濒危植物七子花RAPD条件的优化

以改进SDS法抽提濒危植物七子花嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA（RAPD）分析,分别测试了镁离子, dNTP,模板DNA含量,引物和DNA聚合酶量对反应结果的影响,通过各因子的组合研究,可知七子花RAPD分析较适宜的扩增条件是：15 μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液（10 mmol/L Tris·HCl pH 9.0, 50 mmol/L KCl, 0.1% Triton X_100）,2.5 mmol/L MgCl2,2U Taq酶（上海华美公司）,10 ng模板DNA,20 pmol引物（上海Sangon公司）;dATP、dCTP 、dGTP 、dTTP 各0.1 mmol/L。     

濒危植物七子花DNA的提取及分析

用不同的方法抽提濒危植物七子花嫩叶DNA ,利用紫外分光光度法对其质量进行鉴定 ,以紫外分光光度法及琼脂糖凝胶电泳 -溴化乙锭染色法对其含量进行双重测定 ,显示适合七子花DNA抽提的最佳方法是改进的SDS法 ,该法适合RAPD分析。用此法对七子花植株不同器官的DNA进行抽提 ,其含量分别是 :嫩叶 >枝芽 >老叶 >嫩茎 >老茎。     

濒危植物七子花的生殖构件特征

对濒危植物七子花(Heptacodium miconioides)的花枝构成及不同类型花序的结实状况进行了研究。结果显示：(1)在黄经洞(种群B),花枝的营养生长旺盛,单枝的花序数和花数多,平均为23．5个和278朵;在狮子岩坑(种群A)．开多轮花的花序比例高．但花枝的花序数较少,单枝的开花数最少。(2)七子花的结实率很低．可育胚珠的平均结实率均在40％左右,且结实率与花序的开花数量呈显著的负相关关系。(3)花序类型对种子重量也有一定的影响,其中种群A的Ⅰ型花序所结果实的种子最大,但这些种子的胚也未发育完全。因此,七子花成为濒危物种的关键并不是结实的数量,而是结实的质量。     

濒危植物七子花的开花与结实特性

对濒危植物七子花(Heptacodium miconioides)的开花和结实特性进行了研究.结果显示:(1)生境的光照和土壤条件好有利于花枝多开花,而海拔低(或气温高)则有利于花序开多轮花,并使花期延长.(2)七子花的结实率不高(平均只有34.10%),主要原因是大多数早开的花没有获取资源的空间优势,结实率很低.(3)种子的大小也与花序类型及开花位置有关,其中Ⅰ型花序产生的最大,Ⅲ型花序上轮花产生的最小.(4)去基轮花可以提高花序的开花数量,但不能改善其结实状况。因此,提高七子花果期的生殖投资可能是解除其濒危状态的关键.     

濒危植物七子花繁殖器官的形态及其变异

对国家2级保护植物七子花(Heptacodium miconioides)的繁殖器官的形态及其变异进行了研究.结果显示:种群A的生境恶劣,花枝的开花数少,结实状况不及种群B,但因仅开基轮花的花序比例低和开三轮花的花序比例高,果实和种子的变异较大;而种群B的生境条件好,开花结实有明显的改善,但成熟种子的胚发育也不完全,且种子的最大值(由花序Ⅰ产生)不及种群A.说明七子花更适合于生境恶劣的条件下生长.另外,整枝疏花可以改善其结实状况,但效果不显著,说明七子花自身的营养调节能力差.因此,有性生殖障碍是七子花成为濒危物种的主要原因,要消除这种障碍必须研究种群的生态适应机制和种质的更新.     

七子花的细胞学研究

七子花ＨｅｐｔａｃｏｄｉｕｍｍｉｃｏｎｉｏｉｄｅｓＲｅｈｄ .是我国特有单种属植物 ,属于忍冬科北极花族ＴｒｉｂｅＬｉｎｎａｅｅａｅＤｕｍｏｒｔｉｅｒ,主要分布于浙江、湖北两省 (徐炳声 ,1 988)。关于忍冬科的细胞学研究见诸报端的已有不少如 :六道木属的糯米条ＡｂｅｌｌｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＲ .Ｂｒ.2ｎ =32 (Ｂｅｎｋｏ -Ｉｓｅｐｐｏｎ ,1 992 )、北极花属的北极花ＬｉｎｎａｅａｂｏｒｅａｌｉｓＬｉｎｎ .2ｎ =32 (Ｂｅｎｋｏ -Ｉｓｅｐｐｏｎ ,1 992 ;Ｓｅｍｅｒｅｎｋｏ ,1 990 )、忍冬属的Ｌｏｎｉｃｅｒａａｌｐｉｇ…     

七子花的解剖学研究

研究了七子花根、茎、叶和芽的解剖学结构,并与忍冬科荚蒾属的珊瑚树进行比较。结果表明,两种植物具有一些共同特点:茎中髓部发达;异面叶,栅栏组织细胞都有两层,气孔大多集中于下表皮,叶表面有腺毛。两者也存在一些明显差异:七子花根毛明显少于珊瑚树,甚至未见;幼茎形状、茎中维管柱形状也明显不同;七子花栅栏组织细胞排列较珊瑚树整齐。     

濒危植物七子花内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

首先从濒危植物七子花中分离到38株内生真菌,综合运用形态特征和分子生物学技术,明确其分类地位。38株植物内生真菌分属于6个属和1个无孢子群,其中交链孢属和刺盘孢属为优势菌群,葡萄座腔菌属、镰刀菌属、赤霉菌属、拟茎点霉属和无孢子群为常见属。以大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌为靶标菌对获得菌株发酵液粗提物进行抑菌试验,发现95%以上的菌株对试测细菌具有一定的抗菌活性,表明七子花内生真菌的抗菌活性十分普遍;其中QZHⅡ10对大肠埃希菌具有较好的抑菌活性,抑菌圈直径为12.0 mm;而QZHⅡ07则对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,抑菌圈达到15.5 mm。这表明七子花内生真菌具有开发为微生物源杀菌剂的价值。     

浙江北山七子花群落主要植物叶热值

对不同季节浙江北山七子花群落18种优势植物叶的热值和灰分含量进行了研究,探讨了生境片断化所造成的影响。结果表明:(1)不同种类植物叶的灰分含量有较大差异,与植物自身的遗传特性有关(主要是叶的元素含量),其中仅乔木层算盘子(Glochidion puberum)和灌木层华箬竹(Sasamorpha sinica)的灰分含量高于10%,其他植物灰分含量较低;不同季节植物的灰分含量不同,且具有不同的季节变化趋势;从群落林冠到地被层,各层植物叶的平均灰分含量由高到低依次为乔木层(7.49%±2.59%)、灌木层(7.20%±3.22%)、草本层(6.68%±1.02%)和间层(6.28%±1.31%),但层次间差异不显著(p>0.05)。(2)不同种类植物叶的去灰分热值变化范围较大,有6种植物的去灰分热值高于20.00 kJ/g,4种植物低于18.00 kJ/g,同一层次内常绿植物叶的去灰分热值一般比落叶植物高;从林冠到地被层,各层植物叶的去灰分热值由高到低依次为灌木层((20.33±2.29)kJ/g)、乔木层((19.92±1.05)kJ/g)、间层((19.71±3.26)kJ/g)和草本层((18.14±0.74)kJ/g),仅乔木层和草本层之间的差异达到显著水平(p<0.05);不同季节植物叶的去灰分热值变化较为复杂,其中多数植物在春秋季热值含量较高,夏季热值含量较低。(3)对不同生境条件下3种乔木植物叶的热值和灰分含量的比较研究显示,由于受到片断化后光照增强等因素的影响,与林内相比林外生境植株叶的干重热值和去灰分热值均明显升高(p<0.05),而灰分含量变化规律不明显。分析认为,生长速率慢和某些高热值成分的积累是造成片断化条件下植物叶热值升高的主要原因。     

七子花的繁殖生物学研究

对国家2级保护植物七子花（Heptacodium miconioides)的开花、传粉与结实等繁殖特性进行了研究。结果显示：七子花的花无梗,由多轮紧缩呈头状的聚伞花序组成顶生圆锥花序,多数花序开两轮花（基轮和中轮）,少数只开基轮花。自花传粉的比例高,花后4h的柱头花粉多超过60粒,8h的柱头可多达142粒,其中近1／3的花粉萌发,少数能到达子房。每个子房仅1枚胚珠可育,其平均结实率为40．6％,上轮花的开花会影响下轮花的结实率,降低幅度可达34．8％,早开花的结实也会影响迟开花的结实。表明七子花的结实率很低,资源限制是影响结实的主要因素。     

七子花减数分裂及小孢子形成

本文研究七子花的减数分裂及小孢子形成过程。七子花小孢子母细胞减数分裂为同时型,从小孢子母细胞后期到游离四分体产生为止,其周围均包围着一层胼胝质体,七子花的四分体主要为四面体型,单核小孢子呈三角形,花药壁的发育为双子叶型。     

七子花不同器官次生代谢产物含量的分析

对七子花不同器官的黄酮、鞣质、生物碱、皂甙、木质素、绿原酸等6种次生代谢产物的含量进行测定与分析。结果显示：6种次生代谢产物总量和各成分在七子花不同营养器官中的含量均具有一定的差异,总含量以老根最高,但主要以木质素为主;黄酮、总皂甙和总生物碱的含量以叶片最高,分别为24.13、5.51、31.08 g·kg^-1;绿原酸在花中含量最高,其次是叶,分别为38.74、37.13 g·kg^-1;鞣质在幼根中含量最高,为9.33 g·kg^-1;木质素以老根为最高,是120.43 g·kg^-1。这6种次生代谢产物在不同器官中含量与它们的合成途径、运输方向和作用部位有一定的关系。     

七子花不同花器官的愈伤组织诱导效应

以七子花的不同花器官(花萼、花瓣、花丝、花柱、花药及幼蕾)在MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.6mg/L培养基上进行培养。结果表明,在上述6种器官中,以幼蕾、花萼、花瓣为外植体具有较高的诱导率,且增殖速度快。     

浙江天台山七子花群落种群分布格局研究

以浙江省天台山七子花群落为研究对象,采用相邻格子样方法取样数据,应用方差／均值比的t检验法、负二项参数、扩散型指数、Cassie指标、丛生指标、平均拥挤指数和聚块性指数等方法,分析了七子花群落各优势种群以及七子花种群在各样地中的分布格局,并分立木级对七子花种群在不同样地内的集群强度进行了测定。结果是：群落中各优势种群均呈集群分布;七子花种群在各样地亦呈集群分布,但集群强度有差异;各样地中七子花种群小树的集群强度均大于中树,种群呈扩散趋势。     

七子花幼苗光合特性的温度响应

对七子花苗期光合特性的温度响应的研究结果表明：（1）净光合速率的最适温度为26-30℃。在19-40℃之间,暗呼吸速率与温度呈乘幂关系。蒸膳速率与温度呈线性关系。（2）饱和光强,表观量子效率和净光合速率在29℃时最高,在39℃时最低,但光补偿点和蒸滕速率程式高,光抑制加剧。（3）高温使七子花叶片的羧化效率下降。CO2补偿点上升,从而引起光合能力下降。     

天台山七子花群落下土壤微生物生物量的季节动态

研究天台山七子花群落下土壤微生物生物量的季节变化规律及生态特性。根据实测数据分别对根际、根围微生物生物量碳、氮与土壤环境因子之间进行相关性分析,并建立了土壤微生物指标与环境因素之间的回归方程,以此为基础对天台山七子花群落下土壤微生物生物量的季节变化进行预测。回归分析表明：土壤温度、水分对微生物生物量的影响大于土壤pH值对微生物生物量的影响,而且土壤温度、水分对微生物生物量氮的影响大于对微生物生物量碳的影响。土壤温度对微生物生物量碳、氮的影响最大。