) in the bone marrow and improve the mitotic activity produced by cisplatin. Cisplatin is one of the most widely used antineoplastic drugs in the treatment of cancer. The 70 adult male Swiss albino mice were divided into seven groups:

• Gr. I: treated with distilled water and considered as a control group.
• Gr. II: treated with camel milk (33 ml/kg, b.w).
• Gr. III: treated previously with cisplatin (0.5 mg/kg, b.w).
• Gr. IV: treated with camel milk and followed after 2 h. with cisplatin (33 ml/kg → 0.5 mg/kg, b.w).
• Gr. V: treated with camel milk and cisplatin at the same time (33 ml/kg + 0.5 mg/kg, b.w).
• Gr. VI: treated with an acute single dose of cisplatin (2.5 mg/kg, b.w).
• Gr. VII: treated with camel milk prior and followed with an acute single dose of cisplatin (33 ml/kg → 2.5 mg /kg, b.w). The animals were sacrificed 24 h after cisplatin injection. The pretreatment with CM dose caused a significant decrease (P < 0.001) in the frequency of MnPCEs and increase (P < 0.001) in the mitotic index (MI) induced by cisplatin when compared with the groups treated with cisplatin alone. The possible explanation for the antigenotoxic and anticytotoxic effects observed in the pretreatment with CM is ascribed to its contents. In conclusion, from the findings we suggest that this milk has some antioxidant effect, and the antigenotoxic mechanism of this milk needs to be explored further before their use during cisplatin chemotherapy.

     

The carboxyl-terminal of BRCA1 is required for subnuclear assembly of RAD51 after treatment with cisplatin but not ionizing radiation in human breast and ovarian cancer cells

BRCA1 plays an important role in maintaining genomic stability through its involvement in DNA repair. Although it is known that BRCA1 and RAD51 form distinct DNA repair subnuclear complexes, or foci, following environmental insults to the DNA, the role of BRCA1 in this process remains to be characterized. The purpose of the study was therefore to determine the role of BRCA1 in the formation of RAD51 foci following treatment with cisplatin and ionizing radiation. We found that although a functional BRCA1 is required for the subnuclear assembly of BRCA1 foci following treatment with either ionizing radiation or cisplatin, a functional BRCA1 is required for RAD51 foci to form following treatment with cisplatin but not with ionizing radiation. Similar results were obtained in SKOV-3 cells when the level of BRCA1 expression was knocked down by stable expression of a retrovirus-mediated small-interfering RNA against BRCA1. We also found that the carboxyl-terminal of BRCA1 contains uncharacterized phosphorylation sites that are responsive to cisplatin. The functional BRCA1 is also required for breast and ovarian cancer cells to mount resistance to cisplatin. These results suggest that the carboxyl-terminal of BRCA1 is required for the cisplatin-induced recruitment of RAD51 to the DNA-damage site, which may contribute to cisplatin resistance.     

黄芪多糖对Lewis肺癌小鼠细胞因子及顺铂所致免疫功能低下的影响

目的观察黄芪多糖(APS)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、细胞因子及顺铂(DDP)所致免疫功能低下的影响。方法 90只小鼠,设空白对照组10只,余80只依次造模为荷瘤小鼠,并随机分为8组:模型组(等体积生理盐水),顺铂阳性对照组(6 mg/kg DDP),APS低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高剂量(200 mg/kg)组,联合用药低、中、高剂量组(DDP剂量减半,APS各剂量同上),于造模次日起各组分别腹腔注射等体积的药物0.3 mL。DDP每周一次,其余药物每天1次,连续20d。于第21天取血清采用ELISA法测定细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的水平,并观察各组抑瘤率及免疫器官指数。结果 DDP、APS低、中、高剂量及联合用药低、中、高剂量组对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤率分别为49.30%、17.21%、39.68%、42.98%、51.02%、57.21%、65.11%(与模型组比较P0.05或0.01;联合用药组与DDP组比较P0.05)。与空白对照组比较,APS中、高剂量组和联合用药组脾脏指数显著升高;与模型组比较,APS高剂量和联合高剂量脾脏指数差异有显著性(P0.05);与DDP组比较,APS各剂量和联合用药组小鼠胸腺指数和脾脏指数均升高。结论 APS能提高Lewis肺癌小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的水平;增强DDP所致免疫功能低下小鼠的免疫功能,对免疫器官有一定的保护作用;能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,在与DDP减半量联合使用时可使DDP抑瘤作用增强,且其机制可能与增强机体的免疫功能有关,说明APS对DDP有一定的增效减毒作用。此项研究在实体瘤的治疗中有潜在的应用前景。