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《生物技术》2015,(5)
[目的]利用PCR法(链式聚合酶反应)制备17号染色体的绿色荧光计数探针。[方法]首先通过对人类基因组17号染色体着丝粒序列分析,找出其特异性的重复序列,设计引物,通过PCR法制备绿色荧光探针,然后利用荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)实验检验所制备17号染色体计数探针质量。[结果]FISH实验结果显示,利用PCR法制备的计数探针荧光信号清晰可辨。[结论]PCR法可良好地应用于17号染色体计数探针(Chromosome 17 enumeration probe,Cep17)的制备,制备的探针可用于相关疾病的检测。 相似文献
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陆生软体动物染色体制备方法学探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
本文对陆生软体动物染色体制备方法作了较详尽地讨论,并结合灰巴蜗牛染色体制备,对原有方法作了部分改进。确定了适宜于陆生软体动物染色体制片的取材时期为5月,8月和9月,秋水仙素作用浓度为3-5μg/ml,用温浴方法低渗,固定采用甲醇、冰醋酸梯度固定,并运用火焰干燥法制片,可以得到较理想的染色体分裂相,为陆生软体动物染色体遗传研究打下了实验基础。 相似文献
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已知分子量大小的染色体DNA分子标记是脉冲电泳研究中用以估算样本染色体DNA分子大小必不可少的参照物。对用做标记的啤酒酵母(Sacharomycescerevisiae)和粟酒裂殖酵母(Schizosacharomycespombe)完整染色体DNA几种制备方法的比较研究以及改进研究表明,液氮冷冻研磨法,凝胶包埋法以及凝胶包埋破壁法效果均很好,都得到大量染色体DNA,且彼此间无明显差异。表明液氮冷冻研磨法和凝胶包埋法制备上述两种酵母菌染色体DNA分子标记是两种理想的方法,可完全取代凝胶包埋破壁法,即缩短处理时间又降低成本。此外,相同的电泳样本块在不同的电泳条件下,所得结果有一定的差异,表明电泳条件是影响电泳结果的一个重要因素 相似文献
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蜘蛛胚胎细胞染色体制片技术 总被引:1,自引:0,他引:1
蜘蛛的染色体制片方法和核型分析,对蜘蛛遗传变异、种群演化、分类和染色体结构、功能与形态之间关系等问题的研究是十分重要的基本技术手段。目前,制作大型个体蜘蛛的染色体方法,常采用生殖腺的压片或蜘蛛血液细胞的常规制片法来制备染色体标本,然而,对于个体微小的真正蜘蛛类染色体的制片,如用上述二种方法就难以进行,国内也一直未见有关真正蜘蛛染色体制片方法的报道,至使小型个体蜘蛛的染色体组型分析工作进展缓慢。1977年美国的Seiji Malsimoto等采用蜘蛛胚胎细胞制作染色体标本,取得了较好的结果。胚胎细胞染色体制片法操作简便、快速,特别适用于小型个体蜘蛛染色体标本的制作。近年 相似文献
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用做标记的两种酵母菌完整染色体DNA的简化制备法 总被引:1,自引:2,他引:1
已知分子量在小的染色体DNA分子标记是脉冲电泳研究中用以估算样本染色DNA分子大小必不可和的参照物。对用做标记的啤酒酵母和粟酒裂殖酵母完整染色体DNA几种制备方法的比较研究以及改进研究表明,液氮冷冻研磨法,凝胶包埋法以及凝胶包埋破壁法效果均很好,都得到大量染色体DNA,且彼此此间无明显差异。 相似文献
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一种制备鱼类染色体的新方法 总被引:6,自引:0,他引:6
自1966年Ojima建立鱼类染色体空气干燥法以来,鱼类染色体研究技术有了很大进展.目前有肾细胞培养法、上皮细胞培养法和外周血培养法等。细胞培养需要在有一定条件的实验室进行(如无菌操作),因而简便快速的制备鱼类染色体方法便不断产生,有PHA+秋水仙碱注射法、秋水仙碱体外注射法和CoCl+秋水仙碱体外注射等方法.本文介绍一种适合于在野外条件下进行的小型鱼类和鱼苗染色体制片方法。 相似文献
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鳞翅目昆虫染色体的研究方法 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究以鳞翅目昆虫睾丸为材料,在常规压片法基础上引进空气干燥法进行改良。得到高清晰度的昆虫染色体图谱。睾丸在不同的低渗液里处理后,置入卡诺氏液固定,然后用空气干燥法制片,Giemsa液染色。结果表明这一方法制备所得到的昆虫染色体图,不仅染色体分散好,而且染色体的细微结构较清晰。 相似文献
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在利用马来丝虫生殖腺制备染色体的同时,以该雌虫子宫内虫卵为材料,对Imai法加以改动,用来探索制备丝虫染色体的方法,获得较满意的效果。操作步骤如下: 1、将马来丝虫雌虫置于培养液RPMI1640 20%小牛血清(含4μg/ml秋水仙硷)中 相似文献
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水稻中期染色体和DNA纤维的高效制备技术 总被引:2,自引:0,他引:2
水稻中期染色体和DNA纤维制备是水稻分子细胞遗传学研究中的关键技术。目前,这两个技术还有很多不足,该研究建立了高效制备水稻中期染色体和DNA纤维的方法。该方法制备的染色体,分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好,水稻根尖分生组织细胞的分裂指数高达25%。植物细胞的细胞壁是制备DNA纤维的最大障碍,所以必须先提取细胞核,然后裂解细胞核释放出DNA纤维。在这个研究中,还建立了一个用刀切法分离细胞核,进而用SDS裂解核膜,用载玻片拖出DNA来制备水稻DNA纤维的方法。该方法制备的DNA纤维多呈平行的细线,背景清晰,伸展的程度均匀,适合于原位杂交。 相似文献
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目前,鱼类染色体标本制备的方法主要是由Yamamoto等建立的肾细胞-PHA体外短期培养法和Ojima等提出的外周血淋巴细胞离体培养法,以及活体注射PHA直接用肾组织的细胞制片等。用短期细胞培养研究鱼类染色体有较突出的优点,它能保持染色体的自然状态,染色体的形态特征较易于显示出来,中 相似文献