血浆环化鸟苷—磷酸(cGMP)的蛋白竞争结合分析法

环化腺苷一磷酸(cAMP)和环化鸟苷一磷酸(cGMP)广泛存在于各种组织和体液中,是一对具有特殊意义的单核苷酸在细胞内起着调节生理机能和物质代谢的重要作用。cGMP在细胞和体液中的含量远低于cAMP,测定较困难。目前可供选择的较好的测定方法主要有放射免疫分析法及以蛋白激酶为特异试剂的放射竞争结合分析法。一般来说,放射免疫法灵敏度较高,特异性较强,样品处理较简便,但抗体制备较复杂,灵敏度的提高亦有赖于使用~125Ⅰ标记物,需经常制备。蛋白激酶的制备较简便,通常用氚标记物,一次制备可长期使用,放射防护也较简单,但对样品的纯度要求较高,灵敏度则与用氚标记物的放射免疫     

环磷酸鸟苷(cGMP)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其特性的鉴定

<正> 自从1975年单克隆抗体技术建立以来,已被应用在各个生物学领域中,国内外都尚未建立抗cGMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。我们为了获得更纯,特异性更高的抗cGMP抗体,对此项工作进行了探索,已筛选出能分泌抗cGMP抗体的杂交瘤细胞株,并进行了初步鉴定;现将工作简报如下: 用琥珀酰环磷酸鸟苷(ScGMP)与牛血清白蛋白相连后的化合物(ScGMP-BSA)为抗原免疫BALB/c小鼠,每月一次,共四次,最后一次为尾静脉连续注射三天,第四天将免疫     

外源环化鸟-磷(cGMP)对蒜根尖细胞有丝分裂的生物学效应

1957年,Sutherland等发现环化腺-磷(cAMP),被看作是生物界的一件大事,随后,Price等在1963年从大鼠尿中分离出cGMP,并且逐渐了解到cGMP也是细胞生命活动的重要调节控制物质,其作用与cAMP相拮抗。一些研究证明:提高细胞内cGMP水平,可以促进有丝分裂。这两种核苷酸在细胞分裂、分化的调节控制中起重要作用。虽然在动物、细菌、真菌等中cGMP的研究方面已有不少报导,但对植物细胞cGMP的研究则较少。为了了解外     

大白鼠血浆皮质酮的竞争性蛋白质结合分析法

血浆皮质酮的测定方法很多,西尔佰(Silber,1954)报道的比色法,任克尔(Zenker,1958)报道的荧光法。彼得森(Peterson,1963)报道的双同位素衍生物法,沃尔菲利(Murphy,1967)、纽瑟姆(Newsome,1972)和卡梅伦(Cameron,1973)分别报道的竞争性蛋白质结合分析法以及戈梅斯-桑切斯(Gomez-Sanchez,1975)报道的放射免疫法等。其中以后二者的灵敏度和特异性为     

饱和分析法测定3′,5′-环一磷酸腺苷(cAMP)

本文提供了一个改进的3',5'-cAMP饱和分析法。用膜片分离自由的和与蛋白激酶结合的cAMP,直接用膜片法测定氚的放射性强度,灵敏度在微微克分子水平。同时对于各种影响测定的因素进行了研究和讨论。     

酵母酶系合成三磷酸鸟苷的研究

研究了利用啤酒酵母细胞酶系催化鸟苷酸(GMP)合成三磷酸鸟苷(GTP)的工艺过程。采用分式析因及响应面实验设计对其工艺条件进行优化,分析了温度、pH、酵母、无机盐和表面活性剂等因素对GTP积累的影响,得到了一个可以较好预测实际反应的二次方模型以及优化条件即：GMP 7．16g/L,葡萄糖55g/L,酵母270g/L,硫酸氨1．5g/L,硫酸镁2g/L,磷酸二氢钾27．2g/L,表面活性剂8川L,氯化十六烷基吡啶1．5g/L,pH6．74,温度37．4℃。经过优化,反应得率从71．3％增至92．7％,较国内外报道的水平(80％)提高了12．7％.     

安定结合抑制蛋白(DBI)的研究进展

198 3年 ,Alessandro等首先从小鼠脑中分离纯化得到一种高度保守的肽类物质 ,它能拮抗安定物质———diazepam与脑突触膜相结合 ,故称之为安定结合抑制蛋白(DBI) .此肽的相对分子质量为 10ku ,含 86个氨基酸残基 ,N端为封闭型 ,C端具有高度保守性 ,是活性功能的重要组成部分 .它可与CBR (central typebenzodiazepinereceptor)结合 ,变构调节GABAA 受体的活性 .同时 ,DBI也可与PBR (peripheral typebenzodiazepinereceptor)结合 ,促进类固醇的合成 .DBI还可影响动物胃肠消化、饮食等 ,因此被认为是一种新型的脑肠神经肽 .1　DBI的…     

药物-血浆蛋白结合与药物动力学

药物-血浆蛋白结合的浓度依赖性能产生非线性动力学,使血浆药物浓度随时间的衰减不呈(?)级动力学函数关系;半衰期随剂量增加而缩短;血浆药物浓度及药-时曲线下面积不随剂量增加而相应按比例增加。结合不影响高摄取药物的清除率,但影响低摄取药物的清除率。     

多种功能的poly(C)-结合蛋白

细胞内的RNA一般不会单独存在,而是与各种各样的RNA结合蛋白（RBPs）绑定在一起,形成核糖核蛋白复合体（RNP complexes）影响着RNA的加工与转归. Poly(C) 结合蛋白是一类重要的RNA结合蛋白,可分为两组：hnRNP K 和PCBP1 4. 它们以序列特异的方式与核酸嘧啶富含区相结合. 这类蛋白具有共同的结构模体（motif）,即hnRNP K 同源（KH）域. KH域是与mRNA结合的结构基础,也是机体内调控系统的组成部分,可使得Poly(C) 结合蛋白参与蛋白/核酸、蛋白/蛋白之间的相互作用,范围涉及复制、转录、mRNA稳定和翻译控制过程等. 对Poly(C) 结合蛋白功能的深刻认识可使我们洞察多种疾病的病理生理过程.     

一种水稻酰基辅酶A结合蛋白cDNA的鉴定(英文)

对一水稻ｃＤＮＡ 克隆（Ｒ１９０８） 的分析表明, 其可能编码水稻酰基辅酶Ａ 结合蛋白（ａｃｙｌＣｏＡｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＡＣＢＰ）。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交显示水稻（ Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．） 基因组中仅有一个该基因的拷贝。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 分析表明水稻的ＡＣＢＰ基因在水稻的根、茎、叶、叶鞘、黄化苗和幼穗中皆表达,而以黄化苗的绿苗叶鞘中的表达强度高于绿苗叶片。     

放线菌中腺苷三磷酸结合盒转运蛋白的研究进展

放线菌由于能产生多种结构新颖、活性独特的次级代谢产物,在医药工业、农业和环境保护上具有重要作用。全基因组测序的数据显示,放线菌中含有数目众多的腺苷三磷酸结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白基因,在营养摄入、次级代谢产物转运、外源毒素解毒等一系列过程中发挥着重要的作用。本文概述了ABC转运蛋白的结构和作用机制,并结合本实验室的研究工作,对近年来放线菌中ABC转运蛋白的研究进展进行了比较全面的综述,着重介绍了负责次级代谢产物跨膜转运的ABC外排蛋白,并展望了放线菌ABC转运蛋白的研究热点和应用前景。     

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)相关结合蛋白

有四种不同类型的细胞表面或细胞外基质中的蛋白质分子在结合碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、辅助其发挥生物功能活性方面起着重要的作用。它们是 :(1)细胞膜上的具有酪氨酸激酶活性的FGF受体家族 (FGFRs) ;(2 )细胞外基质中的硫酸乙酰肝素蛋白多糖家族 (HSPGs) ;(3)细胞内富含半胱氨酸的FGF受体 (CFR) ;(4)分泌型的FGF结合蛋白 (FGF BP)。本文试图从它们在bFGF生物功能发挥中可能起到的作用对它们进行简单综述。     

曲美他嗪人血浆蛋白结合率的测定

目的:建立测定曲美他嗪与人血浆蛋白结合率的高效液相色谱法(HPLC),测定曲美他嗪在人血浆中的蛋白结合率。方法:采用平衡透析法,结合HPLC测定曲美他嗪在人血浆中的蛋白结合率。结果:低、中、高3个浓度下,曲美他嗪的血浆蛋白结合率分别为14.7%,16.2%和15.5%。结论:本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足生物样品分析的要求。曲美他嗪与血浆蛋白结合率较低。     

生长因子受体结合蛋白2(Grb2)的生理功能

生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor bound protein 2,Grb2)是一种在细胞中广泛表达的衔接蛋白。作为信号通路上的节点蛋白,Grb2在细胞内许多信号传导通路中起着重要调控作用。Grb2的异常表达或活化与肿瘤的发生息息相关。大量研究表明,它可以作为抗肿瘤治疗的分子靶点,因此Grb2抑制剂也就成了抗肿瘤药物研发的一个热点。该文对Grb2的生理功能和抑制剂研究的最新进展进行了综述。     

草地螟普通气味结合蛋白I(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析

气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能.本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白I(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1 蛋白.并利用N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针研究了Lsti-GOBP1蛋白与醇类、醛类、酯、烯等50种气味标样的结合特性,结果表明Lsti-GOBP1可与其中35种气味化合物结合,但只有1-己醇、1-庚醇、肉桂醛和莰烯4种气味标样能在20 mol/L浓度(探针与蛋白结合的饱和浓度值)下将1-NPN从Lsti-GOBP1中替换50%,其结合常数分别为8.997,7.283,7.289和9.814 mol/L.据此可以得出,Lsti-GOBP1蛋白的气味物质结合谱很广,同时具有较强的特异性,其中1-己醇、1-庚醇、肉桂醛、莰烯等化合物在草地螟识别寄主植物气味物质的过程中起重要作用.     

无环鸟苷(Acyclovir)抗乙肝病毒疗效观察

乙型肝炎病毒目前仍缺少有效的抗病毒疗法,我们应用省医工所提供抗病毒新药无环鸟苷治疗慢性乙肝10例,年龄22～37岁,HBsAg~+和抗-HBc~+,伴HBeAg~+9例,持续半年以上。治疗方法和观察方法     

中华按蚊气味结合蛋白AsinOBP1与避蚊胺(DEET)的结合特性分析

【目的】研究中华按蚊Anopheles sinensis气味结合蛋白1(Asin OBP1)与避蚊胺(N,N-diethylm-toluamide,DEET)的结合特性,并与埃及伊蚊Aedes aegypti Aaeg OBP1、致倦库蚊Culex quinquefasciatus Cqui OBP1进行比较,分析与DEET互作的关键氨基酸残基。【方法】利用原核表达载体进行目的蛋白Asin OBP1的原核表达及纯化。以N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针,通过荧光竞争结合实验对Asin OBP1与DEET的结合特性进行分析,并比较Asin OBP1,Aaeg OBP1和Cqui OBP1与DEET的结合能力,通过分子对接鉴定其与DEET互作的氨基酸残基。【结果】Asin OBP1能与DEET结合,解离常数为29.55μmol/L。在相同实验条件下,Cqui OBP1和Aaeg OBP1都能结合DEET,解离常数分别为17.15和12.81μmol/L。与Aaeg OBP1和Cqui OBP1相比,Asin OBP1结合DEET的能力最弱,Aaeg OBP1最强。分子对接显示,DEET分子结合在Asin OBP1二聚体靠近交界面的结合口袋边缘,结合口袋由α4,α5和α6上的氨基酸残基Leu-92,Leu-95,His-96,Leu-99,Ala-107,Met-108,Met-110,Gly-110,Cys-114,Leu-115,Trp-133,Met-108',Lys-112'和Leu-115'组成。比较分析发现3个蛋白中与DEET甲苯基团形成疏水性作用的氨基酸残基、与DEET羰基氧形成氢键的氨基酸残基是相同的,但与DEET二乙基侧链形成疏水性作用的氨基酸残基中,有一个位置存在差异,Aaeg OBP1是Leu,而Asin OBP1和Cqui OBP1是Met残基。Leu的疏水性强于Met,可能是Aaeg OBP1与DEET的结合能力较强的原因之一。【结论】Asin OBP1能够结合DEET,不同蚊虫气味结合蛋白1与DEET的亲和力存在差异,进一步探索这些差异形成的原因对于阐明气味结合蛋白与DEET互作的模式具有重要的参考价值。     

金属结合蛋白(肽)与环境重金属生物修复

重金属污染是全球关注的重要环境问题。针对重金属的生物修复技术 ,因其特有的优势 ,越来越受到重视 ,其中一个重要的研究领域是利用金属离子和金属结合蛋白或结合肽之间存在的强亲和能力特性进行的生物修复研究。就金属结合蛋白 (肽 )的种类、结构特点、以及金属结合的作用机理进行了总结 ,同时综述了展示或表达有不同金属结合蛋白或结合肽的微生物和植物对重金属污染进行生物修复的最新研究进展 ,对基于金属结合蛋白 (肽 )的环境重金属生物修复的进一步研究 (如肽库的构建和筛选 ,金属与蛋白 (肽 )的相互作用 )进行了讨论。