AMI 患者血浆NT-proBNP 水平与心肌缺血及预后关系的研究

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者血浆N末端B型尿钠肽前体(NT-proBNP)的水平与心肌缺血及预后的关系。方法:98例急性心肌梗死患者根据患者是否行直接PCI手术治疗,分为PCI手术治疗组和非PCI治疗组,观察缺血改善情况与NT-proBNP水平的关系,同时根据治疗后NT-proBNP的水平分为三组,A组NT-proBNP<125pg/ml、B组125pg/ml≤NT-proBNP<450pg/ml、C组NT-proBNP≥450pg/ml,观察NT-proBNP的水平与预后的关系。结果:行PCI组NT-proBNP的水平下降程度(438.3±134.5)明显高于未行PCI组者(158.6±146.1,P<0.05),MACE的发生情况C组明显高于A组(P=0.006<0.01),也高于B组(P=0.028<0.05),A组与B组相比,B组的MACE发生率有上升的趋势,但是无统计学意义(P=0.432>0.05)。结论:急性心肌梗死患者早期血浆NT-proBNP的水平在一定程度上可以反应心肌的缺血程度,且与患者的预后成明显的负相关。     

人脐带间充质干细胞对小鼠实验性溃疡性结肠炎的疗效

目的探讨人脐带间充质干细胞移植术对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的疗效,以及对血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平的影响。方法选用雄性小鼠48只,完全随机分为正常对照组、模型对照组、脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗组,每组16只。模型对照组与hUC-MSCs治疗组通过口服5﹪葡聚糖硫酸钠诱导UC模型。对hUC-MSCs治疗组小鼠经尾静脉注射脐带间充质干细胞。观察各组疾病活动指数评分;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测量各组小鼠血清中TNF-α、IL-8的表达水平,各组数据两组比较采用t检验,多组比较使用重复测量资料的方差分析对结果进行统计分析。结果模型对照组与hUC-MSCs治疗组DAI评分从第2天开始上升,直至实验结束分别为8.72±0.71、4.01±0.35均高于正常对照组0.21±0.20,且差异有统计学意义(F=1 300.66,P0.01);模型对照组与hUCMSCs治疗组比较,在造模期间及治疗的第4天DAI评分分别为7.95±0.71、8.01±0.73,差异无统计学意义(t=-0.24,P=0.08),在治疗的第5天hUC-MSCs治疗组DAI评分开始下降为7.23±0.82,且与模型对照组8.01±0.81相比,差异有统计学意义(t=-2.71,P=0.01)。造模第7天,模型对照组与hU C-MSCs治疗组两组TNF-α分别为(363.32±15.84)pg/ml、(375.52±16.21)pg/ml,均高于空白对照组(112.14±11.23)pg/ml(F=624.12,P0.01);模型对照组与hUC-MSCs治疗组两组IL-8分别为(65.32±10.12)pg/ml、(57.21±8.71)pg/ml均高于空白对照组(25.02±7.81)pg/ml(F=34.29,P0.01),但两组比较差异无统计学意义(P0.05);第2次干细胞注射7 d后即实验结束时,模型对照组与hUC-MSCs治疗组TNF-α分别为(453.23±15.63)pg/ml、(276.84±17.91)pg/ml,仍高于空白对照组(134.32±12.31)pg/ml(F=642.41,P0.01);模型对照组与hUC-MSCs治疗组两组IL-8分别为(75.23±6.72)pg/ml、(39.12±4.42)pg/ml仍高于空白对照组(27.12±5.91)pg/ml(F=113.90,P0.01),但hUC-MSCs治疗组水平较造模结束时有所下降,低于模型对照组(P0.05)。结论间充质干细胞移植术对UC小鼠有良好的治疗作用,且能降低血清中TNF-α、IL-8的水平。     

脑脊液中CD4~+ CD25~+ Treg、sICAM-1及BAFF与动脉瘤蛛网膜下腔出血的相关性研究

目的探讨脑脊液中CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)及B细胞活化因子(BAFF)与动脉瘤蛛网膜下腔出血(SAH)的相关性。方法随机选择内蒙古医科大学附属医院神经外科2015年3月至2016年12月120例SAH患者作为观察组,选择同期健康体检人群40例作为对照组,均行脑脊液CD4~+CD25~+Treg、sICAM-1及BAFF水平检测,组间比较采用t检验,并采用Pearson参数法分析其与疾病严重程度(Hunt-Hess分级法)的相关性。结果观察组CD4~+CD25~+Treg水平(2.52±0.73)%低于对照组(4.52±1.08)%,差异有统计学意义(t=-12.563,P0.01);sICAM-1(853.25±155.36)pg/ml及BAFF(586.23±163.73)pg/ml水平高于对照组sICAM-1(315.65±132.58)pg/ml,(t=-19.569,P0.01)及BAFF(272.66±142.58)pg/ml,(t=-11.426,P0.01);随着Hunt-Hess分级的增加,SAH患者CD4~+CD25~+Treg水平呈逐渐降低趋势(3.12±0.82)%、(2.42±1.05)%、(1.28±0.61)%,sICAM-1(627.21±152.56)pg/ml、(794.78±106.36)pg/ml、(896.56±110.52)pg/ml及BAFF(395.32±162.53)pg/ml、(589.62±170.43)pg/ml、(789.61±173.52)pg/ml水平呈逐渐上升趋势,3组比较差异有统计学意义(F=7.214,12.372,11.581,P均0.01);CD4~+CD25~+Treg与SAH病情程度呈负相关(r=-0.824,P0.01)、sICAM-1、BAFF水平与病情程度成正相关(r=0.922,0.472,P均0.01)。结论 CD4~+CD25~+Treg是颅内动脉瘤患者的一种保护因素,其水平的含量降低,动脉瘤破裂后SAH的风险程度增加,sICAM-1、BAFF参与SAH的发生,其水平增高可加重动脉瘤SAH的炎症反应。     

不同频率声波加载对SD大鼠行为学和海马5-羟色胺、多巴胺及D_2受体表达的影响

该文旨在探讨不同频率声波加载对SD大鼠抑郁症行为学、海马体分泌5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、多巴胺(dopamine, DA)和对多巴胺D2受体表达的影响。在音乐解析的基础上,对音乐的节奏要素进行了研究,运用作曲、编曲软件Finale2011创作系列模拟声波。以大鼠常有的正常、麻醉、应激三种状态下的心率频率作为标准,分别模拟出频率为350 beats/min、300 beats/min、400 beats/min三种单音声波的音频文件加载于SD大鼠后,用试剂盒检测海马体左右两侧的5-HT和DA的浓度。免疫荧光强度分析D2受体的表达情况。结果显示,与对照组相比, 300 beats/min组的大鼠行为学变化更为积极,体重、糖水偏好率均明显增加,同时5-HT和DA浓度增加,分别增多0.098 8 ng/mL(P0.01)、808.5 ng/mL(P0.01); 350 beats/min组和400 beats/min组行为学变化偏向抑郁,体重和糖水偏好率明显下降, 350 beats/min组5-HT和DA分别下降0.005 3 ng/mL(P0.01)、308.5 ng/mL(P0.01); 400 beats/min组分别下降0.031 5 ng/mL(P0.01)、1 067.5 ng/mL(P0.01);此外,频率为300 beats/min的声波加载使D2受体表达明显加强(P0.01),其他两组频率声波加载表达减弱。该研究结果得出,不同频率的声波加载对SD大鼠行为学变化、体重、糖水偏好率和5-HT、DA的分泌有不同的影响,对大鼠加载频率接近于大鼠麻醉状态心率时的声波,更有利于海马体行为学的变化和体重、糖水偏好的增加以及5-HT和DA的分泌和D2受体的表达。     

应用iTRAQ结合质谱技术筛选冷应激大鼠血浆差异表达蛋白

目的:应用同重同位素相对与绝对定量(iTRAQ)结合质谱技术筛选冷应激大鼠血浆差异表达蛋白。方法:将30只健康SPF级雄性Wistar大鼠随机分为冷应激组A和常温饲养组B,将A、B两组分别随机分为3组,即A1、A2、A3组和B1、B2、B3组(n=5)。常温饲养温度为(24.0±0.1)℃,冷应激温度为(4.0±0.1)℃。两组实验大鼠经不同温度处理12 h后,用肝素钠抗凝负压管腹主动脉采血,分离血浆,提取血浆蛋白、定量、酶解、iTRAQ标记、强阳离子交换色谱(SCX分离)和质谱分析。结果:共鉴定出1 085个蛋白,筛出39个差异表达蛋白,其中29个表达上调蛋白,10个表达下调蛋白。经生物信息学分析,筛出3个与动物冷应激相关的重要差异表达蛋白,分别为:组织相容性蛋白HA-1、Ras相关蛋白Rap1b、整合蛋白β-1。结论:本实验成功筛出冷应激大鼠血浆差异表达蛋白,iTRAQ技术为筛选大鼠冷应激蛋白诊断标志物提供了一个良好的平台,为深入研究动物冷应激发生机制奠定了良好基础。     

起搏器术后新发房性心律失常的影响因素分析

目的:探讨起搏器术后新发房性心律失常的发生情况及其相关影响因素。方法:选择2006年1月至2007年12月于沈阳军区总医院首次植入永久起搏器的107例患者,男性50例,平均年龄65.0±11.9岁,术前通过追问病史及相关检查均排除房性心律失常(房颤、房扑、房速),术后平均随访3.9年,观察新发房性心律失常情况。按术后是否出现房性心律失常,将患者分为新发房性心律失常组和无房性心律失常组,比较两组患者术前和术后心脏超声结果的变化、心室起搏比例、起搏部位及起搏模式,并通过logistic回归分析起搏器术后发生房性心律失常的影响因素。结果:新发房性心律失常组26例(24.3%),其中房颤17例(15.9%),房扑2例(1.9%),房速7例(6.5%);无房性心律失常组81例。与无房性心律失常组比较,新发房性心律失常组左房内径明显增加(P=0.040)、二尖瓣返流程度较重(P=0.032)及左室射血分数明显下降(P=0.001),心室起搏百分比(VP%)显著升高(P=0.017)。心尖部起搏患者房性心律失常的发生率明显高于间隔部起搏(33.3%vs 16.9%,P<0.05),双腔起搏组患者房性心律失常发生率明显低于单腔起搏器组(18.7%vs 37.5%,P<0.05)。Logistic回归分析显示术后新发房性心律失常的发生与高比例的心室起搏(P=0.006)、VVI(R)起搏模式(P=0.014)及右心室起搏电极导线植于心尖部(P=0.024)显著相关。结论:起搏模式、心室起搏百分比、起搏部位是起搏器术后发生房性心律失常的影响因素。     

妊娠高血压外周血中促Th2 的细胞因子水平及IL-2/IL-10 平衡 的临床意义

目的:检测妊娠高血压患者外周血中促Th2的分子IL-4、IL-2与IL-10的水平,探讨IL-2/IL-10在妊高症中的临床意义。方法:选择40例未妊娠妇女为对照组,30例正常妊娠妇女为妊娠组,28例妊娠高血压患者为妊娠高血压组,ELISA检测血清中IL-4、IL-2和IL-10的水平。结果:与对照组外周血中IL-4水平(0.53±0.04)pg/ml相比:正常妊娠组IL-4水平升高至(0.91±0.03)pg/ml(P<0.05),妊娠高血压组IL-4水平(0.67±0.35)pg/ml升高但明显低于正常妊娠组(P<0.01)。与对照组外周血中IL-2水平(0.41±0.05)pg/ml相比:正常妊娠组IL-2水平升高至(0.82±0.11)pg/ml(P<0.01);妊娠高血压组IL-2水平高达1.57±0.22(pg/ml)明显高于其它两组(P<0.01)。妊娠高血压组外周血中IL-10水平明显低于正常妊娠组IL-10水平(P<0.01);妊娠高血压组外周血中IL-2/IL-10比值明显高于于对照组及正常妊娠组的比值。结论:妊娠高血压患者外周血中细胞因子IL-2和IL-10分泌异常且诱导Th2细胞产生的IL-4降低,打破Th1/Th2平衡,致使Th1型免疫反应增强,使早孕期滋养细胞受到免疫损伤以致侵入能力下降,导致妊娠期高血压疾病的发生。     

槲皮素对骨髓间充质干细胞移植联合肾移植所诱导的免疫耐受的影响

目的探讨槲皮素对骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导肾移植免疫耐受的影响。方法在对肾移植后的大鼠给予BMSCs治疗的基础上,同时给予不同剂量的槲皮素,观察其诱导免疫耐受的效果。建立大鼠肾移植模型,随机分为4组:对照组、BMSC组、MSC+高/低剂量槲皮素干预组。Western blot检测各组肾组织中Janus激活激酶(JAK)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、p-STAT3的蛋白表达水平,ELISA检测血清中转化生长因子β1(TGF-β1)水平。收集BMSC组肾小管上皮细胞,干扰及过表达STAT3的同时予以槲皮素干预,使用Western blot检测JAK、STAT3、p-STAT3及TGF-β1表达。采用单因素方差分析比较各组间数据差异,组间数据两两比较采用SNK-q检验。结果大鼠经肾移植后,对照组血清中TGF-β1蛋白表达(19162±223)pg/ml高于其他组,BMSC组(12 106±163)pg/ml、MSC+高槲皮素干预组(9 113±110)pg/ml、MSC+低槲皮素干预组(9 024±133)pg/ml。3组分别与对照组比较P均0.01。对照组肾组织中JAK、p-STAT3的蛋白相对表达量(1.5±0.2,10.7±0.5)均高于其他各组[MSC组(0.9±0.3,8.5±0.2;P均0.01)、MSC+高槲皮素干预组(0.7±0.2,6.1±0.3;P均0.01)、MSC+低槲皮素干预组(0.7±0.3,5.8±0.1;P均0.01)]。干扰STAT3后肾小管上皮细胞中p-STAT3和TGF-β1蛋白相对表达量(0.7±0.1,0.3±0.1)均少于其他各组[对照组(8.2±0.4,7.1±0.5;P均0.01)、槲皮素干预组(5.6±0.3,4.8±0.4;P均0.01)、空白对照组(5.7±0.3,4.5±0.4;P均0.01)]。过表达STAT3后中p-STAT3和TGF-β1蛋白相对表达量(10.5±0.6,8.4±0.5)高于槲皮素干预组[(5.7±0.3,5.4±0.3);P均0.01]和空白对照组[(6.1±0.1,5.6±0.4);P均0.01]。结论大鼠肾移植时在给予BMSCs注射的同时给予槲皮素干预,可有效地抑制免疫排斥反应,改善肾功能;JAK/STAT3/TGF-β1可能参与了槲皮素诱导的免疫调节。     

不同注射途径的脂肪间充质干细胞对大鼠肠炎疗效的实验研究

目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)腹腔及静脉注射对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导肠炎疗效的影响。方法将32只大鼠完全随机分成正常组、腹腔注射组、静脉注射组及模型组,每组8只。用TNBS诱导炎症性肠病(IBD)动物模型,腹腔及静脉注入ADMSCs,记录大鼠的疾病活动指数(DAI)、观察结肠宏观损伤及微观变化、测定结肠的髓过氧化物酶(MPO)活性、检测结肠Ki-67^+细胞的表达、比较血液中IL-1β、TNF-α浓度及结肠TGF-β、IL-6、IL-17A、IL-10的基因表达水平。采用单因素方差分析及独立t检验进行统计学分析。结果 ADMSCs腹腔注射组(98.05±0.63)g高于静脉注射组[(94.32±0.48)g,t=12.281,P=0.000],同时腹腔注射组DAI评分1.71±0.75低于静脉注射组3.57±0.97,(t=-3.980,P=0.002)。另外发现腹腔注射组结肠组织内髓过氧化物酶MPO浓度(95.75±5.52)U/g低于静脉注射组(74.37±5.12)U/g,(t=-7.513,P=0.000),腹腔注射组结肠病理评分2.14±0.69低于静脉注射组3.57±0.76,(t=-3.612,P=0.004)。结肠免疫荧光检查发现腹腔注射组比静脉注射组有更多的Ki-67^+细胞。酶联免疫吸附测定(ELISA)发现腹腔注射组血浆中IL-1β的浓度(130.71±7.08)pg/ml比静脉注射组(163±9.09)pg/ml低,(t=-8.518,P=0.000),同样腹腔注射组血浆中TNF-α的浓度(201.71±6.75)pg/ml也比静脉注射组(242.28±8.30)pg/ml低,(t=-10.033,P=0.000)。此外,结肠组织实时定量聚合酶联反应(RT-qPCR)的结果显示腹腔注射组IL-6 mRNA的表达4.34±0.48比静脉注射低6.15±1.05,(t=-4.147,P=0.001),腹腔注射组IL-17A mRNA的表达2.61±0.53也比静脉注射低3.57±0.46,(t=-4.301,P=0.001)。然而,腹腔注射组IL-10 mRNA的表达水平37.75±4.46比静脉注射组高27.68±2.25,(t=5.327,P=0.001),腹腔注射组TGF-β mRNA的表达水平15.82±0.99也比静脉注射组高11.97±2.25,(t=3.740,P=0.003)。结论 ADMSCs腹腔注射优于静脉注射并可能成为ADMSCs治疗IBD的较好选择。     

血清大分子量肌糖蛋白C剪接变构体水平对卵巢癌的临床意义研究

目的:探讨血清大分子量肌糖蛋白C剪接变构体(L-Tn-CSV)水平对卵巢癌的临床意义,为卵巢癌的临床诊断、治疗和预后判断提供参考依据.方法:选择143例首次发病卵巢癌患者、18例复发卵巢癌患者、40例良性卵巢肿瘤患者及30例健康人为研究对象,采用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中的L-Tn-CSV、HE4和CA125的表达水平并进行比较分析.结果:对一般卵巢癌标志物CA125和HE4与血清L-Tn-CSV诊断卵巢癌的敏感性和特异性比较发现其无统计学差异;首次发病的卵巢癌患者与复发的卵巢癌患者血清中的L-Tn-CSV水平分别为4924.1±3145.6pg/ml和4217.5± 2349.3pg/ml,显著高于健康女性(2259.3±723.2pg/ml)及良性卵巢肿瘤组(2435.6± 863.6 pg/ml)(P＜0.01);卵巢良性肿瘤组血清L-Tn-CSV含量与正常对照组比较无统计学差异(P=0.42),卵巢癌Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者血清L-Tn-CSV水平较Ⅰ期显著增高(P＜0.01);复发组的血清L-Tn-CSV水平明显高于卵巢良性肿瘤组和正常对照组(P＜0.01),而Ⅲ期、Ⅳ期血清L-Tn-CSV水平无统计学差异(P＞0.01);Spearman等级相关分析显示血清L-Tn-CSV水平与卵巢癌临床分期(r=0.573,P＜0.01)及复发(r=0.627,P＜0.01)呈正相关;术后血清L-Tn-CSV水平呈阴性与切除手术后治愈可能性显著相关(P＜0.01).结论:血清L-Tn-CSV水平对卵巢癌肿瘤诊断、分期及预后评估有一定的参考价值.