玉米雄性不育胞质鉴定与分类问题的探讨

供试材料包括35个已知其不育胞质所属类群的不育系、17个待鉴定不育胞质类型的品系、200个用这些不育系和不同自交系测交的杂交种。研究结果表明,这些不育系对小斑病T小种毒素的反应、育性的表现和遗传及对环境条件的反应是不同的。在试验研究资料的基础上,提出了一种简便准确的玉米不育细胞质综合鉴定分类方法。     

海狸鼠生理生化和血液流变学常值的测定

１材料与方法１１动物来源１９９５年１２月从新疆农业大学经济动物养殖场精选成年、健康、活泼海狸鼠（Ｍｙｏｃａｓｔｏｒｃｏｙｐｕｓ）３５只,待其安静后,用矫正后的半导体点温度计测肛温。１２采血、保定心脏采血８ｍｌ,一部分用肝素抗凝（７０～１００ＩＵ...     

对《关于用“小液流法”测定植物组织水势的改进意见》一文的商榷

潘景美、陈宏愚两位同志对华东师范大学编写的“小液流’法提出了改进意见,现根据我们的实践体会与作者进行商讨。一、关于染色剂使用问题“小液流”法是根据相同溶质、当浓度相同的溶液比重亦相同的原理,测定待测液浓度是否改变,该法很灵敏,溶液浓度稍有改变即可在液滴比重上反应出来。所以实验中待测液的着色这一环节必需掌握好,如果亚甲蓝加入太多就会增加溶液比重而影响试验的准确性,加入太少又因着色太浅而不易辨别,而且各管中所加量难于一致,所以作者提出改用亚甲蓝溶液在试验组各     

基因工程

通过熔解待测DNA,将24个碱基的寡核普酸引物与连有1.okb片段的单DNA序列退火,并用DNA聚合酶完成链延伸反应,来扩增1.Okb的DNA专一性探针片段。从理论上说,要增工00 000 000倍,需要重复此过程25次。扩增之后,将反应混合物转移到尼龙过滤器中,并用点印迹法与放射性标记的1.Okb片段杂交。用     

用于雌二醇检测的免疫芯片技术

以卵清白蛋白为载体蛋白合成了雌二醇的结合物用Cy3新型荧光染料标记结合物 ,作为雌二醇的竞争物 ,建立了以竞争法为基础的检测食品中雌二醇的免疫芯片新方法。用生物芯片点样仪在醛基化玻片表面点样制备免疫微阵列 ,以扫描仪检测反应结果 ,对雌二醇进行了定性定量检测。实验结果表明荧光信号随待测物浓度的降低而增强 ,待测物浓度在 0.001～ 0.4μg/ml的范围内有较好的线性趋势 ,检测范围为 1～ 0.001μg/ml。     

酶标探针在转基因植物检测中的应用

采用碱性磷酸酶标记DNA制备分子探针, 并首次在植物中应用。酶在苯醌作用下与单链DNA联结, 形成DNA和酶的共价复合物即酶标探针。此探针通过分子杂交与待测DNA结合, 再与酶的底物作用显色, 3～6h 内可观察结果。用此探针检测转基因植物中的UidA基因, 点杂交和Southern杂交结果表明, 所合成的酶标探针具有快速、准确、安全而经济的优点。点杂交证明外源UidA基因被成功转化到受体植物中, Southern 杂交对转基因的材料检测的结果证明, 该材料包含多个外源UidA基因拷贝, 初步确定其外源UidA基因拷贝数在5个以上。     

尿液睾酮的准确测定

在放免测定中,分离纯化样品中待测物质是保证测定准确性的一个重要步骤。生殖甾体激素常规放免测定方法,一般采用乙醚或其它有机溶剂抽提分离样品中待测的甾体激素。但这种方法不能完全将甾体同样品中可与抗血清发生交叉反应的物质分离开,往往得到过高的测定结果。本文介绍在尿液睾酮的放免测定中加用Celite柱层析纯化步骤,获得较为准确的测定结果,并和常规放免方法所得结果相比较。     

响应面法优化火棘总酚含量测定方法

通过响应面优化建立了福林酚比色法检测火棘总酚含量的定量方法。考察了福林酚试剂的浓度(mol/L)及用量、Na2CO3溶液的浓度(g/L)及用量、水浴时间及温度、待测液体系的p H值及乙醇浓度等因素对火棘总酚含量测定的影响。在单因素试验的基础上,进一步通过Box-Behnken设计优化火棘总酚的检测条件。结果表明,火棘总酚的最适检测条件为:1 m L适宜浓度的火棘总酚提取物,加入0.4 mol/L福林酚试剂5 m L,漩涡混匀后,加入170 g/L Na2CO3溶液1 m L,混匀后于34℃水浴反应40 min,冰水中快速冷却,室温条件下于765 nm波长测吸光度。该方法具有极好的重复性及重现性,1 h内检测稳定性高,回收率高达99.95%,测定时可忽略待测液体系p H及乙醇浓度的影响。该方法可推广应用于其它植物总酚含量的检测。     

脱壁酶液诱导植物细胞产生过氧化物酶抑制因子的研究

以烟草(+)天仙子杂交种愈伤组织、苜蓿和小麦愈伤组织为实验材料,用愈创木酚法测定过氧化物酶(EC.1.11.7 POD)活性,首次报道了用分离原生质体的脱壁酶液能够诱导植物细胞产生POD 抑制因子,所试材料经脱壁酶液处理后均测不出POD 活性,并且对POD活性具有抑制作用。此类POD 抑制因子是小分子物质,具有较强的热稳定性,一些迹象表明它们不是酚类物质。POD 抑制因子可能是通过影响POD 催化合成的初始反应产物的稳定性,来达到其抑制效能。不同种属来源植物细胞产生的POD 抑制因子在抑制作用上无明显差异。至于POD 抑制因子的稳定性,在原生质体培养难易程度不同的植物材料间有差异。文中讨论了POD 抑制因子的产生和清除对培养原生质体细胞壁的再生修复及对培养状况的影响。     

HgCl2对泥鳅精子运动的影响

为了检测不同浓度的HgCl2对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus精子运动的影响,以泥鳅精子为实验材料,用含终浓度分别为0(对照)、1、5、10、15和20 μmoL/L的HgCl2待测液分别孵育0、2、4和6 h后激活,激活后立即在显微镜(Olympus IX81)下观察精子运动参数.为进一步探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的机制,用终浓度为20μmol/L的HgCl2保存液孵育泥鳅精子10 min,以含终浓度分别为0、0.1、1、10 mmol/L的2-巯基乙醇和20μmol/LHgCl2混合液为激活液激活.激活后立即在显微镜下观察精子运动,发现2-巯基乙醇町逆转HgCl2对泥鳅精子的抑制作用,为探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的可能机制提供参考.