降钙素基因相关肽家族的受体活性修饰蛋白

降钙素基因相关肽家族中的降钙素、胰淀粉样酶、两种降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素具有相似的结构。受体活性的修饰蛋白（RAMP）是新近从蟾蜍卵细胞中发现并克隆出来的蛋白质。受体活性修饰蛋白是具有单一跨膜功能域的蛋白,可调节降钙素的受体样受体（CRLR）向细胞膜的转运和识别配体的特异性。不同的RAMP可与降钙素受体试样受体或降钙素受体结合表现为对不同配体具有亲和的、不同的受体表型而决定了体内的生物学效应。RAMP1转运的末端糖基化的成熟的CRLR蛋白,使CRLR表现为功能性的降钙素基因相关肽（CGRP）受体表型;RAMP2转运的CRLP是核心糖基化的未成熟的CRLR蛋白,使CRLR表现为功能性的肾上腺髓质素（Adm）受体表型。RAMP亦可与降钙素受体作用产生Amylin受体表型。     

骨形态发生蛋白家族及其受体在生殖调控中的作用

骨形态发生蛋白 (bonemorphogenelicprotein ,BMP)又称骨形成蛋白 ,属于转化生长因子超家族成员。本文从理化特性、受体种类、信号转导机制 ,以及在动物生殖调控中的作用和受体基因突变所导致的多胎机制等方面 ,详细阐述了有关BMP近年来的研究状况 ,旨在为研究绵羊或其它物种的多胎机制提供参考     

褪黑激素受体基因的研究进展

褪黑激素通过与药理学特异性的高亲和性G-蛋白耦联受体相结合来发挥其生物学功能。本文介绍了褪黑激素受体的结构、功能与调控、褪黑激素受体基因的克隆及基因结构、褪黑激素受体基因的发育性表达与作用、褪黑激素受体基因的定位与多态性分析,并讨论了该基因与繁殖季节性的关系。 Abstract:Melatonin exerts its biological effects through pharmacological specific,high affinity G protein-coupled receptors.This review introduced the structure,function,and regulation of melatonin receptor,the cloning and structure,developmental expression,mapping and polymorphism of melatonin receptor gene.The relationship between melatonin receptor gene and reproductive seasonality was also discussed.     

降钙素基因相关肽家族受体及其受体活性修饰蛋白

降钙素基因相关肽家族是一类多功能的激素家族 ,参与人体的多种生物学功能 ,与多种疾病有关。降钙素基因相关肽受体包括降钙素受体 (CTR)和降钙素受体样受体 (CRLR) ,CTR可以独自与降钙素结合 ,而CRLR必须与一组称作受体活性修饰蛋白 (RAMPs)的蛋白质共同作用才能发挥生物学功能。综述CTR的研究概况及CRLR与RAMPs相互作用的机制和表达调控 ,以期为人们设计新型药物提供参考。     

基因多形性与抗心力衰竭药物疗效

临床上常用的一种通过阻断β受体的抗心衰药物只对50％的病人有效。基因研究发现，β受体基因多形性与该药物的疗效有关。在人群中，β受体基因有两种常见表型，一种表型表达的受体在蛋白结构的特定部位含精氨酸，另一种表型表达的受体在蛋白结构的这一部位含有的是甘氨酸。每个人从父母那里遗传两套基因，因此人们有的有两条合成含精氨酸受体的基因；有人有两条合成含甘氨酸受体的基因；还有人有一条合成含精氨酸受体的基因，一条合成含甘氨酸受体的基因。将人的合成含精氨酸受体的基因转给小鼠，这种小鼠不仅易于发生心衰，而且对β受体阻断剂反应好。     

降钙素基因相关肽受体组分蛋白

降钙素基因相关肽受体组分蛋白(calcitonin gene-related peptide-receptor component protein,CGRP-RCP)是降钙素基因相关肽受体的一个具有146/148个氨基酸的胞内膜周边蛋白,特异地与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)相互作用并促进CGRP和肾上腺髓质素的信号跨膜转导,现认为CGRP-RCP也是G蛋白偶联受体中一个动态的调节器。CGRP-RCP的mRNA在人和鼠的几乎所有组织均可检测到,在小鼠睾丸中分布尤其明显。在哺乳动物中,CGRP-RCP与C17(酵母菌中聚合酶III的必需亚基)是直系同源蛋白,人体的CGRP-RCP能取代酵母中的C17,发挥与C17相同的生物学作用。     

TGF-β超家族在软骨发生、发育和维持中的作用

转化生长因子b(Transforming growth factor b, TGF-b)超家族包括TGF-b和骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)两个亚家族。TGF-b超家族信号通路的配体、配体拮抗分子、受体、信号转导分子均在软骨内成骨过程中发挥各自独特的作用, 参与调控软骨细胞的谱系分化、增殖、成熟、凋亡和矿化。BMP信号能起始间充质细胞向软骨细胞分化并维持软骨细胞的特性, 在软骨发生过程中起主导作用; 在生长板发育的过程中, BMP信号促进软骨细胞的成熟, 促进成骨, 而TGF-b信号抑制软骨细胞的肥大分化, 维持生长板中适量的软骨细胞; TGF-b信号和BMP信号对于关节软骨的维持和修复都是不可或缺的。因此, TGF-b超家族的重要作用贯穿骨骼发育过程的始终。     

TGF—β超家族在软骨发生、发育和维持中的作用

转化生长因子β(Transforming growth factor β,TGF-β)超家族包括TGF-β和骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)两个亚家族.TGF-β超家族信号通路的配体、配体拮抗分子,受体、信号转导分子均在软骨内成骨过程中发挥各自独特的作用,参与调控软骨细胞的谱系分化、增殖、成熟、凋亡和矿化.BMP信号能起始间充质细胞向软骨细胞分化并维持软骨细胞的特性,在软骨发生过程中起主导作用;在生长板发育的过程中,BMP信号促进软骨细胞的成熟,促进成骨,而TGF-β信号抑制软骨细胞的肥大分化,维持生长板中适量的软骨细胞;TGF-β信号和BMP信号对于关节软骨的维持和修复都是不可或缺的.因此,TGF-β超家族的重要作用贯穿骨骼发育过程的始终.     

新型的Ⅱ类细胞因子受体--白介素22结合蛋白

白介素22结合蛋白为一种新型的Ⅱ类细胞因子受体家族成员,已弄清了其蛋白质结构,基因及其表达。它能直接结合IL－22,作为IL－22的拮抗剂,发挥着多种生物学功能。     

β—淀粉样前体蛋白分子生物学研究进展

β－淀粉样前体蛋白基因定位于２１号染色体长臂，具“管家基因：结构特点。在组织中广泛表达但有一定的特异性，其近侧启动子（－９６＋１０１）淡转录活性所必需，研究发现β－淀粉样前体蛋白基因表达调控由多种顺式元件和反式因子的相互作用所决定。β－淀偻样前体蛋白呈细胞表面受体构象，具有多种生物学功能。业已证明其分子生物学功能的改变与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ病的发生、发展有着十分密切的关系。     

一种双顺反子表达载体的构建及应用的研究

将表达载体pEC34中的一段寡核苷酸序列,其中包括翻译增强子序列、SD序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点,插入GST基因后,构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白2A(hBMP2A)和人骨形成蛋白3(hBMP3)C端肽段,将第一顺反子基因（GST基因）切小到原来的1／3时,则位于下游的第二顺反子基因编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达量增加一倍。     

Generation of a Bmp2 conditional null allele

Bone morphogenetic proteins (Bmp's) are known to play many important roles in embryogenesis. In addition, recent data from human genetic studies has revealed that Bmp's also have important functions in maintenance of the adult phenotype and aging. The original Bmp2 germline null allele resulted in lethality at embryonic day 7.0-10.5 due to malformation of the amnion/chorion and cardiac malformations. Because the early embryonic lethality of the Bmp2 germline null allele hinders further investigation into Bmp2 function at later stages, we generated a Bmp2 conditional null allele. Using gene targeting in mouse embryonic stem (ES) cells, we introduced LoxP sites upstream and downstream of Bmp2 exon 3 that encodes the mature peptide. Our results indicate that the Bmp2 conditional null allele is a true conditional null that encodes wildtype activity and reverts to a null allele after cre recombinase-induced recombination.     

骨形成蛋白诱导型真核载体的构建及其表达

成骨分化相关基因骨钙素 (OC)等的启动子内均含有成骨特异性转录因子Cbfa1特异性作用元件 ,而骨形成蛋白 (bonemorphogeneticprotein ,BMP)的促成骨分化作用正是通过其首先引起Cbfa1的升高 ,而后Cbfa1激活这些基因的表达 ,最终出现成骨分化表型 .为解决BMP没有理想的活性测定方法的问题 ,在RT PCR结果证实BMP 2可促进NIH3T3和C2C12细胞Cbfa1表达后 ,构建了串联6个Cbfa1作用元件的小鼠OC部分启动子 (6OCP)控制萤光素酶 (luciferase)报告基因的真核表达质粒 ,以期来放大BMP诱导报告基因表达的作用效果 .即通过细胞转染、rhBMP 2刺激后检测萤光素酶活性变化 ,从而间接定量测定rhBMP 2的生物学活性 .结果表明 ,pcDNA3 6OCP Luc转染细胞后其报告基因的基础活性较pcDNA3 Luc大为降低 ;而且在一定剂量范围内 ,转染细胞的萤光素酶活性 (荧光值 )随rhBMP 2剂量增加而升高 ,并呈线性正相关 ,为建立BMP活性定量测定的方法打下基础     

BMP2 initiates chondrogenic lineage development of adult human mesenchymal stem cells in high-density culture

Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) have been shown to differentiate into distinct mesenchymal tissues including bone and cartilage. The capacity of MSCs to replicate undifferentiated and to mature into cartilaginous tissues suggests these cells as an attractive cell source for cartilage tissue engineering. Here we show that the stimulation of human bone marrow-derived MSCs with recombinant bone morphogenetic protein-2 (BMP2) results in chondrogenic lineage development under serum-free conditions. Histological staining of proteoglycan with Alcian blue and immunohistochemical staining of cartilage-specific type II collagen revealed the deposition of typical cartilage extracellular matrix components. Semi-quantitative real-time gene expression analysis of characteristic chondrocytic matrix genes, such as cartilage link protein, cartilage oligomeric matrix protein, aggrecan, and types I, II, and IX collagen, confirmed the induction of the chondrocytic phenotype in high-density culture upon stimulation with BMP2 and transforming growth factor-beta3 (TGFbeta3). Histologic staining of mineralized extracellular matrix with von Kossa, immunostaining of type X collagen (typical for hypertrophic chondrocytes), and gene expression analysis of osteocalcin and adipocyte-specific fatty acid binding protein (aP2) further documented that BMP2 induced chondrogenic lineage development and not osteogenesis and/or adipogenesis in human MSCs. These results suggest BMP2 as a promising candidate for tissue engineering approaches regenerating articular cartilage on the basis of mesenchymal progenitors from bone marrow.     

RNA inhibition of BMP-4 gene expression in postimplantation mouse embryos

Short, hairpin RNA (shRNA) directed against bone morphogenetic protein 4 (Bmp-4) was delivered to early postimplantation staged mouse embryos via tail vein injection of pregnant dams. As early as 24 h postinjection, embryos expressed a DsRed marker and later exhibited defects of neural fold elevation and closure and of cardiac morphogenesis. Immunohistochemical analysis of sectioned embryos indicated that Bmp-4 protein was depleted and gene expression analysis indicated there was a reduction in Bmp-4 mRNA and an upregulation of the Bmp-4 antagonists, noggin and chordin, in embryos exposed to the shRNA, but not in control embryos. There was no change in the expression of Gata4, brachyury, or claudin6 in RNAi exposed embryos, indicating that RNA silencing was specific to Bmp-4 rather than producing widespread gene inhibition. Delivery of shRNA to embryos has the potential to specifically knockdown the expression of developmentally essential genes and to rescue gene mutations, significantly decreasing the time required to analyze the function(s) of individual genes in development.     

人骨形态发生蛋白—7全长cDNA的克隆及序列测定

从人胎儿肾中提取总ＲＮＡ,反转录得ｃＤＮＡ,ＰＣＲ扩增获得１．３ｋｂ的骨形态发生蛋白－７（ＢＭＰ－７）的全长ｃＤＮＡ。克隆的ＢＭＰ－７基因编码的氨基酸序列与献报道相同。     

重组人BMP-2在烟草不同组织中的表达

骨形态发生蛋白（BMPs）是一类调节骨组织发育的生长因子。BMP-2是BMP家族中诱骨活性最强的。在骨组织工程研究和临床应用中需要大量的BMP-2。因此,研究出一种能够有效地大量生产BMP-2的方法是十分必要的。随着植物分子生物学的进展,转基因植物被用作一种生物反应器来生产目的蛋白。以gus作为报告基因,研究了重组人bmp-2基因在烟草中的表达。通过GUS活性检测、半定量PCR和Western blotting分析了根、茎、叶组织中基因表达的水平,结果显示融合蛋白在根和茎组织中表达量显著高于叶组织。由于根和茎组织中蛋白组成与叶组织相比相对简单,提示其更易于进行目的蛋白的纯化。     

自固化磷酸钙人工骨复合骨形成蛋白在牙槽骨缺损修复中的应用

目的：探讨自固化磷酸钙人工骨（autosolidification calcium phosphate cement,ACPC）复合骨形成蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）对牙槽骨缺损修复的生物学作用。方法：将ACPC/BMP即刻植入拔牙术后患者牙槽创口,随访24周,通过临床检查和CCD数字化摄片观察牙槽骨缺损修复情况。结果：实验位点无炎症、过敏和毒性反应发生,实验组患者牙槽嵴骨量吸收较空白对照组少,外形维持较好。结论：BMP/ACPC复合骨兼具骨的引导性和诱导性,可促进新骨沉积钙化,即刻植入拔牙创利于增加牙槽骨量,维持牙槽外形,但材料降解性存在不足。     

人骨形成蛋白－2AcDNA基因工程产物诱骨活性的形态学证明

人骨形成蛋白２Ａ（ｈｕｍａｎｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ２Ａ,ｈＢＭＰ２Ａ）ｃＤＮＡ３′端５６７个核苷酸插入表达载体ＰＳＧ４Ｔ－２中,在大肠杆菌中获得１５％的表达,表达产物为２１ＫＤ的蛋白质,经包涵体洗涤,尿素变性和复性后,取１ｉｎｇ表达产物,植入小鼠股四头肌中,２１天后取植入区进行组织切片观察,证实这种基因工程产物具有良好的异位骨诱导活性。     

重组骨形态发生蛋白-7在骨损伤疾病治疗中的研究进展

骨形态发生蛋白-7(BMP-7)是具有强诱骨活性的蛋白质因子,已通过基因工程技术在体外得到表达,较长时间以来不断被应用于骨损伤疾病的研究,得到了确切的治疗效果。通过载体将BMP-7基因转入真核细胞,与生物聚合载体复合后植入体内,能表达并分泌活性的BMP-7,诱导骨细胞的生成,促进骨组织的修复,成为一种新的有效的治疗手段。