用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖

氨基酸分析仪在结构上与糖分析仪相似,本文仅讨论利用日立835-50型氨基酸分析仪分析还原糖。一、原理在硼酸缓冲液洗脱条件下,糖的混合物能够在强碱性阴离子交换树脂柱上得到分离。经分离的单一糖组分在98℃温度下,与2,2′-双金鸡纳酸盐试剂作用,生成蓝紫色的络合物。该络合物在波长562nm处有最大吸收,因此可用氨基酸分析仪检测器的570nm通道进行检出。检出信号经数据处理机处理,电传打字机打印出色谱图和分析实验报告。     

氨基酸的离子交换色谱(续)(理论基础和实践)

<正> 十、分析试剂为借助离子交换树脂成功地进行氨基酸色谱,试剂要特别纯化和对它进行必要的预处理。特别要注意去掉纯试剂中的重金属离子和带颜色的化合物,因为两者都牢固地保留在柱内离子交换树脂上,这不可避免地导致在氨基酸的分离过程中树脂交换容量的损失。对氨基酸离子交换色谱用主要试剂的必     

油茶籽氨基酸成分分析

油茶籽醇提物经阳离子交换树脂分离;水提物经酸水解,双向纸层析分离;用氨基酸分析仪测定,油茶籽含有十五种游离氨基酸和八种水解蛋白质氨基酸,对动物由入氯化碳引起肝损伤,有促进恢复的作用,无毒性,可利用的药源丰富。     

人凝血酶原复合物离子交换树脂的筛选及吸附性能研究

采用若干种人工合成的大孔阴离子交换树脂,对人血浆中凝血酶原复合物(PCC)的分离纯化性能进行了研究.同时.将DEAE-Sephadex A50时PCC的分离纯化性能与该类人工合成分离纯化材料进行了对比.研究结果表明,在各种人工合成大孔阴离子交换树脂中,CG-6对PCC具有较优的分离纯化性能;并系统研究了CG-6树脂对PCC分离纯化性能.     

刺五加有效成分及体外抑制二酰基甘油酰基转移酶活性研究

本文为研究刺五加(Acanthopanax senticosus Harms)的化学成分及其抑制二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)活性。刺五加用75%乙醇提取,经硅胶、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,结合理化性质、波谱数据鉴定化合物的结构。得到12个化合物分别鉴定为赤式-愈创木基丙三醇-β-O-4′-二羟基松柏醇(1)、(E)-3-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-enal(2)、7′E-4,9-dihydroxy-3,3′,5′-trimethoxy-8,4′-oxyneolign-7′-en-9′-al(3)、5-甲氧基去氧双松柏醇(4)、去氧双松柏醇(5)、5,5′-二甲氧基落叶松脂素(6)、5,5′-二甲氧基开环异落叶松树脂酚(7)、(7′S,8′S)-4′-O-甲基黄花菜木脂素(8)、(+)-9′-O-(Z)-阿魏酰-5,5′-二甲氧基落叶松脂素(9)、(+)-9′-O-(E)阿魏酰-5,5′-二甲氧基落叶松脂素(10)、大豆苷(11)和3′-甲氧基大豆苷(12)。其中化合物1～3和8～10为首次从该植物中分离得到。化合物1、3～7、9和10对DGAT1活性具有抑制作用,其IC_(50)值范围在81.5±1.2到123.2±1.1μM之间。     

提高Beckman 121 MB型氨基酸分析仪的分辨率

在Stein和Moor等人研究的基础上发展起来的Beckman 121MB型氨基酸分析仪,以聚苯乙烯磺酸树脂作为阳离子交换剂。单柱洗脱系统由pH3.28、pH3.90和pH 4.95的柠檬酸钠缓冲液组成。该仪器与日本、瑞典等国的同类仪器相比最大的缺点是无滤氨柱。因此对试剂、环境的要求很高,以消除氨对分析的污染。但在实际工作中,蒸馏水,缓冲液、试剂及实验室环境都可能带入氨,从而导致氨基酸分析,特别在碱     

树脂柱层析法从蚕蛹水解液中系统分离制备多种氨基酸

<正> 首先由Moore和Stein氏所建立并在近来极为迅速发展完臻的离子交换柱层析法已成功地应用于氨基酸生产。目前,国内已有从羊毛、猪毛、猪血粉、人发、蚕丝、大豆等水解液中分离制备氨基酸的报道。本文则是报道运用国产732强酸性阳离子交换树脂和717强碱性阴离子交换树脂,采用分组后,长线上柱——即多柱串联上样、分组洗脱、分段收集的分离方     

氨基酸的配位离子交换树脂拆分

最近十五年来,运用配位交换色谱直接拆分DL-α-氨基酸取得了很大进展。采用与金属离子络合的手性吸附剂的配位交换色谱完全拆分了各种DL-α-氨基酸。为分析目的则采用普通填料和手性络合物流动相的配位交换色谱。把手性络合物涂在硅胶上的配位交换色谱亦取得了较好的拆分效果。     

棕色固氮菌((?)zotobacter vinelandii)产生的钼配位化合物——Ⅰ.分离、纯化及其特性

棕色固氮菌在正常培养条件下能产生一种含肽物质,经浓缩及CM-和DEAE-纤维素柱分离纯化后,在蔗糖密度梯度离心中处于5％蔗糖溶液中(ρ=1.010～1.017gcm~(-3)),在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现一条带。含肽物质是由脂类、多肽和糖所组成。脂:肽:糖比例为1.76:1.00:0.27。脂类以磷脂为主,主要成分为磷脂酰乙醇胺。多肽含有十三种氨基酸,分子量约为4000道尔顿,圆二色散谱表明只有α螺旋结构。糖为乳糖。电子显微镜观察含肽物质为大小形状不一的颗粒状(直径为20～25 nm)和盘绕的聚合体。这种含肽物质可能是来自该细菌胞壁质中的脂多糖络合物。     

离子交换法从生产胱氨酸废液中分离提取三种碱性氨基酸

本研究利用国产７３２阳离子交换树脂,从生产胱氨酸废液中提取了三种碱性氨基酸。通过实验确定了洗脱分离三种氨基酸：组氨酸、赖氨酸、精氨酸的较适宜工艺条件,并根据平衡原理和色谱理论探讨了洗脱剂阴离子和ｐＨ值对洗脱分离的影响规律。有如下关系：设单位体积中离子交换树脂吸附总量为Ｑ,则：注＊：Ｋ＝ｐ／ｑｐ、ｑ分别为氨基酸在固定相（树脂）和流动相）（洗脱剂）中所占分数。注：ｎ（ｍａｘ）＝ｒ／ｑ：指洗脱出氨基酸最大浓度时洗脱剂用量。其中γ表示理论塔板数。由（４）式可看出,Ｅ值增大时ｎ（ｍａｘ）减小,即洗脱剂用量减少,由（３）式可知,ｐＨ值直接影响Ｅ值大小,不同ｐＨ条件下对Ｅ的影响如图１。由图１可知,Ｅ值随ｐＨ变化存在一个突跃阶段。恰当地调节ｐＨ值,可大幅度提高洗脱剂的洗脱能力,从而降低洗脱剂用量,降低成本;同时使洗脱后氨基酸与洗脱剂的分离更容易;另外不同的氨基酸由Ｅ值表现出的突跃阶段所对应的ｐＨ范围是不同的,因此可以利用洗脱剂ｐＨ值的改变选择性地洗脱某种特定的氨基酸,使性质类似的三种碱性氨基酸得以分离,由图２表示的实验结果证实了这一点。１．２．洗脱剂中阴离子对阳离子交换树脂洗脱的影响。当洗脱剂阴离子为弱酸根离子（以Ｓ－表示?     

LC-8A氨基酸分析仪检修

<正> LC—8A氨基酸分析仪是日本柳本株式会社80年代初的产品,可以满足一般氨基酸分析的要求。它采用三元缓冲液为流动相,以磺酸离子交换树脂为分离柱(φ4×125mm)的固定相,茚三酮显色剂与氨基酸柱后衍生化,570和440nm二波长检测,SYSTEM—1100微机程序控制和信号处理。LC—8A氨基酸分析仪与其它氨基酸仪在结构上有相似之处,输液泵和检测器等基本一致。许多部件在国内买不到,维修有一定难度。在实践中,我根据现有条件,对其曾出现的故障进行了检修。实践证明效果很好。     

含氟聚醚砜阴离子交换膜的制备和性能研究

以双(4-氯苯基)砜和2,2-双(4-羟基苯基)六氟丙烷为单体通过缩聚反应、氯甲基化、季铵化和碱化,制备了不同季铵化的含氟聚醚砜阴离子交换膜。利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)对聚醚砜(PES)、氯甲基化聚醚砜(CMPES)和季铵化聚醚砜(QPES)的结构进行了表征,并测试了膜的各项性能。结果表明,膜的离子交换容量(IEC)受氯甲基化反应条件的影响,最佳条件下制得QPES-A5膜性能最佳,IEC为1.739 meq·g~(-1),80℃下吸水率(WU)可达45.4%,溶胀率(SR)为20.6%,电导率为26.10 mS·cm~(-1),常温下拉伸强度为24 MPa。60℃时用3 mol/L NaOH溶液浸泡24 h后,电导率仍为21.90 mS·cm~(-1),良好的综合性能说明含氟聚醚砜阴离子交换膜在碱性阴离子交换膜燃料电池方面有很好的应用前景     

草菇子实体多肽的分离纯化及其结构分析

采用碱性蛋白酶酶解提取草菇子实体多肽,透析法对其进行分离纯化得到3-10、1–3及1 kDa以下3种多肽组分,比较3种组分的体外抗氧化活性。用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)、紫外吸收光谱、傅里叶红外光谱和氨基酸的测定方法表征纯化后多肽结构。结果表明,1–3kDa组分的抗氧化活性最强,其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率达到99.81%,铁离子自由基还原能力为1.47, 2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), ABTS+]自由基和羟自由基的清除能力分别达到99.15%、99.34%。此分子量的草菇抗氧化肽的总蛋白含量为71.12%,灰分含量为12.75%,水分含量为8.44%,其他为7.69%。经鉴定表明草菇子实体多肽是一种优质蛋白质。     

伊犁野生郁金香内生烟曲霉的分离鉴定及活性

【背景】对郁金香的研究主要集中在种质资源、引种栽培、扩繁育种及化学成分分析方面,而关于伊犁野生郁金香内生菌的研究尚未见报道。【目的】从伊犁野生郁金香中筛选出内生真菌并对其进行抑菌及抗氧化活性研究。【方法】采用组织块培养法和平板划线法对伊犁野生郁金香内生菌进行分离纯化;用斜面低温保存法对内生菌进行保存;以形态学方法和分子生物学方法对分离出的内生真菌进行鉴定;通过液体发酵得到次级代谢产物,对乙酸乙酯萃取发酵产物进行滤纸片抑菌分析。使用Fe3+总还原能力法、2-2′二苯基-1-三硝基苯肼(2,2′-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基法、 2′-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonicacid,ABTS]自由基法及羟基自由基法比较菌株乙酸乙酯层和水层的抗氧化活性。【结果】从伊犁野生郁金香中分离获得一株内生真菌,经鉴定为曲霉属(Aspergillus)烟曲霉(Aspergillus fumigatus),简称为YGL-1。YGL-1对金黄色葡萄球菌(Staphylo...     

茶叶中酸性杂多糖的部分化学性质及降血糖活性的研究

粗老绿茶用醇提、复合纤维素酶提取、醇沉、再经弱碱性的大孔阴离子交换树脂D315柱层析,经NaCl洗脱,超滤除盐得酸性多糖ATPS。传统多糖的分离纯化一般采用价格昂贵的DEAE纤维素柱层析,很难进行工业化生产,为考察价格便宜的大孔阴离子交换树脂D315的分离纯化性能,对其分离得到的酸性茶多糖ATPS的部分化学性质进行了研究。将ATPS上DEAE52纤维素柱进一步纯化,收集DEAE52 NaCl梯度洗脱的主峰,透析,冻干,得ATPS-Ⅰ。高效凝胶渗透色谱分析发现ATPS与ATPS-Ⅰ分子量分布基本一致,气相色谱和离子色谱分析表明两者的单糖组成均以鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸为主,而且摩尔比近似。紫外光谱扫描表明ATPS不含蛋白质,红外光谱分析表明其糖苷键键型有α-型和β-型两种,单糖主要以吡喃糖苷形式存在。实验表明大孔阴离子交换树脂D315可以起到分离纯化茶多糖的作用。动物实验表明：ATPS能抑制四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的升高。     

虫花菌胞外糖蛋白的分离、纯化及其性质研究

虫花菌(Isaria farinosa(Dicks)Fr.)发酵液经超滤浓缩、乙醇沉淀、弱酸性阳离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂去杂蛋白后,又经Sephadex G-150纯化得到PG。PG经醋酸纤维膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和Sepharose 4B柱层析,证明是单一均匀的糖蛋白。PG的分子量为11.1万。PG的糖含量为92.35％、蛋白含量为7.61％。PG用气相色谱、红外光谱分析表明含有D-甘露糖、D-半乳糖,其摩尔比是5.93:1。推测PG主要含α-型糖苷键。PG对小鼠实体瘤S-180有一定的抑制作用,抑瘤率为22.2％。     

福建产太子参氨基酸成分分析

采用日立L8800全自动高速氨基酸分析仪,从福建柘荣产太子参中检出18种氨基酸,全氨基酸总质量分数为77.7g.kg-1,其中精氨酸(Arg)高达20.8 g.kg-1;此外,还发现太子参中含有丰富的γ-氨基丁酸,质量分数高达16.5 g.kg-1。采用RT-HPLC(柱前衍生-反相液相色谱分离)检测质量分数为20.5 mg.kg-1,验证了HPCEC(离子交换色谱分离-柱后衍生法)氨基酸自动分析结果。     

菜豆黄色花叶病毒(BYMV)—新疆苜蓿分离株的鉴定

从新疆苜蓿黄斑花叶病株上分离到病毒分离物M-4,该分离物能引起多种豆科值物系统花叶,并在藜科植物上产生局部褪绿斑,易经汁液摩擦接种和蚜虫传毒,不经菜豆种子传毒。病毒致死温度60—65℃,体外保毒期4—5天,稀释限点10~(-3)—10~(-4)。病毒粒体线状,长约660—740nm,宽15nm;在感病的寄主叶片细胞中,电镜观察到风轮状、带状和环状内含体。免疫电镜法测定,该分离物与菜豆黄色花叶病毒(BYMV)抗血清有血清反应。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和氨基酸自动分析仪分析分别测得该病毒的衣壳蛋白亚基分子量为16,200道尔顿,氨基酸残基数128个。鉴定结果认为,分离物M-4是BYMV的一个株系。     

植物呼吸及代谢的研究 Ⅵ.乙酸在水稻幼苗中的利用

以[2-C~(14)]-乙酸饲喂水稻黄化幼苗,研究了乙酸在体内的呼吸途径。从饲喂试验获得了以下结果:1.以80%酒精提取萌发5天的水稻幼苗,将提取液通过阴离子交换树脂 AmberliteIRA-400,收集洗脱液进行纸上层析。从层析谱上得到异柠檬酸、柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸及苹果酸。结果表明在水稻幼苗中存在着三羧酸循环的中间成分。2.以[2-C~(14)]乙酸饲喂水稻幼苗,经过不同时间2至40或60分钟保温,立即以80%热酒精提取。提取液通过阳离子交换树脂 Zerolite 225及阴离子交换树脂 AmberliteIRA-400,以分离出有机酸、氨基酸及糖三类化合物。这三类化合物放射性强度的测量结果表明,放射性最初只在有机酸中出现,随后为氨基酸,而糖类几乎始终不出现放射性。3.从饲喂乙酸的水稻幼苗提取液中分离出的有机酸,用阴离子交换树脂 Zerolite FF进行柱层析,分部收集各种有机酸,浓缩并测量其放射性强度。结果表明柠檬酸、异柠檬酸、琥珀酸、延胡索酸及苹果酸均被 C~(14)标记上。当饲喂乙酸时,同时加入丙二酸,则乙酸渗入到有机酸的总量降至50%以下,而标记琥珀酸的放射性强度却相对增加,纸层析谱的放射自显影也证明有琥珀酸的积累。4.从不同时间饲喂乙酸所分离出的有机酸,其放射性强度测量结果表明,2分钟标记琥珀酸出现最多,至10分钟后,苹果酸和柠檬酸同时随之增加,纸层析谱的放射自显影也证实了这点。5.当饲喂乙酸时,同时加入亚砷酸钠或α,α′-联呲啶,则乙酸的利用受到不同程度的抑制,分别为68%及44%,而 C~(14)渗入琥珀酸的量只分别受到46%及29%的抑制,即施用抑制剂后仍有相当数量标记琥珀酸的积累。6.氨基酸的纸层析及放射性强度结果表明,天门冬氨酸及谷氨酸的放射性分别占氨基酸总放射性的17%和20%。饲喂乙酸时加入丙二酸,C~(14)渗入氨基酸下降50%以上,由此亦可见乙酸最早渗入到与三羧酸循环有直接联系的氨基酸中。7.从上述实验结果可以得出结论,在水稻整体幼苗中存在着三羧酸循环。同时根据短时间饲喂乙酸首先出现大量标记琥珀酸以及亚砷酸钠和α,α′联呲啶抑制后仍有较大量琥珀酸积累的事实,可以认为乙酸的利用除了主要通过三羧酸循环以外,还可能通过乙醛酸循环及二羧酸循环等途径。     

茶多糖金属络合物的制备及清除自由基活性研究

粗老绿茶经弱碱性的大孔阴离子交换树脂D315柱层析分级,得到以酸性糖为主的多糖样品ATPS.将ATPS与金属离子Ca2+、Fe3+络合,制备得到ATPS-Ca(Ⅱ),ATPS-Fe(Ⅲ)络合物.研究发现茶多糖对不同的金属离子配位能力大小不同,ATPS-Ca(Ⅱ)的络合程度远高于ATPS-Fe(Ⅲ).红外光谱扫描发现茶多糖可能以仲羟基和羧基的C-O配位为主.采用化学发光体系产生自由基模型,以比较经金属离子络合后的不同结构的茶多糖清除自由基的能力.研究发现:ATPS及其络合物清除·OH活性远高于O2-,且ATPS-Ca(Ⅱ)清除羟自由基活性比ATPS减弱很多,ATPS-Fe(Ⅲ)清除羟自由基活性与ATPS接近,一方面,这可能与茶多糖ATPS与二价钙的络合程度远远强于与三价铁的络合程度,其清除·OH活性很大程度与络合金属离子位点的数目及络合强度有关,另一方面,可能与·OH相比,茶多糖与O2-的反应活性很弱有关.