五种开口箭属植物根状茎中甾体皂甙及甾体皂甙元的初步研究

薄层层析结果显示五种开口箭属植物根状茎中均含有甾体皂甙和甾体皂甙元 ,为开口箭属植物作为甾体药物资源提供了依据。     

弯蕊开口箭中的多羟基甾体皂甙元

从弯蕊开口箭(Tupistra wattii Hook. f.)的新鲜根茎中分离出2个新的多羟基甾体皂甙元,分别命名为弯蕊皂甙元B (wattigenin B) (1) 和弯蕊皂甙元C (wattigenin C) (2), 同时分离到2个已知的甾体皂甙元--凯替皂甙元kitigenin (3)和铃兰皂甙元B (convallagenin B) (4).通过波谱解析鉴定了这4个皂甙元的结构,并测定了它们在体外对肿瘤细胞K562和A2780a的细胞毒活性.化合物1～4为首次从该种植物中分离得到.     

弯蕊开口箭中的多羟基甾体皂甙元

从弯蕊开口箭(Tupistra wattii Hook．f．)的新鲜根茎中分离出2个新的多羟基甾体皂甙元,分别命名为弯蕊皂甙元B(wattigenin B)(1)和弯蕊皂甙元C(wattigenin C)(2),同时分离到2个已知的甾体皂甙元——凯替皂甙元kitigenin(3)和铃兰皂甙元B(convallagenin B)(4)。通过波谱解析鉴定了这4个皂甙元的结构,并测定了它们在体外对肿瘤细胞K562和A2780a的细胞毒活性。化合物1～4为首次从该种植物中分离得到。     

五种开口箭属植物根状茎中甾体皂甙元的初步研究

薄层层析结果显示五种开口箭属植物根状茎中均含有甾体皂甙和甾体皂甙元,为开口箭属植物作为甾体药物资源提供了依据。     

从制胶后的胡芦巴种子中提取甾体长甙元的研究

胡芦巴为一年生草植物,本文以制胶后的胡芦巴种子剩余物为实验原料,研究了甾体皂甙元的最佳提取工艺路线和工艺。在该工艺条件下的重复试验表明,胡芒巴甾体皂甙元的得率在1.15％以上,熔点大于187.5℃,其中薯蓣皂甙元含量达86.5％,结果具有工业化开发价值。     

薯蓣皂甙元的气液色谱分析

薯蓣皂甙元(diosgenin)是合成甾体激素药物的重要原料。它主要是从薯蓣属(Dioscorea)植物的根茎中提取的。测定植物材料中薯蓣皂甙元的含量通常采用重量法,操作繁琐费时,样品需量较大,不适宜大量样品的筛选。同时,由于操作条件掌握上的差异,容易造成较大的误差。六十年代以来,气液色谱(GLC)应用于甾体化合     

粉背薯蓣中甾体皂甙元的分离和鉴定

粉背薯蓣(D.collettii Hook f.var.hypoglauca Palibin)在我国野生资源丰富,分布较广,以华东地区的浙江、江西为多。丁志遵、唐世蓉,李德高等曾从该植物分离到约莫皂甙元,并对薯蓣皂甙元的含量进行了测定。国内一些生产厂反映用粉背著蓣提取的总甙元产品熔点偏低(184—187℃),不符合国内现行质量标准。为了进一步查明熔点偏低的原因以及粉背薯蓣能否用作薯蓣皂甙元的原料,我们对该植物中的甾体皂甙元进行了分离和鉴定。     

蜘蛛抱蛋属中甾体皂甙的分布

在文献资料和实验研究的基础上,本文总结了甾体皂甙在蜘蛛抱蛋属植物中的分布。发现单羟基的薯蓣皂甙元的配糖体一蜘蛛抱蛋皂甙(薯蓣皂甙元-3-O[β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)]-[β-D-木吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡哺糖基(1→4)-β-D-半乳吡哺糖甙),广泛存在于所研究过的这些植物中,而且是大部植物根茎的主要皂甙。它是蜘蛛抱蛋属植物的特征化学成分,表明该属是一个自然类群,甾体皂甙对它是有分类学意义的。     

薯蓣皂甙元的研究进展

我国是薯蓣资源大国,其有效成分薯蓣皂甙元是甾体激素的主要合成原料.对薯蓣皂甙元的鉴定、生物合成、提取、分离以及利用等研究进行综述.     

弯蕊开口箭中一个新的甾体皂甙元

从云南民间抗炎药弯蕊开口箭（Ｔｕｐｉｓｔｒａ ｗａｔｔｉｉ Ｈｏｏｋ．ｆ．）的新鲜根状茎中分离到１个新的甾体皂甙元,命名为弯蕊开口箭甙元Ａ（ｗａｔｔｉｇｅｎｉｎ Ａ）,其结构通过光谱分析鉴定为螺甾－２５（２７）－烯－１β,２β,３β,４β,５β,６β－六醇;同时还分离到１个已知的甾体皂甙元,兰茂甙元Ｄ（ｒａｎｍｏｇｅｎｉｎＤ）。     

凝胶过滤与镍柱亲和纯化金葡菌a-溶血素重组蛋白的生物学特性比较

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌a-溶血素蛋白为研究对象, 分析比较通过凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA spin columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物, Bradford法测定蛋白含量, 兔红细胞测定半数溶血效价。结果显示这2种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带, 达电泳级纯度。与此同时, 凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04%, 蛋白含量为0.337 mg/mL, 溶血活性为1519 HU/mg; 镍柱亲和层析的纯化率为17.5%, 蛋白含量为0.35 mg/mL, 溶血活性为1463 HU/mg。由此可见, 凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒。     

Fe3+络合萃取法从野葛根中分离葛根素

利用Fe3 + 能够和葛根素生成可溶性络合物的性质建立了一种从中药野葛根中萃取葛根素的新型分离方法。以甲醇冷浸从野葛根中提取葛根总黄酮 ,将其进行水解、中和 ,再给水解葛根总黄酮中加入FeCl3 使葛根素与Fe3 + 络合溶解 ,过滤除去其它不溶性物质 ,用盐酸解聚Fe3 + 葛根素络合物 ,则得葛根素粗品 ,将其重结晶可得葛根素。同时 ,利用分光光度法确定了Fe3 + 葛根素络合物解聚的最佳酸度。利用TLC标准品对照、IR和分光光度法对产品进行了定性和定量分析。该方法从葛根中提取葛根素收率为 1 2 % ,纯度为 96 5 % ,具有操作简便、工艺流程简单 ,容易实现工业化的优点。     

重组人核苷二磷酸激酶A的理化性质

对重组人核苷二磷酸激酶A（rhNDPK-A）进行纯化,并对重组产物的理化性质及在溶液中的聚合状态进行鉴定。NDPK-A工程菌发酵后的菌体高压匀浆,然后微孔过滤、超滤浓缩,所得样品经DEAE阴离子交换、Cibacron Blue亲和层析、分子筛层析三步纯化后,以SDS-PAGE和RP-HPLC分析纯化产物的纯度,RP-HPLC测定酶活性。合格制品以基质辅助激光解析飞行时间质谱测定相对分子质量（MW）;Edman降解法测定N末端序列;多角度激光散射法测定重组产物在溶液中的表观分子量。结果表明,rhNDPK-A纯化产物的SDS-PAGE纯度为97.3%,RP-HPLC纯度为99.2%;比活性为（900±100）u/mg;单体相对分子质量为17017,与NDPKA分子量理论值相差132。测序结果表明,rhNDPK-A N末端缺失Met残基,其理论分子量为17017,与飞行质谱测定结果完全一致。表观分子量测定结果表明,rhNDPK-A在溶液中形成六聚体,表观分子量为102kD。上述结果说明, NDPK-A重组产物具与天然产物相同的自发形成六聚体性质,这为NDPK-A新药开发和机理研究打下了良好基础。     

甜瓜ACC氧化酶反义基因植物表达载体的构建及转化烟草的研究

用限制性内切酶从目的基因供体质粒pBI-aACO1上切下大小约2．3kb的目的基因,将其定向连接在受体质粒pCAMBIA2301载体上,构建成含有GUS基因的甜瓜ACC钣化酶反义基因植物表达载体pCB-aACO1。采用直接转化法将pCB-aACO1导入根癌农杆菌菌株EHA105,并用新构建的工程菌对普通烟草进行了遗传转化研究。在Kanamycin选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株,经过GUS基因组织化学法检测以及PCR方法鉴定,证实了该反义基因已导入烟草基因组中,此项研究为下一阶段用该反义基因转化甜瓜品种以改良甜瓜果实耐贮运性打下基础。     

广州市花都城区绿地土壤肥力与重金属污染分析

在对广州市花都城区绿地土壤取样调查的基础上,采用全国第二次土壤普查养分分级标准和内梅罗污染指数法等对其土壤肥力和重金属污染情况进行分析评价,揭示花都城区绿地土壤存在的问题。结果表明,花都城区绿地土壤容重变幅在1.25～1.75 g·cm–3之间,孔隙度变幅在30.81%～47.42%之间,pH在6.16～7.68之间,有机质含量在四级及以下标准,严重缺乏氮素和磷素。不同绿地类型中,厂区路旁绿地土壤重金属污染最严重,其次为主干道两侧绿地;研究区As污染最严重,Pb次之,未受Zn污染,存在不同程度的Cu、Cd、Cr、Ni、Hg污染。相关性分析表明,土壤pH与全钾、碱解氮含量极显著相关,有机质与全氮极显著相关,全氮、全磷分别与碱解氮、有效磷显著正相关,全钾与碱解氮显著负相关;重金属元素中,Cu与Zn、Cr、Ni极显著相关,Zn与Cu、Pb、Cd、Cr、Ni极显著相关,Pb与Zn、Cd极显著相关,Cr与Cu、Zn、Ni极显著相关,As和Hg与其他重金属元素均无显著相关性。     

Flash双源CT冠脉成像联合心肌灌注显像对猪急性心肌梗死模型的诊断价值

目的:探讨Flash双源CT(DSCT)冠脉成像联合心肌灌注显像对猪急性心肌梗死模型的诊断价值。方法:使用明胶海绵栓塞法建立5只猪急性心肌梗死模型,使用DSCT冠脉成像联合心肌灌注显像进行"一站式"扫描得到冠脉图像和心肌灌注图像,并与冠脉造影和病理染色相比较。结果:DSCT得到的心肌灌注图像结果与病理染色相比较,敏感性为93%,特异性为91%,阴性预测值为96%,阳性预测值为84%,Kappa值为0.82;DSCT得到的冠脉图像与冠脉造影相比较,敏感性为93%,特异性为81%,阴性预测值为95%,阳性预测值为75%,Kappa值为0.71。结论:DSCT冠脉成像联合心肌灌注显像与组织病理学及冠脉造影一致性较好,可以用于对猪急性心肌梗死模型的诊断。     

Virulence of Agrobacterium tumefaciens strains with Brassica napus and Brassica juncea

Summary Brassica napus and Brassica juncea were infected with a number of Agrobacterium tumefaciens strains. Tumourigenesis was very rapid and extremely efficient on B. juncea with all but one of the strains. Tumourigenesis on B. napus varied widely. It was very efficient with the nopaline strains, was reduced with the succinamopine strain A281 and was very weak with the octopine strains. The latter observation was confirmed with six different B. napus rapeseed cultivars. The selectivity was due to differences in the virulence of Ti plasmids with B. napus, rather than the tumourigenicity of the T-DNA or virulence of the chromosomal genes associated with the strains. An exception was strain LBA4404. The virulence of the octopine strains was increased by coinfection with more virulent disarmed strains and by induction with acetosyringone.     

三种麻醉方法在骨科动物实验中效果比较

目的比较3种麻醉方法在骨科动物实验中的效果,从而得出最佳方法。方法将80只实验动物随机分为3组,A组（速眠新II肌肉注射组）,B组（0.6%戊巴比妥钠静脉注射组）,C组（速眠新II肌肉注射＋0.6%戊巴比妥钠静脉注射联合用药组）,在骨科动物实验中分别进行麻醉、手术,比较3组的麻醉效果,观察其诱导期、麻醉期（麻醉维持时间）、苏醒期、麻醉效果、死亡率等。结果 A组麻醉的诱导期长,效果不好;B组麻醉的诱导期短,但麻醉效果不理想,死亡率高;C组麻醉的诱导期短,麻醉效果好,安全。结论 C组诱导期短,麻醉效果好,安全。无论在实验动物的伦理道德方面,还是在保证动物实验质量方面都是最佳选择。     

TK1在肺癌患者血清中的表达水平及其与肿瘤临床病理特征及预后的关系

目的:探讨肺癌患者血清胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)与肿瘤临床病理特征及预后的关系。方法:选择2012年1月-2014年1月在我院接受治疗的肺癌患者79例作为研究对象,另选择同期在我院接受健康体检的志愿者53例作为对照组。采用化学发光法检测两组研究对象血清中TK1的表达情况,并分析TK1表达与肿瘤临床病理特征及预后的关系。结果:TK1在肺癌患者血清中的阳性表达率(56.96%)显著高于健康对照组(16.98%),差异具有统计学意义(P0.05)。肿瘤分期为晚期的患者血清中TK1的阳性表达率高于肿瘤分期为早期的肺癌患者,差异具有统计学意义(P0.05);肿瘤远处转移的患者血清中TK1的阳性表达率高于未发生远处转移的患者,差异具有统计学意义(P0.05)。TK1在性别、抽烟史、淋巴结转移及病理类型不同患者血清中的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P0.05)。TK1阳性患者两年生存率(42.22%)低于TK1阴性患者(64.71%),差异具有统计学意义(P0.05)。结论:肺癌患者血清中TK1呈高表达,其表达水平与肿瘤远处转移、TMN分期及预后有关。     

Effects of co-expression of molecular chaperones on heterologous soluble expression of the cold-active lipase Lip-948

The cold-active lipase gene Lip-948, cloned from Antarctic psychrotrophic bacterium Psychrobacter sp. G, was ligated into plasmid pColdI. The recombinant plasmid pColdI+Lip-948 was then transformed into Escherichia coli BL21. SDS-PAGE analysis showed that there was substantive expression of lipase LIP-948 in E. coli with a yield of about 39% of total protein, most of which was present in the inclusion body. The soluble protein LIP-948 only consisted of 1.7% of total LIP-948 with a specific activity of 66.51U/mg. Co-expression of molecular chaperones with the pColdI+Lip-948 were also carried out. The results showed that co-expression of different chaperones led to an increase or decrease in the formation of soluble LIP-948 in varying degrees. Co-expression of pColdI+Lip-948 with chaperone pTf16 and pGro7 decreased the amount of soluble LIP-948, while the soluble expression was enhanced when pColdI+Lip-948 was co-expressed with "chaperone team" plasmids (pKJE7, pG-Tf2, pG-KJE8), respectively. LIP-948 was most efficiently expressed in soluble form when it was co-expressed with pG-KJE8, which was up to 19.8% of intracellular soluble proteins and with a specific activity of 108.77U/mg. The soluble LIP-948 was purified with amylase affinity chromatography and its enzymatic characters were studied. The optimal temperature and pH of LIP-948 was 35°C and 8, respectively. The activity of LIP-948 dropped dramatically after incubation at 50°C for 15min and was enhanced by Sr(2+), Ca(2+). It preferentially hydrolyzed 4-nitrophenyl esters with the shorter carbon chain.