厌氧菌的两种简易培养方法——铁丝圈厌氧法与催化剂厌氧法

现在临床标本中的厌氧菌主要是革兰氏阴性杆菌、阳性球菌和阳性无芽孢杆菌等。为解决这些菌分离培养的难题,我们参考国外资料,发展出两种简单有效的厌氧培养法,现报告如下。一、铁丝圈厌氧法     

小鼠盲肠内容物中正常菌群的分离和定量

本文报道了采用厌氧培养技术,从小鼠盲肠内容物中分离到6株严格厌氧和兼性厌氧菌。鉴定为拟杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、难辨梭菌、粪链球菌和大肠扦菌。它们在小鼠盲肠内容物的正常菌群中占优势,含菌量与国外文献中报告的相似。     

厌氧菌预还原琼脂平板培养方法

为简化厌氧菌分离培养方法,使其在普通实验条件下于固体培养基上形成单菌落,本研究增加庖肉培养基无氧溶液体积,用作无氧倍比稀释液,在琼脂柱下进行倍比稀释,将皿盖带有胶塞孔的厌氧琼脂平板进行预还原,注射接种倍比稀释菌液,通过厌氧指示剂监测无氧效果,初步试用于肠道厌氧菌分离培养。结果显示,该方法整个操作过程厌氧效果良好,无需专门厌氧设备即可以分离纯化培养肠道乳酸杆菌,甚至无芽胞专性厌氧菌,如双歧杆菌和韦荣球菌。     

悉生重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠的研究——Ⅰ.肠道厌氧菌群的分离和鉴定

本文报道了由澳大利亚WEHI研究所(The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research)引进的悉生SCID(Severe Combined Immunodeficient)小鼠肠道厌氧菌群的分离、鉴定结果。该小鼠粪便标本需氧及厌氧培养发现应用非选择性Scheadler血琼脂需氧条件下有一种革兰氏阳性杆菌生长;厌氧条件下生长的培养物经数种选择性培养基也分离出革兰氏阴性及阳性杆菌,据细菌形态学,染色特征,生化反应特性等鉴别为吉氏拟杆菌、嗜酸乳杆菌和梭形杆菌。     

简易厌氧培养皿及厌氧罐检测厌氧菌的对比观察

在厌氧菌检验中,培养器材的选择是厌氧菌分离培养成败的关键之一。本室采用简易厌氧培养皿和厌氧罐两种不同器材进行对比试验,报告如下。１材料与方法１１器材简易厌氧培养皿为两个磨砂面边缘的玻璃平皿,高２ｃｍ,直径８５ｃｍ;厌氧罐选用高１７ｃｍ、直径１４ｃ...     

胃癌及癌旁组织中无芽孢厌氧菌相关性的研究

在实验研究过程中发现 ,不同的消化道疾病患者 ,胃黏膜微生物群的检出率、菌种、数量均有不同 ,其中胃癌组微生物群改变最明显。为了解微生物与胃癌的相关性 ,对 5 7例胃癌患者的癌组织和癌旁组织进行了无芽孢厌氧菌的检测 ,实验结果表明 ,胃癌病变的中心部位与癌旁组织的无芽孢厌氧菌的检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰氏阳性无芽孢厌氧菌 (优杆菌、丙酸杆菌、消化链球菌等 ) ,占检出菌株的 6 4 .86 %(48/74 ) ,其中硝酸盐还原实验阳性菌株为 5 9.4 6 % (44 /74 )。癌旁组织检出的主要为革兰氏阴性无芽孢厌氧菌 (类杆菌、梭杆菌、紫单胞菌、韦荣球菌 ) ,占检出细菌的 5 7.14 % (2 4 /42 ) ,硝酸盐还原实验阳性菌株为16 .6 7% (7/42 )。胃癌的病因受多种因素的影响 ,在胃癌组织中检测到无芽孢厌氧菌对胃癌的形成起到的作用 ,有待进一步研究。     

厌氧微生物培养分离：过去、现在和未来

厌氧菌是地球上数量最多、物种最丰富的微生物,也是分类上报道最少的微生物。它们对氧气敏感、生长条件苛刻,不容易培养分离。本文简要总结了厌氧微生物的研究历史,分析了限制厌氧微生物培养分离的主要因素,讨论了厌氧微生物培养分离的策略和方法,回顾了国内外厌氧微生物的系统分类学现状,并展望了厌氧微生物培养分离的发展趋势。     

成人牙周炎龈下套氧菌分离鉴定及药敏试验结果分析

分离并鉴定了329例成人牙周炎龈下优势厌氧菌群,并对不同病程中的菌群变迁、厌氧菌的药物敏感性进行了分析.成人牙周炎龈下标本中厌氧菌阳性检出率为97.9%,其中以牙龈紫质单胞菌检出率最高(38.5%),具核梭杆菌次之(18.9%).随着牙周病变程度的加重,牙龈紫质单胞菌、具核梭杆菌、产黑色素普氏菌、星群厌氧链球菌、厌氧消化链球菌的检出率增高(P＜0.05),小韦荣球菌的检出率下降(P＜0.01),表明前5种厌氧菌在AP发病过程中有重要作用,小韦荣球菌与之无关.替硝唑、甲硝唑和克林霉素对438株革兰氏阴性厌氧菌的MIC90分别为1～8,2～8和4～16 mg/L,对278株革兰氏阳性厌氧菌的MIC90分别为16～32,16～64和4～16 mg/L,表明替硝唑和甲硝唑体外抗革兰氏阴性厌氧菌效果优于克林霉素,抗革兰氏阳性厌氧菌作用不如克林霉素.     

一株高温高效产氢细菌的分离及产氢特征研究

实验组采用非选择性培养、选择性培养、液体培养和固体培养一整套培养方法,结合平面厌氧操作技术与培养瓶厌氧技术,从混合产氢培养液中分离得到1株较好的产氢细菌。细菌需氧实验证明:此细菌为厌氧细菌;Gram实验和芽孢染色实验表明:此菌为革兰氏阴性杆菌,无芽孢。在不同的pH值、不同金属离子与温度下,于间歇式条件下测定其产氢量。实验结果表明:此菌株对pH值敏感,其最适产氢pH值为5.5,最适温度在45℃左右,在最适宜条件下产气量在1000 mL/(5 g葡萄糖),产气周期在15 d左右。金属离子影响实验表明:缺少铁和镁离子对此产气菌株的产气量有明显影响,此菌株对铜离子(0.1 g/L)无抗性。     

厌氧菌感染的微生物学检查

厌氧菌分有芽孢的和无芽孢的两大类,过去对后一类报道很少。近年来,由于厌氧培养技术的改进,发现在人体内正常菌群中,厌氧菌占首位,其中绝大多数为无芽孢的厌氧菌。厌氧菌的临床感染率也很高。据报道,腹腔感染     

家鸭粪便正常菌群的研究

本文应用常规好氧培养法和厌氧培养法,分析了不同日龄、性别及饲养条件下金定鸭粪便正常菌群的组成与变化情况,并同成年骡鸭、正番鸭、北京鸭和康贝尔鸭的粪便菌群做了比较。     

感染根管的厌氧菌培养结果分析

从64只感染根管中的58只根管分离到144株无芽胞厌氧菌,其中类杆菌54株,厌氧性链球菌23株,韦荣氏球菌17株,真杆菌11株,梭杆菌10株,放线菌8株,双岐杆菌2株,消化链球菌和消化球菌19株。40只根管为厌氧菌和兼性厌氧菌或需氧菌混合感染,18只根管和6只根管分别为单独厌氧菌和兼性厌氧菌感染。33只根尖周炎根管分别采集牙髓和根尖渗出物样本进行培养,实验结果表明牙髓样本中革兰氏阳性厌氧杆菌检出率较高,根尖渗出物中以产黑素类杆菌属的细菌检出率较高。根尖周炎和牙槽脓肿患者的感染根管中产黑素类杆菌属的细菌检出率明显高于蜂窝组织炎患者。     

厌氧培养皿及厌氧培养管的临床应用——对传统的厌氧菌分离培养及鉴定方法的简化

利用我们研制的厌氧培养皿及管,共检验了39份牙髓炎及牙周炎标本,分离出厌氧菌59株,标本中厌氧菌分离的阳性率为100％。其中类杆菌28株,消化链球菌9株,消化球菌7株,韦荣氏球菌5株,真杆菌2株,梭形杆菌8株。在类杆菌中产黑素类杆菌21株,占类杆菌总数的75％。结果表明使用厌氧培养皿及管研究厌氧菌简便、有效、经济,适于基层单位应用。     

一株厌氧嗜盐菌的鉴定

从冬尖腌制品中分离到一株厌氧嗜盐菌（SEM）,该菌为革兰氏阴性杆菌,大小为0．5×6.0μm,专性厌氧,不运动,不形成芽孢,生长需要8％～25％NaC1,最适生长盐浓度为12．50～17．50,能利用多种糖和醇,发酵葡萄糖产生丙酸和已酸。它应归属于严格厌氧嗜盐菌Haloanaerobe,但与已报道的几个种有较大差异,是否为新种,还有待于进一步研究。     

日本弓背蚁消化道厌氧细菌的分离培养

【目的】采用自行设置的厌氧装置,分离培养日本弓背蚁Camponotus japonicus消化道厌氧细菌。【方法】改进了一种简易的厌氧装置——平皿夹层法,利用4种培养基对日本弓背蚁消化道内厌氧或兼性厌氧菌进行分离培养。【结果】从日本弓背蚁消化道共分离到22个不同的菌株,隶属于厚壁菌门、放线菌门和变形菌门3大类群的17个属;4种培养基分离到的细菌种类存在明显差异,选择性较强,其中从LB和牛肉膏蛋白胨培养基上分离到的细菌种类较多,分别为10种和8种;从MRS和LBS培养基上分离到的细菌较少,分别为3种和1种;大工蚁和小工蚁的消化道细菌组成也存在差异,可能与其在巢群中担负的功能和职责有关,还有待于进一步研究分析。【结论】利用平皿夹层法可以成功分离到日本弓背蚁肠道的厌氧细菌,该种方法对于其他昆虫消化道厌氧菌的分离培养具有一定的参考价值。     

小型简易厌氧手套箱的研制与考核

近年关于厌氧菌培养技术和方法获得惊人的发展,从六十年代亨格特转管法到八十年代的Ｇａｓ－Ｐａｋ厌氧罐和厌氧手套箱的开发研制,使厌氧菌的培养技术日趋完善［１］,我国八十年代曾由陈聪敏教授等人［２］开发厌氧手套箱和义乌生产的抽气换气厌氧培养装置,但终因造价...     

30例口腔感染患者无芽孢厌氧菌的分析

人类口腔1克牙垢约有10~(10～11)个厌氧菌,每毫升唾液有10~(8～9)个厌氧菌,比需氧菌多10倍。当机体或口腔局部抵抗力减弱以及生态环境改变时,口腔内常居的无芽孢厌氧菌毒力相对增强,可引起较严重的感染。本文报道30例口腔感染患者无芽孢厌氧菌的分离、培养和鉴定结果。     

5—硝基咪唑类药物体外抗无芽孢厌氧菌效果的观察

从多种临床标本中分离并鉴定了200株无芽孢厌氧菌.赛克硝唑(SNZ)、替硝唑(TNZ)和甲硝唑(MNZ)对120株革兰氏阴性厌氧菌的MIC90分别为1～4,1～2和4～8 mg/L,对80株革兰氏阳性厌氧菌的MIC90分别为4～8,4～16和16～32 mg/L.SNZ体外抑制革兰氏阴性厌氧菌作用略弱于TNZ,但抑制革兰氏阳性无厌氧菌较TNZ稍强,MNZ对两类厌氧菌的抑制效果均不如SNZ和TNZ.     

临床厌氧菌的分离和鉴定

我们从口腔、胸部、腹部和盆腔等处采集了110份临床感染标本,以自制的输送培养基立即送实验室,在厌氧手套箱(霍尔玛厌氧系统1029型)或Gas-pak罐中,行厌氧菌的分离和培养,其中64份标本检出厌氧菌,阳性率为58％。临床标本中牙周炎标本厌氧菌检出率高达100％,牙髓炎标本为85％,阑尾脓肿和腹膜炎标本为83％,胆道标本为39％,脓胸标本为57％,盆腔标本为33％,早期单纯性阑尾炎和甲状腺囊肿合并感染的标本各5份,都未检出厌氧菌。从64份阳性分离的标本中共分离到厌氧菌370株,经鉴定分别属于11个菌属32个菌种(未定种的有74株),其中类杆菌最多占45.9％(类杆菌属中脆弱类杆菌占37.6％),次为梭杆菌属和消化链球菌属,各占15.1％。革兰氏阳性无芽胞厌氧菌占8％左右,而梭菌属为8.9％,其余是二氧化碳噬纤维菌属(2.9％)、韦荣氏球菌属(1.3％)、链球菌属和纤毛菌属(1.5％)等。在厌氧菌鉴定中,我们使用了微量生化直接酶测定技术和代谢产物的气相色谱分析技术,这些方法在厌氧菌鉴定中比常规方法敏感且有较大的价值。     

腹内感染的细菌学研究

本文对外科腹内感染150例进行了需氧与厌氧的细菌学研究。结果表明腹内感染的病原菌都是消化道内的正常菌群,需氧菌以大肠杆菌等革兰氏阴性杆菌为主,而厌氧菌则以吉氏拟杆菌等脆弱群拟杆菌多见。感染多为几种细菌的混合感染,尤其是需氧菌与厌氧菌的混合感染。并对内源性细菌引起感染的致病机理进行了讨论。