表皮生长因子,生长抑素对人早孕胎盘hCG分泌及其因表达的影响

观察了表皮生长因子,生长抑素对体外培养的人早孕绒毛膜促性腺激素分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ含量的影响,发现ＥＧＦ可明显刺激绒毛分泌ｈＣＧ,显著增加ｈＣＧ β－ｍＲＮＡ含量。生长抑素虽然对绒毛ｈＣＧ分泌及ｈＣＧβｍ－ＲＮＡ含量无明显影响,但可抑制ＥＧＦ,ＧｎＲＨ的ｈＣＧ分泌及ｈＣＧβ－ｍＲＮＡ。提示ＥＧＦ,ＳＳ在妊娠早期参与了ｈＣＧ分泌的调节。     

雌激素拮抗剂对胎盘EGF受体及其基因表达的影响

中期孕鼠在他莫昔芬作用下，其颌下腺，血清中ＥＧＦ含量下降，胎盘中ＥＧＦ受体结合位点数下降以及它的ｍＲＮＡ表达受到抑制，再次证实了他莫昔芬抑制雌激素诱导ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达，从而使ＥＧＦ受体结合位点数减少，因素，他莫昔芬对孕鼠胚胎生长发育有不可忽视的影响。     

表皮生长因子诱导人成纤维细胞基因表达谱的变化

深入研究EGF对靶细胞的作用有助于揭示细胞增殖、转化、凋亡以及胚胎发育的分子机理。本文采用cDNA微阵列技术,检测EGF持续作用48小时后人胚肺二倍体成纤维细胞基因表达谱的变化。结果显示:EGF长期作用诱导广泛的基因表达变化,在所检测的4096种人类基因中,有855种发生了变化,这些表达变化的基因参与细胞的能量代谢、生物合成、细胞周期调控及受体酪氨酸激酶和G蛋白耦连受体信号转导等细胞反应,其中最显著的变化趋势是GPCR及其相关蛋白基因表达的下调。     

亲和层析法纯化人绒毛膜促性腺激素

本文介绍了一种应用抗hCG β亚单位单克隆抗体亲和层析提纯hCG的方法。结果表明,该法具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。hCG回收率为96％,免疫学活性17000IU/mg蛋白,生物学活性(小鼠子宫称重法)达到10 000U/mg蛋白以上。     

人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关

采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性,以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明,ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明,ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体,而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显,说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性,与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。     

肽类生长因子对游离细胞核中拓扑异构酶活性的影响

将表皮生长因子及神经生长因子分别作用于分离所得的鼠胚成纤维细胞及其转化细胞的细胞核。结果表明表皮生长因子可以提高游离细胞核中ＤＮＡ拓扑异构酶的活性,但神经生长因子无此作用。     

人胎盘滋养层细胞培养与体外hCG释放的研究

本研究的目的是了解细胞滋养层细胞和合胞体滋养层细胞体外分化和生物学特性。方法:采用酶消化和Percoll密度梯度离心法,对人足月胎盘细胞滋养层细胞进行分离、纯化和体外培养。采用放射免疫法(RIA)检测细胞培养上清液hCG含量的变化。结果:经分离和纯化的细胞滋养层细胞在体外培养中生长良好,通过细胞分裂和融合形成合胞体滋养层细胞,随着合胞体滋养层细胞的生长,细胞培养上清液中hCG含量显著升高。我们认为从胎盘中分离和纯化的细胞滋养层细胞在体外培养中可分化和融合形成合胞体滋养层细胞,体外hCG含量的增加与合胞体滋养层细胞生长有关。     

重组人表皮生长因子的稳定性

考察了不同条件下重组人表皮生长因子（rhEGF）的稳定性。结果表明,不同的保存条件（物理状态、温度、pH、浓度等）对rhEGF的稳定性有显影响,使用适当的添加剂（保护剂、抗氧剂、抑菌等）可以提高rhEGF的稳定性。上述结果为rhEGF的制剂学研究提供了依据。     

人表皮生长因子的研究进展

人表皮生长因子是激活表皮生长因子受体的生长因子家族的典型成员,由人体的多个组织器官合成与分泌,通过结合受体激活一系列信号途径,调控细胞的增殖、分化和迁移等。近年来,有关人表皮生长因子的研究已扩展到其在人类生理和病理作用的领域,尤其在组织再生和伤口愈合方面成为研究热点。文中综述了人表皮生长因子的研究进展,简要描述了其基因和蛋白的结构与特点、作用机制与生物学效应,重点介绍该生长因子在胃肠溃疡愈合、皮肤伤口修复和肿瘤病理过程中的作用与影响,从而为相关研究提供辅助信息。     

人肝癌细胞表皮生长因子受体以及佛波酯对它的调变

利用放射受体结合测定证明了两株人体肝癌细胞株7402和7721细胞均有EGF受体的存在。受体数目分别为每细胞6.2×10~4和2.5×10~4,代表它们亲和力的解离常数K_D值分别为1.2 nmol/L和0.80 nmol/L。PMA处理对7721细胞的EGF受体及其亲和力均无明显影响;对7402细胞EGF受体却显示了调变作用。受体数目虽同样没有变化;但亲和力却随药物处理时间有一个下降、恢复的变化过程。在PMA处理1小时,EGF结合抑制达最大,此时受体的解离常数K_D值为3.0 nmol/L;在处理96小时,受体亲和力恢复并略有增高,此时K_D值为0.95 nmol/L。~3H-TdR参入实验表明,在PMA抑制7402细胞EGF受体亲和力的同时,细胞DNA的合成速率也相应下降。对于佛波酯等因子对EGF受体的调变作用,我们认为是属于生长因子启动细胞DNA合成进行细胞分裂的整个生物学过程中感受性因子对进行性因子的调节作用。     

人肝癌细胞表皮生长因子受体以及佛波酯对它的调度

Using radioligand binding assay, the presence of epidermal growth factor (EGF) receptors in cells of two human liver cancer cell lines, BEL-7402 and SMMC-7721, was demonstrated. The ligand binding data were analyzed by a computer program. The dissociation constants (KD) of the ligand-receptor binding complex at equilibrium for 7402 and 7721 cells were 1.2 nM and 0.8 nM respectively, and their number of EGF receptors per cell were 6.2 x 10(4) and 2.5 x 10(4) respectively. After the treatment of cells with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), no change either in the affinity or in the number of EGF receptors was found in 7721 cells. However, in the case of 7402 cells, while the number of receptors, like 7721 cells, remained unchanged, the affinity of EGF receptors displayed a time dependent modulation after PMA treatment. It dropped within the first hour to a KD value of 3.0 nM and then gradually returned to the normal control value at 48 hours or even slightly higher than normal (0.95 nM) at 96 hours of treatment. The modulation or down-regulation of EGF receptors by PMA in 7402 cells was paralleled by the simultaneous inhibition of DNA synthesis in these cells as evidenced from their reduction of 3H-TdR uptake. It is not clear what is the basis for the differences found between 7402 cells and 7721 cells in their number of EGF receptors per cell and their responsiveness to PMA treatment. It might be related to their difference in autocrine secretion of alpha-transforming growth factors.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

人表皮细胞生长因子及其研究进展

表皮细胞生长因子是人体内一种重要自分泌/旁分泌的生长因子。人表皮细胞生长因子及其受体调控细胞增殖、分化、迁移、生存等与细胞命运密切相关的过程,在细胞发育、伤口愈合、器官发生中发挥重要作用。本文将对人表皮细胞生长因子的合成、分泌、生化特性、分子结构、家族、受体、信号通路、生物学活性、生理功能、应用及制备方法等方面进行综述。     

表皮生长因子对鼠胚成纤维细胞细胞周期的调节作用

本文观察了表皮生长因子（ＥＧＦ）对小鼠胚胎成纤维细胞Ｃ_３Ｈ／１０Ｔ_１／２ＣＬ_８（简称Ｃ_３Ｈ／１０）细胞周期的影响。结果表明：ＥＧＦ使Ｓ期提前,细胞周期缩短。进一步探讨了ＥＧＦ对细胞周期影响的机制,发现ＥＧＦ可活化在细胞周期调节中起重要作用的Ｐ３４~（ｃｄｃ２）激酶（简称ＣＤ２Ｋ）,使ＣＤ２Ｋ在周期中活性高峰出现的时间提前,提示ＥＧＦ对细胞周期的影响可能通过作用于ＣＤ２Ｋ实现的。     

表皮生长因子对neu基因表达的诱导作用（简报）

The erb B2/neu oncogene encodes a protein which sequence is closely similar to the epidermal growth factor receptor (EGFR). We have previously found that EGF can induce the expression of erb B1/EGFR gene in normal and 3H-TdR transformed C3H/10T1/2CL8 mouse embryo fibroblast cells i.e. NC3H10 and TC 3H10 respectively, but we do not know whether the neu oncogene expression can be induced by EGF. In this study, the effect of EGF on NC3H10 and TC3H10 has been observed by Northern blot analysis. The result indicated that EGF had a obvious induction effect on neu oncogene expression in these cells. Thus, the expression of both erbB 1/EGFR gene and erbB 2/neu oncogene can be induced by EGF. This result may provide a novel clue to the molecular mechanism of EGF action in cell nucleus.     

人表皮生长因子肽谱及一级结构的质谱法分析

采用液相色谱－质谱联用法（ＬＣ－ＭＳ）,分别对基因工程表达的人表皮生长因子胰蛋白酶和Ｖ８蛋白酶的酶解产物进行了肽质谱分析,获得各肽段的分子量信息。并对大部分肽段用串联质谱（ＭＳ－ＭＳ）分析了肽的序列,获得其氨基酸序列信息。此外,还测定了分子中二硫键的数目。均获得满意的结果。这一方法的建立将有助于天然的,人工合成的及基因工程表达的蛋白质或多肽的鉴定和结构分析,其精确度及分辨率都超过常规方法。     

一种热稳定的人胎盘源促细胞生长因子

胎盘细胞中含有丰富的生物学活性物质.通过在 90℃温度下酸性介质抽提、乙醇沉淀、DE-52阴离子交换层析、高效液相色谱层析,从人胎盘组织中分离纯化得到一种热稳定的小分子量促细胞生长因子.该物质对人羊膜细胞、小鼠成纤维细胞、小鼠骨髓瘤细胞等多种细胞有较高的刺激生长活性.这种物质被称为人胎盘源促细胞生长因子Ⅰ(Human Placental Growth Factor-I,简称HPGF-1),它是一种分子量为1900的肽类物质,是由一条含有10个氨基酸残基的肽链和非肽部分组成的化合物.肽链部分的分子量为1195,其氨基酸组成已被测定,N-末端残基为 Phe.非肽部分的分子量为692. 该因子的等电点为6.8.     

E．coli分泌表达载体的构建和人表皮生长因子在E．coli中的分泌性表达

采用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉ基因组片段中克隆出碱性磷酸酯酶（ＰｈｏＡ）的启动子和信号肽序列．在ＰｈｏＡ启动予５＇端设计了ＥｃｏＲⅠ酶切位点,在信号肽编码序列３＇端设计了ＨｉｎｄⅢ酶切位点．将ＰＣＲ产物酶切后ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ片段克隆至ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ位点,组构出含有ＰｈｏＡ启动子和信号肽序列的分泌表达载体ｐＢＭ－Ｐｈｏ－１．之后将人表皮生长因子的成熟肽基因克隆至该载体,使之在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得分泌表达,另采用ｐＩＮⅢ载体系统以分泌方式表达了人表皮生长因子。     

产人表皮生长因子的重组大肠杆菌的发酵动力学

对产人表皮生长因子的重组大肠杆菌Escherichia coli(E.Coli)的发酵动力学进行了研究,采用了发酵体系中含质粒的工程菌与不含质粒的非工程菌的共处模型,分析了细胞生长、底物消耗、基因工程产物生成的过程,由模型计算的结果与实验结果基本吻合。     

抗重组人表皮生长因子单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

建立能稳定分泌特异性抗重组人表皮生长因子(rhEGF)单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,制备出高效价的 ,具有生物学活性的抗重组人表皮生长因子单克隆抗体 ,为EGF及其单克隆抗体在肿瘤生长调节中的作用研究 ,为肿瘤的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。此外 ,为EGF的亲和层析纯化提供材料。以BALB/c小鼠脾细胞为饲养细胞 ,运用细胞杂交瘤技术制备 ,间接ELISA法筛选出能稳定分泌针对人表皮生长因子的单克隆抗体细胞株 ;对杂交瘤细胞进行染色体核型分析并以体内诱生法产生腹水以获得大量单克隆抗体 ,并采用HiTrapProteinAHP柱对其纯化…     

E.coli分泌表达载体的构建和人表皮生长因子在E.coli中的分泌…

采用ＰＣＲ技术从Ｅ．ｃｏｌｉ基因组片中克隆出碱性磷酸酯酶的启动子和信号肽序列,在ＰｈｏＡ启动子５端设计了ＥｃｏＲⅠ酶位点,在信号肽编码序列３端设计了ＨｉｎｄⅢ酶切位点,将ＰＣＲ产物酶切后ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ片段克隆至ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲⅠ－ＨｉｎｄⅢ倍点,组构出含有ＰｈｏＡ启动子和信号肽序列的分泌表达载体ｐＢＭ－Ｐｈｏ－,之后将人表皮生长因子的成熟肽基因克隆至该载体,使之有Ｅ．ｃｏｌｉ中获得分