大黄素对金黄色葡萄球菌的抑菌作用机制

以金黄色葡萄球菌为供试菌,通过测定大黄素对其细胞膜的通透性、可溶性蛋白质和呼吸代谢的影响,来阐述大黄素的抑菌作用机制. 利用电导率、生物大分子分析、呼吸代谢抑制检测等方法,验证大黄素的药效作用. 实验结果显示,大黄素作用金黄色葡萄球菌后,培养基溶液中电导率比对照组增加了2.23%,DNA和RNA大分子的含量比对照组增加了67.36%,大黄素作用金黄色葡萄球菌16 h后,菌体可溶性蛋白总量比对照组减少了28.3%;大黄素能抑制金黄色葡萄球菌物质代谢中的2种关键酶的活性,其中琥珀酸脱氢酶活性抑制率为53.8%,苹果酸脱氢酶的活性抑制率为25.5%.上述结果表明,大黄素可以破坏细菌细胞膜的通透性,抑制菌体内的蛋白质合成,通过抑制代谢关键酶的活性发挥杀菌作用.     

贯叶连翘总提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用

以3株金黄色葡萄球菌为代表,分别探讨了经光照和未经光照处理后在培养24h的过程中贯叶连翘总提取物(TEHPL)对3株金黄色葡萄球菌的光密度(OD640mm)、活菌数(CFU)、总菌数(TCC)、最低杀菌浓度(MBC)的影响和对其中2株菌超氧化物歧化酶(SOD)的影响。结果表明TEHPL对金黄色葡萄球菌有抑菌和杀菌作用,其抑菌或杀菌作用与其浓度有关,不需光照。并且TEHPL诱导菌体细胞内SOD活力增高。     

红谷霉素对金黄色葡萄球菌抑菌机制的研究

红谷霉素是一种抗细菌的新型抗生素。为探讨红谷霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,本文采用浓度为EC50和EC90的红谷霉素对试验菌株进行处理,并设空白对照,测定供试菌株的胞外多糖、细胞膜渗透性和生物大分子(DNA、RNA、蛋白质和胞外酶活性)。结果显示:红谷霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用首先表现在对核酸合成的抑制,由于核酸的合成受阻,引起菌体内的蛋白质和其它的生物大分子的合成受阻,细菌细胞膜通透性改变。透视电镜照片显示:红谷霉素处理后金黄色葡萄球菌菌体内部的原生质体明显变稀。     

噬菌体JD007在即食牛奶中对金黄色葡萄球菌抑菌作用

目的评估噬菌体JD007作为食品添加剂在即食牛奶中防控金黄色葡萄球菌的效果,并与食品添加剂nisin抑菌效果作比较,以评估两者是否有协同抑菌作用。方法应用双层琼脂平板法对噬菌体滴度测定和扩增,应用超高速密度梯度离心对其进行纯化;使用稀释平板涂布法对细菌进行计数进而评估杀菌效果。结果噬菌体JD007对10株(共11株)分离自食品的金黄色葡萄球菌有杀菌作用,该噬菌体在铺有金黄色葡萄球菌的双层琼脂平板上可形成透明抑菌圈。噬菌体感染细菌的感染复数MOI=10、100时,无论是25℃还是4℃,在牛乳中都能显著抑制金黄色葡萄球菌生长,抑菌效果比nisin显著;而且噬菌体JD007和nisin在4℃有协同抑菌作用。结论噬菌体JD007对食品来源金黄色葡萄球菌有较广的杀菌谱,在室温和4℃时,能显著抑制牛乳中金黄色葡萄球菌的生长,具有作为食品防腐剂的潜能。     

金黄色葡萄球菌耐药机制的研究进展

多征重耐药性金黄金葡萄球感染越来越引起临床重视。细菌产生β－内酰胺酶是对β－内酰按蟠蠊生素是最主要耐药机制,不产酶株主要是细菌合成新型青霉素结合蛋白２ａ而引起抗生素作用靶位改变之故,它由获得性染色体基因所编码。     

金黄色葡萄球菌生物膜形成机制研究进展

金黄色葡萄球菌是医院和社区获得性感染最常见的病原菌之一,而且可形成生物膜,从而导致生物膜相关疾病的产生。患者一旦发生金黄色葡萄球菌生物膜感染,难以彻底治愈。深入研究金黄色葡萄球菌生物膜形成的分子机制和调控网络,对寻找有效的防治、治疗药物和手段具有重要意义。我们就金黄色葡萄球菌生物膜形成过程和调控机制的研究近况做一综述。     

体外诱导耐万古霉素金黄色葡萄球菌及分子机制

【目的】通过前期体外诱导获得耐万古霉素金黄色葡萄球菌,从基因突变方面对万古霉素耐药性菌株进行研究。【方法】通过低浓度万古霉素逐步诱导13株敏感性金黄色葡萄球菌,用琼脂稀释法和E-test法检测所有菌株对万古霉素的耐药性(最低抑菌浓度,MIC),PCR扩增与万古霉素耐药性密切相关的4个重要基因:rpo B、vra S、gra R和gra S,并测序分析,比较诱导前后不同菌株的基因序列。【结果】通过60 d的体外诱导实验,13株对万古霉素敏感性金黄色葡萄球菌中有6株被诱导为中介耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin intermediate Staphylococcus aureus,VISA),7株菌被诱导之后对万古霉素仍处于敏感状态,MIC4 mg/L。检测诱导前后所有菌株的rpo B、vra S、gra R和gra S基因发现:有3株VISA的rpo B基因同时有L466S和H481N的突变,gra S基因同时有R232K的突变。【结论】对万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌经过较长时间的体外诱导可发展为VISA。在已检测的重要基因中,rpo B和gra S的突变对耐药性的发展很可能起关键作用,而vra S和gra R对这一过程没有显著影响。     

金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药的分子机制

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院内和社区感染的重要现菌,所致感染治疗困难,因此成为各国学者关注与研究的热点。本文就近几年国内外在ＭＲＳＡ耐药分子机制的研究中取得的成果,如ｍｅｃＡ基因以及其他与ＭＲＳＡ对甲西林抗性表达相关基因的定位,结构及功能等作一介绍。     

金黄色葡萄球菌D试验和耐药性分析

目的 了解本地区金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药表型及其对常用抗菌药物的耐药性.方法 用K-B琼脂扩散法检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)及双纸片法(D试验)检测红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用VITEK 2 Compact进行菌株鉴定和药敏试验.结果 156株金黄色葡萄球菌中MRSA有51株,占32.7％.红霉素对克林霉素诱导耐药共29株,占18.6％,其中MRSA有10株,甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MRSS)有19株.金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物具有不同的耐药性,对青霉素的耐药性超过95％,对万古霉素、奎努普汀/达福普汀、利奈唑烷和替加环素敏感.结论 临床微生物实验室应加强对金黄色葡萄球菌中克林霉素诱导耐药的检测,临床治疗中也应加强抗菌药物的合理应用以防多耐药菌株的产生.     

苦瓜总皂甙对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

研究苦瓜总皂甙的抑菌作用及抑菌条件。以苦瓜正丁醇浸提物为原料,研究其对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。试验结果表明,苦瓜总皂甙对金黄色葡萄球菌的抑制作用明显,最低抑菌浓度为30 mg/mL;抑菌最适pH值范围5~8;苦瓜总皂甙的热稳定性好,在121℃处理10 min仍具有较好的抑菌活性。金黄色葡萄球菌生长曲线表明,对数生长期的金黄色葡萄球菌对苦瓜总皂甙较敏感,而对接近稳定期的菌体抑制作用较弱。     

蓝莓提取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用研究

本文以四种栽培蓝莓为主要研究对象,通过与山梨酸钾抑菌效果的比较,研究了蓝莓提取物对金黄色葡萄球菌(AB91093)的抑制作用,并测定了蓝莓中总酚酸和还原糖的含量。结果表明,蓝莓对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌效果。四种蓝莓提取物中,Elliott和Darrow提取物对金黄色葡萄球菌的抑制效果显著,分别在300 mg/mL和350 mg/mL时可明显抑制金黄色葡萄球菌的生长,450 mg/mL时能完全杀死金黄色葡萄球菌。蓝莓的抑菌能力与其酚酸含量正相关,与还原糖含量负相关。而山梨酸钾对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为100 mg/mL和200 mg/mL。     

金黄色葡萄球菌L型的药敏试验分析

本文从血液和骨髓标本中分离出的金黄色葡萄球菌Ｌ型,分别用Ｌ型平板和ＭＨ平板做药敏试验,结果显示庆大霉素（ＧＥＮ）、氯霉素（ＣＭＰ）、红霉素（ＥＲＹ）、氧哌青霉素（ＰＩＰ）、卡那霉素（ＫＡＮ）、万古霉素（ＶＡＮ）在ＭＨ平板上比在Ｌ型平板上的药物敏感率高,耐药中低（Ｐ＜０．０５）;而氨苄青霉素（ＡＭＰ）、羧苄青霉素（ＣＡＲ）、先锋霉素（ＣＥＦ）、丁胺卡那霉素（ＡＫＮ）、氟哌酸（ＦＰＡ）、先锋必（ＥＦＯＢＩＤ））、螺旋霉素（ＳＰＩ）药物敏感中比Ｌ型平板上低,耐药率高（Ｐ＜０．０５）。苯唑青霉素（ＯＸＡ）、菌必治（ＲＯＣ）、利福平（ＲＩＦＰ）、麦迪霉素（ＭＩＤ）则在两种培养基上的敏感和耐药率基本相同（Ｐ＞０．０５）。     

金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验

利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株（Staphylococcus aureus, ATCC13565）中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因,序列测定结果与报道完全一致。构建了表达载体pETSEA并获得高效表达,重组蛋白（rSEA）在37℃诱导时以包涵体形式存在,降低温度则出现可溶表达,可溶性rSEA占总rSEA的55%。可溶性rSEA经Ni²⁺亲和层析纯化,达电泳纯。通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较,结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了9个氨基酸但其结构并没有明显的变化。单核细胞增殖试验进一步证明了该结论：将rSEA与SEA同外周血单个核细胞共同培养,两者均能有效地促进其增殖。将rSEA与体内激活的脾细胞共培养,则能增强脾细胞的体外抑瘤活性。     

万古霉素对金黄色葡萄球菌体外抗菌活性研究

目的调查万古霉索对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。方法收集温州医学院附属第一医院2005年2～7月从临床各种标本分离的金黄色葡萄球菌112株,PCR检测mecA基因确定MRSA,采用琼脂稀释法和全自动微生物分析仪检测金黄色葡萄球菌万古霉素MIC值,使用4mg／L万古霉索脑心浸液琼脂（BHIA）筛选异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌（hVRSA）。结果MRSA的检出率为64．3％,万古霉素的MIC大多数≤2mg／L,MIC。为2mg／L,有2株菌在4mg／L万古霉素BHIA平皿上生长,经菌群分析法证实非hVRSA。仪器法检测的万古霉素MIC值与琼脂稀释法的符合率只有35．7％,琼脂稀释法万古霉索MIC高于仪器法,仪器法检测的2株万古霉素中介耐药的菌株经琼脂稀释法和K-B法证实为敏感株。有6株对万古霉索的MIC为4mg／L,按美国NCCLS／CLSI2006年的标准被确定为万古霉素中介耐药株。结论万古霉素对金黄色葡萄球菌具有较强的体外抗菌活性,未发现耐药株,但MIC值较大。仪器法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性结果不可靠。按NCCLS／CLSI2006年的标准临床上能检测到对万古霉素中介耐药的金黄色葡萄球菌临床分离株。     

金黄色葡萄球菌持留菌形成机制的研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种重要的院内感染致病菌,是导致人类各类感染最重要的病原体之一。金黄色葡萄球菌耐药问题一直是临床慢性感染治疗的最大障碍。随着细菌耐药机制研究的不断深入,研究者发现持留菌可能是导致疾病的持续性和复发性感染的真正原因。近年来持留菌的存在引起的耐药问题被高度重视,金黄色葡萄球菌持留菌的基本特征和形成机制的研究对临床上更好地控制耐药及感染问题具有重要的意义。为此,本文将从金黄色葡萄球菌持留菌的特性、生物膜、能量代谢、基因调控等多方面对金黄色葡萄球菌持留菌进行系统全面的综述。     

环境毒物对金黄色葡萄球菌毒性影响的研究

采用毒物在营养琼脂中垂直扩散方法,通过测定毒物在营养球脂中抑制金黄色葡萄球菌生长产生蓝色抑菌带的长度,研究Hg、Cr^6 、Pb、CN^—、As、NO2^—、F^—及苯酚对金黄色葡萄球菌的毒性影响。结果表明：受试毒物的浓度与抑菌带有相关性,相关系数具显著意义;对毒物的敏感性为Cr^6 ＞Hg＞As＞CN^—＞Pb＞NO2^—＞苯酚＞F—;多种毒物共同作用其毒性影响增加。     

冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制机制

【背景】金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病菌,易在食品及加工器具表面形成生物膜,引起食品腐败和疾病的传播,威胁食品安全。【目的】研究冬凌草甲素抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成的作用机制。【方法】使用结晶紫染色法和扫描电镜观察冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制作用,刚果红平板法定性检测冬凌草甲素对细胞间多糖黏附素(polysaccharideintercellular adhesion,PIA)合成的影响,分光光度法测定冬凌草甲素对供试菌株胞外DNA (eDNA)释放量的影响,RT-PCR技术检测冬凌草甲素对供试菌株ica A、cid A、agr A和sar A基因表达量的影响。【结果】冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌生物膜形成有较强的抑制作用;冬凌草甲素能显著抑制PIA的合成,且呈浓度剂量依赖;冬凌草甲素能抑制供试菌株e DNA的释放量,其中1/4最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)的冬凌草甲素作用金黄色葡萄球菌16 h后,与对照组相比,e DNA的释放量降低了48.62%;冬凌草甲素可显著抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成相关基因的表达,其中1/2MIC的冬凌草甲素作用金黄色葡萄球菌16 h后,ica A、cid A、agr A和sar A基因的表达量分别比对照降低了91.6%、94.7%、77.6%和70.4%。【结论】冬凌草甲素通过抑制ica A和cid A基因的表达,影响PIA的合成和eDNA的释放,进而干预生物膜的形成。     

金黄色葡萄球菌预防及治疗研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是院内获得性感染的主要病原体之一,金黄色葡萄球菌会引起患者的严重感染,对患者的治疗和预后产生不良影响。现今临床预防和治疗金黄色葡萄球菌感染主要依赖抗生素。近年来,随着金黄色葡萄球菌耐药性的增强,万古霉素(Vancomycin)成为治疗其感染的最后一道抗生素防线。目前迫切需要探寻新的治疗方法来代替抗生素治疗。现归纳针对金黄色葡萄球菌耐药性的最新疗法,旨在为预防和治疗金黄色葡萄球菌感染提供新的思考。     

金黄色葡萄球菌的耐药性分析及基因分型研究

目的通过分析上海地区院内分离金黄色葡萄球菌的药敏谱型及对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）进行基因谱型的研究,了解金黄色葡萄球菌的院内流行状况。方法对临床分离出的43株金黄色葡萄球菌进行药敏试验和SCCmec基因盒的多重PCR检测,并将结果整合后用MEGA3．1软件分析其进化相关关系。结果药敏结果显示43株金葡菌对青霉素和甲氧西林的耐药率最高。甲氧西林的耐药率达到62．8％。MecA阳性菌株SCCmec的分型显示均为Ⅱ型或Ⅲ型,且所占比例相近,未见Ⅰ型和Ⅳ型。进化树分析发现了在同一医院中亲缘关系相近的菌株,为院内感染流行株。结论MecA基因介导的MRSA在分离菌株中所占比例高,存在院内感染爆发性流行。