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1.
目的:筛选出莽草酸、转酮醇酶双重营养缺陷型的D-核糖生产菌枯草芽胞杆菌,以提高D-核糖的产量。方法:采用化学诱变剂乙基磺酸甲烷(EMS)对野生型D-核糖生产菌的原生质体进行诱变,并从D-核糖合成途径对发酵培养基进行优化设计。结果:摇瓶发酵D-核糖平均产量为52.2g/L;获得的B.sems-10菌株具有良好的遗传稳定性,D-核糖产量高达67.5g/L。结论:通过对D-核糖生产菌原生质体的EMS诱变,筛选出了高产、遗传性状稳定的营养缺陷型B.sems-10菌株,为进一步提高产量奠定了基础。 相似文献
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碱性淀粉酶产生菌的筛选和产酶条件的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
对采自全国各地的50份上样进行筛选,获得一株产酶活性较高的菌株B-9545,通过摇瓶培养确定了产酶的最适培养基Ⅱ(g/100ml):复合蛋白胨1.0;玉米淀粉1.5;玉米浆1.5;NaC10.5;K2HpO40.1;MgSO40.02;CaCO30.5;Tween800.1;pHg—10,在该条件下,30℃荡培养48h,酶活力可达596u/ml。对菌株B—9545的产酶特性研究表明:该酶对高pH环境有较强的适应性,因此,可用于碱性洗涤用酶。 相似文献
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文章为优化葡萄糖氧化酶产生菌的诱变育种和发酵工艺,将桔青霉CICC 40277作为生产菌株,通过对固、液培养基中菌种的生长和产酶活力进行比较,选取木薯叶为培养基质,经固体培养活化后,菌株的产酶活力最高达到66.48 U/g。然后采用2-脱氧-D-葡萄糖为菌株抑制剂,以甲基红为指示剂设计了一种高效、简便的筛选方法。通过紫外诱变育种,最终筛选得到一株高产菌株Uv-7,其产酶活力达到79.76 U/g,比原始菌株提高了20%。采用单因素试验对Uv-7菌株产葡萄糖氧化酶的最佳菌种活化条件进行优化,得到最适条件为:培养时间144 h、培养温度30℃、接种量20%(V/V);最适培养基组分为:以5.5 g木薯叶为固体基质,按照1∶1(W/V)的固液比添加盐溶液(g/L):MgSO4·7H2O 0.5、Na2HPO4 2.0、KCl 0.3、CaCO3 3.0、葡萄糖30、酵母粉6,当pH为6.0时,菌株经活化后产葡萄糖氧化酶的活性提高到了101.52 U/g,与原始菌株相比提高了52.7%... 相似文献
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α-乙酰乳酸脱羧酶产生菌的微波诱变 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得α-乙酰乳酸脱羧酶的高产突变株,以产α-ALDC的枯草芽孢杆菌3226—5为出发菌株进行了诱变处理。经过微波(小火)物理诱变得到3株高产正突变株W181、W184、W195,经过多次传代实验,表明W181、W195是稳定的突变株。突变株W195的α-ALDC相对酶活(OD522)由出发菌株的0.35提高到0.617,提高了76%,突变株W181提高了66.9%。 相似文献
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为获得ɑ-乙酰乳酸脱羧酶的高产突变株,以产ɑ-ALDC的枯草芽孢杆菌3226-5为出发菌株进行了诱变处理。经过微波(小火)物理诱变得到3株高产正突变株W181、W184、W195,经过多次传代实验,表明W181、W195是稳定的突变株。突变株W195的ɑ-ALDC相对酶活(OD522)由出发菌株的0.35提高到0.617,提高了76%,突变株W181提高了66.9%。 相似文献
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高活力碱性淀粉酶菌种的选育及培养条件研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对产碱性淀粉酶芽胞杆菌B-9545进行紫外线、原生质体亚硝基胍复合诱变等反复处理,获得一株具有较高碱性淀粉酶活力的变异株PN-6。产酶活力从540u/ml提高到780u/ml,确定的最佳培养条件是:pH8-10,30℃培养48h。从变异株和出发菌株的生长及产酶曲线看到,变异株的生长速度低于出发菌株,其产酶高峰与出发菌株相比略拖后一段时间,但是酶活力要远大于出发菌株。 相似文献
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碱性蛋白酶产生菌的筛选及发酵条件考查 总被引:4,自引:0,他引:4
从土壤中分离到的167株芽胞杆菌中选出一株高产、稳产碱性蛋白酶菌株A4-3(嗜碱性枯草芽胞杆菌)。该菌株最适产酶条件为(g/100ml):蔗糖6.0;豆饼水解液10.0;Na2CO31.0;起始pH9.5。在该条件下,经37℃振荡培养48h,酶活力达2612u/ml。 相似文献
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1株抗菌植物内生菌EJH-2菌株的分离和鉴定 总被引:13,自引:0,他引:13
目的从中药植物金银花的组织中分离到1株具有抗菌活性的植物内生菌EJH-2菌株,并对其进行了分子生物学鉴定。方法通过总DNA提取,PCR扩增,得到1300bp的16S rRNA序列。PCR产物序列通过BLAST软件在NCBI网站中进行同源性比较。通过Bioedit7.0和Treedrawing软件绘制系统发育树。结果EJH-2的16SrRNA序列和数据库中的类多粘芽胞杆菌KCTC 1663菌株的序列的同源性为99.76%。在系统发育树中,EJH-2菌株和多粘类芽胞杆菌在同一分支。结论EJH-2菌株应归属于多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)。 相似文献
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以高产L-谷氨酸的谷氨酸棒杆菌GY1为研究对象,采用ARTP进行全局诱变,进一步提高L-谷氨酸的发酵水平。首先,对谷氨酸棒杆菌GY1原生质体的制备及再生条件进行优化,接着,根据致死率选择最佳的ARTP处理时间,然后,采用96微孔板及摇瓶发酵的方式对突变株进行筛选,最后,对获得的优良突变株进行50 L罐发酵验证。结果显示,溶菌酶浓度为10.0 mg/mL,酶解90 min,原生质体形成率和再生率达到最佳。ARTP最佳处理时间为40 s,致死率达到89.6%,经过初筛与摇瓶复筛,获得突变株YAG117,其摇瓶发酵L-谷氨酸含量达16.3 g/L,较出发菌株提高13.9%,且连续传代五代遗传稳定。50 L补料分批发酵条件下,L-谷氨酸产量在36 h最高,达到216.6 g/L,较出发菌株提高12.9%,糖酸转化率达68.87%,比出发菌株提高了10.2%。ARTP处理GY1菌株原生质体,能够有效积累有利突变,提高突变株发酵生产L-谷氨酸的能力,获得的突变株YAG117也显示了较好的工业化应用潜力。 相似文献
12.
蛋白酶产生菌的筛选和紫外诱变育种 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:筛选水产品加工用蛋白酶产生菌,为酶的的分子改造和水产品加工提供材料基础.方法:通过在富含水产品蛋白的场所的针对性采样,菌落平板筛选结合发酵上清液平板验证以及Folin-酚试剂定量检测确认筛选结果,并通过紫外诱变提高产中性蛋白酶菌株的产酶能力.结果:从12份土样中分离187株具有明显蛋白酶活性的单菌落.在挑取的11株透明圈明显的蛋白酶产生菌中,菌株W9在所有菌株中可以稳定产生较高的蛋白酶酶活力,约为1 594U/ml.通过对其进行紫外诱变后,在突变株中筛选得到一株酶活约为1 845U/ml的 W9UV突变株,比野生菌株酶活提高了15.6%.结论:突变菌株W9UV可稳定产生较高的蛋白酶酶活力,发酵性能优良. 相似文献
13.
本研究以铜山烟草(中烟100)生产田根际土壤为材料,通过以支链淀粉作为碳源的固体鉴别培养基的分离培养获得3株产淀粉脱支酶菌株,将其依次编号为XUEX1、XUEX2和XUEX3,采用DNS法测定了3株菌的产酶活性,经过32h的连续发酵,XUEX3菌株的酶活性峰值达到了16.3 U/mL,XUEX1和XUEX2的峰值均未超过9 U/mL.选取产酶活性最高的XUEX3作为出发菌株进行紫外线诱变选育.结果 表明,试验获得的3个正突变菌株XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3的产淀粉脱支酶活性与出发菌株相比均有显著提高,其中XUEX3-3的HC值达到了出发菌株XUEX3的3.2倍;经过32 h的连续发酵,XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3产酶活性的峰值分别为39.7 U/mL、43.1 U/mL和35.3 U/mL;与对照相比,突变株XUEX3-2的产酶峰值出现的时间提前了4h,XUEX3-1和XUEX3-3的则推迟了4h,但经过连续5代的传代培养,正突变菌株XUEX3-1、XUEX3-2和XUEX3-3的遗传稳定.研究结果丰富了产淀粉脱支酶菌株的遗传资源库,为后期的应用开发提供了更多选项. 相似文献
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采用紫外线对现有生产菌株进行诱变处理,再运用筛选剂丙酸、丁酸等对其进行选育,得到高产菌株M-3-01。投入中试车间发酵罐中,发酵效价达到50560×103u.L-1,其发酵能力比出发菌株提高了26%。 相似文献
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Winsome Garvey Arleen Fathi Francine Bigelow Blair Carpenter Carmencita Jimenez 《Biotechnic & histochemistry》1987,62(6):365-368
A method is described which demonstrates nuclei, elastic fibers, red blood cells, collagen and fibrin. Nuclei and elastic fibers are stained by a modified VerhoefPs elastic tissue stain which was previously developed and used in the elastic-Masson combination. Both early fibrin and red blood cells are shown by Hssamine fast yellow. Mature fibrin, some types of collagen and other cytoplasmic changes are stained by a combination of acid fuchsia, Biebrich scarlet and ponceau 2R, while old fibrin is demonstrated by the collagen stain. This method takes about 1 hr to perform and has the added advantage that several entities are clearly shown in a single slide. 相似文献
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通过对菌株BX-2(Bacillus subtilis)的紫外诱变和硫酸二乙酯的诱变处理得到D-核糖高产菌株BY-5。36℃,pH6.8,250 r.m in-1条件下培养72 h,其D-核糖产量从开始的55.0 g.L-1提高到68.0 g.L-1。蔗糖和葡萄糖的混合碳源发酵,D-核糖产量达到75 g.L-1。当D-葡萄糖被蔗糖部分替代后,D-核糖生产能力得到了提高。 相似文献
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N. V. Tsurikova L. I. Nefedova E. V. Kostyleva V. I. Zvenigorodskii V. G. Yasinovskii T. A. Voeikova A. P. Sinitsyn 《Applied Biochemistry and Microbiology》2002,38(5):427-432
A highly potent strain of Bacillus licheniformis 103 that synthesized thermostable -amylase with temperature and pH optima of 90–95°C and 6.0–8.5, respectively, was obtained by mutagenesis and selection. The composition of fermentation media and conditions for submerged cultivation of the producer were optimized. -Amylase whose activity reached 260 U/ml was obtained in laboratory fermenters. 相似文献