多孔醋酸纤维素球形载体固定化糖化酶的研究

报道了一种多孔醋酸纤维素球形固定化酶载体的制备技术,以NaIO₄氧化法活化,固定糖化酶,测定了固定化糖化酶的催化反应特性,并与游离酶作了比较.固定化酶在55℃下水解10批淀粉溶液,总反应时间超过24 h,活力无显著变化.     

产糖化酶黑曲霉的固定化研究

采用多孔聚酯材料作为固定化载体,考察并比较了载体吸附固定化黑曲霉菌丝细胞的条件,当菌丝体细胞与载体预培养的条件为pH值5.0、孢子浓度为105个/ml、固液比为1/75时,有利于菌丝体的生长、吸附固定及发酵产酶.在产糖化酶的发酵过程中,与游离菌丝体细胞相比,发酵过程持续产酶时间有一定程度的延长,产糖化酶活力始终高于游离菌丝体.     

产糖化酶黑曲霉固定化方法比较的研究

采用海藻酸钙凝胶电埋法、以沸石、多孔聚酯等材料为固定化载体的吸附法固定黑曲霉（Aspergillus niger AS3.4309)菌丝细胞,以游离菌丝体作为对照,进行发酵产糖化酶的比较,结果表明：以聚酯泡沫作为固定化载体吸附固定化菌丝细胞产糖化酶活力最高。在产糖化酶的发酵过程中,与游离菌丝体细胞相比,固定化黑曲霉持续产酶时间有一定程度的延长。     

α淀粉酶与糖化酶的共固定化研究

经纤维素为载体用重氮化法同时固定了糖化酶和α淀粉酶,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,发现共固定化酶较固定化单酶能更好地发挥协同效应,能在较低温度下将淀粉一步水解为葡萄糖,共固定化酶在３０℃下的操作半寿期可达９２０小时。     

糖化酶在丝素膜上的固定化及性质研究

利用丝素作糖化酶的固定化载体,应用包埋法和共价交联法两种方法,制备了固定化糖化酶丝素膜,研究结果表明,共价交联法制备的酶膜活力较高,且回收率可达50%以上;与溶液酶相比,固定化酶的最适温度提高了10℃,热稳定性与贮存稳定性也有了很大提高。     

聚乙烯醇复合凝胶固定化糖化酶研究*

以聚乙烯醇复合凝胶作为载体固定化糖化酶,最终酶活达到1.558u/g干胶．酶活回收率是30．2％。该固定化酶在pH4.6,45℃下,以10%的可溶性淀粉为底物进行分批试验,操作半衰期为350h,具备高底物浓度下操作及贮存稳定性。     

具有磁响应性的聚乙二醇载体固定化糖化酶的研究

以两亲性的聚乙二醇胶体粒子,通过吸附－交联法固定化糖化酶。研究了戊二醛浓度,缓冲液ｐＨ值及加酶量对酶固定化的影响,固定化酶活力可达１７０９５Ｕｐｅｒｇｒａｍ干胶,活力回收为６３％。磁性固定化酶最适温度比天然酶提高５℃,最适ｐＨ比天然酶提高０５个ｐＨ单位。并且对酸、碱、热的稳定性大大增强,贮存及操作稳定性也大大提高。该磁性载体合成简单,固定化方法简便,具有磁性,易于分离,因而为工业上的应用提供了一种新的可能。     

α淀粉酶与糖化酶的共固定化研究

以纤维素为载体用重氮化法同时固定了糖化酶和α淀粉酶,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,发现共固定化酶较固定化单酶能更好地发挥协同效应,能在较低温度下将淀粉一步水解为葡萄糖。共固定化酶在３０℃下的操作半寿期可达９２０小时。     

聚苯乙烯树脂固定化D-海因酶的初步研究

D-海因酶广泛用于D-氨基酸的制备研究和生产中,目前已有许多固定化D-海因酶及含D-海因酶细胞的研究报道。尝试了不同功能基团的聚苯乙烯树脂进行D-海因酶的固定化,结果表明功能基为伯氨基和仲氨基效果较好,并选取聚苯乙烯树脂D92进行了固定化D-海因酶的研究。采用该树脂制备固定化酶的最优条件是：酶质量浓度6mg／mL、温度25℃、固化时间12h。所得固定化酶的最适作用温度45℃,最适作用pH为8.5,且作用温度及适宜pH较广,Km为游离酶的1,8倍,且储存稳定性、操作稳定性较好。45℃下半衰期为11d。     

Immobilization of glucoamylase on DEAE-cellulose activated with chloride compounds

Partially purified glucoamylase (1,4-α-d-glucan glucohydrolase, EC 3.2.1.3) from Aspergillus niger NRRL 330 has been immobilized on DEAE-cellulose activated with cyanuric chloride in 0.2 m acetate buffer, pH 4.2. In the matrix-bound glucoamylase, enzyme yield was 20 mg g^?1 of support, corresponding to 40 200 units g^?1 of DEAE support. Binding of the enzyme narrows the pH optimum from 3.8–5.2 to 3.6. Thermal stability of the bound glucoamylase enzyme was decreased although it showed a higher temperature optimum (70°C) than the free form (55°C). The rate of reaction of glucoamylase was also changed after immobilization. V_max values for free and bound enzyme were 36.6 and 22.6 μmol d-glucose ml^?1 min^?1 and corresponding K_m values were 3.73 and 4.8 g l^?1 respectively. Free and immobilized enzyme when used in the saccharification process gave 84 and 56% conversion of starch to d-glucose, respectively. The bound enzyme was quite stable and in the batch process it was able to operate for about five cycles without any loss of activity.     

葡萄糖淀粉酶在高压静电纺PEI/PVA纳米纤维膜上的离子吸附固定

旨在应用离子结合法将葡萄糖淀粉酶固定在PEI/PVA纳米纤维膜上并对其理化性质进行研究。采用高压静电纺丝技术制备聚乙烯亚胺(PEI)/聚乙烯醇(PVA)纳米纤维膜,采用热交联方法使其具备水稳定性后,再利用离子吸附法固定葡萄糖淀粉酶。结果显示,利用红外光谱(FT-IR)表征固定有葡萄糖淀粉酶的PEI/PVA纳米纤维膜,表明葡萄糖淀粉酶可成功固定在静电纺丝形成的PEI/PVA纳米纤维膜表面。通过固定化葡萄糖淀粉酶的酶学性质鉴定,发现固定化葡萄糖淀粉酶的最适反应温度为65℃,比游离的葡萄糖淀粉酶提高了6℃;固定化葡萄糖淀粉酶的适用p H值范围明显变宽;热稳定性和存贮稳定性显著增强且可以重复使用。利用离子吸附法能简便地将蛋白质分子固定于纳米纤维膜上,具有一定的应用前景。     

磁性聚乙二醇载体固定化葡萄糖淀粉酶的研究

以磁性聚乙二醇为载体,通过吸附-交联法固定化糖化酶.研究了戊二醛浓度、pH值及加酶量对酶固定化的影响.并对固定化酶的最适温度、最适pH、米氏常数、热稳定性及操作稳定性等进行了探讨.     

壳聚糖球固定化酵母细胞的研究

以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在酵母细胞悬浮液中,制备了固定化酵母细胞壳聚糖球。以苯乙酮酸为底物,催化合成了D-扁桃酸。最优固定化条件是戊二醛的质量分数w(GA)=1%,酵母细胞与交联壳聚糖球的质量比m(Y):m(CB)0=0.5,交联时间为6h,固定化时间为18h,底物浓度为10mmol/L,在此条件下反应最大转化率和产物光学纯度分别高达67.86%和98.05?。固定化酵母壳聚糖球具有良好的重复使用性和贮存稳定性。     

葡糖淀粉酶基因的分子生物学研究

从酶活、底物、产物、应用及空间结构等方面论述了葡糖淀粉酶的一般生物学特性及应用,分析了其不同来源的基因同源度。着重从分子生物学角度阐述了葡糖淀粉酶基因在多种表达系统中的分泌表达情况,并对其基因在曲霉及酵母中的高效表达及分泌引导功能进行了初步阐述和探讨。     

固定化对微生物生理变化的影响

固定化微生物技术近年来得到了广泛的应用研究,然而,人们关于固定化对微生物生理特性影响方面的知识还很缺乏,文献报道不多且比较零散,严重滞后于固定化微生物的应用研究。综述了固定化对微生物生理特性方面的影响,包括固定化对微生物生长速率、对微生物活性、对有毒物质的耐受性以及对细胞中DNARNA总量变化等方面的影响。     

接枝淀粉载体固定化糖化酶的研究

合成了淀粉接枝丙烯腈及丙烯酰胺的两亲性高分子化合物,并以此为载体,用物理吸附方法固定化了糖化酶。最适偶联条件研究表明：缓冲液的浓度,ｐＨ值及吸附时间和加酶量都对固定化酶活力,比活有一定的影响。在最适固定化条件下,固定化酶的活力为１５００Ｕ／ｇ干胶,蛋白载量为２５ｍｇ／ｇ干胶,比活为６０Ｕ／ｍｇ蛋白,比天然酶的比活（８．０Ｕ／ｍｇ蛋白）提高６倍。最适反应温度比天然酶提高１０℃（天然酶最适反应温度为５０℃）．无底物存在下,固定化酶在５５℃的半衰期为２４ｈ,而天然酶只有１ｈ;有底物存在下,固定化酶在５５℃的半衰期为２２０ｈ,４５℃的操作半衰期由外推法算得为６９天,而且该载体对糖化酶有一定的保护作用,当固定化酶在低于５５℃热处理一段时间后,对酶活力有激活作用,酶活力最大可提高４０％。该载体合成简单,固定化方法简单,步骤少,因而为工业上应用提供了一种新的可能性。     

Immobilization by Adsorption of Hydrophobic Lipase Derivatives to Porous Polymer Beads for Use in Ester Synthesis

A novel procedure for attaching lipase to certain kinds of hydrophobic surfaces is described. The procedure involves covalent derivatization of the protein molecule by reaction in solution with a hydrophobic imidoester, aldehyde or activated polyethylene glycol. The resulting protein derivative is then allowed to adsorb onto an insoluble hydrophobic surface. Quantitative adsorption is observed and the enzyme is bound very strongly on the support The number and nature of the hydrophobic substituents introduced in the chemical derivatization step can be easily controlled. The adsorption step occurs spontaneously upon exposure of the modified protein to a variety of hydrophobic materials. The hydrophobic lipase derivative obtained by reaction with PEG activated with p-nirrophenyl chloroformate, for example, adsorbs readily onto polyacrylate and polystyrene beads, with most of its esterification activity in organic solvent intact. Its thermostability is also greatly enhanced. Derivatization of lipase with hydrophobic groups greatly enhances its esterification activity in organic solvent, and its immobilization in this manner enables the preparation of a highly reactive biocatalyst for biotechnological application.     

葡聚糖磁性毫微粒固定化L－天冬酰胺酶的研究

葡聚糖磁性毫微粒固定化Ｌ－天冬酰胺酶的研究徐慧显,李民勤,潘再群,马建标,何炳林（南开大学高分子化学研究所,天津３０００７１）大肠杆菌天冬酰胺酶对急性淋巴白血病有明显疗效［１］,注射入体内以后,可迅速清除血清中的天冬酰胺──敏感性肿瘤细胞的必需营养成...