微生物法转化大力补(Dianabol)的研究

△′-脱氢甲基睾丸素的商品名称为大力补(Diana-bol),是个种蛋白同化激素,能有效促进人体内蛋白质合成,钙、磷、钾、水分的蓄积,其功效与性激素睾丸素、甲基睾丸素相比,具有同化效应强,男性化副作用小的特点。据文献报道,大力补在临床上已用于晚期乳腺癌病人,大面积烧伤病人的治疗,对骨质疏松症、发育     

A环饱和甾体的微生物转化作用I．用17a-甲基表雄醇制备去氢17a-甲基睾丸素

本文比较了诺卡氏菌(Nocardia)和节杆菌(Arthrobacter)两属共62株菌株对17a-甲基表雄醇(1)和17a-甲基睾丸紊(III)的脱氢能力,以找出生产去氢17a-甲基睾丸素(IV)的菌种。根据这些微生物的脱氢特点,它们的转化作用可以分以下四种类型：(1)I→III→IV (2)I→III→IV (3)I→III→IV (4)I→III→IV 从第二种转化类型的微生物中选到一株能彻底氧化(I)的节杆菌9—2。在它的培养基质中加硫酸钻可抑制去氢1 7扣甲基睾丸素(IV)的降解,从而使产物(IV)大量积累。脱氢的最适pH为6,溶解甾体底物用的乙醇浓度为2％。在此条件下,去氢17a-甲基睾丸素(IV)的转化率超过85％。     

△~9-1,18-十八烯二元酸生产菌株的筛选和诱变

△~9—1,18-十八烯二元酸(△~9DC_(18))是合成名贵香料——灵猫香的重要原料。灵猫香是四种名贵动物香(龙涎香、麝香、灵猫香和海狸香)中的一种。由于人民生活水平的不断提高,对名贵香料的需求量与日俱增,又由于人类保护野生动物,所以名贵香料的供求关系日渐紧张,因此合成人造香料是一种发展方向。 △~9DC_(18)自然界中不存在,化学方法又无法合成,微生物具有一种特异的氧化能力,能在常温常压下发酵油酸或油醇,生成相应链长的二元酸而不破坏其双键结构,因此可用微生物方法生产△~9DC_(18)。1983年日本田冈映用假丝酵母(Candida)MD—105,从反式—△~9—十八碳脂肪酸和顺式—△~9—十八碳脂肪酸发酵生产,用休止细胞转化96h,前者产生反式—△~9—1,18—十八烯二元酸(反式△~9DC_(18))达到32.9g/L,后者产生顺式—△~9—1,18—十八烯二元酸(顺式△~9DC_(18))达到48.lg/L。本文报道生产△~9DC_(18)菌株的筛选和诱变。     

蓟运河汉沽地区河泥中汞的微生物甲基化作用

汞的生物转化作用的研究开始于60年代末,Wood等(1968)研究了生物甲基化的机制,认为汞甲基化有酶和非酶两种作用,甲基化作用是通过甲基钴氨素中的甲基转移来完成的。瑞典生物学家Jensen和Jernel(?)v(1969)提出在湖泊底泥里微生物有形成甲基汞的功能,汞甲基化的速度与底泥里的微生物活动有密切的相关性。由此,微生物汞甲基化作用得到人们的注视,Yamada等(1972)在厌氧条件下研究了匙形梭菌(Clostridium cochlearium)的汞甲基化作用。Vonk等(1973)发现在通气条件下一些细菌和真菌可使氯化汞甲基化形成少量的甲基汞。Fagerstr(?)m和Jernel(?)v(1972)曾报道,通气条件下汞转化过程中甲基化的主要产物是一甲基汞,厌氧条件下汞甲基化的产物大部是二甲基汞。但是,人们总是认为甲基化的主要产物为一甲基汞,而二甲基汞形成的数量则很少(Iverson等,1978)。这些汞化合物在水体中引起危害。     

8-氧化咖啡因和嘧啶类生物碱在普洱熟茶中的存在

应用柱层析分离技术,从普洱熟茶中首次分离到8-氧化咖啡因,嘧啶类生物碱(胸腺嘧啶脱氧核苷、胸腺嘧啶和尿嘧啶) ,黄酮类配糖体(黄杞甙) ,以及简单酚类化合物(1 ,2 ,4-苯三酚、1 ,3-苯二酚和4-甲基-1 ,2-二苯酚)。由于普洱熟茶是由大叶茶经微生物后发酵生产的, 8-氧化咖啡因显然是茶叶中的咖啡因在微生物作用下形成的转化产物。胸腺嘧啶脱氧核苷亦可能是茶叶中的嘧啶类生物碱与微生物中的核苷类化合物在后发酵过程中缩合形成的。二者均为新发现的普洱熟茶的特征性成分。     

α-环糊精糖基转移酶活性区域突变提高选择形成γ-环糊精能力

探讨α-环糊精糖基转移酶(CGT酶)活性区域-3亚位点(47位赖氨酸残基),-7亚位点(146~152位氨基酸残基)以及环化中心位点(195位酪氨酸残基)对其催化底物形成γ-环糊精(CD)能力的影响。将α-CGT酶相应位点分别进行如下突变:K47T,Y195I,以及146~152位氨基酸残基替换为异亮氨酸(命名为△6),并在大肠杆菌BL21中实现异源活性表达。以可溶性淀粉作为底物进行转化,利用HPLC分析各种突变酶的催化产物中3种环糊精产量和比例。结果表明,和野生酶相比,所有突变酶的淀粉水解活性和环糊精总生成量都有不同程度的下降。在产物的组成方面,突变酶Y195I的催化产物中,α-CD的含量由68%降为30%,β-CD由22.2%提高为33.3%;而γ-CD由8.9%提高为36.7%,含量提高了4倍,取代α-CD成为产物中的主要成分;γ-CD的实际产量为1.1 g/L,是野生酶(0.4 g/L)的3倍。突变酶K47T和△6的转化产物中α-CD比例有不同程度下降,但仍然是产物中的主要组分,β-和γ-CD的比例都有所增加。由此可见,活性区域中195位氨基酸对于α-CGT酶的活力和催化选择性具有重要的影响,Y195I突变体酶最有利于选择性形成γ-CD。纯化后突变酶Y195I的酶学性质试验表明,其最适反应温度和野生酶相同,但最适反应pH有所提高,且比野生酶具有更好的pH稳定性。因此,突变酶Y195I具有生产制备γ-CD的潜力。     

微生物铬转化和抗性机制与生物修复研究进展

铬(Chromium,Cr)是过渡金属元素,在自然界中以六价[CrO_4~(2-),Cr_2O_7~(2-),Cr(Ⅵ)]和三价[Cr(OH)_3,Cr(Ⅲ)]为主。很多微生物在长期铬胁迫的条件下,进化出了一系列铬转化和抗性机制。微生物对铬的转化包括Cr(Ⅵ)的还原和Cr(Ⅲ)的氧化。微生物的Cr(Ⅵ)还原可以将毒性强的六价铬转化为毒性弱或无毒的三价铬,这类微生物有较强的土壤和水体铬污染治理潜力。Cr(Ⅲ)的氧化也在铬的生物地球化学循环过程中起着至关重要的作用。除了Cr(Ⅵ)的还原,微生物对铬的抗性机制还有:(1)减少摄入;(2)外排;(3)清除胞内氧化压力;(4)DNA修复。本文主要介绍微生物的铬转化和抗性机制,以及其在铬污染生物修复中应用的最新研究进展。     

核酸降解物在水稻生产上的应用及其作用机理的研究——Ⅲ.水稻对~(14)碳-核酸降解产物的吸收和运转

用~(14)碳标记的核酸降解产物,~(14)碳-核苷酸、~(14)碳-尿嘧啶核苷和~(14)碳-腺嘌呤,研究了水稻秧苗对核酸降解产物的吸收和运转。水稻秧苗叶面和根部都能吸收这些~(14)碳标记的核酸降解产物,其中叶面对~(14)碳-核苷酸的吸收,在6小时后除去所涂叶片外其他部分吸收达70～80%左右,因此在实际应用核酸降解产物中,如喷施6小时内降雨,需要补喷以发挥其应有的效果。     

微生物对硒的还原及其产物的应用研究进展——纪念硒发现200周年

硒是生命必需的微量元素,以硒代半胱氨酸(Sec,第21位氨基酸)和硒代甲硫氨酸(Se-Met)的形式加入到硒蛋白(酶)中。人畜硒摄入过量或不足均会导致很多疾病。微生物参与了Se(-Ⅱ)、Se(0)、Se(Ⅳ)和Se(Ⅵ)等各种价态间的转化。本文主要综述微生物对硒的还原及其生物学意义。微生物对硒的还原包括同化还原、异化还原以及在还原基础上进行的硒的甲基化。硒的同化还原主要是形成各种硒蛋白,满足微生物自身对硒的需求,食源性微生物对人畜补硒具有重要意义。高浓度硒酸盐和亚硒酸盐则可促使微生物进行异化还原并形成单质纳米硒颗粒。有的微生物会将还原态的Sec和Se-Met进一步转化为挥发态的甲基化硒。硒的异化还原和甲基化都是解毒机制,在硒污染环境的治理中具有重要意义。最后,阐述了单质纳米硒在医药、生物传感器和治理重金属污染等方面的应用前景,以及微生物合成CdSe荧光量子点的应用。     

A环饱和甾体的微生物转化作用III．倍他美松中间体16β-甲基-5a-△9(11)-孕甾烯-3β,17a, 21-三羟基一20一酮一21一醋酸酯的△1.4 作用

节杆菌9—2在一定浓度的氯化钻存在下转化16β一甲基一5a一△9(11)一孕甾烯-3β,17a,21-三羟基一20一酮21-醋酸酯(I)为16β-甲基-A1.4,9(11)-孕甾三烯-17a,21一二羟基-3,20-二酮(n)。转化的最适条件为氯化钴浓度0．08％;乙醇2一4％;pH 7—8;温度28—30℃。在此条件下,产物(II)的收率在60％以上。     

应用甲基睾丸素诱导莫桑非洲鲫雄性化的研究

为了控制莫桑非洲鲫(Tilapia mossambica)的过盛繁殖和充分利用雄性非洲鲫生长快的特点,近年来,国内外应用甲基睾丸素诱导莫桑非洲鲫,使遗传上的雌鱼转换为功能上的雄鱼。 本文着重研究口服甲基睾丸素诱导莫桑非洲鲫雄性化效应与剂量、时间、鱼体大小的关系,试图找出口服时间短、用药少、经济低廉的技术措施,为大面积推广单性养殖创造条件。     

培他美松中间体(17a-羟基-16β一甲基孕甾-4，9(11)二烯-3，20一二酮)微生物脱氢的研究

从47株对甲基睾丸素A环1位具有脱氢能力菌株[1]中,选出了3株对培他茭松中间体17a-羟基一16β一甲基孕甾一4,9(11)二烯一3,20一二酮有转化能力的优良菌株A69—1、A69—2、G1—1。对A69-1菌株转化甾体的条件进行了初步研究,发现培养基成分、通气量、金属离子、乙醇浓度和青霉素等与脱氢强度有关。进一步放大试验证明,通气量是转化工艺条件的关键。300升发酵罐试验产品收得率近70％。     

微孔草种子油的三萜醇和甾醇成分

微孔草Microula sikkimensis Hemsl,种子油中的不皂化物含量为0.6％。从不皂化物中分离出三萜醇和甾醇。已鉴定有4个三萜醇(β—香树脂醇、环阿屯醇、羽扇醇和24—次甲基环阿屯醉),11个甾醇(胆甾醉,△~7胆甾醇、菜油甾醇,24—甲墓△~7—胆甾醇、β—谷甾醇,22-二氢菠菜甾醇、菜子甾醇、豆甾烯醇、5,24(28)—豆甾烯醇、△~7—燕麦甾醇和7,24(28)-麦角甾醇)。     

甲基睾丸素对牛蛙性腺作用效果的初步观察

采用投喂甲基睾丸素的方法，对牛蛙苗种进行性转化研究，获得１００％的雄性率，此法不仅对性分化已达１０个月的蝌蚪有效，对已完成变态的幼蛙，同样有明显的效果。     

以乙酸为碳源生长菌体的两阶段培养生产L-半胱氨酸合成酶

假单胞菌F12能够将DL-2-氨基-△~2-噻唑啉4-羧酸(DL-2-amino-△~2-thiazoline-4-carboxylic acid,DL-ATC)转化为L-半胱氨酸。将该微生物转化过程分为以乙酸和氨为碳源和氮源的菌体生长阶段和利用DL-ATC诱导L-半胱氨酸合成酶产生阶段。考察了乙酸对菌体生长的影响以及菌体比生长速率对L-半胱氨酸合成酶诱导的影响。结果表明,当乙酸浓度大于4 g/L时对菌体生长有显著抑制作用,乙酸的存在对L-半胱氨酸合成酶的诱导有抑制作用,菌体比生长速率较高时更有利于酶系的产生。在5 L罐中进行的两阶段培养,最高体积酶活达到283 U/mL,比优化前提高了150%,比分批培养提高了130%。     

短刺小克银汉霉与卷枝毛霉对昂丹司琼的转化

采用微生物转化法考察11株放线菌及11株小型丝状真菌对昂丹司琼的转化能力,通过高效液相色谱-多级质谱(HPLC-MSn)检测转化产物。7株真菌可将昂丹司琼转化为7-羟基昂丹司琼和N-去甲基昂丹司琼,与文献中报道的人体内主要代谢产物相同,其中短刺小克银汉霉AS 3.153转化能力最强,在优化的转化系统中7-羟基昂丹司琼和N-去甲基昂丹司琼的产率分别达到57.80%和15.60%。此外,3株真菌和7株放线菌将昂丹司琼转化为1-羟基昂丹司琼,其中卷枝毛霉AS 3.3421转化能力最强,在优化的转化系统中,1-羟基异构体的总产率达43.10%。表明筛选出的2模型菌株对形成昂丹司琼的类哺乳动物代谢产物具有互补能力,在确定药物代谢产物种类及制备相应的对照品中具有应用价值,可作为药物代谢体外研究的有效辅助工具。     

用新月弯孢霉11β-羟基化16a-甲基化合物RS-21醋酸酯

对新月弯孢霉AS3．4381的菌丝体转化16a-甲基Reicbstein's 化合物S21-醋酸酯(I)生成16a-甲基氢化可的松(II)进行了研究。培养24h的菌丝体的11β-羟基化活性最高;乙醇对此羟基化活性的抑制作用明显。当(1)浓度为0.15％,转化72h,产物(II)的重量收率为55.4％。     

新疆低阶煤本源生物甲烷转化中微生物群落组成及变化

【目的】探究新疆低阶煤生物甲烷转化过程微生物群落组成及多样性。【方法】采用厌氧培养方法和末端限制性片段长度多态性技术(Terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)分析新疆低阶煤本源微生物对甲烷转化及有机酸含量的影响,分析新疆哈密大南湖长焰煤生物甲烷转化过程中微生物群落动态变化。【结果】研究表明长焰煤和褐煤对本源微生物产甲烷影响较小,随着低阶煤生物甲烷转化时间的延长,甲烷产量呈上升趋势,转化60 d后长焰煤甲烷产量高达10.28 m L/g,挥发性有机酸(VFA)浓度则最低;微生物多样性指数变化不明显,不同转化时间微生物主要类群为放线菌门(Actinobacteria),拟杆菌门(Bacteroidetes),厚壁菌门(Firmicutes),变形菌门(Proteobacteria);甲烷菌的群落结构相对于细菌较简单,在整个低阶煤生物转化产甲烷过程中共有古菌类群为甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)、甲烷盐菌属(Methanohalobium)、甲烷叶菌属(Methanolobus)、甲烷食甲基菌属(Methanomethylovorans),它们是构成群落结构的基本菌群。【结论】低阶煤生物甲烷转化过程微生物群落具有丰富的多样性,且不同时期多样性有较大差异。甲烷菌群落结构相对于细菌较简单,共有类群明显。     

双指示剂催化动力学光度法测定中药中痕量铜

在pH 5.5的邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲介质中,以邻菲啰啉为活化剂,研究了痕量铜(Ⅱ)催化过氧化氢氧化甲基橙和次甲基蓝的指示反应。通过测定430 nm和670 nm两个波长处催化体系和非催化体系吸光度的变化,并优化反应条件,建立了一种测定痕量铜(Ⅱ)的新方法。结果表明,铜(Ⅱ)的质量浓度在0.004～0.160μg/mL范围内与△A有良好的线性关系,其中△A=△A_(430) △A_(670),线性回归方程为△A=0.1120c 0.0003,线性相关系数r=0.9957。该方法可用于中草药中所含痕量铜的测定,其结果与原子吸收光谱法相吻合。     

大豆异黄酮微生物转化研究进展

大豆异黄酮是大豆在其生长过程中形成的一类次生代谢产物,具有抗氧化、抗癌、减少骨质流失、降低心脑血管发病率等多种生理功能。目前已知,被摄人机体的大豆异黄酮将被肠道微生物菌群转化为具有更高、更广生物学活性的不同产物。因此,大豆异黄酮对人体的有益调节作用强弱并不简单取决于摄人机体的净含量的多少,更在于被摄人机体的大豆异黄酮将如何被肠道菌群转化。本文从大豆异黄酮的组成与功能、大豆异黄酮体内吸收、代谢及微生物转化、转化产物的活性以及高效合成等方面进行了系统综述,对大豆异黄酮微生物生物转化研究现状和存在问题进行分析总结,并对今后发展趋势进行展望,旨在推动高活性大豆异黄酮微生物转化产物的研究与开发。