脱硫链霉菌LD48产硫化物氧化酶酶学性质研究

从土壤中分离出1株能氧化硫化物的耐热链霉菌菌株LD48(Streptomyces sp.LD48),对其所产的硫化物氧化醇粗酶液的酶学性质进行了较系统的研究。结果表明:该酶的最适反应温度是37℃以上;该酶极耐高温,在50-100℃范围内处理6h,未见酶活损失,甚至高压蒸汽灭菌(0.1MPa)30min后,亦未见酶活损失;其最适反应体系pH为8.0-10.6;该酶耐受pH范围较广,在pH为3-7时比较稳定,在pH11-13的强碱性环境中仍能保持70%的活性,但不耐受pH8-10的碱性环境;Mn2 对该酶有激活作用,EDTA则100%的抑制,而酶对Al3 、Mg2 、Ca2 及Zn2 等几种金属离子不敏感。     

链霉菌702产孢子固体培养基和培养条件的筛选

通过单因素实验、均匀设计和正交实验对链霉菌702产抱子培养基和培养条件进行筛选,筛选到的最佳培养基组成为：马铃薯2009／L,葡萄糖25g／L．最佳培养条件为培养温度37℃、培养时间5天和培养基初始pH值8．实验结果表明,采用优化后的培养基和培养条件,使链霉菌702产抱子数达到4．07亿,比原来培养基（高氏一号培养基）产抱予量提高了8．7倍,培养时间却从原来的7天缩短到现在的5天．     

产黄青霉菌株39B分离培养及其白藜芦醇代谢积累条件研究

在虎杖组织培养过程中获得1株产黄青霉菌株(Penicillum chrysogenum,39B)菌株,其发酵液经TLC和HPLC检测含白藜芦醇,对其培养条件及白藜芦醇积累特性进行了研究,通过正交优化试验得到该菌最佳培养条件:20g/L葡萄糖,2g/L硝酸铵,pH值7.0,28℃,100r/min。3mmol/L苯丙氨酸、Mg2+、Zn2+能促进其生长和白藜芦醇的积累,其白藜芦醇含量达8.6617μg/100mL。     

大孔吸附树脂吸附链霉菌702抗真菌活性物质工艺

研究大孔吸附树脂吸附链霉菌702抗真菌活性物质的工艺条件。采用5种不同大孔吸附树脂吸附链霉菌702发酵液提取液中抗真菌活性物质,选择吸附效果较佳树脂进行吸附条件优化,以桔青霉为指示菌,纳他霉素为对照抗生素．采用“管碟法”测定抗真菌活性物质含量。结果发现,XAD18树脂吸附效果较好,获得优化吸附条件：上样液pH6,NaCl质量浓度10g/L,上样量22．63mg／g湿树脂,吸附流速2．5mL／min,水洗体积180mL,洗脱流速1．5mL／min,洗脱剂为体积分数10％、50％和90％的甲醇,洗脱方式为梯度洗脱。在确定的工艺条件下XAD18对链霉菌702抗真菌活性物质的吸附率可达90％,洗脱率可达75％,回收率可达80％。     

一株产L-谷氨酸氧化酶的链霉菌分离鉴定及酶学性质分析

采用4-氨基安替吡啉/苯酚显色反应,从土壤中分离出产酶菌株Str-6.通过菌株形态、培养特征和生理生化试验、16S rDNA序列分析,初步将其鉴定为山丘链霉菌.其初步酶学性质研究表明,该菌株所产L-谷氨酸氧化酶为胞外酶,28℃培养36 h时产酶酶活达到0.023 1 U/mg蛋白,对L-谷氨酸具有较强的底物专一性.酶作用最佳反应pH为6.0,反应温度为35℃.在pH6.0-7.0和温度35-40℃下具有较好的稳定性.     

爱德华氏菌产乳酸氧化酶的条件研究

在以前工作的基础上,对已获得的产乳酸氧化酶的5株菌进行复筛,对产酶量大的一株菌进行了分类鉴定,确定该菌株属迟钝爱德华氏菌生物群I(Edwardsiella tarda Biogroup I)。这与曾报道的产乳酸氧化酶分枝杆菌(Mycobacterium)和片球菌(Pediococcus)是不同的菌。分别研究了培养基中的培养初始pH、核黄素、乳酸钠以及硫酸铵对发酵产乳酸氧化酶的影响。这一酶源在酶法生产丙酮酸及医疗诊断和酶电极应用上有意义。     

盐增强培养对弗氏链霉菌产新霉素的影响

目的:弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)作为氨基糖苷类抗生素新霉素的主要生产菌株,其新霉素B具有抗菌活性强、抗癌、抗HIV等作用,提高新霉素B的效价具有重要意义.方法:在满足微生物正常生长所需盐离子的条件下,通过盐增强培养的方式向培养基中添加不同种类、浓度无机盐来改变细胞壁附近的理化特性、渗透压以及...     

培养条件对毛栓菌菌丝体生长和多酚氧化酶分泌的影响

研究了碳源、氮源、培养温度、初始pH值、接种量、通气量等条件对毛栓菌（Trametes trogii)菌丝体生长及多酚氧化酶分泌的影响;结果表明,不同碳源和氮源对菌丝体生长影响较大,对多酚氧化酶分沁也有较大影响,麦草粉和麸皮为碳源,玉米粉、硫酸铵为氮源有利于多酚氧化酶的分泌;初始pH值对酶活影响较小,培养温度、通气量等对酶活影响较大。     

链霉菌MIUG4.46胞内葡萄糖异构酶的提取条件研究

比较了采用不同方法处理链霉菌MIUG4．46的生物量时,细胞内葡萄糖异构酶的释放能力。当联合采用溶菌酶和高压力来破碎细胞时,提取物中葡萄糖异构酶的总酶活力为91．3％,酶的回收率为87％。用溶菌酶溶菌和高压破碎细胞后,在Mg~(2＋)和Co~(2＋)存在的情况下,对细胞悬浮液进行热处理（70℃下加热10min）时,有利于提高提取物中葡萄糖异构酶的纯度,酶的比活力达3．275U／mg蛋白质。     

圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质

圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶基因naoA在大肠杆菌中获得了成功表达,从含有重组质粒pNA101(pET23b∷naoA)的工程菌株BL21(DE3)中分离纯化了硝基烷类氧化酶,SDSPAGE检测为均一。对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。底物为1硝基丙烷、2硝基丙烷和硝基乙烷时,在04mol/L的磷酸缓冲液中,酶的最适反应pH值为7～8,最适反应温度为48℃～56℃。室温保存6d后,酶的活性保持了43.3%,但对60℃以上的高温敏感。硫醇化合物如巯基乙醇、还原型谷胱甘肽不同程度地抑制酶活性,特别是NADH,其浓度为1mmol/L时,酶活性几乎全部丧失。以1硝基丙烷为底物时,NaoA的Km为357mmol/L,Vmax为0199μmol/(μg.min)。     

盾壳霉产生几丁质酶的条件研究

本实验采用摇瓶培养研究了盾壳霉(Coniothyrium minitans)产生几丁质酶的条件。改良的天然马铃薯葡萄糖培养基(mPDB)较合成培养基(SMCS)更适宜作为盾壳霉产生几丁质酶的基础培养基。添加9种不同碳源试验表明葡萄糖较适宜于盾壳霉产几丁质酶;氮源试验表明硝酸钾是产酶的较适宜氮源。盾壳霉形成几丁质酶的培养时间以15 d为佳,培养的适宜pH值为6.5。     

Optimum Culture Conditions for Production of Exfoliative Toxin by Staphylococcus hyicus

Optimum culture conditions for the production of exfoliative toxin by Staphylococcus hyicus (shET) were examined. High shET activity was obtained from the culture filtrate of HI and TY broth inoculated with S. hyicus. The pH in these two media ranged from 7 to 8.5 during bacterial culture, while the lowest pH in TS and BHI broth was less than 6. shET activity in the culture filtrate from TY broth inoculated with 10⁷ CFU of S. hyicus per ml was higher than that in TY broth inoculated with 10⁶ and 10⁸ CFU of bacteria per ml. When shET activity in the culture filtrate was measured under various shaking conditions, the culture filtrate shaken at 75 oscillations per min had the highest shET activity of the five shaking conditions. shET activity of the culture filtrate of TY broth to which protease inhibitor had been added was the same as that of TY broth without inhibitor. shET activity in a shaking culture in an Erlenmeyer flask was also the same as that in sac culture and that in shaking culture using a shaking (Sakaguchi) flask. shET activity in TY broth supplemented with 100 mM glucose was significantly lower than that in TY broth without glucose. Based on the above results, the optimum culture conditions for the production of shET were as follows: inoculation of 3 × 10⁹ CFU of S. hyicus strain P-1 into 300 ml of TY broth in a 2,000-ml Erlenmeyer flask, and incubation at 37 C with shaking at 75 oscillations per min. Then shET activity of the culture filtrate under appropriate culture conditions was measured after various incubation periods. shET activity was detected 6 hr after inoculation, reached the maximum (2⁵³ exfoliative unit/0.1 ml) at 16 hr and decreased between 20 and 48 hr. Thus, the optimum incubation period was determined to be 16 hr. Then the optimum concentration of ammonium sulfate for isolation of shET from the culture filtrate under appropriate culture conditions was examined. The greatest shET activity was obtained from the fraction salted out with 90% saturated ammonium sulfate. Thus, the optimum concentration of ammonium sulfate for the isolation of shET was determined to be 90% saturation.     

不吸水链霉菌梧州新亚种胆固醇氧化酶基因的克隆与序列分析

克隆不吸水链霉菌梧州新亚种胆固醇氧化酶基因.以不吸水链霉菌梧州新亚种基因组DNA作为模板,根据已知的胆固醇氧化酶基因的保守序列设计简并引物进行PCR扩增,PCR产物与载体连接、转化,构建重组质粒.获得了不吸水链霉菌梧州新亚种胆固醇氧化酶基因重组质粒,序列测定并分析.     

培养条件对毛栓菌漆酶分泌的影响

研究了碳源、氮源、愈创木酚、香兰素及培养条件对漆酶分泌的影响;结果表明,麦草粉作碳源、(NH_4)_2SO_4作氮源有利于漆酶的分泌,适宜浓度的愈创木酚和香兰素等对漆酶的产生有一定的作用;pH在3.0～8.0的范围内对漆酶的分泌影响差别不大,培养温度、接种量、通气量对漆酶的分泌有较大影响。     

泰山虫草C-2最优液体培养条件筛选

在泰山虫草资源调查过程中,采集、分离获得一株泰山虫草菌(Cordycepssp.)。对其进行人工驯化栽培,发现其生长周期短,发菌快,适应性强。利用正交试验设计法筛选其最佳液体发酵培养基及条件,用SAS数据处理软件系统对菌丝生物量、多糖进行方差分析,并测定发酵液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)等酶的活性。结果表明,泰山虫草最优的菌丝体发酵培养基组合是:马铃薯20%、蔗糖2%、豆粉2%、胶体几丁质0.5%、无机盐0.1%KH2PO41、2 h光照。     

粘红酵母发酵生产类胡萝卜素培养条件的优化

目的是通过测定不同条件下类胡萝卜素的产量找出粘红酵母发酵生产类胡萝卜素的最优条件。探讨了不同碳源、氮源对粘红酵母菌体生长和色素形成的影响,并通过正交实验确定了最佳条件组合。实验结果表明,最适发酵培养条件为：蔗糖40g/L、酵母粉20g/L、转速150r/min、装液量30mL/500mL、发酵时间84h。在此条件下,粘红酵母摇瓶发酵的生物量、类胡萝卜素含量及产量分别达15.17g/L、718.6μg/g、10.9mg/L,依次比初始发酵提高了1倍、7.4倍和15.8倍。发酵过程动态分析表明,84h色素产量达最高峰。     

Preparation of N-Monoalkyl and O-Acyl Derivatives of Allosamidin,and Their Chitinase Inhibitory Activities

Allosamidin (1) was converted to demethylallosamidin (2) and didemethylallosamidin (3) by a reaction with methylamine and ammonia, respectively. In the same way, a series of N-monoalkyl derivatives was prepared from 1 and 2. A variety of 6- and 6”-O-acyl derivatives of 1 was also prepared by chemically selective acylation. The inhibitory activity of each of these derivatives on chitinases originating from insects and fungi showed that a monomethylaminooxazoline or dimethylaminooxazoline structure was important for strong activity, and that the 6”-O-acyl derivatives of 1 each retained relatively high activity.     

高产番茄红素链霉菌选育及摇瓶发酵研究

番茄红素的抗氧化能力目前在类胡萝卜素中最强,是近年来国际上功能食品成分研究的热点。在国内首次利用龟裂链霉菌（Streptomyces rimosus）发酵生产番茄红素,建立了分光光度计法和HPLC法等番茄红素测定方法;以一株龟裂链霉菌Fc作为出发菌株,进行紫外诱变,筛选到一株突变高产菌株Fc’,其番茄红素产量较出发菌株提高2.5倍;通过摇瓶发酵实验优化培养条件,使菌株Fc’的番茄红素产量达到230 mg/L,并且在不添加任何阻断剂的情况下,利用链霉菌发酵可获得纯度较高的番茄红素。该结果为今后利用链霉菌工业化生产番茄红素奠定了良好基础。     

海洋来源担子菌产葡萄糖氧化酶发酵条件优化

为提高从大连渤海海域海泥中筛选到的菌株Basidioascus sp. LG-31产低温葡萄糖氧化酶活性性,对菌株Basidioascus sp.LG-31进行了单因素发酵条件优化,结果表明,菌株Basidioascus sp.LG-31产低温葡萄糖氧化酶活性显著提高。单因素优化结果：蔗糖4%(质量分数)、酵母粉0.3%(质量分数)、NaNO₃ 0.4%(质量分数)、无机盐(KH₂PO₄ 0.02%(质量分数)、KCl 0.10%(质量分数)、MgSO₄·7H₂O 0.10%(质量分数))、初始pH值7.0、装液量125 mL/250 mL、接种量2%(体积分数)、转速200 r/min、温度20℃。最高酶活性达435.37 U/mL,相对于优化前的最高酶活性15.28 U/mL,提高了28.49倍。为下一步酶学性质研究及低温葡萄糖氧化酶在工业中的应用提供参考。