荧光标记抗体追踪天花粉蛋白引产作用部位的研究

目前,天花粉粗提物作为中期引产药物,虽然在临床已广泛使用,但是对天花粉蛋白中期引产的原理还不甚了解。根据临床引产下来的胎盘病理观察,发现滋养层细胞广泛坏死,绒毛间隙有大量的纤维蛋白沉着。天花粉粗提物对宫外孕、葡萄胎、恶性葡萄胎和     

天花粉蛋白对体外培养人胎盘绒毛滋养层细胞影响的研究

随着天花粉粗提物中期引产和治疗滋养层细胞疾病在临床上推广应用,深入研究其作用原理,具有重要的实际意义。临床实践和动物实验(上海市天花粉科研协作组,1996),为研究引产原理积累了许多有价值的资料。在小鼠中荧光标记抗体的追踪实验证     

天花粉蛋白放射免疫测定法

天花粉蛋白(Trichosanthin)是一种使用简便而有效的中期妊娠引产药物。鉴于目前临床上一般采用肌肉注射天花粉蛋白粗提物引产,剂量5—10毫克,估计由肌肉转移至血循环的天花粉蛋白量,每毫升血液中至多也只有毫微克水平。因此,为了准确地了解天花粉蛋白在血循环中量上的动态变化,探讨天花粉蛋白的代谢规律,进一步深入研究天花粉蛋白在细胞水平和分子水平的作用原理,以及改进临床用药途径和降低有效剂量,建立天花粉蛋白的超微量分析技术就显得更加迫切和重要。     

免疫抑制和天花粉蛋白终止妊娠作用的初步研究

天花粉粗提物是从中药栝楼根提取出来的一种蛋白质性药物。对中期引产有显著效果,对宫外孕、葡萄胎以及绒毛膜上皮癌也有一定疗效(上海市天花粉科研协作组,1976)。据临床观察,注射天花粉粗提物的病人,特别是有和天花粉接触史者,往往出现过敏反应(皮疹,肌肉疼痛,胸闷,甚至休克)。并可能测出抗体。目前,临床虽采用皮试方法,剔除     

天花粉蛋白引产原理的探讨

天花粉粗提物是从葫芦科植物栝楼的根提取出的中期引产药物,其纯化的引产有效成分为分子量约18,000的碱性蛋白质,称为“天花粉蛋白”。经鉴定对中期妊娠有很好的引产效果。同时,对宫外孕、葡萄胎、恶性葡萄胎有独特的疗效,对绒毛膜上皮癌也有一定的疗效, 根据对天花粉蛋白的原初作用部位,胎盘和离体培养的人滋养层细胞的形态和功能损伤,以及抑制前列腺素合成对天花粉蛋白引产的影响等方面的研究结果,互相印证,初步阐明了天花粉蛋白引产作用原理:(1)天花粉蛋白直接作用于胎盘的滋养层细胞,并有一定的细胞专一性:(2)天花粉蛋白能选择地使胎盘绒毛合体滋养层细胞变性坏死,解体的细胞碎片留在血窦中,引起凝血,造成循环障碍和进一步的大量组织坏死,胎盘绒毛坏死是原发的,循环障碍是继发的:(3)胎盘绒毛的损伤反映在功能方面,HCG和甾体激素迅速下降到先兆流产的临界水平以下。由于胎盘形态和功能严重损伤的结果,破坏了母体和胎儿之间的内分泌关系和代谢物的交换,并假定可能通过尚未弄清楚的机制,引起前列腺素合成的增加,发动宫缩而导致流产。总之,天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。天花粉蛋白引产作用原理的初步阐明,在实践上为提高和扩大天花粉蛋白的     

天花粉蛋白研究讨论会在京举行

1986年4月22日至25日,中国科学院在北京举行了天花粉蛋白研究讨论会。天花粉蛋白是我国科研人员于20多年前从民间流传的引产中药天花粉中发现并提取出来的一种单链碱性蛋白质。经过科学院有机化学所和细胞生物所(前实验生物所)与一些医疗部门(如上海龙华医院、瑞金医院等)结合临床多年研究和改进,发现结晶天花粉蛋白能有效而安全地用于抗早孕、中期引产和治疗葡萄胎、宫外孕甚至抑制一些肿瘤。动物实验证明,天花粉蛋白能相当专一地损伤胎盘滋养层合体细胞,从而在细胞水平初步阐明了引产机理。为了进一步从分子水平深入开展研究,有机所从1973年左右开始了天花粉蛋白氨基酸序列     

注射用天花粉对早孕兔子宫收缩的作用

天花粉针剂中期引产的成功,是中西医结合、整理和提高祖国医药学遗产的一项重要成果。据报道,天花粉蛋白的引产原理,主要作用于胎盘绒毛的合体滋养层细胞。由于药物引起滋养层细胞的变性和坏死,破坏其功能,从而导致胎儿死亡,以达到引产目的。但是关于天花粉蛋白使滋养层细胞损伤,如何引起宫缩发动的问题,尚缺乏针对性研究。目前,天花粉针剂在临床上用于早孕流产,出现了可喜的苗头;以天花粉针剂和15甲基前列腺素 F_(2α)联合用药终止早孕,更取得显著进展。开展天花粉蛋白对妊娠     

以抗病毒作用为指标测定天花粉蛋白生物活性的微量方法

天花粉蛋白是从祖国医药宝库中发掘的引产药物。近年来,研究者证明,天花粉蛋白在组织培养上可抑制人免疫缺损症病病毒(HIV)和其它病毒的复制。 天花粉蛋白生物活性的测定,一般用小白鼠等怀孕动物测定引产活性,也有人用兔网织红细胞裂解液体外转译体系,测定其抑制蛋白合成的能力。前者天花粉蛋白用量大,后者用量虽小,但实验较繁琐而且需同位素标记的氨基酸和必要的设备。     

天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂的亲和层析分离和一些性质

用酸处理交联琼脂糖6B和水不溶胰蛋白酶,可分别从天花粉的丙酮粉制剂中得到一定纯度的天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂。天花粉凝集素的分子量为60,000,等电点约5.5。天花粉胰蛋白酶抑制剂的分子量约6000,对胰蛋白酶的当量抑制比为1:4.3。由此认为上述两种生物活性物质不同于有引产活性的天花粉蛋白。不少植物种子或块茎中同时存在着外源凝集素和蛋白水解酶抑制剂。本文对这两类物质的共存现象作了讨论。     

天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂的亲和层析分离和一些性质

用酸处理交联琼脂糖6B和水不溶胰蛋白酶,可分别从天花粉的丙酮粉制剂中得到一定纯度的天花粉凝集素和天花粉胰蛋白酶抑制剂。天花粉凝集素的分子量为60,000,等电点约5.5。天花粉胰蛋白酶抑制剂的分子量约6000,对胰蛋白酶的当量抑制比为1:4.3。由此认为上述两种生物活性物质不同于有引产活性的天花粉蛋白。不少植物种子或块茎中同时存在着外源凝集素和蛋白水解酶抑制剂。本文对这两类物质的共存现象作了讨论。     

无花粉蛋白在体内定位的放射自显影研究

天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。在临床应用中已累积了大量经验。关于作用机理的研究也进行了各方面的工作(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。在小白鼠以间接荧光标记抗体法,追踪了给药后不同时间,“纯制天花粉”抗原分布的动态。结果证明,天花粉蛋白的原     

天花粉蛋白在真核细胞核糖体28S RNA上的作用位点

天花粉蛋白(trichosanthin)是一种核糖体失活蛋白。在临床上用于妊娠引产,近来发现它还具有抗艾滋病毒(HIV)的功能。我们在前文中报告,从经过天花粉蛋白处理的大鼠肝核糖体抽得的rRNA,再用苯胺作用,经     

天花粉蛋白引起敏感细胞膜上G蛋白激活的初步研究

天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种单链核糖体失活蛋白,具引产、抗肿瘤、抗HIV等多种生物学功能。天花粉蛋白专一性杀伤敏感细胞的机制一直未被研究清楚。本文首次以生物分子相互作用分析(BIA)证明在天花粉蛋白敏感的细胞膜上存在着能与天花粉蛋白专一结合的组分。我们进一步利用[~(35)S]GTPγS结合实验发现天花粉蛋白能够激活敏感细胞膜上的G蛋白,而对不敏感细胞没有相应的G蛋白激活。这些结果表明了在敏感细胞膜上天花粉蛋白特异受体的存在。     

天花粉蛋白对合体滋养层细胞功能损伤的动态分析

引言天花粉蛋白对胎盘滋养层的作用有一定的细胞专一性(上海实验生物研究所第二研究室,1976;熊用周等,1976;王应天,1978),直接损伤合体滋养层细胞是天花粉蛋白导致中期孕妇引产的一个关键环节(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。已经了解,测定血清中绒毛膜促性腺激素(HCG)和胎盘促乳素(HPL)可     

分泌抗天花粉蛋白单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤细胞系(简报)

天花粉蛋白经我国化学、生物学和医学工作者近年来的共同努力,用于中期引产的成功率已达百分之九十八,用作抗早孕的成功率也已达百分之九十二以上。(沈阳市计划生育科学研究所刘国武等,未发表资料)。为使用高度专一的单克隆抗体,进一步分离纯化天花粉蛋白的有效成分,以开展天花粉蛋白的生物活性与抗原结构关系的研究,最近我们采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了二株稳定     

天花粉蛋白引产和内源前列腺素的关系的初步研究

天花粉蛋白中期引产的实验研究,证明胚盘的形态和功能损伤是引产过程的原初的和关键的变化(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。然而,还必须注意到,只有当这些变化导致发动宫缩等一系列分娩活动时,才能将胎儿和胎盘排出,完成流产。因此,胎     

小鼠抗天花粉蛋白IgE单克隆抗体的制备、分离和鉴定(英文)

天花粉蛋白是中药天花粉的有效引产成份,在应用中它偶尔也引起过敏反应。我们用杂交瘤技术建立了一株分泌抗天花粉蛋白特异性IgE单克隆抗体的杂交瘤细胞系。在实验中,二次免疫的C57 BL/6 J小鼠的肠系膜淋巴结细胞和脾细胞分别被用来同NSI骨髓瘤细胞进行融合。虽然在融合前动物血清IgE抗体效价仅为40～160 PCA滴度,但用肠系膜淋巴结细胞进行的4次融合都产生了IgE杂交瘤。阳性率为1.0-6.7%。对比之下,用脾细胞进行的另外两次融合却没有观察到IgE杂交瘤产生,统计结果说明差异显著(P<0.05)。该IgE单克隆抗体可以在体内和体外诱发大鼠肥大细胞脱颗粒。56℃热处理2小时能使该抗体诱导PCA反应的能力完全丧失,然而却不影响其结合抗原的能力。对该单克隆抗体的特异性的鉴定表明,它可以特异性地识别精制天花粉蛋白和结晶天花粉蛋白上的抗原决定簇。     

天花粉蛋白在孕鼠体内的酶标定位

天花粉蛋白(TCS)是一种高效的引产剂,也能用于治疗宫外孕及其他滋胚层细胞增生性疾病。药物有相当的专一作用,损伤胎盘而其他组织不受严重影响。从孕猴注射药物后胎盘在短期内所出现的显微的和超微的形态变化来看,破坏绒毛的合体滋胚层细胞是作用机制的关键。中     

天花粉中总黄酮提取工艺研究

本研究优化了天花粉中总黄酮的提取工艺,采用Al(NO3)3-Na NO2比色法测定了天花粉中总黄酮的含量。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验,以天花粉中总黄酮提取率为指标,探讨了甲醇体积分数、料液比、提取温度、提取时间对天花粉中总黄酮提取率的影响。结果表明最佳提取工艺参数为:甲醇体积分数50%、料液比1∶15、提取温度70℃、提取时间90 min。在最佳工艺条件下测得天花粉中总黄酮平均含量为0.1184 mg/g。该方法操作简单,稳定性和重复性好,本实验首次测定了天花粉中总黄酮含量,为天花粉药材质量控制提供了依据。     

天花粉蛋白及其与抗体的复合物对蛋白质合成的抑制作用(简报)(英文)

天花粉蛋白在无细胞系统中显示强烈的抑制蛋白质生物合成的能力,其活性与经巯基试剂还原开裂的蓖麻毒蛋白相当。天花粉蛋白对BEL-7402人肝癌细胞的毒性甚低,但当它通过二硫键与抗肝癌单抗Hepama-1偶联后,其毒性增强五十倍。张学军和王家槐不久前发现天花粉蛋白与蓖麻毒蛋白A链的一级结构有很大的相似性~[5]。我们的实验结果与他们的发现互相印证。天花粉蛋白与抗体偶联后,可能通过抗体与细胞表面抗原的结合而内化,从而增强了它的细胞毒性。考虑到天花粉蛋白与其他植物单链致核糖体失活蛋白(RIPs)有不少特性十分相似,我们推断天花粉蛋白是RIP家族中的一员。天花粉蛋白与抗体偶联过程中,双功能试剂SPDP的修饰使天花粉蛋白的活性降低一个数量级,似乎意味着天花粉蛋白上的某些氨基可能对其活性至关紧要。发展新的偶联方法的工作正在进行。如能在双功能试剂修饰后保留其大部分活性,天花粉蛋白作为免疫毒素的“弹头”药物可能颇具潜力。