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细胞转录调节因子 Y Y1 可抑制人乳头瘤病毒16 型( H P V 16) 癌基因启动子 P97 的活性, Y Y1 位点的突变和缺失不仅可诱导 P97 活性增强而且可在全基因组内增强 E6 癌基因转录,同时使病毒对啮齿类动物纤维细胞的转化能力增强。为了观测人乳头瘤病毒16 型长控制区( H P V16 L C R) 序列上 Y Y1 蛋白特异性结合位点破坏在完整基因组范围内对人原代包皮角源细胞永生化能力的影响,将 H P V 16 Y Y1 位点突变株和野毒株转染至人原代包皮角源细胞。筛选结果表明,突变株可诱导形成永生化细胞,永生化能力明显高于野毒株。对4 株永生化细胞系 D N A检测发现,均含有呈整合状态的 H P V 16 D N A,其中3 株的 E1/ E2 区域有缺失。 R N A 检测显示,4株细胞内均有 E6/ E7 m R N A 的转录。这表明, H P V 16 L C R 上 Y Y1 蛋白特异性结合位点的破坏,可在完整基因组范围内增强病毒使人原代包皮角源细胞永生化的能力。 相似文献
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YY1抑制效应的破坏可促进人乳头瘤病毒16型癌基因的转录 总被引:4,自引:1,他引:3
人乳头瘤病毒16型(HPV16)癌基因的表达受病毒早期启动子P97的控制。位于LCR上YY1蛋白结合位点的破坏可明显提高P97的活性。为了观测YY1位点破坏在全基因组范围内对病毒e6/e7基因转录的影响,将构建的带有LCR特异性突变的重组HPV16全基因组DNA和HPV16野毒株DNA转染至培养细胞,同时组建HPV16E6反向序列RNA体外转录质粒。RNase保护试验证实,突变HPV16DNA在短 相似文献
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构建来自宫颈癌并带有突变及缺失LCR的HPV16重组体 总被引:4,自引:0,他引:4
为研究HPV16转录调节蛋白YY1结合位点改变对病毒致癌性的影响,以HPV16野毒株质粒p1203为基础,经多次克隆,将来自宫颈癌组织并带有缺损突变的LCR重组到地HPV16基因组中。核酸序列分析证实,质粒pDV390在第2个YY1位点上有一G→A点穷变,质粒pDV326和pDV401分别带有115bp和143bp的缺失突变,从而涉及2和4个YY1结合位点,重组质粒其它核苷酸序列与HPV16标准序列一致。这些重组质粒的组建为进一步研究YY1蛋白对HPV16致癌基因表达的调控及HPV16致癌作用的影响打下基础。 相似文献
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人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus)HPV是发生宫颈癌的必要条件,人乳头瘤病毒16E5癌基因突变与宫颈癌的发生有密切的相关性。人乳头瘤病毒E5是一种转化作用的癌蛋白,是细胞膜或内膜整合蛋白。人乳头瘤病毒E5在感染的细胞中表达。主要在感染细胞克隆早期的繁殖,扩张中起重要作用。它干预生长因子受体,干扰周期蛋白和周期蛋白激酶,促进病毒癌基因转化,抑制抑癌基因表达,激活启动子促进病毒繁殖,并通过多种机制促使损伤细胞,通过细胞周期,使宿主细胞增殖,分化延缓,恶性化。E5基因变异意味着功能有可能改变,可能机体或细胞对病毒变异株的免疫能力,与宫颈癌的发生和HPV的嗜上皮性有关,因此对人乳头瘤病毒16E5基因变异的研究对于人乳头瘤病毒16在宫颈癌发病中的作用有着不可忽略的意义。本文对人乳头瘤病毒16E5突变株在宫颈癌组织中的作用及其基因突变的研究现状进行分析。 相似文献
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人乳头瘤病毒16碧蓝晚期基因L1在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌的发生关系密切。其晚期蛋白L1是主要结构蛋白,可以刺激机体产生中和抗体,对病毒攻击可以起到保护作用。本研究将HPV16型中国分离株的L1基因定向克隆到原核表达载体pET-21c质粒中,建立HPV16 L1在大肠杆菌中的高效表达系统pET21c-HPV16 L1,该系统在IPTG的诱导下可表达60ku的L1蛋白,表达效率为23%,此蛋白通过Western-blot得 相似文献
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徐钤 《国外医学:分子生物学分册》1998,20(2):52-55
本对人乳头瘤病毒早期基因之一E5基因的致癌性的分子机理进行了综述,对E5蛋白与生长因子受体的相互作用,一些癌基因的反式激活作用及细胞缝隙在连接的损伤作用进行了讨论。 相似文献
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小鼠白血病病毒分为两类;(1)急性转化MuLV:Abelson,MuLV 其代表,基因组含有v-abl癌基因,编码产生P120^gag-abl磷蛋白,诱发小林巴细胞白血病,(2)慢性转化MuLV:极大多数MuLV均属于此类。基因组不携有v-onc癌基因为其特点,Moloney-MuLV(M-MuLV)是研究这类MuLV致瘤机制的良好模型。白血病生成中包括原癌基因激活、MCF重组体形成、15号染色体 相似文献
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以痘苗病毒天坛株为载体的表达单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D的重组活疫苗的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
从我国分离到的一株单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1-168株)病毒基因组中,分离出含有糖蛋白D(gD)基因的1.2kb片段,插入带有痘苗病毒天坛株TK区的质粒pJSB1175P7.5k启动子下游,转染无白血病鸡胚原代细胞,获得带有HSV-1-168gD基因的重组痘苗病毒。此株重组病毒在感染细胞膜上表达HSV-1-168gD糖蛋白抗原,能与特异性单克隆抗体反应。在感染细胞中表达的膜抗原经SDS-PAGE分析,表达分子量为54kD糖蛋白。用Southern杂交分析了重组病毒DNA中特异的gD基因,对作为活疫苗的重组痘苗病毒株进行了一些微生物学活性、免疫原性和毒力等方面的研究。 相似文献
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当今,随着分子学生物技术的不断发展,人们用于人乳头瘤病毒检测的手段也越来越多,其中核酸检测主要包括第2代杂交捕获、聚合酶链反应、原位杂交、Southern杂交和斑点杂交等方法.临床应用的有第2代杂交捕获和荧光定量聚合酶链反应.第2代杂交捕获法为一种半定量方法,是目前美国食品与药物管理局唯一批准能够在临床使用的人乳头瘤病毒DNA检测技术.该法具检测效能高,并可对人乳头瘤病毒进行高危型和低危型分析,为临床人乳头瘤病毒(特别是高危型人乳头瘤病毒)感染的早期诊断和监测提供了新的手段. 相似文献
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人乳头瘤病毒转化基因致癌的分子机制研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
人乳头瘤病毒16型(HPV16)与宫颈癌及其他生殖道和肛周等恶性肿瘤有密切关系。本文综述了近年来HPV16转化基因在转录耕接、转录调控及致癌机制等方面的研究进展。 相似文献
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人乳头瘤病毒16型预防性疫苗的相关研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
王立良 《微生物学免疫学进展》1997,25(3):71-74
人类乳头瘤病毒16型(HPV16)在宫颈癌患者中检出率高达90%。近年来通过基因工程方法对HPV的晚期基因(L1和L2基因)编码的外壳蛋白产物的研究很多,发现主要壳蛋白(L1)可自我组装成病毒样颗粒(virus-likeparticles,VLP),并可用作预防性疫苗;基于次要壳蛋白(L2)的预防性疫苗和核酸水平的预防性疫苗也很有前途。本文着重从近几年国际上HPV16预防性疫苗的基础性工作进展及预防性疫苗研究现状等方面及趋势作一综述。 相似文献
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将人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)基因组上游调控区(URR)540bp的Sau3A-Narl片段(H序列),正反向插入β-干扰素表达载Trp劝子上游,使β-IFN表达明显增强,可使基因表达水平提高3.6倍和2.1倍。H序列正反向插入增强子检测载体不仅使β-半乳糖苷酶表达活性增加-10倍,还能使半乳糖苷酶mRNA量明显增高,证明H序列对被调控基因的增强作用是发生在转录水平。 相似文献
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人乳头瘤病毒E6蛋白致病作用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
人乳头瘤病毒(HPV)可致多种临床疾病.高危型HPV的E6蛋白能与p53蛋白形成复合物,并使之发生快速的蛋白酶介导的降解作用,从而破坏p53蛋白抑制细胞增殖和诱导凋亡的活性.此外,E6蛋白还与其他多种细胞功能蛋白相互作用,同样对HPV的致病性至关重要. 相似文献
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DNaseⅠ超敏感位点的研究能够发现潜在的调控基因转录活化的位点,比较正常人外周血有核细胞,淋巴瘤细胞株P3HR1和人鼻咽癌低分化磷癌细胞株HOnE1和HNE2中Ha-ras-1瘤基因的DNaseⅠ超敏感位点发现,只有HONE1和HNE2细胞基因组中存在一个DNaseⅠ超敏感位点,位于第一个外显子上游0.37kb处,上述结果提示正常白细胞和P3HR1细胞中Ha-ras-1基因处于失活状态,而在鼻咽癌细胞基因组中则处于活化状态,它的活化可能与0.37kb处的DNA序列有密切的关系。 相似文献