蚕豆下表皮细胞外钙调素的存在及其对气孔运动的调节

细胞外钙调素可能作为多肽第一信使,调节细胞增殖,花粉萌发,特定基因表达等生理过程,气孔能灵敏地对外界刺激作出反应,快速开闭,本文用免疫电镜和免疫荧光显微镜技术证明保卫细胞及其它表皮细胞胞外都存在钙调素;外源纯化钙调素能促进气孔关闭,抑制气孔开放,最适浓度为10^-8mol/L;不能透过质膜的大分子钙调素拮抗剂W—-agarose和钙调素抗血清都能抑制气孔关闭,促进开放,说明保卫细胞的内源胞外钙调素确实能促进气孔关闭,抑制开放。而且只能在细胞外起作用,推测在自然情况下,保卫细胞内源胞外钙调素可能作为胞外第一信使和其它信号分子一起调节气孔的开关运动,而且可能在环境刺激与细胞响应之间起重要作用。     

选择标记法对钙调神经磷酸酶和钙调素结合位点的研究

钙调素是一种多功能的钙调节蛋白。在细胞调节中,它往往需要与细胞里一些活性物质。蛋白质、酶等相结合而进行作用。钙调神经磷酸酶(Calcineurin)是新近发现的一种活性直接受Ca~(2 )、钙调素调节的磷蛋白磷酸酶。因此,钙调素如何和钙调神经磷酸酶结合,它们的结合位点等问题就成为这两个领域的研究者共同关心且迫切需要解决的课题。最近,我们用     

蚕豆下表皮细胞外钙调素的存在及其对气孔运动的调节

细胞外钙调素可能作为多肽第一信使,调节细胞增殖、花粉萌发、特定基因表达等生理过程.气孔能灵敏地对外界刺激作出反应,快速开闭.本文用免疫电镜和免疫荧光显微镜技术证明保卫细胞及其它表皮细胞胞外都存在钙调素.外源纯化钙调素能促进气孔关闭、抑制气孔开放,最适浓度为10-8mol/L;不能透过质膜的大分子钙调素拮抗剂W7-agarose和钙调素抗血清都能抑制气孔关闭、促进开放,说明保卫细胞的内源胞外钙调素确实能促进气孔关闭、抑制开放,而且只能在细胞外起作用.推测在自然情况下,保卫细胞内源胞外钙调素可能作为胞外第一信使和其它信号分子一起调节气孔的开关运动,而且可能在环境刺激与细胞响应之间起重要作用.     

钙与钙调素对柑橘原生质体抗冻性的影响

钙与钙调素对柑橘原生质体低温锻炼过程中抗冻力的获得有影响。加钙螯合剂或钙调素拮抗剂ＴＦＰ,能明显抑制柑橘原生质体抗冻性的表达。钙离子载体Ａ２３１８７可提高未经低温锻炼的原生质体抗冻力,但该作用在钙调素拮抗剂ＴＦＰ参入下则减弱,表明原生质体抗冻力的表达受钙和钙调素的调节。     

钙与钙调素对柑橘原生质体抗冻性的影响

钙与钙调素对柑橘原生质体低温锻炼过程中抗冻力的获得有影响。加钙残余螯合剂或钙调素（ChM）拮抗剂TFP,能明显抑制柑橘原生质体抗冻性的表达。钙离子载体A23187可提高未经低温锻炼的原生质体抗冻力,但该作用在钙调素拮抗剂TFP参入下则减弱,表明原生质体抗冻力的表达受钙和钙调素的调节。     

外源钙调素与拟南芥悬浮培养细胞结合位点的观测及其胞外效应

以拟南芥悬浮培养细胞为实验体系,借助外源荧光及同位素标记钙调素,研究结果表明外源钙调素不能被主动内吞入细胞内,而是主要以完整分子形式结合在细胞外表面;外源纯化钙调素可促进正向型质膜囊泡中的鸟苷酸三磷酸水解酶活性升高,也可引起拟南芥悬浮细胞质游离钙离子浓度的特异升高,表明外源钙调素可能通过细胞表面位点跨膜信号转换为细胞内信号,从而调节生物学活性。     

高表达钙调素NRK细胞模型的建立及其对细胞生长失调的影响

钙调素作为Ｃａ￣（２＋）信号的主要胞内受体,在细胞增殖调节中起着重要作用。实验中运用ＤＮＡ体外重组技术构建了高表达钙调素的真核载体,并将其转染到大鼠正常肾细胞（ＮＲＫ）中得到钙调素高表达的稳定细胞株。分析表明,高表达钙调素加速细胞生长,促进细胞从Ｇ＿１期向Ｓ期及Ｇ＿２期向Ｍ期的进程,并且使细胞血清依赖性降低,在单层培养中出现接触抑制丧失的岛状生长的现象。基因表达分析表明,原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ随钙调素增高而表达加强,这可能是钙调素作用的分子机理之一。     

钙调素结合蛋白参与调控植物逆境胁迫的研究进展

Ca²⁺是植物体内重要的第二信使,当植物受到各种环境刺激时,细胞内的Ca²⁺浓度瞬间产生变化,并被Ca²⁺信号效应器识别,通过与下游的靶蛋白结合并调节其活性,参与调控植物各种生理活动。钙调素结合蛋白以依赖Ca²⁺或不依赖Ca²⁺的方式结合钙调素。对目前已经鉴定的植物钙调素结合蛋白结构特点进行了综述,并着重介绍了钙调素结合蛋白是如何参与调节植物对生物胁迫和非生物胁迫的反应,为提高作物抗病抗逆能力研究提供理论基础。     

高表达钙调素NRK细胞模型的建立及其对细胞生长失调的影响

钙调素作为Ｃａ＾２＋信号的主要胞内受体，在细胞增殖调节中起着重要作用，实验中运用ＤＮＡ体外重组技术构建了高表达钙调素的真核载体，并将其转染到大鼠正常肾细胞中得到钙调素高表达的稳定细胞株。分析表明，高表达钙调素加速细胞生长，促进细胞从Ｇ１期向Ｓ期及Ｇ２期向Ｍ期的进程，并且使细胞血清依赖性降低，在单层培养中出现接触抑制丧失的岛状生长的现象。基因表达分析表明，原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ随钙调素增高而     

拟南芥钙调素定点突变基因分离及其在钙不依赖钙调素结合蛋白检测中的应用

动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用．然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法．首先,采用定点突变的方式,得到了拟南芥钙调素亚型2的多个突变基因mCaM2,随后,大肠杆菌重组表达突变蛋白的电泳迁移率及⁴⁵Ca²⁺覆盖分析表明,得到了编码失去钙结合能力的钙调素的突变基因mCaM2₁₂₃₄, mCaM2₁₂₃₄突变钙调素中所有4个钙结合EF-hand结构域中的关键氨基酸谷氨酸均突变为谷氨酰胺．在酵母双杂交体系中,作为诱饵蛋白的突变钙调素mCaM2₁₂₃₄与我们前期体外方法报道的钙不依赖性钙调素结合蛋白AtIQD26存在相互作用．这将为钙不依赖性钙调素结合蛋白提供有用的体内研究工具,有利于我们全面认识钙-钙调素-钙调素结合蛋白信号途径．     

神经调节蛋白（neuromodulin）

神经调节蛋白是一种神经组织特异性的钙调素结合蛋白,与钙调素结合有反Ｃａ＾２＋依赖性。它与突触的可靠性、神经生长和再生有关。本简述其分离纯化、结构与功能以及ｃＤＮＡ克隆与表达等方面的研究现状。     

钙调素mRNA和蛋白在水稻花药和雌蕊发育过程中的原位定位

利用ＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学定位技术分别检测了钙调素ｍＲＮＡ和钙调素蛋白在水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）花药和雌蕊发育过程中的时空分布特征。钙调素基因在绒毡层、柱头、花粉管生长途径、退化助细胞以及维管薄壁细胞中大量表达,也可在小孢子母细胞、小孢子、花粉、反足细胞、卵细胞以及中央细胞中检测到。钙调素基因的表达强度随不同的发育阶段而变化：花药发育早期表达强,以后逐渐减弱并向特定部位集中,如绒毡层和花粉萌发孔等。胚胎发育早期,钙调素基因在胚乳细胞中的表达比原胚中强,而后期则在分化胚中比胚乳细胞中强。推测在有性生殖过程中,钙调素可能通过Ｃａ２＋ＣａＭ信号途径调节小孢子发育、花粉萌发、花粉管生长、受精以及物质运输等生理过程     

光敏核不育水稻叶片中钙调素mRNA原位杂交分析(简报)

采用组织RNA原位杂交技术研究钙调素基因在光敏核不育水稻接受光周期信号后时空表达特征的结果表明,钙调素基因在不同光周期诱导后,叶片在育性转换对光周期敏感的不同发育时期中,mRNA表达量和空间分布上没有明显的差异,与光敏核不育水稻育性不存在直接的关系;叶肉细胞中钙调素mRNA的大量表达,可能与光敏色素信号系统调节叶绿体发育及光合作用有关。     

钙调素亲和层析柱的制备及其应用

钙调素琼脂糖亲和层析柱是研究和纯化钙调素结合蛋白的理想工具。本文介绍了牛脑钙调素的提取以及利用牛脑钙调素制备钙调素琼脂糖亲和层析柱的方法。用钙调素琼脂糖亲和层析,可以使牛脑钙调素依赖的PDE的纯度提高18倍;发现在小麦细胞壁中存在9种钙调素结合蛋白或亚基。     

植物及动物钙调素抗体免疫反应特性的比较研究

用酶联免疫吸附测定和胶体金免疫电镜定位技术对三种钙调素抗体与植物和动物钙调素的免疫反应特性进行了比较研究。结果表明,在与小麦钙调素的相对亲和力中,抗小麦钙调素抗体大于抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体,抗牛脑钙调素抗体则很弱。抗小麦钙调素抗体与小麦钙调素的 K_D(解离常数)值为2.50×10~(-9)mol/L;抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体与小麦钙调素的 K_D 值为2.82×10~(-8)mol/L,而它与牛脑钙调素的 K_D 值为1.90×10~(-)mol/L。定位玉米根尖细胞钙调素,抗小麦钙调素抗体比抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体有更高的标记密度.定量小麦钙调素,抗小麦钙调素抗体比抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体有较高的检测灵敏度。     

植物钙调素结合蛋白（CaMBPs）的研究概况

本文简要论述了研究钙调素结合蛋白的意义和方法,着重介绍了植物领城中钙调素结合蛋白的研究状况,其中包括一些依赖于钙调素的酶的研究进展及未知钙调素结合蛋白的研究方向和现状,并在比较动植物钙调素结合蛋白研究工作的基础上,对植物钙调素结合蛋白今后的研究谈了些粗浅的设想。     

平菇子实体钙调素的分离纯化及其与猪脑钙调素的生物活性比较

平菇萃取液经酸性沉淀、热变性、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水亲和层析和DEAE-Cellulose 52离子交換层析分冉出了电泳纯的真菌钙调素。在比较钙调素对磷酸二酯酶活化的能力和ELISA实验的免疫亲和力对发现,平菇钙调素与猪脑钙调素的生物活性有较大差异,提示在钙调素定量测定中有必要考虑到标准钙调素与样品钙调素之间的同源性差异。     

胰岛β细胞内钙调素的过度表达可导致新生小鼠糖尿病

钙调素(calmodulin)是普遍存在于各种生物细胞内的主要钙结合蛋白,它存在于植物、无脊椎动物以至哺乳动物体内,在细胞内是一种基础的和生命悠关的因子。胰岛β细胞内含有非常丰富的钙调素,它在促分泌物引起的胰岛素分泌中是不可缺少的,胞内钙稳态的调节对于β细胞的生存及发展可能具有关键作用。     

植物类钙调素生理功能的研究进展

钙调素(也称钙调蛋白)是一种广泛存在于真核生物中的钙感受器,参与各种生理活动的信号转导.植物除了含有钙调素以外,还含有一类与钙调素同源性很高,但在结构上又不同于钙调素的蛋白,称为类钙调素(也称类钙调蛋白).近年来,人们在植物特有的类钙调素的功能研究方面取得了一些重要的进展.研究表明,类钙调素与钙调素一样,也具有广泛的生物学功能,参与植物生长发育和对各种胁迫的响应.本文就植物类钙调素与钙调素之间的区别、类钙调素与钙离子及靶蛋白的结合,以及类钙调素的各种生理功能进行总结.     

细胞外钙调素——一种植物中的多肽信使?

钙调素历来被认为是细胞内钙信号的多功能受体蛋白,国内外10多年的研究已证实,它普遍存在于人、动物细胞外与植物质外体.我们的工作证明了钙调素不仅普遍存在于植物细胞外,而且在胞外位点具有促进悬浮培养细胞及其原生质体的增殖、调节花粉萌发与伸长和促进rbc小亚基基因的光不依赖性表达等多种重要生物学功能.在花粉体系中,还证明了胞外钙调素具有跨膜与胞外信号转导机制,其中包括异三聚体G蛋白、PLC/IP3/IP3R和胞内钙信号等组分的参与.因此,认为细胞外钙调素可能是植物中的一种多肽信使,这对传统上认为植物中不存在进行胞间通讯的多肽信使的观点,提出了新的质疑.