激光光散射法研究DNA-阳离子络合物的生成过程

由于抗DNA抗体免疫化学的发展,使人们对固定化DNA技术发生很大兴趣。这是因为固定化DNA可作为抗DNA抗体的免疫吸附剂去治疗一些与免疫复合物有关的疾病,例如红斑狼疮、类风湿性关节炎等,而这些疾病靠传统治疗方法疗效不佳。以免疫吸附剂治疗免疫性疾病是Terman在1979年首次试用成功。吸附剂一般是用DNA和二价金属离子或有机阳离子进行络合,生成不溶于水的络合物,该络合物对一些致病的抗体及抗原抗体的复合物有吸附作用。因而以二价阳离子络合并沉淀固定DNA的反应引起了人们的兴趣。 Schultz提出,以激光光散射方法可以快     

核酸抗体

核酸抗体的研究始于五十年代中期。最初一些研究者试图用纯DNA免疫动物制备抗体,均告失败。稍后,人们才用DNA与载体蛋白组成复合物免疫动物,获得了核酸抗体,同时还发现既便用碱基、核苷、单核苷酸或寡核苷酸与牛血清清蛋白的复合物也能产生特异性抗体。至此人们开始认识到核酸物质具有抗原性。由于抗体-抗原反应的高度特异性,核酸抗体的研究在核酸的检测、分离和提纯,核酸结构与功能的研究及临床应用等方面都发挥着重要的作用。本文拟就核酸抗体的某些研究情况作一简要介绍。一、核酸的抗原性核酸由碱基、戊糖和磷酸组成。核酸的抗原性由碱基或戊糖-磷酸所决定,因此核酸的抗     

免不1号和2号治疗免疫性不育雄鼠的组织学和免疫组织化学研究

用中药复方免不1号,免不2号治疗免疫性不育雄鼠,观察睾丸,附睾组织学和免疫组化的变化。用精子抗原免疫昆明种雄性小白鼠,建立免疫性不育动物模型。同时分别饲喂中药复方免不1号,免不2号,醋酸强的松,生理盐水;从组织学和免疫组化等方面观察免疫性不育症的变化。结果显示免疫性不育雄鼠血清,精囊液抗精子抗体高,睾丸间质,睾丸曲细精管界膜,精原细胞,附睾管上皮细胞免疫复合物沉积多,睾丸每曲细精管精子和晚期精子细胞减少,中药免不1号和2号能降低抗精子抗体,清除免疫复合物的沉积,恢复曲细精管精子和晚期精子细胞数。结果表明：免不1号和2号通过调节全身免疫系统,清除循环和局部的抗精子抗体,免疫复合物,提高精子和精子细胞数,从而提高小鼠的受孕率。     

核酸抗体

核酸抗体的研究始于五十年代中期。最初一些研究者试图用纯DNA免疫动物制备抗体,均告失败。稍后,人们才用DNA与载体蛋白组成复合物免疫动物,获得了核酸抗体,同时还发现既便用碱基、核苷、单核苷酸或寡核苷酸与牛血清清蛋白的复合物也能产生特异性抗体。至此人们开始认识到核酸物质具有抗原性。由于抗体-抗原反应的高度特异性,核酸抗体的研究在核酸的检测、分离和提纯,核酸结构与功能的研究及临床应用等方面都发挥着重要的作用。本文拟就核酸抗体的某些研究情况作一简要介绍。     

核酸的免疫分子生物学研究进展

五十年代初期,Blix等便提出了对DNA抗原性研究的课题,由于生化与免疫技术发展的局限,作者未能充分证实DNA抗体的特异性。十年后由Plescia和Bernard分别以氧化法制成了抗DNA的特异抗体,不久,Halloran以化学交联法制成了抗单核苷酸、寡核苷酸和DNA的抗体。到1970年Stollar等便揭示出抗体的特异性与DNA双螺旋构象的关系。上述三方面对核酸免疫开拓性研究,为核酸的免疫分子生物学     

一种新型的抗原检测系统——免疫-PCR

一种新的抗原检测系统(技术)——免疫-PCR,最近由Takeshi Sano等发明。该系统以特定DNA分子作为标记物,利用链霉亲和素与蛋白A的交链物既能与生物素又能与抗体结合的双重特性,将抗原抗体复合物和生物素化DNA连接起来,形成特定的抗原抗体复合物-链霉亲和素蛋白A交链物-生物素化DNA结合物。     

用免疫亲和层析法纯化细菌铁蛋白

用细菌铁蛋白免疫家兔,制备抗铁蛋白血清,用进一步纯化的抗铁蛋白抗体作为配基与溴化氰活化的Sepharose4B偶联,得到亲和免疫吸附剂。以此法纯化的铁蛋白为聚丙烯酰胺凝胶电泳纯,相对复合抗体作双向免疫电泳显示单峰,并具有较高的免疫活性。     

肠道疫苗保护作用的免疫相关物

正保护作用的免疫相关物(CoP)是一种免疫应答,这种应答在统计学上与保护作用相关联。免疫相关物可能是机制性的,也可能是非机制性的,对一种疾病而言可能有一种以上的免疫相关物,它们通常被称为共相关物。大多数目前已知的免疫相关物与中和血清或黏膜抗体有关,在个别情况下抗体的其他功能可能更加重要。此外,细胞免疫应答常常与抗体起协同保护作用。目前已经批准上市了一些抗某些肠道病原体的疫苗,还有一些抗其他病原体的候选疫苗正处在研     

急进性肾小球肾炎动物模型研究进展

急进性肾小球肾炎根据免疫病理特征分为Ⅰ型抗GBM抗体型、Ⅱ型免疫复合物型和Ⅲ型微量免疫复合物型,代表性的动物模型分别是实验性自体免疫肾小球肾炎、肾毒血清肾炎和实验性自体免疫脉管炎。本文就这些模型的造模方法、免疫机制和应用范围进行综述,以供读者参考。     

疑似百日咳病人血清中特异性抗体的研究

对北京地区９份疑似百日咳病人血清进行特异性抗体（抗－ＰＴ和抗－ＦＨＡ抗体）的检测中,有７份血清中抗－ＰＴ和抗－ＦＨＡ抗体两者或单个高于百日咳病患者恢复期２０－３０Ｅｕ／ｍｌ的抗体阳性指标。结果表明,在未免疫或免疫不完全以及学龄前儿童和免疫过的青少年人群中仍有百日咳疾病的感染。建议考虑对学龄前儿童或中小学生进行百、白联合疫苗或无细菌百日咳疫苗的加强接种。     

抗Ⅱ型登革病毒蛋白抗体的制备和特点分析

本研究旨在制备和鉴定小鼠抗Ⅱ型登革病毒（DENV‐2）10种蛋白的抗体,为后续相关研究提供实验材料。利用真核表达载体pReceiver构建DENV‐210种蛋白的重组质粒,提取质粒 DNA ,肌内注射免疫小鼠,共免疫4次。末次免疫后2周取小鼠血清,利用DENV‐2感染的Vero细胞和DENV‐2各蛋白的稳定表达细胞,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接免疫荧光法（IFA）和蛋白免疫印迹法评价免疫效果,分析抗体的特点。DNA免疫小鼠后获得抗DENV‐210种蛋白的抗血清,抗体效价波动于1∶400～1∶16127之间,以抗E蛋白抗体效价最高,达1∶16127,而抗NS3、NS4b、NS5蛋白抗体效价较低,仅为1∶400。利用DENV‐2感染的Vero细胞和稳定表达病毒蛋白的EAhy926细胞进行IFA染色,抗DENV‐2各蛋白的抗血清均可特异性识别DENV‐2抗原。蛋白免疫印迹结果显示,抗E、NS1、NS4b和NS5蛋白抗体能识别热变性蛋白,其他抗血清未呈现阳性反应条带。本研究提示,DNA免疫小鼠所获得的抗DENV‐2各蛋白抗体能特异性识别自然感染或模拟自然感染状态下的DENV‐2蛋白,可为后续相关研究提供工具,也表明DNA免疫法可作为抗体制备的一种策略。     

系统性红斑狼疮(SLE)患者血清免疫复合物中DNA的提取及电镜观察

从活动期SLE患者血清DNA/抗-DNA免疫复合物中分离DNA,用电镜观察结果表明:这些DNA是很不均质的双链片段。它们的分子量范围很宽,镜下可见的最小片段长553A(约150bp),最大片段长10431A(约2800bp),多数DNA片段长约200—400bp,与正常对照相比较有明显区别。另外,还观察到具有单链末端的双链DNA片段。     

SLE血清中抗-DNA抗体分离和性质的研究

本文用国产高分子树脂(T)接枝小牛胸腺DNA,通过亲合层析从系统性红斑狼疮SLE患者血清中纯化出抗-ds DNA抗体和抗-ss DNA抗体。酶联免疫吸附分析(ELISA)的研究表明:SLE抗-DNA抗体和DNA结合的差异性很大,是高度非均一性的。抗-ss DNA抗体不仅组成成分比抗-ds DNA抗体复杂,ss DNA/抗-ssDNA亲合能力也明显高于ds DNA/抗-ds DNA。纯化的抗-DNA抗体以IgG类抗体占主导,同时也有其它类型抗体存在(例如IgM等)。抗-ds DNA抗体有较抗-ss DNA抗体高的IgG含量(两者的IgG/IgM分别是7.0和4.0),说明IgG抗-DNA抗体更倾向于同dsDNA结合。     

AP-1与STAT5相互作用协同调节血管紧张素原基因表达

为研究AP-1和STAT5协同调节血管紧张素原基因表达的作用机制,用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）和染色质免疫沉淀分析（ChIP assay）检测血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的AP-1和STAT5的DNA结合活性;用凝胶超迁移分析和免疫共沉淀方法观察AP-1和STAT5的相互作用. 结果显示,AngⅡ可分别促进AP-1和STAT5与血管紧张素原基因调控区顺式元件的结合以及二者之间的相互作用;核蛋白与含AP-1结合位点的寡核苷酸探针结合形成的复合物可与抗c-Jun抗体和抗STAT5抗体形成超迁移电泳区带;而用抗c-Jun抗体也可从STAT5 染色质免疫沉淀复合物洗脱液中检测到AP-1的存在. 而且,AP-1和STAT5的相互作用程度及其二者与DNA的结合活性与血管紧张素原表达活性具有一致关系,该效应可被JAK2特异抑制剂AG490所抑制. 上述结果提示,与顺式元件结合的AP-1和STAT5通过相互作用而形成四元复合物协同调节血管紧张素原基因的表达,JAK2对该过程具有诱导活化作用.     

正常人和SLE患者血清中抗DNA抗体的研究

用亲和层析法对6例正常人和4例SLE患者血清中抗DNA抗体进行提取和定量研究,发现正常人血清中抗DNA抗体的组成IgM/IgG大于1,是以IgM为主的抗体,SLE患者血清中抗DNA抗体含量高,IgM/IgG小于1,是以IgG为主的抗体。用胰蛋白酶降解提取的抗DNA抗体再借助于SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳对正常人和SLE患者抗DNA抗体的结构进行初步探讨,电泳结果表明正常人和SLE患者纯化抗DNA抗体经胰蛋白酶降解以后,正常人在52.2Kd区有一特异性降解片段,而SLE患者则在33.6Kd区有明显的降解片段富集,且表明它们是抗DNA—IgG所产生的。这说明SLE患者血清中抗DNA—IgG不仅在数量上比正常人有所增加,而且在结构上也有所不同。此外,这两种不同的抗DNA—IgG被胰蛋白酶降解的速度也有差异。     

炭疽芽胞杆菌疫苗研究进展

炭疽芽胞杆菌引起的炭疽病死亡率非常高 ,当前的疫苗具有效力不稳定、对吸入性炭疽的保护率低、免疫程序繁琐、存在副作用等缺点。近年来人们在改造传统疫苗的同时又有一些新的发现 ,如保护性抗原 (PA)的抗体在体内可杀死芽胞 ;通过粘膜免疫能够诱导机体分泌IgA抗体 ;抗多聚谷氨酸 (γ D PGA)抗体可以同炭疽杆菌的繁殖体作用 ,从而杀死繁殖体 ;寻找到新的免疫原。DNA疫苗、活载体疫苗的出现为新一代安全、免疫程序简单、具更高保护率的疫苗奠定了基础     

免疫学技术在棘球蚴病临床免疫诊断中的应用

免疫学方法是人体包虫病重要的辅助诊断方法,是手术前确诊和临床治疗后随访的重要指标。近些年来,随着免疫学、分子生物学等生物技术的发展,为包虫感染的试验诊断提供更多的方法和信息。本文主要通过对皮内实验、抗原的检查、抗体的检查、免疫复合物的检查以及DNA的检查的逐个分析,探讨目前临床上对棘球蚴病的免疫学诊断方法研究进展。     

免疫学技术在棘球蚴病临床免疫诊断中的应用

免疫学方法是人体包虫病重要的辅助诊断方法,是手术前确诊和临床治疗后随访的重要指标。近些年来,随着免疫学、分子生物学等生物技术的发展,为包虫感染的试验诊断提供更多的方法和信息。本文主要通过对皮内实验、抗原的检查、抗体的检查、免疫复合物的检查以及DNA的检查的逐个分析,探讨目前临床上对棘球蚴病的免疫学诊断方法研究进展。     

EB病毒膜抗原与系统性红斑狼疮相关性的实验研究

目的:探讨EB病毒膜抗原(MA)的表达与系统性红斑狼疮的关系.方法:用直接免疫荧光抗体法(DFA)检测MA在转基因小鼠体内的表达,用间接免疫荧光法(IFA)和免疫印迹法(IBT)分别检测血清中的抗核抗体(ANA)和抗ENA抗体,用Bradford法检测小鼠24h尿蛋白浓度.常规病理HE染色观察小鼠的肾脏病理改变,冰冻切片免疫荧光检测肾脏是否有免疫复合物沉积.结果:表达MA的转基因小鼠组,有8只小鼠ANA阳性,5只小鼠抗ENA抗体阳性,24h尿蛋白浓度平均值为4153.8 g/ml,小鼠肾脏存在多种病理改变及大量免疫复合物在肾小球沉积.对照组小鼠ANA、抗ENA抗体均为阴性,24h尿蛋白浓度平均值为382.7g/ml,肾脏未见病理改变.结论:EB病毒MA的表达可能引发SLE.     

抗体固定化方法研究进展

在免疫分析和生物芯片中,抗原-抗体特异性结合被广泛应用,其中抗体的固定化是研发高效诊断和分离工具的关键环节。生物分子工程、材料化学与交联剂化学的进步极大地促进了抗体固定化技术的发展。 抗体可以通过物理吸附、共价偶联和亲和相互作用固定到不同类型的固相表面。 抗体固定化的目标是以一种正确的空间取向将抗体固定到固相表面,在完全保留抗体构象和活性的同时最大化抗原的结合能力,这对固相化抗体的分析性能至关重要。 对固定抗体到固相载体表面的各种最新方法进行了阐述,包括物理吸附法,通过羧基、氨基、巯基、糖基和点击化学的共价结合法以及基于生物亲和作用的固定法,并对固定化抗体的表征方法进行了归纳,最后对抗体固定化方法的发展方向进行了展望。