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相似文献
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1.
盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(EC1.1.1.8),得到比活为12.6U/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4%~20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDSPAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮(DHAP)还原的最适pH值为7.5,催化G3P脱氢的最适pH值为10。该酶对4个底物还原型辅酶Ⅰ(NADH),二磷酸吡啶核苷酸(DHAP),辅酶Ⅰ(NAD),G3P的表观Km值分别为63μmol/L,272μmol/L,1.53mmol/L,6.52mmol/L。该酶在保存过程中易失活。NADH能降低酶失活的速度,而NAD则不然。低浓度NaCl对酶略有保护作用,但高浓度NaCl加快酶的失活,且浓度越高效应越明显。  相似文献   

2.
三唑酮对绿豆幼苗叶片衰老的延缓作用   总被引:26,自引:0,他引:26  
三唑酮处理可提高离体绿豆(PhaseolusradiatusL.)幼苗叶片叶绿素和蛋白质含量。叶片衰老过程中超氧物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(AsAPOD)活性及抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低。20mg/L三唑酮可提高POD、AsAPOD活性和AsA、GSH含量,对SOD、CAT活性无影响。丙二醛(MDA)含量在叶片衰老过程中提高,并与POD、AsAPOD活性和AsA、GSH含量呈显著负相关,三唑酮可降低MDA含量。表明三唑酮有提高植物对膜脂过氧化作用的保护能力,延缓叶片的衰老作用。  相似文献   

3.
高粱细胞质雄性不育系3197A(3A)在常温条件下是不育的(Figs.11&2),经热激(45℃)诱导不同程度地恢复了育性(Figs.13&4),为研究其不育机理提供了线索。热激2h后,3A中即可产生一类线粒体热激蛋白(HSPs)。其中,分子量为70kD的HSP70含量最高,也最为稳定。不过,3A中HSPs的稳定性弱于保持系3197B(3B)(Fig.2,Panels1~4)。放线菌素D抑制HSPs的合成,而氯霉素无此作用(Fig.2,Panels5&6),表明:HSPs是由核基因编码、在细胞质中合成、再跨膜转运到线粒体中的。3A幼穗经热激后,线粒体的总蛋白量猛增了2.7倍(Fig.3),达到3B的水平,育性亦变为可育的。Fig.4表明:HSP70反义链cDNA(R1)能进入到3B花药细胞中,并与靶RNA(HSC70mRNA)结合,而对照、正义链cDNA(D)链无此反应。由此、再增加一个通用保守序列的反义链cDNA(R2)、共两个探针(R1、R2),可以检测到:3A在常温下没有能力合成HSC70mRNA(Fig.5),而在热激条件下,转变为有能力(Fig.6)。启示:3A在热激条件下由不育转变为可育  相似文献   

4.
中国海产刚毛藻科新记录栾日孝张淑梅(大连自然博物馆大连116001)THREESPECIESOFCLADOPHORACEAENEWTOCHINALUANRiXiaoZHANGShuMei(DalianMuseumofNaturalHistory...  相似文献   

5.
应用蓝藻类金属硫蛋白启动子(smtOP)的金属诱导性,在丝状体蓝藻鱼腥藻(Anabaenasp.PCC7120)中表达具有更高金属结合能力和对Cd2+有选择特异性的小鼠金属硫蛋白基因(mMTⅠcDNA)。构建穿梭表达载体pKTMRE并在大肠杆菌HB101中扩增,经三亲接合转移、链霉素筛选、DNA和蛋白质印迹等方法鉴定得到稳定的转基因工程蓝藻。转基因蓝藻对金属离子吸附能力和较高重金属浓度下放氧活性测定表明,外源基因的表达提高了蓝藻对重金属离子的抗性,是野生蓝藻的1.5~2.0倍。  相似文献   

6.
对江西修水清水岩乡东岭剖面和乐平沿沟剖面的再研究表明,HindeodusparvusMorphotype1在东岭剖面首现于大冶组的最低层位,生物地层界线与岩石地层界线一致,仅比事件地层界线高5-6cm。沿沟剖面Hindeodusparvus带厚仅36cm,其首现与岩石地层界线也一致。张克信等提出的H.latidentatus→H.parvus→H.turgidus→I.isarcica的演化谱系需作进一步修正。依据华南的资料,本文第一作者提出新的演化谱系:H.latidentatus→H.parvus→I.staeschei→I.isarcica。H.turgidus并不在此演化系列中,它属Hindeodus的另一分枝。二叠三叠系界线层的牙形刺应区分出浮游相与浅水相。在浮游相,牙形刺序列为:(1)ClarkinachangxingensisC.deflecta带,(2)C.carinata带,(3)C.planata带。在浅水相,牙形刺序列为:(1)H.latidentatus带,(2)H.parvus带,(3)I.staeschei带,(4)I.isarcica带,(5)H.postparvus带  相似文献   

7.
高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建   总被引:7,自引:0,他引:7  
重组大肠杆菌Escherichia coliHMS174(pTZ18UPHB) 含有携带聚羟基烷酸(PHA) 合成基因( phaCAB)** 的质粒pTZ18UPHB,是很有潜力的PHA 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成3羟基丁酸(3HB) 与3羟基戊酸(3HV) 共聚物[P(3HBco3HV)] 的缺陷。将RK2 质粒上的par DE 基因引入pTZ18UPHB 构成质粒pJMC2 ,该质粒可以在宿主E.ColiHMS174 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至18 m mol/L,发现E.Coli HMS174(pJMC2) 能够以丙酸为前体合成P(3HBco3HV) ,其中3HV 在共聚物中的含量为5 % ~8 % 。在5L自动发酵罐中分批补料培养E.Coli HMS174(pJMC2) ,培养基初始磷酸盐浓度为15 m mol/L,30 h 后每升培养液中干菌体可达42-5 g,P(3HBco3HV) 占干重的70 % ,其中3HV 在共聚物中的含量为4-9 % 。  相似文献   

8.
酵母菌 S H2 发酵产物( 简称 F S H2) ,用 Sephadex G75 凝胶层析和 H P L C 色谱层析分离纯化,收集到一组蛋白。该组蛋白在 P A G E 和 S D S P A G E 电泳上带型一致,无蛋白亚基,分子量范围为52 ~72 k D。凝胶上糖蛋白的特异性染色——— Schiff’s 染色显示阳性染色带;用 Lowry’s 法测蛋白和硫酸酚法测糖,显示蛋白与糖的比例约为3∶1 。该组蛋白与人α干扰素作用,增强干扰素生物学效价分别为1 .6 ~2 .8 倍和1 .4 ~4 .0 倍;经 Sephadex G75 凝胶层析的 F S H2 蛋白洗脱峰增效2 .01 ~5 .68 倍;发酵液增效1 .64 ~6 .86 倍。并证实酵母菌 S H2 增效干扰素的活性成分为52 ~72k D 分子量范围的胞外糖蛋白( 简称 Y E G Ps) 。  相似文献   

9.
小麦根质膜H^+—ATPase的部分纯化   总被引:2,自引:0,他引:2  
以小麦(TriticumaestivumL.)根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经TritonX100和KCl处理后,再用Zwitergent314增溶H+ATPase,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜H+ATPase。SDSPAGE结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为94kD的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高15.7倍。部分纯化的质膜H+ATPase可以水解ATP,受K+刺激,并被N,N′dicyclohexylcarbodimide(DCCD)抑制;ATP水解活力被Na3VO4抑制95%,但不被NaN3、NaNO3和Na2MoO4抑制。  相似文献   

10.
转基因鱼工作的开展被用于水产科学基础与应用研究的各个领域。应用方面的一项重要研究就是利用转生长激素基因来提高鱼的增长速度。需要解决两个问题:一是转基因鱼所使用的基因元件;二是外源基因的高整和率与高表达。已有许多报道认为:不同种动物的生长激素不一定相互促进生长。我们通过显微注射,将鲤鱼金属硫蛋白启动子(cMT)与大马哈鱼生长激素基因(sGH)的融合基因(cMTsGH)导入鲤鱼单细胞后期的早期胚胎,构建了全鱼转基因鲤鱼。通过斑点杂交、Southernblot结合PCRSouthernblot,对外源sGH的整和进行了精确的检测和分析。实验选取性成熟鲤鱼,收集卵子和精子,湿法受精获得受精卵。经过基因注射,孵化后的鱼苗放入水族箱。待鱼苗平游,提取总DNA进行检测。以PstI酶切质粒pcMTcGH(Fig.4)分离3.4KbsGH片段,用随机引物标记,作为杂交探针。同时,设计并合成sGH基因的PCR特异引物。Fig.1的斑点杂交结果与Fig.2的PCRSouthern结果相比较(Table1),说明斑点杂交存在着高的假阳性。而PCRSouthern将PCR的快速、方便与Southern的准确性相结合,排除了P  相似文献   

11.
将马铃薯Y病毒普通系(PVY0)的外壳蛋白基因克隆到表达质粒pMALc2中,构建这一基因在大肠杆菌中的表达载体pMALc2PVY0CP。SDSPAGE及Westernbloting检测结果表明,这一表达栽体在E.coliDH5α中经IPTG诱导可表达分子量为71.8kDa的特异性融合蛋白。以amyloseresin亲合柱层析纯化这一融合蛋白为抗原,免疫家兔制备了效价为1∶1024的特异性抗血清。用该抗血清可通过对流免疫电泳、免疫双扩散及Westernbloting对PVY进行检测  相似文献   

12.
中国苔草属菱形果组新资料(2)   总被引:1,自引:0,他引:1  
1高氏苔草新种图1:1~5CarexkaoiTangetWanginherb.sp.nov.TYPE:Guangdong(广东),Ruyuan(乳源),atthemarginsofforests,19330513,X.P.Gao(高锡朋)5256...  相似文献   

13.
国产多榔菊属两新种陈艺林(中国科学院植物研究所北京100093)TWONEWSPECIESOFDORONICUMLINN.(COMPOSITAE)FROMCHINACHENYiLing(InstituteofBotany,theChineseAc...  相似文献   

14.
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)活性变化及有氧运动时LDLR活性调节的影响。发现,高脂(HC)组肝组织匀浆LDLR活性较正常对照(NC)组降低37%(P<0.05),同时血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及血清载脂蛋白B(ApoB)均显著高于NC组(P<0.01);高脂+运动(HE)组TC、LDLC及ApoB均明显低于HC组,而LDLR活性则较HC组增高26%(P<0.05)。结果提示:(1)高胆固醇负荷时细胞可通过下行调节影响LDLR活性;(2)运动可能通过增加对细胞内胆固醇利用和降解,反馈作用于下行调节过程影响LDLR的合成,增加对LDLC摄取而显著改善血脂水平。  相似文献   

15.
高氧预适应对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
抗氧化酶具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,在抗氧化酶中,比较重要的是超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GlutathionePeroxidase,GSHpx)和过氧化氢酶(CAT)。为了解高氧预适应(HyperoxicPreconditioning,HOP)对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸80-85%氧气(1atm,15-20%为氮气)6h,连续7d。利用Langendorf装置做成心肌缺血再灌注模型。实验动物随机分为二个部分。第一部分可逆性心肌缺血(HOPA组与对照A组):缺血10min,再灌注60min。观察冠脉回流液中SOD活力,检测心肌内抗氧化酶活力(SOD,GSHpx,CAT)。第二部分不可逆性心肌缺血(HOPB组与对照B组):缺血60min,再灌注60min。测定冠脉回流液中肌酸磷酸激酶(CPK)含量,SOD及心肌内抗氧化酶活力。结果表明:对于可逆性心肌缺血:SOD,GSHpx活力升高;对于不可逆性心肌缺血损伤:HOP能减少CPK释放,SOD活力升高。  相似文献   

16.
昆虫滞育激素(Diapausehormone:DH)、性信息素合成激活肽(Pheromonebiosynthesisactivatingneuropeptide:PBAN)是诱导昆虫滞育和性信息素(Sexpheromone)合成的两个重要神经肽[1...  相似文献   

17.
大麦叶片液泡膜微囊经H2O2 和·OH处理后,H+ATPase 和H+PPase 水解活性和泵运质子活性下降, H+PPase 对H2O2 更敏感一些。同时加入与H2O2 和·OH 相同浓度的抗坏血酸(AsA) 或甘露醇可显著恢复两种酶的活性和质子转运活性。H2O2 和·OH 处理后,H+ATPase 米氏常数( Km) 变大,H+PPase 的最大反应速度( Vmax) 减小  相似文献   

18.
为了进一步探讨门静脉血流阻断对肝的影响,作如下实验。24只健康成年家兔分为(1)对照组:假手术;(2)实验组:门静脉右外支结扎术。术后第1,3,7天分别处死动物。取结扎叶肝组织行组织化学观察。结果,实验组肝琥珀酸脱氢酶(SDH),葡萄糖6磷酸酶(G6Pase),镁激活三磷酸腺苷酶(Mg2+ATPase),胆碱酯酶(ChE)等酶活性和糖原PAS反应明显降低;乳酸脱氢酶(LDH),酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)活性明显升高。术后第1,3,7天各动物肝的组织化学变化无显著性差异。结果表明:门静脉缺血将引起肝的代谢和功能损害,门静脉在肝血供中起着很重要的作用  相似文献   

19.
污染土壤中多环芳烃生物降解的调控研究   总被引:23,自引:6,他引:17  
选用温度、湿度、表面活性剂TW80和CNP比4个因素为调控因子,采用正交法进行周期为150天的实验研究.结果表明,30天后,土壤中PAHs的降解率可达44.5~74.6%,60天后,达70.4~93.7%,降解率的不同与调控条件显著相关.在此期间,降解最佳条件为40℃,湿度25%,CNP比为120101,TW80分别为200~500mg·kg-1.实验结束时,土壤中PAHs的降解率达91.2~99.8%.降解的最佳条件是40℃,湿度15%.经R值判别表明,不同时期各因子对PAHs降解影响有所不同.温度对PAHs降解影响较大,表面活性剂对土壤中PAHs的生物降解有调控作用.  相似文献   

20.
本工作采用3HTdR掺入DNA法观察重组人肝细胞生长因子(rhHGF)刺激大鼠离体肝细胞DNA合成的剂量与时间效应。实验结果表明:rhHGF是最强的促肝细胞分裂剂,在一定剂量范围内,rhHGF与肝细胞DNA合成有明显的量效关系。1ng/mlrhHGF即可引起3HTdR掺入显著增加(P<0.01),随剂量增加,刺激DNA合成的效应也随之增强;10ng/ml时3HTdR掺入量最大,较对照组高7倍(P<0.001),剂量再增加即出现抑制效应;rhHGF刺激肝细胞DNA合成存在时间效应关系,表现为rhHGF作用24h,DNA合成量明显高于对照组(P<0.01),48h作用达最高(P<0.001),随后开始下降,至96h下降到相当于24h的水平。  相似文献   

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