超薄切片玻璃“废刀”的再用

目前国内外电镜实验室在制作超薄切片时,绝大多数用玻璃刀。一般在切过一个组织块后,玻璃刀就不能再用。因此,制刀玻璃的耗量较大,且不易寻找合用的玻璃。四川医学院电镜室用“废刀”制成重制刀,方法较简便。现将重制方法及效果介绍如下:1.方法(1)去蜡除去玻璃刀上的胶布,将刀立放在几层柔软的纸上(斜面向下),置于约80℃烤箱中,使熔化的蜡被纸吸去。取出后再用软纸除去玻璃刀上残留     

超薄切片用刀值得注意的几个问题

本文就超薄切片过程中玻璃刀的制作及使用玻璃刀和钻石刀切片时容易勿视的几个技术问题进行探讨,以期对提高超薄切片的质量有一定的帮助。     

品制备对超薄切片的影响

电镜超薄切片的质量与组织块的硬度,组织的固定,清洗、脱水、浸透、包埋、包埋块的修整形状,切片机、玻璃刀、架刀角度和收集槽液面等因素都有密切的关系,标准的超薄切片应是厚度适中、均匀、平整、无刀痕、无颤纹和皱折。要想获得理想的超薄切片,作者认为     

一种简单实用的连续半薄切片技术

一种简单实用的连续半薄切片技术常规的半薄切片法有两种：一是干刀法，玻璃刀不装水槽，切一片，用尖头镊子夹取切片边缘，放到滴有蒸馏水的载玻片上。二是湿刀法，玻璃刀上安装水槽，切一片，待其在水中展开，用睫毛针从边缘捞起，放于载玻片的水滴中。在没有专用超薄切...     

怎样使磨刀石磨平

切片刀是显微切片中非常重要的工具。如何保持切片刀的锋利,除了加强对切片刀的保护和熟练的磨刀技术外,磨刀石的平滑与否也是非常重要的。一般市售的磨刀石外观上平滑无疵,但加上滑润剂就显出高低不平了,如果用这样的磨刀石磨切片刀,其刀刃不但不会锋利反而会把刀口磨成弧线,影响切片。所以新磨刀石必须经过磨平加工。方法是将金刚砂(研磨粉,分800、1000、1400号     

火棉胶包埋组织切片及冰冻切片的连续切片与染色

近年来为了教学和研究所用之切片标本,曾广泛使用火棉胶包埋组织切片和冰冻切片法,这两种方法虽然它是有比石腊包埋组织切片稍厚一点,但它的优点是远超过了缺点。组织用石腊包埋,在组织经过不同浓度酒精脱水后,须用氯仿或二甲苯透明,再置于58℃温箱石腊中几个小时。以上透明剂具有使组织收缩变小,在经过这样高温之下,组织增加它由收缩而扭转和变形,纤维曲折,细胞及所含物质缩小,折光率增强,组织内所含之尖脂脂亦易于被以上透明剂所溶解,致染色不佳。作为观察和研究组织形态是不够美满的。因为石腊包埋组织制作切片有以上之缺点,     

介绍一种自制的超薄切片机液槽水面调节装置

在作电子显微镜超薄切片时,液槽内水位调节常常会遇到麻烦。槽液过多时,往往会从刀口部位溢出,沾湿了标本块面,致使切片无法进行。这样只能用滤纸吸干溢出的槽液,调节液槽水位。如果污染了刀口,就不得不更换新刀,重新调整块面与刀口距离,才能续继切片;若液槽内水位过低,又不能沾湿刀口时,     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

简易贴翅标本的制作

昆虫的翅各具形态 ,具有一定的研究价值 ,把各种昆虫的翅分类制成贴翅标本 ,便于研究观察。下面介绍一种简单易行的制作方法 :1　材料　透明宽胶带纸、无色透明玻璃板、镊子、碳素钢笔、白色标签纸、玻璃刀和剪刀。2　方法　 1)将玻璃板裁成合适的尺寸 ,擦拭干净。2 )用镊子夹着处死的昆虫的翅基轻轻取下 ,按自然状态贴于透明胶带纸上。3)将此贴有昆虫翅的胶带纸紧贴于玻璃板上 ,注意不要出现气泡。使翅被密封于胶带纸与玻璃板之间 (类似于塑封 )。4 )将注明昆虫名称、采集地点、采集日期等内容的标签 ,贴于标本下面。一个玻璃板可贴数 10对…     

蚤和蚊虫的石腊连续切片方法介绍

<正> 随着昆虫的组织化学和昆虫微生物学的发展,对昆虫内部器官的细胞结构和化学成分往往要求详细的观察,这就需要将虫体做连续切片。昆虫的体壁较坚硬,切片时往往不易完整。近年来国外使用其它试剂(Supercedrol)代替乙醇脱水,用其它介质(Paraplast)代替石腊,并在真空条件下进行透蜡,使标本避免在长时间浸腊过程中脆裂,保持标本的完整。我们未能找到这些试剂,因而仍用石腊切片法,使用的材料是印鼠客蚤和白纹伊蚊。     

一种在两栖类胚胎的免疫组织化学研究中有多种用途的方法

本文介绍了我们最近发展的一项用于两栖类胚胎的免疫组织化学研究的技术。两栖类胚胎经过适当的化学固定以后,用振动切片机可以得到50—100 μ的切片。我们用这样的切片进行免疫萤光和免疫酶标染色,均得到满意的结果,可以进行光镜(共聚焦显微镜,普通显微镜)及透射电镜的观察。由于在整个过程中避免了使用有机溶剂及包埋剂,所以最大限度地保存了抗原性。与传统的各种免疫组化技术比较,切片的各部分组织均能迅速与抗体反应,组织保存相当完好,可以满足电镜观察的要求。运用这种方法,还可以将同一胚胎的不同切片分别用于光镜和电镜观察,使结果更具说服力。     

晶体锇酸安瓿瓶的安全破裂法

锇酸是电镜样品制备中主要的固定剂,它是剧毒试剂,并被密封在壁较厚的安瓿瓶中,从晶体锇酸配制固定液时,须将安瓿瓶破裂,常用安瓿瓶的破裂方法是在洁净的安瓿瓶的中部用小砂轮或钻石刀划一痕,然后将安瓿瓶放入洁净的小棕色试剂瓶中,再用一洁净的粗玻璃棒的一端对准安瓿瓶的的中部一敲,使其破裂。此法要求敲击之力适度而准确,破裂不成功,可能安瓿瓶和棕色试剂瓶皆破或棕色试剂瓶破裂而安瓿     

酶免疫组织化学技术

酶免疫组织化学技术,是以辣根过氧化物酶(Horsenadish peroxidase 简称HRP)结合在抗体、抗原或中间体上,对组织或细胞进行的免疫化学反应。由于酶对底物的对数放大作用和成色反应,增强了分辨力,使抗原抗体反应具有较高的的敏感性和特异性。本法具有操作简便,试剂稳定和不需用特殊设备等优点;在细胞涂片、冰冻切片和石腊切片中,均可在光镜或电镜下定位或定量组织细胞中的各种成份和研究细微结构等。因此,自1966年 Nakane 等建立酶免疫技术以来,发展很快。最初主要是通过化学交联剂将酶与抗体交联,用以检测组织中的相应抗原,相     

介绍一种超薄切片中细胞定位的薄层包埋方法

电子显微技术中,对研究材料中的特定组织或细胞的定位在超薄切片时是最困难的一步。曾提出的用还氧树脂厚切片重新包埋的方法以及类似的厚切片重新粘贴法在克服这一困难上有很好的效果。对于单细胞或分离的原生质体,以及花粉和萌发的花粉管等材料,电镜样品的制作常用离心进行材料的收集、固定、脱水和渗透等步骤,并按寻常的方法     

保持培养细胞原位、原形的超薄切片制备法

本文介绍先用环氧树脂Epon812包埋剂制成丘状膜,再在膜上培养细胞,直接将膜与细胞一起包埋,制备超薄切片。此种方法不仅能克服以往培养细胞需要离心成团,容易造成细胞破碎、变形的缺点;还能避免琼脂预包埋法悬浮细胞造成的抗原封闭;并能得到为数较多的连续超薄切片。它操作简便,较好地保持了培养细胞生长的原来位置及原有形状,为培养细胞进行免疫电镜的操作和提高制备培养细胞超薄切片的数量和质量提供了一种有效的途径。     

改装FOK型超微切片机

FOK型超微切片机(图1),适合于切动植物组织的切片,所切之厚薄介于0.05-5微米之间,原机器是使用刮脸刀片作为薄切的刀。有一个固定刀片的台于,刀片按装好;由带有齿轮之轴向前推动,轴之前面有上下跳动之杠杆,调节切片之厚薄,在杠杆前端有按装包埋组织聚合物的固定装置,用手摇动机柄时,螺旋轴问前转动,杠杆上下跳动便可进行薄切,薄切的同时还可以调节厚度。这种机器因为按装的刀片太厚,刀锋又不锐利,一般很难切出0.05微米厚的薄切片,并     

丙三醇可以代替香柏油

在生物学的研究和教学方面,不少时候需要使用油浸镜头来观察标本,特别是在细胞学,组织学和微生物学等方面,这种技术操作几乎是不能缺少的。普通一般放在油浸接物镜和切片之间的折光率与玻璃相近似的是香柏油(当然也有用其他油的)。这种香柏油比较昂贵,比较容易挥发,时间过久即不便使用,因而盛放香柏油的容器需要用双层瓶。同时,油浸     

石蜡切片刀的改进研究

以手术刀片代替传统的切片刀,通过肝、肾、脾、肺、心肌、气管等器官所作的对比性切片试验表明,该切片刀不仅达到了原有切片刀的性能,还能做1—3微米半薄切片。染色后在10×10、10×40显微镜下,整个切片完整无损,厚度均匀,各类细胞结构清晰易辨。该切片刀不需磨鐾,省时省力,操作简便,经济实用。特别适合基层实验室的组织及病理学的教学科研工作。     

用整装电镜技术观察体外培养的人体鼻咽癌上皮细胞(CNE 细胞)的细微结构

培养细胞具有复杂的细胞骨架三维结构,包括微丝、微管和中等纤维三种主要的胞质纤维。使用抗体标记技术在光学显微镜和超微结构水平对这些纤维的结构蛋白的定位有过许多工作,但在方法学上还具有不足之处。光学显微镜能观察样品的范围大,但解像力差。常规电镜虽然可用于观察细胞结构,但样品必须切片,因此对细胞内的成分很难重组出立体的概念。近年发展起来的整装电镜术,在研究细胞结构     

生物样品离子刻蚀法

早在一个世纪前人们就认识离子的轰击作用,开始在金属学、固体电子学中应用。近年来离子刻蚀技术已成为扫描电镜生物样品制备中的一种新方法。利用高速运动的离子流不断轰击样品表面,使表面的原子和离子发生溅射和剥离.这种溅射一般为物理溅射和化学溅射,其速率取决于刻蚀体和被刻蚀体的性质和刻蚀条件。生物样品的细胞膜表面结构被一层糖蛋白或糖脂掩盖,有些材料如胃、小肠等表面还附有许多粘液,用常规方法很难洗净,就会影响电镜观察效果。应用超声波方法清洗,由于功率和时间较难控制,一旦掌握不好,细胞表面结构就