自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧

组织芯片（tissue chip TC）技术是将数十个乃至上千个的组织样本,整齐有序地排列在同一张载玻片上,而形成的微缩组织切片;又称组织微阵列（tissue microarray TMA）技术。组织芯片的制作方式主要有石蜡切片法和冷冻切片法,目前以石蜡切片法为常用。现在还有商品化的组织芯片制作仪,如美国（Tissue Arrayer,Beecher Instrument,USA）生产的,但这套产品价格昂贵。所以,手工制作技术更经济、实用,其方法的改进层出不穷。我们采用一次性穿刺针手工制做穿刺工具,用普通石蜡包埋样本,制做组织芯片,收到了满意的效果,现将制做主要程序和技巧介绍如下。     

几种基因芯片技术的比较

基因芯片技术因其自身的优越性将成为基因组序列分析和基因表达研究的主要工具。但是由于不同的实验室使用不同的技术平台 ,从 2 5到 80个碱基的寡核苷酸芯片和长度从数百到几千个碱基的cDNA阵列。不同技术平台的存在 ,为芯片资料的利用和芯片领域的标准化分析带来了困难。通过对不同技术平台的研究比较 ,短的和长的寡核苷酸芯片技术具有明显的优势 ,可望成为将来主要的技术方法。     

生物芯片在微生物学研究中的应用

生物芯片是用于检测生物样品中生物分子及生化指标的微小装置,根据其检测靶标不同分为基因芯片、蛋白芯片、细胞芯片、组织芯片及生化芯片;根据其结构和工作原理不同分为阵列型芯片、液体芯片和微流体芯片。由于具有微量化、并行性、快速、高通量和自动化检测的特点,生物芯片被广泛地应用于生物学研究领域。本文重点论述生物芯片在微生物学研究中的应用。     

生物芯片技术的原理与应用

生物芯片是指将大量生物讯息密码（寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、蛋白质等）以预先设计的方式固定在玻片、硅片等固相载体上组成的密集分子阵列,可分为核酸芯片、蛋白芯片、芯片实验室三类,生物芯片技术的本质是生物信号的平行分析,它利用核酸分子杂交,蛋白分子亲和原理,通过荧光标记技术检测杂交或亲和否,可迅速获得所需信息。高效、快速的生物芯片技术以其无与伦比的优势,在已医学、分子生物学等领域显现出巨大的应用价值,具有非常广阔的发展前景。     

项目推介

重组人复合干扰素α（优福金）;透皮给药微针阵列药物芯片系统项目;抗乙肝病毒人单克隆抗体靶向制剂项目;分枝杆菌多糖注射液     

DNA芯片技术及其应用

ＤＮＡ芯片技术及其应用安海谦卢圣栋（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室）ＤＮＡ芯片（ＤＮＡＣｈｉｐ）又被称为生物集成模片,ＤＮＡ阵列或寡核苷酸微芯片（Ｂｉｏ－Ｃｈｉｐ,ＤＮＡａｒｒａｙｓ,ａｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｍｉｃｒｏｃｈｉｐ）等。这项技术是由位于美国旧金山以南的ＳａｎｔａＣｌａｒａ的一个新兴生物技术公司Ａｆｙｍｅｔｒｉｘ首先发展起来的。它是受到在固相支持物上...     

阵列光镊与微流控芯片技术的结合与应用

在生物医学研究领域中,阵列光镊与微流控芯片的结合已经成为进行细胞操纵、转移以及少量细胞样品分选等方面最有希望的方法之一。光镊技术对样品具有非接触弹性控制、无机械损伤、可无菌操作等优势,以及微流控芯片分析的高效、多功能、微型化、低成本等优势,成为芯片实验室(Lab-on-a-Chip)的重要研究方面。该文概述了阵列光镊技术的形成与研究现状以及微流控芯片技术的发展与应用现状,分析了在不同阵列光镊形成方法下结合微流控芯片可实现的功能与应用,并对其发展趋势进行了展望。     

PIK3CA基因突变的MassARRAY分子量阵列分析

目的：利用MassARRAY分子量阵列分析系统检测胃癌组织PIK3CA基因突变。方法：从胃癌石蜡包埋组织中提取基因组,PCR反应扩增目的基因片段,MassARRAY分子量阵列分析系统检测PIK3CA基因突变;焦磷酸测序验证检测结果。结果：中国西部地区144例胃癌组织样本中PIK3CA_E542K（1624G〉A）突变携带率为77．6％,PIK3C_LIE545K（1633G〉A）突变携带率为84％。MassARRAY分子量阵列分析系统检测结果与焦磷酸测序结果达到100％吻合。结论：建立了MassARRAY分子量阵列分析系统检测基因突变的方法,初步建立了中国西北地区汉族人群胃癌组织PIK3CA基因PIK3CA_E542K（1624G〉A）PIK3CA_E545K（1633G〉A）位点突变频数。     

应用组织芯片技术检测果糖二磷酸醛缩酶在肝癌与胰腺癌组织中的表达

目的探究果糖二磷酸醛缩酶ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法采用组织芯片和免疫组织化学方法检测ALDOA在肝癌、胰腺癌及其相应的正常组织中的表达.结果ALDOA在肝癌组织中的阳性表达率为80%（24/30）,在正常肝组织中的阳性表达率为33.3%（2/6）,二者之间表达差异具有统计学意义（P〈0.05）.ALDOA在胰腺癌组织中的阳性表达率为66.7%（20/30）,在正常胰腺组织中的阳性表达率为0%（0/6）,二者之间表达差异具有统计学意义（P〈0.01）.ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度无关（P〉0.05）;胰腺癌组织中的ALDOA高表达与淋巴结转移无关（P〉0.05）.结论ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中表达上调.     

蛋白质微阵列检测抗原-抗体相互作用

为了制备蛋白质微阵列和研究芯片表面抗原-抗体的相互作用,研究了如何在玻片表面固化蛋白质和用荧光染料（Cy3,Cy5）对蛋白质进行标记.结果表明,在醛基修饰的玻璃表面,通过共价偶联的方法将抗原或抗体固定到芯片表面,能使二者保持其特异性结合能力.同时,荧光标记后的抗原或抗体仍然具有特异性结合能力.蛋白质微阵列是通过机械手在玻片表面排阵制作的.芯片上的荧光信号获取采用了激光共焦荧光扫描系统.用不同浓度的抗原探针阵列,对其相应的抗体靶分子的特异性结合进行了分析和研究.此外,还通过在玻片表面固定兔IgG和固定鼠IgG,对羊抗兔和羊抗鼠抗体与其相应抗原的特异性相互作用进行了检测.     

盛科加入ONF助力SDN商用交换芯片的发展

盛科网络（苏州）有限公司日前宣布加入Open Networking Foundation（开放网络基金会,简称“ONF”）。ONF是非盈利的组织机构,致力于创新和发展新型网络架构,即软件定义网络（SDN）。盛科将致力于从商用交换芯片的角度来推动SDN的发展并且作为先行者来推动SDN在中国的普及。     

基于 DArT 标记的三疣梭子蟹地理种群遗传多样性分析

三疣梭子蟹是中国重要的水产养殖动物。目前,其养殖业的蟹苗主要还是依靠野生资源,但种质（生长速度、肌肉品质和抗病性）退化现象严重,因此迫切需要了解个体、种群和物种遗传多样性。报道了一种检测三疣梭子蟹多样性芯片技术（diversityarraystechnology,DART）。DArT技术采用芯片可同时检测数百个基因座,即使没有基因组DNA序列信息也可以分析遗传多态性。采用了风tL／TaqI复杂性降低方法,多态性效率为12．5％。利用多样性芯片杂交获得313个DArT标记。这些DArT标记用于点制多态性富集芯片,DArT标记具有较高的多态性信息含量（polymorphisminformationcontent,PIC）。最后根据0／1矩阵获得UPGMA系统进化树,结果表明样品间的遗传多样性与文献报道一致。芯片质量检测中包括赋值重复性为99．1％,同一样品不同个体间的差异不显著,其差异介于0．7％～1．6％。研究表明,DArT技术具有高通量和低成本的显著特点,该技术可为三疣梭子蟹资源保护和良种选育提供支持。     

用于药物筛选的微流控细胞阵列芯片

细胞区域分布培养以及如何有效地对微流体进行操控是微流控阵列芯片在细胞药物研究中的关键技术。本研究介绍了一种利用SU-8负性光刻胶模具和PDMS制作双层结构的微流控细胞阵列芯片的方法,该芯片通过C型的坝结构将进样细胞拦截在芯片的细胞培养的固定区域,键合双层PDMS构成阀控制层,阀网络的开关作用成功实现了芯片通道内微流体的操控,同时芯片设计了药物浓度梯度网络,产生6个不同浓度的药物刺激细胞。通过对芯片3种共培养细胞活性的检测和药物伊立替康(CTP-11)对肝癌细胞的浓度梯度刺激等实验结果验证该芯片在细胞研究和药物筛选等方面的可行性。     

高效液相色谱二极管阵列检测器用于从乳猪心房组织纯化心纳素的质量检测

二级管阵列检测器（DAD）不仅能对高效液相（HPLC）分离组份进行定性定量检测,而且通过解析和比较对分离色谱峰进行紫外扫描得到的光谱图,判断该色谱峰的纯度及取得该组份的一些结构信息。我们尝试将该手段用于从乳猪心房组织纯化心钠素（ANP）的质量控制。ANP是一种由心房肌细胞分泌的28肽循环激素,具有强大的排纳、利尿、舒血管和降血压作用,已尝试用于多种疾病的治疗,证明是一种安全、有效、可靠的抗心血管疾病药物。目前已能人工合成或基因工程表达ANP,但由于产率和活性均低,不能满足实际需要,自动物心房组织纯化ANP是…     

表达芯片筛选类风湿关节炎特异表达基因

为了寻找类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA)新的特异性表达标记物,应用基因芯片对RA、骨关节炎（osteoarthritis,OA）和强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）患者关节滑膜组织的基因表达谱进行比较,并采用实时定量PCR方法对芯片结果进行验证. 全基因组表达芯片的结果显示,与OA滑膜组织及AS滑膜组织相比,在RA患者的滑膜组织中,CD38,ANKRD38,E2F2,CFDP1, CD7, ISG20 和IL2RG基因表达异常|实时定量PCR结果证实,RA患者滑膜组织中,CD38、E2F2和IL2RG基因表达明显增高.     

SPARC在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的：探讨富含半胱氨酸的酸性分泌型蛋白（secreted protien,acidic and rich in cysteine,SPARC）在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用组织芯片技术研究SPARC在正常子宫内膜、增生的子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达情况。结果：SPARC在正常子宫内膜、增生的子宫内膜和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为96.55%、76.79%、59.50%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。在子宫内膜癌中,SPARC的表达强度与手术-病理分期、组织学分级、肌层浸润深度和淋巴结转移相关,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：SPARC表达的缺失与子宫内膜癌的发生、发展密切相关,检测SPARC可为子宫内膜癌的早期诊断、进一步治疗及预后判断提供一定的理论依据。     

石蜡包埋组织芯片制作的探讨

组织芯片(tissue chip)技术是将数十个到上百个的组织样本整齐有序地排列在同一张载玻片上而形成的微缩组织切片,又称组织微阵列(tissue microarray)技术.     

复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用

复合式悬液芯片系统（multiplex suspension array system,MSAS）由悬浮芯片和微流体芯片组成,具有高通量精确定量的特点,而且具有较高的准确性和重复性,在多种蛋白质分子的同时精确定量和大规模样品检测方面有着很大的应用优势,其应用领域覆盖感染性疾病的快速诊断、细胞因子、信号通路、肿瘤标志物、流行病学病原体的筛查、蛋白质的相互作用、单核苷酸多态性（SNP）的研究等。就MSAS在病原学检测中的应用作一简要综述。     

微电极阵列芯片技术研究48h房颤犬左、右心耳电生理特性

目的应用微电极阵列芯片（microelectrode arrays chip,MEA）技术评价48 h房颤（atrial fibrillation,AF）犬左、右心耳（LAA、RAA）的电生理特性。方法随意来源犬12只,以600次/分起搏右心房建立AF模型,分为48 h AF组（n=6）和对照组（n=6）。造模成功后迅速开胸剪取LAA、RAA,置于盛有台式液的MEA中,分别记录AF组及对照组LAA、RAA场电位（field action potential,FAP）形态、振幅、放电频率及激动传导情况。结果 AF组LAA、RAA组织FAP节律绝对不齐,LAA（185.22±25.62）次/分,较对照组（156.44±8.88）次/分增加15.67%（P〈0.01）,RAA（102.39±16）次/分,较对照组（156.44±8.88）次/分减慢34.62%（P〈0.01）。48 h AF组LAA组织电压（458.33±26.73）μV较对照组（740.55±18.93）μV降低38.11%（P〈0.01）,RAA（504.83±39.93）μV较对照组（840.56±18.93）μV明显降低（P〈0.01）,48 h房颤组LAA组织FAP时程（45.28±8.59）ms较对照组（70.77±6.98）ms缩短15 ms（P〈0.01）。RAA（61.78±7.1）ms较对照组（75.83±7.63）ms缩短14 ms（P〈0.01）。48 h AF组LAA、RAA FAP传导异质性增加。结论应用MEA技术可反映心肌组织片场电位电生理特性,48 h AF后LAA放电频率增加,频率绝对不齐,LAA、RAA电压降低,场电位时程延长。     

主要发达国家生物技术关键领域SCI计量对比研究

生物技术是我国战略性高新技术发展领域,也是全球各国在生物经济时代能否获胜的关键技术。本文通过科学引文索引数据库（SCI）中论文收录文献的文献计量学研究,对单克隆抗体、疫苗、重组蛋白、基因治疗、干细胞研究、组织工程、基因组学、蛋白质组学、芯片技术九类关键技术领域的全球研究分布格局进行了探讨,并结合生物医药产业链进行定标比超研究,以期发现我国在全球生物技术领域所处的位置和产业差距。研究发现美国在以上关键技术领域均处于全球绝对领先地位,而我国在某些技术领域如芯片、组织工程、组学等领域已具有一定比较优势和国际竞争能力,但在较长时期内研发和产品仍将处于跟随地位。